biokim protein fixx

Download Biokim Protein Fixx

Post on 13-Apr-2018

218 views

Category:

Documents

0 download

Embed Size (px)

TRANSCRIPT

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    1/26

    I. Judul : Uji Protein

    II. Tujuan :

    II.1Uji Susunan Elementer Protein

    Mengidentifikasi adanya unsur-unsur penyusun protein

    II.2Uji Kelarutan Protein

    Mengetahui daya kelarutan protein terhadap pelarut tertentuII.Uji Pengendapan Protein dengan !aram

    Mengetahui pengaruh larutan garam alkali dan garam di"alen konsentrasi tinggi

    terhadap sifat kelarutan protein.

    II.#Uji Pengendapan Protein $engan %ogam $an &sam 'rganik

    Mengetahui pengaruh logam (erat dan asam organik terhadap sifat kelarutan

    protein.

    II.)Uji *iuret

    Mem(uktikan adanya molekul + molekul peptida dari protein.

    II.,Uji inhidrinMem(uktikan adanya asam amino (e(as dalam protein

    II.Uji /antoprotein

    Mem(uktikan adanya asam amino tirosin0 triptofan0 atau fenilalanin yang terdapat

    dalam protein

    III. Landasan Teori

    Protein (erasal dari kata unani yaitu Proteios yang (erarti pertama3 atau 4utama3

    merupakan makromolekul yang paling (erlimpah didalam sel serta menyusun le(ih dari

    setengah (erat kering pada hampir semua organisme. &sam amino merupakan se(uah unit

    struktur protein. Struktur protein terdiri dari polipeptida yang mempunyai rantai yang amat

    panjang0 tersusun atas (anyak unit asam amino. Protein adalah instrument yang

    mengekspresikan informasi genetik. Seperti juga terdapat ri(uan gen di dalam inti sel0

    masing-masing men5irikan satu sifat nyata dari organisme0 di dalam sel terdapat ri(uan jenis

    protein yang (er(eda0 masing-masing mem(a6a fungsi spesifik yang ditentukan oleh gen

    yang sesuai. Protein0 karenanya (ukan hanya makromolekul yang (erlimpah0 tetapi juga amat

    (er"ariasi fungsinya. Semua protein di dalam semua mahluk0 tanpa memandang fungsi danakti"itas (iologinya0 di(angun oleh susunan dasar yang sama0 yaitu dari 27 asam amino yang

    (aku0 dimana molekulnya sendiri tidak mempunyai akti"itas (iologi. $apat dikatakan (ah6a

    protein (er(eda satu sama lain hal ini karena masing-masing mempunyai deret unit asam

    amino sendiri-sendiri. &sam amino merupakan a(jad struktur protein0 dimana molekul-

    molekul ini dapat disusun dalam jumlah deret yang hampir tidak ter(atas0 untuk mem(uat

    (er(agai protein dalam jumlah yang hampir tidak ter(atas.

    8ampir semua jenis protein tersusun atas unsur-unsur kar(on 9:;0 hidrogen 98;0

    oksigen 9';0 dan nitrogen 9;.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    2/26

    penyusun protein seperti :0 80 ' dan . Protein dapat dikatakan se(agai molekul yang sangat

    (esar0 hal ini dapat memudahkan untuk mengalami peru(ahan (entuk fisik maupun akti"itas

    (iologis. *anyak faktor yang menye(a(kan peru(ahan sifat alamiah protein seperti panas0

    asam0 (asa0 pelarut organik0 p80 garam0 logam (erat0 maupun sinar radiasi radioaktif.

    Sedangkan untuk peru(ahan sifat fisik yang mudah diamati adalah menjadi tidak larut atau

    pemadatan. Protein dikatan (ersifat amfoter0 yaitu protein dapat (ereaksi dengan larutan asam

    maupun (asa. $aya larut protein (er(eda di dalam air0 asam0 dan (asa. Se(agian ada yang

    mudah larut dan ada pula yang sukar larut0 semua protein tidak larut dalam pelarut lemak

    seperti eter atau kloroform. $aya larut protein akan (erkurang jika kita menam(ahkan garam0

    aki(atnya protein akan terpisah dan menghasilkan endapan. &pa(ila protein dipanaskan atau

    kita tam(ahkan alkohol0 maka akan terjadi peru(ahan pada protein yaitu menggumpal. 8al ini

    dise(a(kan karena alkohol menarik mantel air yang melingkupi molekul-molekul protein.

    &danya gugus amino dan kar(oksil (e(as pada ujung-ujung rantai molekul protein0

    dapat menye(a(kan protein mempunyai (anyak muatan dan (ersifat amfoter 9dapat (ereaksi

    dengan asam maupun (asa;.. Protein memiliki sifat seperti mudah larut dalam air0 ini karena

    protein mengandung gugus kar(oksil dan amina yang ikatan peptidanya terdalam. !aram

    dengan konsentrasi tinggi akan dapat menarik air yang terdapat dalam protein hal ini karena

    garam juga dapat menetralkan muatan listrik sehingga menye(a(kan daya larut protein

    terhadap air (erkurang dan protein mengendap. Protein dapat diendapkan dengan 5ara

    menam(ahan asam-asam organik seperti asam pikrat0 asam trikloroasetat0 dan asam

    sulfosalisilat. Penam(ahan asam-asam terse(ut akan menye(a(kan ter(entuknya garam

    protein dimana garam ini merupakan (ersifat tidak larut. 8al lain adalah protein dapat pula

    mengalami denaturasi irre"ersi(le ini dengan adanya logam-logam (erat seperti :u2=08g 2=

    atau P(2=0sehingga mudah mengendap. *iuret dapat kita katakan se(agai senya6a dengan dua

    ikatan peptida yang ter(entuk pada saat pemanasan dua molekul urea. Ketika ion :u 2= dalam

    suasana (asa maka akan (ereaksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan peptide yangmenyusun protein sehingga akan mem(entuk senya6a kompleks yang (er6arna ungu 9"iolet;.

    >eaksi (iuret dikatakn positif terhadap dua (uah ikatan peptida atau le(ih0 tetapi dikatakan

    negatif untuk asam amino (e(as atau dipeptida. >eaksi positif ter(entuk terhadap senya6a-

    senya6a yang mengandung dua gugus? -:82820 -:S820 -:98;820 dan +:'82.

    9&nonim @ 2712; 9aAid@277,;.

    inhidrin merupakan suatu reagen yang (erguna untuk mendeteksi asam amino dan

    menetapkan konsentrasinya dalam larutan0 dan termasuk hidrat dari triketon siklik0 dan

    menghasilkan Aat (er6arna ungu (ila (ereaksi dengan asam amino. Uji inhidrin terjadi

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    3/26

    ketika ninhidrin dipanaskan (ersama dengan asam amino maka ter(entuk kompleks

    (er6arna. &sam amino dapat ditentukan menggunakan intensitas 6arna yang ter(entuk

    se(anding dengan konsentrasi asam amino terse(ut. Pada reaksi ini akan dilepaskan :'2 dan

    8# sehingga asam amino dapat ditentukan se5ara kuantitatif dengan mengukur jumlah

    :'2 dan 8 yang dilepaskan. Prolin dan hidroksi prolin akan menghasilkan 6arna

    kompleks yang (er(eda 6arnanya dengan asam amino lainnya0 dimana kompleks 6arna yang

    ter(entuk mengandung dua molekul ninhidrin yang (ereaksi dengan ammonia yang

    dilepaskan pada oksidasi asam amino. 8asil uji positif pada uji ninhidrin akan di(erikan pada

    asam amino yang mengandung asam B-amino dan peptida yang memiliki gugus B-amino yang

    (e(as. /antoprotein merupakan reaksi yang didasarkan pada nitrasi inti (enAena yang

    terdapat dalam molekul protein. *enAena yang ditam(ahkan asam nitrat pekat0 akan

    menghasilkan se(uah endapan yang (er6arna putih0 dan (eru(ah kuning saat dipanaskan.9

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    4/26

    C. %arutan a'8 #7

    17. &lkohol C,

    11. Kloroform

    4.! Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram

    1. &l(umin telur

    2. %arutan 98#;2S'#jenuh. %arutan a:l )

    #. %arutan :a:l2)

    ). %arutan MgS'#)

    ,.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    5/26

    V. Prosedur erja

    V.1 Uji Susunan Elementer Protein

    A. Uji Adan0a unsur 3 dan &

    1. Masukkan 1 ml &l(umin telur ke dalam ta(ung reaksi.

    2.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    6/26

    (.! Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram

    1. Sediakan ) ta(ung reaksi0 masing + masing isilah

    dengan 2 ml al(umin telur.

    2. Pada ta(ung 10 20 0 dan # (erturut + turut

    tam(ahkan larutan a:l ) 0 :a:l2)0 MgS'#)0 dan 98#;2S'# jenuh setetes

    demi setetes sampai tim(ul endapan.

    . Selanjutnya0 tam(ahkan kem(ali larutan +

    larutan garam se5ara (erle(ihan.

    #. Ko5oklah ta(ung0 kemudian amati peru(ahan

    yang terjadi.

    (.4 Uji Pen"enda#an Protein den"an Lo"am dan Asam &r"ani'

    1. Sediakan ) ta(ung reaksi yang (ersih0 masing-masing isilah dengan 2 ml larutan

    al(umin telur.

    2. Pada ta(ung 10 20 0 #0 dan )0 (erturut-turut tam(ahkan 17 tetes larutan asam

    trikoroasetat 170 asam sulfosalisilat )0 :uS'#)0 8g:l2)0 dan P(-asetat ).

    . Ko5oklah setiap ta(ung dan amati peru(ahan yang terjadi

    (.( Uji Biuret

    1. Sediakan ta(ung reaksi yang (ersih0

    lalu masing-masing isilah dengan larutan al(umin0 kasein0 dan gelatin se(anyak 2 ml.

    2.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    7/26

    1. Sediakan # ta(ung reaksi

    yang (ersih dan masing-masing isilah dengan larutan al(umin0gelatin0kasein0dan

    tirosin se(anyak 2 ml.

    2. Pada setiap

    ta(ung0tam(ahkan 1ml 8' pekat.Perhatikan adanya endapan putih yang

    ter(entuk.

    !. Kemudian panaskan

    selama 1 menit dan amati ter(entuknya 6arna kuning.

    4. Selanjutnya dinginkan di

    (a6ah air kran0lalu tam(ahkan a'8 17 setetes demi setetes melalui dinding

    ta(ung hingga ter(entuk lapisan.

    (. Perhatikan peru(ahan

    6arna yang tejadi

    VI. 3asil dan Pemahasan

    ).1 3asil Uji Susunan Elementer Protein

    &. Uji adanya unsur :080 dan '

    *. Uji adanya atom

    +o. Perla'uan3asil Pen"amatan 56789

    Bau amonia' 5+9 ertas la'mus merah 5+9

    1 &l(umin = 1ml a'8 17 =

    dipanaskan

    = *asa 9p8 H 1;

    2 !elatin = 1ml a'8 17 =

    dipanaskan

    = *asa 9p8 H C;

    :. Uji adanya atom S

    ' PE>%&KU&8&SI% PE!&M&

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    8/26

    dipanaskan = # tetes P(&5 = # tetes 8:l

    pekat

    2 !elatin = 1 m% a'8 17 =

    dipanaskan = # tetes P(&5 = # tetes 8:l

    pekat

    8 6

    $amar 3asil Uji Susunan Elementer Protein

    Uji Adan0a Atom +

    &l(umin se(elum di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan

    &l(umin setelah di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan

    !elatin