akbm - vitamin

7/26/2019 AKBM - Vitamin

1/29

VITAMINDISUSUN OLEH

1. Hasna Ayusuparti2. Gloria 33111410993. Lisna Nurhayati kurnia 3311141109


2/29

Yang akan dianalisis :1.Vitamin C?2.Vitamin A?3.Karbohidrat?


3/29

ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF


4/29

Dimasukkan sampel,

di netralkan dengan NaHCO 3 5%

Warna merah- ungu (+) Vit

Analisis Kualitatif Vitamin C

+ 2 tetes larutan FeCl 3


5/29

Analisa Kualitatif Vitamin C

1. Dimasukkan sampel kedalam tabung reaksi2. Dinetralkan dengan menambahkan NaHCO3. Ditambahkan 2 tetes larutan FeCl 34. Diamati perubahan yang terjadi5. Jika terbentuk warna merah -ungu berar

mengandung Vitamin C


6/29

Analisa Kuantitatif Vitamin C(AOAC Method 967,21)

Titrasi dengan larutan 2,6-diklorofenol1. Bahan yang digunakana. Larutan pengekstrasi (larutan asam metafosfat 500 mL)b. Larutan baku asam askorbat 1 mg/mL

c. Larutan baku diklorofenol-indofenol (DCIP) 200 mLd.Indikator ph timol dengan 10,75% mL NaOH 0,02 N dengan H 2O ad 250 mL


7/29

+ 2 mL larutan bakularutan asam askorbat

+ 5 mL larutan HPO 3 - CH 3 COOH

Titrasi cepat dengan larutan DCIP

Warna merah muda dalam waktu 5 detik,

Hitung volume rata-rata

Pembakuan larutan

baku DCIP dengan

larutan baku Vitamin C

Prosedur Uji Vitamin C dengan Metode DCIP

1


8/29

+ 2 ml H 2 O

Warna merah muda

Titrasi Blanko2

+ 5 mL larutan HPO 3 - CH 3 COOH

Titrasi cepat dengan larutan DCIP

d h l d l l h k


9/29

sejumlah Sampel

+ 2 mL larutan HPO3-CH3COOH

Ttskn indikator phtimol biru

2 = basa

2. Uji Pendahuluan Adanya Senyawa Basa Dalam Jumlah Cukup Besar

Sampel

Encerkan dgn larutan HPO3-CH3COOH ad vol terukur

3. Penyiapan larutan sampel

10 mL Larutan pengekstrasi

1 2

4 P k d


10/29

ml sampel yangdiencerkan

ml larutan HP03-CH3COOH

titrasi cepat dengan larutan DCIP

warna merah muda

4. Penetapan kadar

hitung volume rata-rata

1

2 Dihitung juga 3 kali titrasi blanko dan dihitung volume rata-rata

larutan baku DCIP yang digunakan untuk titrasi blanko


11/29

3 Perhitungan

mg asam askorbat/g,tablet,mL = (X-B) x F/E x V/Y

X = Volume rata-rata DCIP untuk titrasi sampelB = Volume rata-rata DCIP untuk titrasi blankoF = Keseraraan mg asam askorbat/mL DCIPV = Volume larutan uji awal yang diambil

Y = Volume aliqout sampel dititrasi


12/29

Prosedur Uji Vitamin C dengan metode DCIP

a. Pembakuan larutan baku DCIP dengan larutan baku vitamin c1. Masing masing 2,0 ml larutan baku asam askorbat dipindahkan kedala

3 labu erlenmeyer dan masing2 labu erlenmeyer ditambah 5 ml larutaHPO3-CH3COOH

2. Larutan dititrasi cepat dengan larutan DCIP dari buret 50 ml sampaimuncul warna merah muda dalam waktu 5 detik. Dihitung volrata larutan baku DCIP yang digunakan untuk titrasi

3. Dilakukan juga 3 kali titrasi blanko yang terdiri atas 5,0 ml larutan HPCH3COOH dan 2 ml H2O. Dihitung untuk titrasi blanko (misalkan Y4. Banyaknya volume X dikurangi dengan volume Y . Dihitung kesetaraa

mg vitamin c tiap ml buku DCIP. (pembakuan DCIP seperti diatas,dilakukan setiap kali mau membakukan DCIP dengan baku asam askoyang dibuat baru


13/29

LANJUTAN

b. Uji Pendahuluan Adanya Senyawa Basa Dalam Jumlah Cukup Bes1. Sampel diencerkan dengan 2 ml larutan HPO3-CH3COOH .ph

larutan diuji dengan meneteskan indicator ph timol biruc. Penyiapan larutan sampel1. Diambil sejumlah sampel lalu ditambahkan larutan HPO3-

CH3COOH sampai volume terukur .2. Digunakan 10 ml larutan pengekstrasi


14/29

lanjutan

d. Penetapan kadar1. Diambil sejumlah volume aliquot sampel yang mengandung kurang le

2 mg asam askorbat. Jika volume aliquot sampel yang mengandung mg asam askorbat


15/29

Analisis kualitatif dankuantitaf vitamin A??

A li i k lit tif it A


16/29

5 tts Sampel

+10 tetes kloroform1

2 tts asam asetat anhidratdan sedikit kristal SbCl3

2

warna biru yang akan berubahwarna menjadi merah coklat

+ vitam

Analisis kualitatif vit ALisda nursanti,2006)

1. Pereaksi Carr-Price


17/29

5 tts Sampel

+ 1 ml pereaksi TCA dalamkloroform

warna biru kehijauan + vitamin

2. Pereaksi trikloroasetat (TCA

+ vitam


18/29

ANALISA KUAANTITATIFmenurut FI III hal 1FI IV hal 119 USP 30 hal 3466

Kromatografi Lapis Tipis (KLT)1. Pada 1 ml larutan dalam kloroform P yang mengandung lebih kurang 6 g vitam

A, tambahkan 10 ml antimon triklorida LP. Segera terjadi warna biru tidak mantap2. Lakukan Kromatografi Lapis Tipis seperti yang tertera pada KromatografA. Larutan BakuLarutkan isi 1 kapsul vitamin A BPFI dalam kloroform hingga 25,0 ml

B. Larutan Ujitimbang sejumlah zat setara dengan lebih kurang 15.000 unit FI, masukan kedalam

corong pisah, tambahkan 75 ml air, kocok kuat selama 1 menit. Ekstraksi denganml kloroform P dengan mengocok selama 1 menit dan sentrifus untuk menjernihkekstrak kloroform.


19/29

LANJUTAN

Prosedur1. totolkan secara terpisah 15 l larutan uji pada lempeng kromatografi

silika gel.2. Masukan lempeng kedalam bejana kromatografi yang ditipiskan denga

kertas saring dan berisi fase gerak campuran sikloheksana P : eterhingga fase gerak merambat 10 cm.

3. Angkat lempeng, biarkan kering diudara, semprot lempeng dengan fosfomolibdat LP ; bercak biru hijau yang terjadi menunjukan adanyvitamin A. Perkirakan harga Rf vitamin A dalam bentuk alkohol, asetadan palmitat berturut-turut adalah 0,1;0,45;0,7

Perbandingan serapan tidak kurang dari 0,85. Tetapkan rasio serapan yangtelah dikoreksi (A 325 ) terhadap serapan yang diamati (A 325 ) sepetertera pada Penetapan Kadar Akseoroftol


20/29

Analisis kualitatif vit A (estien yazid,lisda nursanti; penuntunpraktikum biokima,CV. Andi offset, Yogyakarta, 2006.

1. Dengan pereaksi Carr-Pricea. Masukan 5 tts zat yang akan diuji kedalam tabung reaksib. tambahkan 10 tetes kloroform campur ad homogenc. Tambahkan 2 tts asam asetat anhidrat dan sedikit kristal SbCl3 Amati

(jika terbentuk warna biru yang akan berubah warna menjadi merahcoklat maka reaksi positif mengandung vitamin A)

2. Dengan pereaksi trikloroasetat (TCA)a. Masukan 5 tts zat yang akan diuji kedalam tabung reaksib. Tambahkan 1 ml pereaksi TCA dalam kloroform campur ad homogen

Amati perubahan warna yang terjadi (jika terbentuk warna birukehijauan maka positif vitamin A)


21/29

ANALISIS KUALITATIF DAN

KUANTITATIF GULA ???

f


22/29

1 ml sampel

pereaksi fehling A dan fehling Bmasing-masing 2 ml

panaskanendapan berwarna merah dansuspense berwarna hijau

+ gula

Analisa kualitatif gula per

Pembuatan kurva standar gula Analisis kuantitatif gula per


23/29

1 grglukosa

Aquadest ad 1liter 10 ppm 20 ppm 30 ppm 40 ppm 50 ppm

60 ppm 70 ppm 80 ppm 90 ppm 100 ppm

encerkan

Ambil 1 ml

1 ml aquadest

blanko 10 tabung reaksi

Reagen nelson1 ml

Panaskan di penangas air 20 menit

+

s

1

Analisis kuantitatif gula perSomogyi-Nelson (AOAC,1990)

2 Penentuan konsentrasi gula pereduksi


24/29

10 tabung

Sampel 1 ml Reagen nelson1 ml

+ arsenomolibdakocok

Panaskan di penangas air 20 menit

endapan la

spektrofoto

Dari metode ini akan didapatkan kadar dari persamaan regresiy=bx+c yang dalam satuan mg/L

2 Penentuan konsentrasi gula pereduksi


25/29

Analisa kualitatif gula pereduksi

Menggunakan pereaksi fehling1. Sampel dipipet 1 ml kedalam tabung reaksi2. Ditambahkan pereaksi fehling A dan fehling B masing-masing 2 m

dan dipanaskan3. Amati perubahan yang terjadi

4. Jika terdapat endapan berwarna merah dan suspense berwarnahijau, maka menunjukan hasil positif


26/29

Analisis kuantitatif gula pereduksi, MetodeSomogyi-Nelson (AOAC,1990)1. Pembuatan kurva standar gula

a. Menyiapkan larutan glukosa standar dengan cara menimbang 1 gram glukosakemudian dilarutkan dengan akuadest hingga 1 liter.

b. Kemudian diencerkaan hingga diperoleh larutan glukosa dengan konsentrasi10,20,30,40,50,60,70,80,90,100 ppm.

c. Diambil masing-masing 1 ml larutan dan 1 ml aquadest sebagai blanko ke dalamtabung reaksi.

d. Setiap tabung ditambahkan reagen nelson sebanyak 1 ml dan dipanaskan dalam air

mendidih selama 20 menit.e. Kemudian ditambahkan arsenomolibdat sebanyak 1 ml dan dikocok hingga semua

endapan larut kembali.f. Volume dalam tabung ditepatkan menjadi 10 ml dengan menambahkan 7 ml

aquadest.g. Lalu diukur serapan menggunakan spektrofotometer.


27/29

2. Penentuan konsentrasi gula pereduksia. masing-masing sampel di pipet sebnayak 1 ml kedalam tabung reaksib. Ditambahkan 1 ml reagen nelson kedalam masing-masing tabung reakc. Campuran dipanaskan kedalam penanggas air selama 20 menitd. Ditambahkan 1 ml reagen arsenomolibdat, dikocok hingga semua

endapan larut kembali.

e. Volume dalam tabung ditepatkan 10 ml dengan menambahkan 7 mlaquadest.f. Diukur serapannya dengan spektrofotometer.Dari metode ini akan didapatkan kadar dari persamaan regresi y=bx+c yandalam satuan mg/L


28/29

DAFTAR PUSTAKA

(Harianja,jhon wesly.Idiawati,Nora.Rudiyansyah.2015.optimasidan konsentrasi asam pada hidrolisis selulosa dalam tongkol

jagung .JKK Vol 4 Hal 66 -71.diakses maret 2016) (estien yazid,lisda nursanti; penuntun praktikum biokima,CV. Andi

offset, Yogyakarta, 2006.


29/29

ADA PERTANYAANN ????^^

akbm - vitamin

Documents