Laporan Praktikum BakteriologiNama: Yuni Tri WulandariTingkat: IIInstitusi :D-III Analis Farmasi dan MakananNo. Absen:08Tanggal :26 September 2014

Topik: Pewarnaan Ziehl NielsenTujuan : untuk membedakan antara kuman tahan asam dan kuman tidak tahan asamPrinsip: Bakteri Tahan AsamBakteri yang jika diwarnai dengan carbol fuchsin dan dipanaskan sampai menguap maka lapisan lilin menjadi lunak sehingga cat dapat terikat kuat oleh bakteri dan setelah dicuci dan dilunturkan dengan alkohol HCl 5% tidak dapat luntur pada saat digenangi Methylen Blue catnya tidak terserap sehingga bakteri tetap berwarna merah. Bakteri Tidak Tahan AsamBakteri yang jika diwarnai dengan carbol fuchsin dan dipanaskan sampai menguap tidak menyerap dengan kuat sehingga setelah dicuci dan diberi alkohol HCl 5% akan luntur dan pada saat digenangi Methylen Blue mampu mengikat cat tersebut sehingga bakteri berwarna biru. Alat: Mikroskop Obyek glass Lampu spiritus Ose bulat Korek apiBahan : Carbol Fuchsin Alkohol HCl 5% Methylen blue Biakan kuman Oil Immersion XylolProsedur:1. Sediaan difiksasi 2. Sediaan digenangi dengan Carbol Fuchsin3. Panasi sediaan sampai menguap, jangan sampai mendidih4. Cat dibuang dan dicuci dengan air kran5. Lunturkan dengan alkohol HCl 5% selama 30 detik6. Sediaan dicuci7. Sediaan digenangi dengan methylen blue selama 1-2 menit8. Cuci dengan air kran dan keringkan9. Setelah kering diamati dibawah mikroskop dengan obyektif 100xHasil: Bentuk: batang Warna: biru Susunan: menyebar Sifat: tidak tahan asamKesimpulan : Jadi, pengamatan dengan menggunakan pewarnaan Ziehl Nielsen dihasilkan bakteri dengan bentuk batang, berwarna biru, susunan menyebar dan tidak tahan asam.Diskusi:1. Komposisi Carbol Fuchsina. Cat induk Fuchsin 10 mlPhenol pekat 4 mlAquadest 100 mlb. Basic Fuchsin 1 gram Alkohol 96% 10 mlCarbolic Acid Kristal 5 gramAquadest 100 ml2. Komposisi alkohol HCl 5%HCl pekat 5 mlAlkohol 96% 100 ml3. Komposisi Leoffler methylen blue Cat induk methylen blue 30 ml10% NaOH/KOH 0,1 mlAquadest 100 ml4. Kuman tahan asam akan berwarna merahKuman tidak tahan asam akan berwarna biru5. Yang termasuk kuman tahan asam Micobacterium leprae Micobacterium tuberculose6. Yang termasuk kuman tidak tahan asam Escherichia coli Shigella spp Salmonella thypi Kuman golongan coccus

7. Dalam pewarnaan Ziehl Nielsen perlu dipanaskan karena bakteri tahan asam mempunyai lapisan lemak atau lilin dan jika dipanaskan lapisan lilin akan lunak atau terbuka sehingga mudah menyerap carbol fuchsinPewarnaan ini bertujuan untuk melunakkan lapisan lilin sehingga mudah diwarnai, jika sampai mendidih sediaan akan rusak atau sulit diamati dibawah mikroskop