Download - Biokim Protein Fixx

Transcript
  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    1/26

    I. Judul : Uji Protein

    II. Tujuan :

    II.1Uji Susunan Elementer Protein

    Mengidentifikasi adanya unsur-unsur penyusun protein

    II.2Uji Kelarutan Protein

    Mengetahui daya kelarutan protein terhadap pelarut tertentuII.Uji Pengendapan Protein dengan !aram

    Mengetahui pengaruh larutan garam alkali dan garam di"alen konsentrasi tinggi

    terhadap sifat kelarutan protein.

    II.#Uji Pengendapan Protein $engan %ogam $an &sam 'rganik

    Mengetahui pengaruh logam (erat dan asam organik terhadap sifat kelarutan

    protein.

    II.)Uji *iuret

    Mem(uktikan adanya molekul + molekul peptida dari protein.

    II.,Uji inhidrinMem(uktikan adanya asam amino (e(as dalam protein

    II.Uji /antoprotein

    Mem(uktikan adanya asam amino tirosin0 triptofan0 atau fenilalanin yang terdapat

    dalam protein

    III. Landasan Teori

    Protein (erasal dari kata unani yaitu Proteios yang (erarti pertama3 atau 4utama3

    merupakan makromolekul yang paling (erlimpah didalam sel serta menyusun le(ih dari

    setengah (erat kering pada hampir semua organisme. &sam amino merupakan se(uah unit

    struktur protein. Struktur protein terdiri dari polipeptida yang mempunyai rantai yang amat

    panjang0 tersusun atas (anyak unit asam amino. Protein adalah instrument yang

    mengekspresikan informasi genetik. Seperti juga terdapat ri(uan gen di dalam inti sel0

    masing-masing men5irikan satu sifat nyata dari organisme0 di dalam sel terdapat ri(uan jenis

    protein yang (er(eda0 masing-masing mem(a6a fungsi spesifik yang ditentukan oleh gen

    yang sesuai. Protein0 karenanya (ukan hanya makromolekul yang (erlimpah0 tetapi juga amat

    (er"ariasi fungsinya. Semua protein di dalam semua mahluk0 tanpa memandang fungsi danakti"itas (iologinya0 di(angun oleh susunan dasar yang sama0 yaitu dari 27 asam amino yang

    (aku0 dimana molekulnya sendiri tidak mempunyai akti"itas (iologi. $apat dikatakan (ah6a

    protein (er(eda satu sama lain hal ini karena masing-masing mempunyai deret unit asam

    amino sendiri-sendiri. &sam amino merupakan a(jad struktur protein0 dimana molekul-

    molekul ini dapat disusun dalam jumlah deret yang hampir tidak ter(atas0 untuk mem(uat

    (er(agai protein dalam jumlah yang hampir tidak ter(atas.

    8ampir semua jenis protein tersusun atas unsur-unsur kar(on 9:;0 hidrogen 98;0

    oksigen 9';0 dan nitrogen 9;.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    2/26

    penyusun protein seperti :0 80 ' dan . Protein dapat dikatakan se(agai molekul yang sangat

    (esar0 hal ini dapat memudahkan untuk mengalami peru(ahan (entuk fisik maupun akti"itas

    (iologis. *anyak faktor yang menye(a(kan peru(ahan sifat alamiah protein seperti panas0

    asam0 (asa0 pelarut organik0 p80 garam0 logam (erat0 maupun sinar radiasi radioaktif.

    Sedangkan untuk peru(ahan sifat fisik yang mudah diamati adalah menjadi tidak larut atau

    pemadatan. Protein dikatan (ersifat amfoter0 yaitu protein dapat (ereaksi dengan larutan asam

    maupun (asa. $aya larut protein (er(eda di dalam air0 asam0 dan (asa. Se(agian ada yang

    mudah larut dan ada pula yang sukar larut0 semua protein tidak larut dalam pelarut lemak

    seperti eter atau kloroform. $aya larut protein akan (erkurang jika kita menam(ahkan garam0

    aki(atnya protein akan terpisah dan menghasilkan endapan. &pa(ila protein dipanaskan atau

    kita tam(ahkan alkohol0 maka akan terjadi peru(ahan pada protein yaitu menggumpal. 8al ini

    dise(a(kan karena alkohol menarik mantel air yang melingkupi molekul-molekul protein.

    &danya gugus amino dan kar(oksil (e(as pada ujung-ujung rantai molekul protein0

    dapat menye(a(kan protein mempunyai (anyak muatan dan (ersifat amfoter 9dapat (ereaksi

    dengan asam maupun (asa;.. Protein memiliki sifat seperti mudah larut dalam air0 ini karena

    protein mengandung gugus kar(oksil dan amina yang ikatan peptidanya terdalam. !aram

    dengan konsentrasi tinggi akan dapat menarik air yang terdapat dalam protein hal ini karena

    garam juga dapat menetralkan muatan listrik sehingga menye(a(kan daya larut protein

    terhadap air (erkurang dan protein mengendap. Protein dapat diendapkan dengan 5ara

    menam(ahan asam-asam organik seperti asam pikrat0 asam trikloroasetat0 dan asam

    sulfosalisilat. Penam(ahan asam-asam terse(ut akan menye(a(kan ter(entuknya garam

    protein dimana garam ini merupakan (ersifat tidak larut. 8al lain adalah protein dapat pula

    mengalami denaturasi irre"ersi(le ini dengan adanya logam-logam (erat seperti :u2=08g 2=

    atau P(2=0sehingga mudah mengendap. *iuret dapat kita katakan se(agai senya6a dengan dua

    ikatan peptida yang ter(entuk pada saat pemanasan dua molekul urea. Ketika ion :u 2= dalam

    suasana (asa maka akan (ereaksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan peptide yangmenyusun protein sehingga akan mem(entuk senya6a kompleks yang (er6arna ungu 9"iolet;.

    >eaksi (iuret dikatakn positif terhadap dua (uah ikatan peptida atau le(ih0 tetapi dikatakan

    negatif untuk asam amino (e(as atau dipeptida. >eaksi positif ter(entuk terhadap senya6a-

    senya6a yang mengandung dua gugus? -:82820 -:S820 -:98;820 dan +:'82.

    9&nonim @ 2712; 9aAid@277,;.

    inhidrin merupakan suatu reagen yang (erguna untuk mendeteksi asam amino dan

    menetapkan konsentrasinya dalam larutan0 dan termasuk hidrat dari triketon siklik0 dan

    menghasilkan Aat (er6arna ungu (ila (ereaksi dengan asam amino. Uji inhidrin terjadi

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    3/26

    ketika ninhidrin dipanaskan (ersama dengan asam amino maka ter(entuk kompleks

    (er6arna. &sam amino dapat ditentukan menggunakan intensitas 6arna yang ter(entuk

    se(anding dengan konsentrasi asam amino terse(ut. Pada reaksi ini akan dilepaskan :'2 dan

    8# sehingga asam amino dapat ditentukan se5ara kuantitatif dengan mengukur jumlah

    :'2 dan 8 yang dilepaskan. Prolin dan hidroksi prolin akan menghasilkan 6arna

    kompleks yang (er(eda 6arnanya dengan asam amino lainnya0 dimana kompleks 6arna yang

    ter(entuk mengandung dua molekul ninhidrin yang (ereaksi dengan ammonia yang

    dilepaskan pada oksidasi asam amino. 8asil uji positif pada uji ninhidrin akan di(erikan pada

    asam amino yang mengandung asam B-amino dan peptida yang memiliki gugus B-amino yang

    (e(as. /antoprotein merupakan reaksi yang didasarkan pada nitrasi inti (enAena yang

    terdapat dalam molekul protein. *enAena yang ditam(ahkan asam nitrat pekat0 akan

    menghasilkan se(uah endapan yang (er6arna putih0 dan (eru(ah kuning saat dipanaskan.9

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    4/26

    C. %arutan a'8 #7

    17. &lkohol C,

    11. Kloroform

    4.! Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram

    1. &l(umin telur

    2. %arutan 98#;2S'#jenuh. %arutan a:l )

    #. %arutan :a:l2)

    ). %arutan MgS'#)

    ,.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    5/26

    V. Prosedur erja

    V.1 Uji Susunan Elementer Protein

    A. Uji Adan0a unsur 3 dan &

    1. Masukkan 1 ml &l(umin telur ke dalam ta(ung reaksi.

    2.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    6/26

    (.! Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram

    1. Sediakan ) ta(ung reaksi0 masing + masing isilah

    dengan 2 ml al(umin telur.

    2. Pada ta(ung 10 20 0 dan # (erturut + turut

    tam(ahkan larutan a:l ) 0 :a:l2)0 MgS'#)0 dan 98#;2S'# jenuh setetes

    demi setetes sampai tim(ul endapan.

    . Selanjutnya0 tam(ahkan kem(ali larutan +

    larutan garam se5ara (erle(ihan.

    #. Ko5oklah ta(ung0 kemudian amati peru(ahan

    yang terjadi.

    (.4 Uji Pen"enda#an Protein den"an Lo"am dan Asam &r"ani'

    1. Sediakan ) ta(ung reaksi yang (ersih0 masing-masing isilah dengan 2 ml larutan

    al(umin telur.

    2. Pada ta(ung 10 20 0 #0 dan )0 (erturut-turut tam(ahkan 17 tetes larutan asam

    trikoroasetat 170 asam sulfosalisilat )0 :uS'#)0 8g:l2)0 dan P(-asetat ).

    . Ko5oklah setiap ta(ung dan amati peru(ahan yang terjadi

    (.( Uji Biuret

    1. Sediakan ta(ung reaksi yang (ersih0

    lalu masing-masing isilah dengan larutan al(umin0 kasein0 dan gelatin se(anyak 2 ml.

    2.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    7/26

    1. Sediakan # ta(ung reaksi

    yang (ersih dan masing-masing isilah dengan larutan al(umin0gelatin0kasein0dan

    tirosin se(anyak 2 ml.

    2. Pada setiap

    ta(ung0tam(ahkan 1ml 8' pekat.Perhatikan adanya endapan putih yang

    ter(entuk.

    !. Kemudian panaskan

    selama 1 menit dan amati ter(entuknya 6arna kuning.

    4. Selanjutnya dinginkan di

    (a6ah air kran0lalu tam(ahkan a'8 17 setetes demi setetes melalui dinding

    ta(ung hingga ter(entuk lapisan.

    (. Perhatikan peru(ahan

    6arna yang tejadi

    VI. 3asil dan Pemahasan

    ).1 3asil Uji Susunan Elementer Protein

    &. Uji adanya unsur :080 dan '

    *. Uji adanya atom

    +o. Perla'uan3asil Pen"amatan 56789

    Bau amonia' 5+9 ertas la'mus merah 5+9

    1 &l(umin = 1ml a'8 17 =

    dipanaskan

    = *asa 9p8 H 1;

    2 !elatin = 1ml a'8 17 =

    dipanaskan

    = *asa 9p8 H C;

    :. Uji adanya atom S

    ' PE>%&KU&8&SI% PE!&M&

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    8/26

    dipanaskan = # tetes P(&5 = # tetes 8:l

    pekat

    2 !elatin = 1 m% a'8 17 =

    dipanaskan = # tetes P(&5 = # tetes 8:l

    pekat

    8 6

    $amar 3asil Uji Susunan Elementer Protein

    Uji Adan0a Atom +

    &l(umin se(elum di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan

    &l(umin setelah di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan

    !elatin se(elum di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan

    !elatin setelah di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan

    &. Uji adan0a Unsur 3 dan &

    &l(umin se(elum dipanaskan&l(umin setelah dipanaskan

    !elatin se(elum dipanaskan !elatin setelah di panaskan

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    9/26

    . Uji Adan0a Atom S

    &l(umin se(elum di tam(ahkan a'8

    17 dan P(-asetat&l(umin setelah di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan kemudian di

    tam(ahkan P(-asetat

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    10/26

    !elatin se(elum di tam(ahkan a'8

    17 dan P(-asetat

    !elatin setelah di tam(ahkan a'8

    17 dan di panaskan kemudian di

    tam(ahkan P(-asetat

    ).2. Pemahasan Uji Susunan Elementer Protein

    &. Uji &danya Unsur :080 dan '.

    Pada per5o(aan uji susunan elementer protein digunakan larutan uji al(umin dan

    gelatin yang dimasukkan dalam 5a6an porselin dan diletakkan gelas o(yek di atas larutan

    uji. Setelah (e(erapa saat dipanaskan0 terjadi pengem(unan pada kedua gelas o(jek. 8al

    ini menandakan pada kedua Aat uji terdapat unsur hidrogen dan oksigen0 dimana jika

    kedua unsur ini (erikatan0 maka akan mem(entuk unsur yang dalam (entuk gas karena

    pemanasan. Sedangkan pada pengamatan (au ram(ut ter(akar untuk mem(uktikan

    adanya unsur nitrogen0 keduanya positif memilikiFmenghasilkan (au ram(ut ter(akar. 8al

    ini dikarenakan (ah6a di dalam rumus empiris kedua larutan sama-sama memiliki unsur

    nitrogen. %alu pada uji Kar(on0 ter(ukti pada kedua larutan positif mengandung kar(on.

    8al ini0 ditandai oleh adanya pada hasil pemanasan kedua larutan terse(ut menyisakan

    gumpalan hitam 9arang; 9ian@271;

    :. Uji adanya atom

    Pada per5o(aan al(umin dan gelatin yang masing + masing ditam(ahkan dengan 1

    ml a'8 170 kemudian dipanaskan0 al(umin dan gelatin menunjukkan reaksi positif

    yaitu terdapat (au amoniak .*au amoniak terse(ut menandakan (ah6a terdapat unsur

    atom pada al(umin dan gelatin. Sedangkan pada per5o(aan adanya atom

    menggunakan kertas lakmus0 al(umin dan gelatin yang masing + masing diteteskan 1 ml

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    11/26

    a'8 17 kemudian diapanaskan memiliki sifat (asa yaitu p8 masing + masing le(ih

    dari . 9JhAy @ 2717;

    :. Uji adanya atom S

    Pada uji susunan elementer untuk mengetahui adanya atom S 9sulfur; pada (ahan uji

    yakni al(umin dan gelatin0 terjadi hasil (er(eda untuk setiap (ahan uji. Untuk al(umin0

    saat dipanaskan (ersama a'8 tidak terjadi peru(ahan 6arna. Ketika larutan di5ampur

    dengan P(-&setat terjadi peru(ahan 6arna hitam yang mengindikasikan ter(entuk P(S.

    &danya sulfur pada al(umin semakin diperkuat saat direaksikan dengan 8:l pekat karena

    adanya asap dengan (au khas (elerang dari (elerang yang teroksidasi. *er(eda saat

    gelatin diuji 5o(akan tidak ada peru(ahan 6arna hitam yang menandakan tidak

    ter(entuknya P(S dan tetapi ter5ium (au ter5iumnya (au khas (elerang.

    Uji ini dilakukan untuk mengetahui adanya protein yang mengandung asam

    amino dengan atom S. Pada uji ini0 dalam suasana (asa0 P( asetat akan (ereaksi dengan S

    dari asam amino mem(entuk garam P(S (er6arna hitam 9reaksi positif ditandai dengan

    ter(entuknya endapan (er6arna hitam atau 5okelat;. Pada per5o(aan ini0 dapat terlihat

    (ah6a pada gelatin tidak terjadi peru(ahan apapun tetapi ter5ium (au (elerang.

    Sedangkan pada al(umin merupakan asam amino yang mengandung atom S pada

    molekulnya. >eaksi P( asetat dengan asam-asam amino terse(ut akan mem(entuk

    endapan (er6arna merah ke5oklatan0 yaitu garam P(S 9mem(uktikan (ah6a sampel

    protein terse(ut mengandung atom S;

    ).! 3asil Uji elarutan Protein

    $amar 3asil Uji elarutan Protein

    +o. Taun"3asil Pra'ti'um

    Alumin telur $elatin

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    12/26

    1.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    13/26

    #.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    14/26

    kedua 8:l 17 hasil yang didapatkan yakni tidak larut0 terkoagulasi. Pada ta(ung a'8

    #7 hasilnya tidak larut0 terkoagulasi. Untuk ta(ung keempat yang (erisi &lkohol C, hasil

    yang didapatkan adalah tidak larut0 dan ada endapan. arna

    unin"

    Terjadi

    enda#an

    er>arna

    'eruh

    Tida' terjadi

    enda#an

    er>arna

    enin"

    Tida' terjadi

    enda#an

    er>arna

    enin"

    $amar 3asil Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram

    &l(umin

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    15/26

    :a:l2 :a:l2

    MgS'# MgS'#

    ).) Pemahasan Uji Pen"enda#an Protein %en"an $aram

    Uji Pengendapan protein dengan garam (ertujuan untuk mengetahui pengaruh larutan

    garam alkali dan garam di"alen konsentrasi tinggi terhadap sifat kelarutan protein.%arutan

    protein yang digunakan dalam praktikum kali ini adalah larutan al(umin. &l(umin adalah

    protein yang dapat larut dalam air serta dapat terkoagulasi oleh panas. Pada praktikum ini0

    menam(ahkan # ma5am larutan yaitu a:l ) 0 *a:l2) 0 :a:l2) 0 dan MgS'# ) ke

    dalam al(umin telur masing + masing menim(ulkan reaksi yang sama.$ari ke # larutan yang

    ditam(ahkan terse(ut yaitu a:l )0 *a:l2)0:a:l2) dan MgS'#)0 pada ta(ung 1

    tidak terjadi endapan dan (er6arna (ening0 ta(ung 2 terjadi endapan dan (er6arna keruh0

    ta(ung tidak terjadi endapan dan (er6arna (ening0 pada ta(ung # tidak terjadi endapan dan

    (er6arna (ening.$ari al(umin yang ditam(ahkan masing-masing larutan terse(ut (ah6a

    hanya yang ditam(ahkan *a:l2) terjadi endapan.Pada *a:l2) menghasilkan endapan hal

    terse(ut menunjukkan (ah6a pengaruh penam(ahan garam terhadap kelarutan protein

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    16/26

    (er(eda-(eda0tergantung pada konsentrasi dan jumlah muataan ionnya dalam larutan.semakin

    tinggi konsentrasi dan jumlah ionnya0semakin efektif garam dalam mengendapkan

    protein.Penye(a( tim(ulnya endapan pada *a:l2 di karenakan adanya peristi6a denaturasi0

    yaitu suatu peru(ahan atau modifikasi terhadap struktur sekunder0 tersier dan kuartener

    molekul protein tanpa terjadinya peme5ahan ikatan-ikatan ko"alen. Kemudian 6arna keruh

    pada endapan terse(ut dise(a(kan karena terjadi ikatan antara ion salisilat dengan al(umin0

    ion-ion negatif dapat menjenuhkan larutan hingga p8 larutan (erada di (a6ah p8 isolistrik

    sehingga gumpalan larut kem(ali.

    ).* 3asil Uji Pen"enda#an Protein %en"an Lo"am %an Asam &r"ani'

    Tael 3asil Uji Pen"enda#an Protein %en"an Lo"am %an Asam &r"ani'

    *ahan

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    17/26

    ).- Pemahasan Uji Pen"enda#an Protein %en"an Lo"am %an Asam &r"ani'

    Protein merupakan suatu polimer yang (erasal dari asam amino yang kemudian

    dihu(ungkan dengan ikatan peptida. Molekul protein ini mengandung unsur-unsur :0 80 '0 0

    P0 S0 dan juga terkadang mengandung unsur logam seperti (esi dan tem(aga. Pada per5o(aan

    pada kali ini0 kita akan mem(uktikan adanya pengendapan protein dengan logam dan asam

    organik. $ari data hasil per5o(aan pengaruh logam (erat terhadap sifat kelarutan protein

    diperoleh data kualitatif (erupa ter(entuknya endapan pada ketiga larutan al(umin yang telah

    ditan(ahkan atau ditetesi dengan Mg:l2 )0 :uS'# ) dan P(-asetat )0 sedangkan untuk

    yang ditetesi dengan &sam sulfosalisilat tidak mengalami pengendapan. Pada ketiga larutan

    yang telah ditetesi dengan Mg:l2 )0 :uS'# ) dan P(-asetat ) ter(ukti memiliki

    endapan di(agian (a6ahnya haln ini karena ketiga larutan terse(ut sudah dapat mengalami

    denaturasi yang (ersifat irre"ersi(le 9tidak dapat kem(ali;0 denaturasi dapat terjadi jika terjadi

    reaksi logam terhadap protein. Sedangkan pada larutan yang ditetesi dengan &sam

    sulfosalisilat tidak mengalami pengendapan hal ini dapat terjadi karena larutan terse(ut tidak

    mampu mengalami denaturasi yang (ersifat irre"ersi(le 9tidak dapat kem(ali;0 dimana

    denaturasi dapat terjadi jika terjadi reaksi logam terhadap protein0 maka dapat dikatakan

    (ah6a dalam hal ini tidak terjadi yang namanya reaksi logam terhadap protein.

    Nika p8 di atas titik isoelektrik protein akan (ermuatan negati"e0 sedangkan di (a6ah

    titik isoelektrik protein (ermuatan positif. 'leh karena itu untuk mengendapkan protein

    dengan ion logam diperlukan p8 larutan di atas titik isoelektrik0 sedangkan untuk

    pengendapan protein dengan ion negati"e memerlukan p8 larutan di (a6ah titik isoelektrik.

    Ion- ion positif yang dapat mengendapkan protein adalah &g=0 :a2=0 n2=0 8g2=0P(2=0:u2=0e2=.

    Sedangkan ion-ion negati"e yang dapat mengendapkan protein adalah ion salisilat0

    trikloroasetat0 pikrat0 tanat dan sulfosalisilat.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    18/26

    Saat struktur protein tidak sta(il maka mudah mengalami denaturasi yaitu keadaan

    dimana protein terurai menjadi struktur primernya0 (aik re"ersi(el maupun ire"ersi(el.

    $enaturasi dapat terjadi karena (e(erapa hal yaitu karena pengaruh p80 panas0 pelarut0 logam

    (erat0 garam0 kekuatan ion0 terlarut0 dan radiasi. 9estien yaAid0 277,;.

    ). 3asil Uji Biuret

    Tael hasil uji Biuret

    +o. atUji 3asil Uji Biuret Poli#e#tida 56789

    1. &l(umin 2 Ungu =

    2. !elatin 2 Ungu =

    . Kasein 70) Ungu =

    $amar hasil uji iuret

    Larutan alumin "elatin dan 'asein seelum di tetesi larutan

    3asil Uji Alumin 2? 3asil Uji $elatin 2? 3asil Uji asein /(?

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    19/26

    ).1/ Pemahasan Uji Biuret

    Pada per5o(aan ini0 akan mem(uktikan adanya molekul-molekul peptida dari protein.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    20/26

    Tael 3asil Uji +inhidrin

    ).12 Pem

    ahas

    a n Uji

    +inhidrin

    &sam amino (e(as adalah asam amino dimana gugus aminonya tidak terikat. Semua

    asam amino0 atau peptida yang mengandung asam-B amino (e(as akan (ereaksi dengan

    ninhidrin mem(entuk senya6a kompleks (er6arna (iru-ungu. amun0 prolin dan

    hidroksiprolin menghasilkan senya6a (er6arna kuning. Protein mengandung asam amino

    (erinti (enAen0 jika ditam(ahkan asam nitrat pekat akan mengendap dengan endapan

    (er6arna putih yang dapat (eru(ah menjadi kuning se6aktu dipanaskan. Senya6a nitro yang

    ter(entuk dalam suasana (asa akan terionisasi dan 6arnanya akan (eru(ah menjadi le(ih tua

    atau jingga. >ekasi ini didasarkan pada uji nitrasi inti (enAena yang terdapat pada mulekul

    protein menjadi senya6a intro yang (er6arna kuning.

    o

    .at Uji 8asil Uji inhidrin &sam &mino (e(as 9=F-;

    1&l(umin 2 *er6arna Ungu =

    2!elatin 2 *er6arna Ungu Pekat

    ==

    Kasein 7.) *er6arna Ungu Muda

    =

    #Pepton 70) *er6arna Ungu Pekat

    ===

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    21/26

    Pada praktikum di atas (aik al(umin0 gelatin0 kasein dan pepton sama-sama

    mem(entuk 6arna ungu dengan intensitas yang (er(eda-(eda. 8al ini menandakan larutanFAat

    terse(ut dapat (ereaksi dengan inhidrin sehingga mem(uktikan (ah6a Aat uji terse(ut

    mempunyai gugus asam amino (e(as. &sam amino dapat ditentukan se5ara kuntitatif dengan

    jalan menggunakan intensitas 6arna yang ter(entuk se(anding dengan konsentrasi asam

    amino terse(ut. Pada reaksi ini dilepaskan :'2 dan 8# sehingga asam amino dapat

    ditentukan se5ara kuantitatif dengan mengukur jumlah :'2 dan 8 yang dilepaskan.

    Struktur Prolin Struktur 8idroksiprolin

    ).1! 3asil Uji ,anto#rotein

    Tael 3asil Uji ,anto#rotein

    $amar 3asil Uji ,anto#rotein

    +o at Uji 3asil Uji ,anto#rotein Tirosin7tri#to@an7

    @enilalanin 56789

    1. &l(umin 2 Kuning -

    2. !elatin 2 Kuning (ening -

    . Kasein 70) Kuning -

    #.

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    22/26

    at uji se(elum diuji 5o(a at uji setelah diuji 5o(a

    &l(umin &l(umin

    !elatin !elatin

    Kasein Kasein

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    23/26

    ).14 Pemahasan Uji ,anto#rotein

    Uji Oantoprotein (ertujuan untukMem(uktikan adanya asam amino tirosin0triptofan0atau

    fenilalanin yang terdapat dalam protein. Uji Oantoprotein merupakan uji kualitatif pada

    protein yang digunakan untuk menunjukkan adanya gugus (enAena 95in5in fenil;. Pada

    praktikum kali ini larutan yang digunakan yaitu larutan al(umin 20 gelatin 20kasein

    70)0tirosin 2 dengan di tetesi larutan 8' pekat0larutan a'8 17. *erdasarkan hasil

    per5o(aan pada uji Oantoprotein (ahan yang mengandung gugus (enAena 95in5in fenil; adalah

    tirosin0tanda positif 9=; menujukkan adanya gugus (enAena 95in5in fenil; pada larutan

    terse(ut0(ahan yang mengandung gugus (enAena 95in5in fenil; setelah di (eri larutan 8'

    pekat dan larutan a'8 17 yang menghasilkan lapisan diatas (er6arna merah.

    9Sel"iana@271;

    VII. esim#ulan

    $ari praktikum yang telah dilakukan pada uji susunan elementer protein yaitu protein

    memiliki unsur :0 80 dan '0 atom dan atom S. Protein memiliki daya kelarutan

    (er(eda-(eda0 protein tidak larut dalam pelarut lemak karena adanya gugus amino dan

    kar(oksil (e(as pada ujung-ujung rantai molekul protein. Pada al(umin yang ditam(ahkan

    larutan a:l ) 0 *a:l2) 0 :a:l2) 0 dan MgS'#) diantara ke # larutan terse(uthanya *a:l2 yang terjadi endapan hal terse(ut dikarenakan adanya peristi6a denaturasi0

    yaitu suatu peru(ahan atau modifikasi terhadap struktur sekunder0 tersier dan kuartener

    molekul protein tanpa terjadinya peme5ahan ikatan-ikatan ko"alen. Protein tidak mampu

    (ertahan terhadap reaksi logam (erat sehingga mengalami denaturasi irre"ersi(le 9tidak

    dapat kem(ali;. %arutan gelatin0 kasein dan al(umin memiliki molekul + molekul peptida

    dan gugus asam amino (e(as sehingga terjadi peru(ahan 6arna menjadi 6arna ungu.

    VIII. Ja>aan Pertan0aan

    1. Uji Susunan Elementer Protein

    1; Pada per5o(aan uji susunan elementer protein yang mem(edakan gelatin dan al(umin

    yaitu adanya atom S.

    2; Nenis asam amino yang mengandung unsure S yaitu

    Sistein

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    24/26

    ; reaksi ter(entuknya (au khas (elerang pada uji adanya atom S

    282S 9g;= S'2 9aG; S9s;= 282'9l;

    2. Uji elarutan Protein

    Karena protein memiliki rantai kar(on yang panjang sehingga sifat asamnya semakin

    (erkurang karena semakin sulit melepas proton dan menye(a(kan kelarutannya semakin

    ke5il. Protein memiliki kemampuan untuk menyerap lemak0 oleh se(a( itu protein tidak dapat

    larut pada pelarut lemak.

    !.

    Uji Pen"enda#an Protein den"an $aram1; Karena semakin tinggi konsentrasi dan jumlah muatan ionnya0 semakin efektif garam

    mengendapkan protein.

    2; !aram 98#;2S'#0 karena menghasilkan paling (anyak endapan. !aram

    98#;2S'#memiliki (erat molekul dan nilai (iloks yang paling (esar di(andingkan garam

    yang lain sehingga paling reaktif untuk mengendapkan protein.

    ; &l(umin yang termasuk dalam protein glo(uler.

    #; ungsi protein dalam darah se(agai (iokatalisator0 hemoglo(in se(agai pengangkut

    oksigen0 hormon se(agai pengatur meta(olisme tu(uh0 dan anti(odi untuk mempertahankan

    tu(uh dari serangan penyakit.

    4. Uji Pen"enda#an den"an Lo"am dan Asam &r"ani'

    1; $enaturasiirreversibleadalah peru(ahan atau modifikasi struktur molekul protein yang

    tidak dapat diu(ah kem(ali.

    2; Karena susu atau putih telur mengandung garam-garam logam (erat dan asam-asam

    mineral kuat yang (aik digunakan untuk mengendapkan protein.

    ; Struktur kimia

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    25/26

    1; Protein adalahsenya6a organikkompleks (er(o(ot molekul tinggi yang

    merupakanpolimerdarimonomer-monomerasam aminoyang dihu(ungkan satu sama lain

    dengan ikatan peptida

    Polipeptida merupakan monomer sedangkan protein merupakan polimer.

    2; !lisin0 karena glisin merupakan asam amino (e(as yang tidak mempunyai satu atom

    kar(on asimetris.

    ). Uji +inhidrin

    1; &sam amino (e(as adalah asam amino dimana gugus aminonya tidak terikat.

    2; &l(umin0 gelatin0 kasein dan pepton karena pada per5o(aan ke + # Aat uji mengalami

    peru(ahan 6arna menjadi 6arna ungu sehingga menunjukkan adanya asam amino (e(as pada

    protein terse(ut.; a0 ninhidrin suatu oksidator sangat kuat yang dapat menye(a(kan terjadinya

    dekar(oksilasi oksidatif asam B-amino. inhidrin yang tereduksi0 kemudian (ereaksi dengan

    amino yang lepas mem(entuk kompleks (iru ungu. Intensitas 6arna (iru ungu yang

    dihasilkan dalam keadaan (aku merupakan dasar (agi ter kuantitatif yang sangat (erguna

    untuk asam amino dan amina-amina yang (ukan asam B-amino.

    #; Struktur kimia prolin

    *. Uji ,antro#rotein

    1;

  • 7/26/2019 Biokim Protein Fixx

    26/26

    %a@tar Pusta'a

    Linarno0 . !. 1CC2.Kimia Pangan dan Gizi. !ramedia? Nakarta

    '


Top Related