pemeriksaan hemostasis klp 3.pptx

8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx

http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 1/78



Oleh : Kelompok IIINama anggota Kelompok :

Nurul hikmatil hasanah

Nurulhidayati Rahmah fitriatun

Rahmat fahmi arief

Rival anugrah ramdani

Robiatul rosidah

Rostiana safarani

S. Nur M. Ismail NU

Siti rif`ah sabariah Suriyani

Wahyu kurnia

Wardatul jannah

Winda permata sari

Yuni suhanti

Yuriska safitri



Pemeriksaan Hemostasis

1. Pemeriksaan penyaring (Screening)

2. Pemeriksaan Khusus



Pemeriksaan Penyaring

1. Bleeding time /masa perdarahan2. Clotting time /masa pembekuan3. Rumple Leed4. Retraksi bekuan5. Volume Cairan Bekuan6. Clott Lysis



Pemeriksaan Khusus

1. Masa Rekalsifikasi plasma2. Jumlah trombosit3. Plasma Protrombin time (PPT)4. Kaolin partial tromboplastine time (APTT)5. Serum Protrombin time (SPT)6. Trombin time (TT)

7. Titer fibrinogen8. Fibrinogen Degradation Product (FDP)9. Euglobulin Lisis time.10. Agregasi Trombosit11. D-Timer



MASA PERDARAHAN BLEEDING TIME / BT )

Tujuan

Menilai trombosit dan reaksi pembuluh darah terhadap luka ; kem

membentuk sumbat trombosit yang efektif. Prinsip

1) Metode Ivy

Manset tekanan darah dipasang di lengan pasien di atas siku, dinaikkan dan dipertahankan konstan sesuai prosedur. Satu (a

insisi standard dibuat dipermukaan volar lengan bawah. Lama yang dibutuhkan untuk berhentinya perdarahan dicatat sebagPerdarahan (Bleeding time).

2) Metode Duke

Dibuat luka standar pada daun telinga dan dicatat lama waktupendarahan.



Alat dan Reagent :

1) Lancet steril

2) Kapas kering

3) Stopwacth

4) Kertas saring5) Alkohol 70%

Cara Kerja

A. Metode Duke

1) Pijatlah terlebih dahulu bagian anak daun telinga yang akan ditusu

2) Bersihkan daerah anak daun telinga dengan kapas alcohol

3) Pencetlah bagian yang akan ditusuk, baru kemudian ditusuk dengamenggunakan lanset.

4) Tiap 30 detik darah dihisap dengan kertas saring.

5) Catatlah waktu yang diperlukan saat darah mulai keluar hingga darkeluar.



B. Metode Ivy

1) Pasang manset tekanan darah di lengan atasdan dinaikkan sampai 40 mmHg

2) Bersihkan area penusukan di lengan bawah

dengan alkohol dan biarkan kering3) Buat insisi di area untuk masa perdarahan

dengan lanset standard. Segera jalankanstopwatch

4) Secara spontan darah akan keluar mengalirsecara alamiah setiap 30 detik, serap darah

tersebut dengan kertas saring5) Bila bercak darah yang muncul ≤ 1 mm,

hentikan stopwatch

6) Catat wajtu sebagai Bleeding Time

7) Lepaskan manset spyghmomanometer



Harga / Nilai Normal

Metode Duke : 1-3 menit

Metode Ivy : 1-6 menit

Catatan A. BT memanjang:

1) Tusukan sp ke permukaan vena

2) Efek aspirin atau obat anti-inflamasi

3) Trombositopenia

4) Defek kualitas trombositB. BT memendek

1) Kertas saring menyentuh luka, mengakibatkan induksi agtrombosit

2) Insisi terlalu kecil (Ivy method), tekanan kurang (templat



Tujuan :

Untuk mengetahui lamanya waktu yang diperlukan daramembeku

Prinsip

Metode Lee & white

Diambil darah vena dan dimasukkan kedalam tabung reaksi, kdibiarkan membeku. Selang waktu dari saat pengambilasampai saat darah membeku dicatat sebagai masa pembekuan



Alat dan Reagen :

Spuit Tabung serologi ( 10 x 75 mm) sebanyak 4 buah

Stopwatch

Kapas

Alkohol 70%



Prosedur kerja

1. Ambil darah 4 ml. Pada saat darah mulai nampak dalam sempritstopwatch.

2. Lepaskan jarum dari semprit dan masukkan darah ke dalam 4 taterbagi rata.

3. Angkat tabung pertama dari rak dan miringkan sedikit untuk mapakah darah sudah membeku. Ulang tindakan ini tiap 30 detik

4. Setelah darah pada tabung pertama membeku, tunggu 30 detik umelihat tabung ke dua dengan cara yang sama.

5. Lanjutkan hingga pada semua tabung terdapat pembekuan darah

6. Laporkan hasil rata-rata tabung nomer 2,3 dan 4. Hasil dibulatka30 detik.



Nilai Normal

Normal : 6-12 menit Meragukan : 12-15 menit

Patologis : diatas 15 menit



TES PEMBENDUNGAN (RUMLPE LEED)

Tujuan : Untuk menguji ketahanan kapiler darah

mengukur kekuatan dinding kapiler darah dalam mencegah perdarahan.

Prinsip :Darah dibendung dengan pemasanganspignomanometer pada tekanan antara sistolik dan diasto

pada lengan bagian atas kemudian dilihat timbul atau tidpathecia paa kulit lengan selama 10 menit



Prosedur Kerja1. Pasanglah ikatan spignomanometer pada lengan atas dan po

sampai tekanan 100 mmHg (jika tekanan sistolik kurang dari

mmHg. Pompalah sampai tekanan ditengah-tengah nilai sistdiastolic)

2. Pertahankan tekanan itu selama 10 menit

3. Lepaskan ikatan dan tunggulah sampai tanda-tanda stasis dalenyap lagi. Stasis darah telah berhenti jika warna kulit pada

yang dibendung tadi mendapat lagi warna kulit lengan yang dibendung

4. Carilah adanya dan hitunglah banyaknya petechie yang timblingkaran bergaris tengah 5 cm, kira-kira 4 cm distal dari foss



Nilai Normal

Normal : Maksimal 10 petechie

Abnormal : Lebih dari 10 petechie

Interpretasi hasilNegatif ( - ) Tidak didapatkan petechie

Positif 1 ( + ) Timbul beberapa petechie dipermupangkal lengan

Positif 2 ( ++ ) Timbul banyak petechie

Positif 3 ( +++ ) Timbul banyak petechie diseluruhpermukaan lengan, telapak tangamuka dan belakang

Positif 4 ( ++++ ) Banyak sekali petechie diseluruhpermukaan lengan, telapak tanganmuka dan belakang



RETRAKSI BEKUAN Tujuan

Untuk mengetahui fungsi trombosit

Prinsip

Setelah darah membeku, bekuan darah mengkpada proses pengerutan itu sejumlah serum diper

dari bekuan sehingga ia menjadi kenyal dan pditentukan oleh jumlah trombosit pervolume darah fungsi trombosit.



Alat dan Bahan

Alat

- Spuit- Tabung sentrifuge

- Kapas alkohol

- Stiweng

- Rak tabung- LidiBahan

- Darah



Prosedur Kerja Siapkan tabung centrifuge bergaris yang telah diberi lidi dengan uju

sedikit dipatahkan

Ambil darah sebanyak 5 cc, kemudian masukkan kedalam tabung c

Biarkan pada suhu kamar selama 2 jam atau semalam dalam lemari Pembacaan :

Tarik lidi secara perlahan. Bekuan darah terikat pada lidi, untuk dinkonsistensinya apakah lembek atau kenyal

Perhitungkan berapa jumlah cairan yang telah diperas keluar dalam

Contoh : Serum yang tertinggal dalam tabung : 2 ml

2 / 5 x 100 % = 40 %

Sifat dan konsistensi bekuan juga perlu dilaporkan. Pada keadaan ndan kenyal



Harga Normal

Volume serum yang dikeluarkan secara spontan dari bekuan m

ukuran bagi retraksi bekuan yang terjadi.Normal : 40 – 60 %

Patologis : Kurang dari 40 %



VOLUME CAIRAN BEKUAN

TujuanUntuk mengetahui jumlah sebenarnya serum yang abekuan.

PrinsipMengukur dalam persentase jumlah serum yang masih ketinggabekuan darah setelah waktu tertentu.



Cara Kerja

Lakukan test retraksi bekuan

Menentukan nilai hematokrit dari darah yang diperiksa

Isi tabung kapiler dengan darah sebanyak ± 2/3 – 3/4 panjang tabulalu sumbat dengan malem

Dicentrifuge dengan mikrocentrifuge dengan kecepatan 15.000 rpmselama 3 menit.

Baca hasilnya pada skala



Nilai Normal

Normal : 0 - 20 %

Patologis : Lebih dari 20 %

Cara Pembacaan hasil

Volume bekuan darah dikurangi nilai hematokrit

Contoh :Hasil test retraksi bekuan : 2 ml serum diperaskeluar = 40 % Volume bekuan : 5 – 2 = 3 ml atau 60 %Hasil test hematokrit : 25 %

Hasil test cairan tertinggal : 60 % - 25 % = 35 %

MENCAIRNYA BEKUAN ( CLOT LYSIS )



MENCAIRNYA BEKUAN ( CLOT LYSIS ) Tujuan

Untuk mengetahui fungsi trombosit

Prinsip

Hasil dari retraksi bekuan di inkubasi pada waktu tertentu dan dicatat waktu yang di

Alat dan Bahan

Alat

- Tabung reaksi

- Kapas

Bahan

- Darah hasil dari retraksi bekuan

Prosedur Kerja Bekuan yang telah diangkat dengan lidi dipindahkan ke dalam tabung yang steril

Catat waktu yang diperlukan hingga darah tersebut lisis

Harga Normal

Darah lisis lewat dari 72 jam ( 3 hari 3 malam )

Prosedur Kerja



.Prosedur Kerja

A. Pembuatan Plasma miskin Trombosit

1) Masukkan 0,3 ml larutan Na. Citrat 3,8 % kedalam tabung

2) Lakukan fungsi vena dan masukkan kedalam tabung yang telah berisi Na. Citrat

perbandingan 1 bagian Na.Citrat : 9 Bagian darah, campur dengan baik.

3) Pusingkan dengan centrifuge selama 20 menit dengan kecepatan 1000 rpm terle

dinaikkan menjadi 2000 baru kemudian 3000 rpm, dan pisahkan plasma dari seB. Penetapan Masa Rekalsifikasi

1. Siapkan tabung yang masing-masing berisi :

a) Plasma penderita yang miskin trombosit

b) Plasma control yang miskin trombosit

c) CaCl 0,025 M

d) NaCl 0,05 %

2. Masing-masing diinkubasi pada suhu 37°C selama 2-3 menit

3. Dengan dispenser masukkan 0,1 ml (100 µ), larutan NaCl 0,85% dan 0,1 ml plas

dicampur dan biarkan dalam waterbath

4. Tambahkan 0,1 ml larutan CaCl2 0,025 M, campur dan pada saat yang bersama

stopwatch

5. Catat waktu sampai terjadinya bekuan, hentikan stopwatch



Harga Normal

Harga Normal : 90 – 150 detik

Prosedur Tahap Tunggal menurut Quick

A. Membuat plasma

1) Masukkan 0,5 ml larutan Natrium Sitrat 3,8 %Ke dalam tabung sentrifuge yang bergaris.

2) Lakukan fungsi vena dan masukkan ke dalam tabung sentrifuge tadi 4,5 ml darah itu.

3) Pusingkan selama 20 menit dengan kecepatan 3000 rpm, pisahkanlah plasma dari sel-sel dar

4) Bila plasma itu tidak segera diperiksa, simpanlah dalam lemari es, tapi meskipun disimpan padpemeriksaan harus dilakukan dalam waktu 2 jam setelah darah diambil.

B. Penetapan masa protrombin

1) Masukkanlah tabung serologi ; 13 x 10 mm ke dalam air bersuhu 37°C

2) Masukkanlah 0,1 ml plasma ke dalam tabung dan tunggulah beberapa lama hingga plasma ber

3) Tambahkan 0,1 ml tromboplastin, kemudian campur.4) Lalu kepada campuran itu diberi 0,1 ml larutan CaCl2 0,22 % ( 0,02 M) jalankan stopwatch tep

Calciumchlorida itu dimasukkan. campur baik-baik

5) Biarkan selama 10 detik, kemudian dicoba apakah sudah ada fibrin dengan berkali-kali memankaitan logam dalam campuran tadi.

6) Hentikan stopwcth pada saat adanya fibrin ; lamanya yang ditunjukkan ialah masa protrombin



MASA REKALSIFIKASI PLASMA

Tujuan

Untuk mencari adanya kekurangan faktor-faktor pembekuan d jalur intrinsic yaitu faktor pembekuan V, VIII, IX, X, XI, XII, prdan fibrinogen.

Prinsip

Plasma citrate yang miskin trombosit dicampur dengan Calsiudalam jumlah tertentu sehingga daya anticoagulansia dinetralpembekuan yang terjadi, dicatat.



Alat, Reagensia dan Bahan

Alat

Tabung serologi Waterbath

Stopwatch

Dispenser

Spuit

Centrifuge Tissue

Pipet tetes

Kapas alkohol



Reagensia

Calcium Chlorida 0,025 M

CaCl2 1,38 gram

Aquadest 500 ml Larutan NaCl 0,85 %

Bahan

Calcium Citrat miskin trombosit

Harga Normal

Harga Normal : 90 – 150 detik



Prosedur Kerja

A. Pembuatan Plasma miskin Trombosit

Masukkan 0,3 ml larutan Na. Citrat 3,8 % kedalam tabung Lakukan fungsi vena dan masukkan kedalam tabung yang telah

Citrat dengan perbandingan 1 bagian Na.Citrat : 9 Bagian darahdengan baik.

Pusingkan dengan centrifuge selama 20 menit dengan kecepatarpm terlebih dahulu, lalu dinaikkan menjadi 2000 baru kemudrpm, dan pisahkan plasma dari sel-sel darah.



B. Penetapan Masa Rekalsifikasi

Siapkan tabung yang masing-masing berisi :

- Plasma penderita yang miskin trombosit

- Plasma control yang miskin trombosit- CaCl 0,025 M

- NaCl 0,05 %

Masing-masing diinkubasi pada suhu 37°C selama 2-3 menit

Dengan dispenser masukkan 0,1 ml (100 µ), larutan NaCl 0,85%

plasma penderita, dicampur dan biarkan dalam waterbath Tambahkan 0,1 ml larutan CaCl2 0,025 M, campur dan pada saa

bersamaan jalankan stopwatch

Catat waktu sampai terjadinya bekuan, hentikan stopwatch



Perhitungan Jumlah Trombosit

Tujuan pemeriksaan

Untuk menghitung jumlah trombosit dalam darah

Metode 1. Direct

Prinsip : Darah diencerkan dalam pipet thomakemudian dimasukkan ke dalam kamar hitung . Jumlah

dihitung dalam volume tertentu, dengan menggunakkonversi jumlah trombosit per l darah dapat diperhitungk



2. Indirect (tidak langsung)/ metode fonio

Prinsip

Darah ditambahkan larutan MgSO4 14 % kemudian dibu

lalu dicat dengan Wright atau Giemsa. Periksa di bawah mperbesaran 40x, jumlah trombosit dihitung per jumlah eritdalam 1000 eritrosit.



Alat dan Reagensia

1. Metode Direct

- AlatPipet thoma eritrosit

Kamar hitung improved

naubauer

Mikroskop

- ReagensiaLarutan Rees –Ecker

Darah vena

EDTA

Kapas + alkohol

2 Metode Indirect



2. Metode Indirect

Alat

1) Objek gelas

2) Mikroskop3) Lampu bunsen

4) Bak pewarna

Reagensia

1) Cat Wright/ Cat Giemsa

2) Darah vena/ kapiler

3) MgSO4 14%4) EDTA

5) Metanol

6) Larutan penyangga pH 6,4

7) Aquadest



Cara Kerja

1. Metode Direct

a) Isaplah darah EDTA sampai pada garis tanda 0,5 tepat.

b) Hapuslah kelebihan darah yang melekat pada ujung pipet.c) Masukkan ujung pipet dalam larutan Rees-Ecker sambil menaha

pada garis tanda tadi jangan sampai keluar. Pipet dipegang dengderajat dan larutan Rees-Ecker diisap perlahan-lahan sampai tan Jangan sampai ada gelembung udara.

d) Angkatlah pipet dari dalam cairan, tutup dengan ujung jari, lalu

karet penghisap.

e) Kocoklah pipet itu selama 15-30 detik. Jika tidak segera dihitung dalam sikap horizontal.



f.) Letakkanlah kamar hitung yang bersih benar dengan kacpenutupnya terpasang mendatar di atas kamar hitung.

g.) Buang cairan yang ada dalam pipet 3-4 tetes dan segeralah

sentuhkan ujung pipet itu dengan sudut 30 derajat padapermukaan kamar hitung dengan menyinggung pinggir kpenutup.

h.) Periksa di bawah mikroskop dengan pembesaran 40 x.

i.) Aturlah fokus mikroskop, hitunglah semua trombosit yan

terdapat dapat 25 bidang sedang yang tersusun dari 16 bidkecil.

2 Metode Indirect



2. Metode Indirect

a. Pulasan Wright

1) Teteskan darah yang sudah dicampur denga(perbandingan darah: MgSO4 = 1:4) di atas objek ge

hingga kering.2) Letakan sediaan yang akan dipulas di atas rak tempa

dengan lapisan darahnya ke atas.

3) Teteskan ke atas sediaan itu 20 tetes larutan Wrig

sediaan di atas kaca penutup 5 tetes). Biarkan selamaagar sediaan direkat dalam waktu itu.

) T t k k di b k l t



4) Teteskan kemudian sama banyaknya larutpenyanggah pH 6,4 ke atas sediaan itu dan biarkaselama 5 12 menit.

5) Siramlah sediaan itu dengan air suling, mula-mu

perlahan-lahan (untuk membuang zat warna yanteraoung di atas) kemudian keras-keras untumembersihkan sediaan itu dari kotoran.

6) Taruhlah sediaan itu dalam sikap vertical agmengering pada udara.

b P l Gi



b. Pulasan Giemsa

1) Teteskan darah yang sudah dicampur dengan MgSO4 (per

darah: MgSO4 = 1:4) di atas objek gelas, tunggu hingga k

2) letakan sediaan yang akan dipulas di atas rak tempatdengan lapisan darah ke atas.

3) Teteskan sekian banyak metilaolkohol ke atas sediaan itu

bagian yang terlapis darah tertutup seluruhnya. Biarkan

menit atau lebih lama.

4) Tuanglah kelebihan metilalkohol dari kaca.

5) Liputilah sediaan itu dengan Giemsa yang telah diencerklarutan penyanggah dan biarkan selama 20 menit.

6) letakan sedian dalam sikap vertical dan biarkan menge

udara.



Rumus Perhitungan

1. Metode Direct

Kamar Hitung Improved Naubauer Perbesaran 40 x.

Perhitungan Jumlah TrombositLuas : 5 x 5 (1/5 x 1/5) mm2 Tinggi : 0,1 mm Volume : 0,1 mm3

Pengenceran : 200x Jumlah trombosit

= (1/0,1) x P x N

= (1/0,1) x 200 x N

= 2000N / µl darah

M t d I di t



2. Metode IndirectPerbesaran 100x dengan oil immersiDidapatkan jumlah trombosit = ....

∑ trombosit = n x= ...../ µl darah

Nilai Normal Trombosit

150.000 –

450.000 / ul darah

Cara Penghitungan Jumlah Trombosit Metode Apusan Dara



Lp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

5 6 4 6 8 9 7 8 9 5 8 9 6 7 8 6 9 8 9 7

N = 5+6+4+6+8+9+7+8+9+5+8+9+6+7+8+6+9+8+9+7 = 144

Jumlah Trombosit = 144 x 1000 = 144.000/mmk

MASA PROTROMBIN (MP) PLASMA PROTROMBINE TIME (PPT)



MASA PROTROMBIN (MP) atau PLASMA PROTROMBINE TIME (PPT)

A. Definisi

Pemeriksaan faktor koagulasi untuk mengukur kemampuan faktor koagulasi ekstrinsik dan b

dalam plasma untuk membentuk koagulasi fibrin.

Cara ini digunakan untuk menguji adanya gangguan faktor pembekuan darah pada jalur e

kekurangan faktor pembekuan VII, X, protrombin dan fibrinogen. Jika dianggap bahwa fak

dalam prose itu normal, maka masa protrombin ini menjadi ukuran untuk aktivitas protro

Dasar percobaan plasma diberi sejumlah tromboplastin dan ion calcium yang optimal dan

untuk menyusun fibrin diukur.



B. Indikasi

Definisi faktor koagulasi jalur ekstrinsik

Bersama APTT mendeteksi aktivitas faktor koagulasi bersama

Inhibitor terhadap faktor ekstrinsik

Monitor terapi antikoagulan oral

Penyakit hati

DIC



C. Prinsip

Ion Ca2+ dalam darah diikat oleh antikoagulan untuk mengham

pembekuan.Plasma yang mengandung semua faktor koagulasi

kecuali Ca2+ ditambah dengan tromboplastin akan membentu

Proses pembentukan jendalan dideteksi secara optikal (clop de

oleh fotodetektor.

Waktu yang diperlukan untuk pembentukan jendalan dinyatak

plasma prothrombine time ( PPT )



D. Prosedur Tahap Tunggal menurut Quick

1. Membuat plasma

Masukkan 0,5 ml larutan Natrium Sitrat 3,8 %Ke dalam tabung sentr

bergaris.

Lakukan fungsi vena dan masukkan ke dalam tabung sentrifuge tadi

darah itu.

Pusingkan selama 20 menit dengan kecepatan 3000 rpm, pisahkanla

dari sel-sel darah. Bila plasma itu tidak segera diperiksa, simpanlah dalam lemari es, tap

disimpan pada suhu rndah, pemeriksaan harus dilakukan dalam wak

setelah darah diambil.

2. Penetapan masa protrombin



Masukkanlah tabung serologi ; 13 x 10 mm ke dalam air bersuhu 37°C

Masukkanlah 0,1 ml plasma ke dalam tabung dan tunggulah beberap

hingga plasma bersuhu 37°C pula.

Tambahkan 0,1 ml tromboplastin, kemudian campur.

Lalu kepada campuran itu diberi 0,1 ml larutan CaCl2 0,22 % ( 0,02 M

stopwatch tepat pada saat larutan Calciumchlorida itu dimasukkan.

baik-baik

Biarkan selama 10 detik, kemudian dicoba apakah sudah ada fibrin d

berkali-kali memancing memakai kaitan logam dalam campuran tad

Hentikan stopwcth pada saat adanya fibrin ; lamanya yang ditunjukk

masa protrombin plasma.

E. Catatan

k b k k f d l k b h l k



Pemeriksaan ini bukan satu penetapan kuantitatif, dalam arti kata sebenarnya; hasil iku

oleh kualitas tromboplastin yang dipakai dan oleh tekhnik pengerjaannya. Oleh karena i

ini selalu harus dilakukan in duplo dan harus juga disertai control dengan plasma norm

Normal antara 11-15 detik. Bila control lebih lama dari 16 detik, percobaan batal karena m

tromboplastin telah menjadi kurang aktif. Tromboplastin dapat dibeli atau boleh juga dibuat sendiri dari otak kelinci; dianjurkan u

yang diperdagangkan saja, karena sering tromboplastin buatan sendiri kurang aktif. Jika

tromboplastin belian, ikutilah instruksi cara melakukan tes masa protrombin dengan se

itu menyertai tiap batch tromboplastin. Larutan tromboplastin tidak tahan lama, harus d

lemari es dan aktivitasnya harus tiap kali diuji dengan plasma normal.

Larutan Calciumchlorida 0,22% juga tidak tahan lama, oleh karena itu sebaiknya membupokok 2,22% ( 0,2M ).

Laporan masa protrombin selalu harus menyebut masa protrombin control jug



duanya disebut dengan detik. Cara yang lebih bagus menyebut aktivitas protro

% ( dari normal ). Cara itu menghendaki agar terlebih dahulu dibuat grafik akt

memakai campuran dari tromboplastin yang dipakai dan plasma normal, camp

diencerkan berderet dengan plasma lain yang tidak mengandung protrombin.

aktivitas protrombin memperlibatkan garis lengkung.

Alat-alat yang khusus dibuat untuk penetapan masa protrombin dan untuk tes

yang berakhir dengan terjadi bekuan dalam plasma memberi hasil penetapan y

reproducible sampai 1/10 detik ketelitian.

Dalam keadaan darurat masa protrombin dapat dilakukan dengan darah kapile



Dalam keadaan darurat masa protrombin dapat dilakukan dengan darah kapile

objek sebagai berikut :

Letakkan setetes tromboplastin diatas objek glass yang kering dan bersih.

Tusukkan kulit untuk mendapat darah kapiler yang leluasa keluar, jalankan stosaat darah mulai keluar dari luka

Segeralah campur darah dengan tromboplastin dengan menggunakan lidi atau

Biarkan sampai detik ke 10 pada stopwatch

Periksalah tiap detik dengan ujung jarum apakah telah terjadi fibrindalam cam

Catatan : Cara kasar ini memerlukan dilakukannya control dengan darah norm

dijalankan beberapa kali berturut-turut pada setiap pasien. Sadarilah bahwa ca

merupakan cara darurat saja dan tidak dianjurkan dipakai sebagai pemeriksaan

MASA TROMBOPLASTIN PARSIAL TERAKTIVASI (MTP



(

ACTIVED PARTIALTHROMBOPLASTINE TIME (APTT)

Definisi

APTT adalah pemeriksaan laboratorium unutk mengukur kem

faktor koagulasi jalur intristik dan bersama yang ada dalam p

untuk membentuk koagulasi fibrin.

APTT adalah test penyaring koagulasi yang sederhana, cepa

reproducible, menyerupai test masa rekalsifikasi dengan tam



Adanya kontak permukaan yang aktif

Fosfolipid (PF3)

Kedua-duanya dipengaruhi oleh tambahan activator kuat terhadap faktor , yaitcelite, ellagic acid, dan silica

Tujuan

Defesiensi faktor koogulasi jalur intrinsik

Bersama PT (Protrombin Time) mendeteksi aktivitas faktor koagulasi bersa

Inhibitor terhadap faktor intrinsik

Monitor terapi antikoagulan

Penyakit hati

DIC

Prinsip Pemeriksaan



Prinsip Pemeriksaan

Ion Ca++ dalam darah diikat oleh anti koagulen untuk menghambat pembek

yang mengandung semua faktor koagulasi intrinsic kecuali Ca++ dan trombos

dengan Ca++ dan fosfolipid dan membentuk jendalan. Waktu yang diperlukan

pembentukan jendalan dinyatakan sebagai Actinated Partial Tromboplastin Tim

Alat, Bahan dan Reagensia

Alat :

Waterbath - Stopwatch

Cetrifuge - Pipet tetes

Tabung serologi trank - Spuit Tabung reaksi - Kapas kering

Dispenser dan yellow tipe - Tissue

Bahan pemeriksaaan

Plasma control miskin trombosit



Plasma control miskin trombosit

Plasma penderita miskin trombosit

Reagensia

Natrium citrate 3,8 %

CaCl2 0,025 M Tromboplastin

Kaolin

Alkohol 70 %

Prosedur Kerja

A. Pembuatan plasma miskin trombosit

1) Masukan 0,3 ml larutan Na citrate 3,8 % ke dalam tabung reaksi. Lakukan fungsi vena d

dalam tabung yang berisi Na citrate 2,7 ml darah (1 bagian Na citrate : 9 bagian darah)

2) Campur sampai homogen kemudian di centrifuge selama 20 menuit dengan kecepatan

menyebabkan plasma hanya mengandung sedikit trombosit (plasma rendah trombosit)

3) Masukkan plasma ke dalam tabung reaksi, kemudian inkubasi pada waterbath 37oC

Penetapan Activated Partial Protrombin Time (APTT)

1) Tromboplastin dicampur dengan kaolin, hal ini dimaksudkan untuk membuat reagen partial tro



2) Inkubasi semua reagen dan alat yang akan digunakan pada waterbath suhu 37oC selama 5 m

3) Pipet 0,2 ml (200 l) plasma kontrol (atau plasma penderita) dan letakan pada waterbath selam

4) Tambah 0,2 ml (200 l) reagen partial tromboplastin (yang mengandung activator) ke dalam ta

mengandung control (atau plasma pasien) dan inkubasi selama 2 menit

5) Setelah tepat 2 menit, pipet 0,2 ml CaCl2 yang telah dihangatkan ke dalam tabung dan nyalak

bersamaan

6) Campurkan tabung segera setelah ditambahkan CaCl2. Biarkan tabung uji tetap di dalam wat

menggoyang tabung perlahan setiap 5 detik

7) Setelah 20 detik, keluarkan tabung uji dari waterbath. Bersihkan bagian luar tabung uji. Goya

perlahan hingga munculnya bekuan dan pada saat yang sama perhitungan waktu dihentikan

8) Sebaiknya test dilakukan in duplo dan dilaporkan hasil rata-rata. Laporkan juga hasil test con

Harga Normal

Normal : 35 – 45 detik

Meragukan : 45 – 50 detik

Abnormal : diatas 50 detik



Masa Protrombin Serum SPT)



Prinsip

Bila serum (+) fibrinogen (absorbed plasma), suspensi tromboplastin

maka akan terbentuk bekuan. Waktu bekuan yang memanjang menaadanya sisa protrombin dalam serum yang sdikit, sebaliknya bila terj

pemendekan terbentuknya bekuan menandakan adanya gangguan p

protrombin activator.

Defisiensi faktor XII, IX, X, XI, VIII, dan V

Nilai normal : > 30 detik (diatas 30 detik)

Patologi : < 30 detik (kurang dari 30 detik)

Alat dan Reagensia B. Reagensia :



g

A. Alat-alat :

1) Waterbath

2) Stopwatch3) Tabung Serologi

4) Tabung Centrifuge

5) Pipet 1 ml

6) Centrifuge

g

1)Calcium chloride 0.025

2)Barium Sulfat 0.2 M

3)Tromboplastin

Prosedur Kerja :

A Persiapan Pemeriksaan :



A. Persiapan Pemeriksaan :

1) Siapkan serum penderita dan serum control

2) Ambil darah penderita dan serum control

3) biarkan membeku pada suhu 37˚C sehingga keluar serumnya

4) Kemudian pusingkan dan pisahkan serumnya5) Buat larutan fibrinogen

6) Buatlah plasma seperti pemeriksaan PPT pada orang sehat

7) Tambahkan kurang lebih 10 ml larutan BaSO4 ke dalam tabung centrifuge dansupernatan jernih

8) supernatann dibuang, kemudian ke dalam tabung ini dimasukkan 2 ml plasm

tercampur benar dan tunggu 10 menit, kemudian putar sampai supernatannn9) supernatan dipisahkan ke dalam tabung lain

10) supernatan ini disebut absorbed plasma dan merupakan fibrinogen

11) Semua alat dan reagensia diinkubasi pada suhu 37˚C di waterbath

B. Kerja :

S b l ik di l i l dil k k ik t h



Sebelum pemeriksaan dimulai perlu dilakukan pemeriksaan terhaabsorbed plasma, apakah boleh digunakan atau tidak caranya yaitberikut :

1) Masukkan ke dalam tabung 0,1 ml absorbed plasma

2) Kemudian 0,1 tromboplastin, kemudian 0,1 ml CaCl sambil stopdijalankan

3) catat waktunya, bila lebih dari 1 menit maka absorbed plasma bdigunakan.

4) Kemudian dikerjakan pemeriksaan SPT sebagai berikut : Ke da

masukkan masing-masing 0,1 ml serum penderita, 0,1 ml absor0,1 ml tromboplastin, 0,1 ml CaCl. Pada waktu penambahan Cstopwatch dijalankan Waktu pembekuan dicatat, kerjakan pulacontrol

Nilai Normal

Waktu Trombin (TT)



Prinsip :

Pemeriksaan ini berdasarkan kenyataan bahwa trombin bisa menggunpalkan fibrinoge

yang telah diketahui ditambahkan pada plasma, waktu yang dibutuhkan untuk terjadin

pada jumlah dan kualitas fibrinogen.

Alat dan Reagensia

1) Trombin

2) Saline

3) Plasma control

4) Tabung

5) Pipet 1 ml6) Antikoagulen, Na citrate

Nilai normal :

Bila terjadi waktu pembekuan : 8-14 detik

Prosedur Kerja :



Prosedur Kerja :

1) Plasma penderita, plasma control dan trombin diinkubasi pada waterbath 37

2) Tempatkan untuk tabung pada waterbath 37oC dan isi masing-masing dengasaline

3) Tabung diisi dengan 0,1 ml plasma degiadasi produk (F.D.P)4) Masing-masing tabung diisi dengan plasma degradasi produk dengan suatu

5) Masukan 0,1 ml larutan trombin yang terdapat dalam serum

6) Kemudian jalankan stopwatch’Waktu terjadinya bekuan dicatat

7) Ulangi prosedur tersebut untuk tabung 2 plasma

8) Kerjakan juga untuk plasma pengontrol

9) Hasil control dan penderita kemudian dibandingkan

PEMERIKSAAN AGREGASI TROMBOSIT

Spesimen

B h ik b L d h di kk d l b i l h b



Bahan pemeriksaan berupa 9 mL darah yang dimasukkan dalam tabung sitrat yang telah ber

3,2% berasal dari subyek yang melakukan pemeriksaan kesehatan. Darah sitrat disentrifus un

platelet rich plasma (PRP) dan platelet poor plasma (PPP). Dan Reagen yang digunakan yaitu

(Adenosine Diphosphat).

Nilai Rujukan

Dewasa: agregasi dalam waktu 3 sampai 5 menit

Persiapan Sampel

Pasien dipuasakan 8-10 jam

Pasien sebaiknya tidak mengkonsumsi obat-obatan yang dapat mempengaruhi tes, sepert

kortikosteroid, aspirin, antihistamin, penisilin, dll sekurang-kurangnya 10 hari sebelum te

Metode Pemeriksaan

Metoda Turbidimetri

Alat dan Bahan

) Al t di k d l h t t Ch L t di i d i t d l



1) Alat yang digunakan adalah 1 set agregometer Chrono-Log yang terdiri dari agregometer model recorder model 707, komputer Windows-based PC with Pentium/compatible processor.

2) Kuvet Cat. No. P/N 312.

3) Stir Bar Cat. No. P/N 313.

4) Tabung sitrat vakum yang berisi 1 mL Na-sitrat 3,2%(Vaquette) digunakan untuk pemeriksaan

agregasi trombosit5) Tabung clot activator 7 mL (Vaquette) yang dipakai untuk pemeriksaan kimia klinik

6) Tabung K3EDTA (Vaquette) yang digunakan untuk pemeriksaan hematologi rutin

7) Sentrifus swing rotor untuk mendapatkan PRP dan PPP.

8) Pipet volumetrik 5 mL untuk melarutkan ADP.

9) Cup Eppendorf 500 μL untuk menyimpan larutan ADP.

10) Pipet otomatik 500 μL untuk memindahkan PRP dan PPP.

11) Pipet semiotomatik variable 10-100 μL untuk pengenceran reagen ADP.12) Stopwatch.

Prinsip Pemeriksaan

Trombosit mengalami aktivasi segera setelah penambahan agonis kemudian beridengan fibrinogen dan mengalami agregasi Absorban cahaya sampel yang terbac



dengan fibrinogen dan mengalami agregasi. Absorban cahaya sampel yang terbacberbanding lurus dengan agregasi trombosit. Jumlah dan rata-rata tergantung patrombosit terhadap penambahan agonist seperti ADP, yang dipengaruhi oleh banseperti suhu, jumlah trombosit, dan kecepatan pencampuran sampel dan reagenabsorban akan dimonitor dan digambarkan dalam bentuk grafik.

Cara Kerja

A. Pembuatan platelet rich plasma (PRP) dan platelet poor plasma (PPP).

1) Platelet Rich Plasma (PRP) yaitu Darah pasien sebanyak 9,0 mL dimasukan d vakum sitrat vaquette yang telah berisi 1 mL Na sitrat 3,2%. Darah tersebut d1000 rpm selama 15 menit atau 100 g selama 15 menit.

2) Plasma yang diperoleh adalah PRP, kemudian dipindahkan ke dalam penamp

Jumlah trombosit PRP harus 200.000-300.000/uL. Jika jumlah trombosit <10untuk melakukan setting optical baseline.

3) Platelet poor plasma (PPP)Sisa darah dalam tabung sitrat yang telah dipisahkdisentrifus lagi 3500 rpm selama 15 menit atau 2400 g selama 20 menit. Plasmdiperoleh adalah PPP, kemudian dimasukkan 500 μL ke dalam kuvet pemeriuntuk PPP adalah plasma dari pasien yang sama dengan PRP.

B. Pedoman pemeriksaan

1) Nyalakan alat, tunggu sampai suhu incubation wells pada alat mencapai suhu 37°C



1) Nyalakan alat, tunggu sampai suhu incubation wells pada alat mencapai suhu 37 C

dan PPP. Masukkan lima kuvet ke dalam lubang incubation wells, 4 kuvet diisi den

sebanyak 500 μL dan 1 kuvet sebagai blanko diisi dengan PPP sebanyak 500 μL.

2) Empat kuvet yang telah berisi 500 μL PRP dimasukkan sebutir magnet yang berfun

sebagai pengaduk.3) Kelima kuvet tersebut diinkubasi selama 3 menit pada suhu 37°C dalam incubation

kuvet yang telah berisi PPP dan stir bar dipindahkan ke lubang optical chamber, k

set switc ditekan ke angka 1. Setelah itu 4 kuvet yang berisi PRP secara berurutan d

lubang optical chamber PRP kemudian tombol stirrer dijalankan, inkubasi kelima

selama 3 menit.

4) Penetapan setting optical baseline, untuk menentukan batas atas transmisi 100 % dan batas bawah transmisi 0 % dengan PRP. Masukkan reagen ADP kedalam kuve

berisi PRP. Pada Layar Komputer akan tampak grafik dari keempat hasil agregasi t

dengan warna yang berbeda.

PEMERIKSAAN D-DIMER

Persyaratan & Jenis Sampel : 1.0 mLPlasma sitrat



y J p

Stabilitas Sampel : < 24 jam 2-8 °C , 4 minggu -20 °C

Metode : Immunometric Flow Through

Nilai Rujukan :

Hasil normal = negatif atau < 0.3 mg/L

Catatan :

Kriteria penolakan sampel : Beku ulang : mutlak.Pemisahan Plasma selama 15

4000 RPM.Plasma beku diencerkan dalam waterbath pada 37 °C selama 15 men

PROSEDUR



A. Metode

Pengukuran D-dimer dapat dilakukan dengan cara aglutinasi atau imunometrik meng

antibodi monoklonal spesifik terhadap D-dimer. Pada cara aglutinasi, plasma penderita ya

mengandung D-dimer direaksikan dengan partikel latex yang dilapisi antibodi monoklon

terhadap D-dimer membentuk gumpalan. Penentuan titer D-dimer dilakukan dengan me

plasma dengan buffer lalu mencampurnya dengan partikel latex. Titer D-dimer adalah pen

plasma tertinggi yang masih menunjukkan gumpalan.

Pengukuran secara imunometrik, plasma penderita yang mengandung D-dimer ditete

membran yang dilapisi antibodi monoklonal D-dimer dan kemudian ditambah konjugat y

mengandung partikel berwarna. Penentuan kadar D-dimer dilakukan dengan mengukur i

yang dihasilkan.

B. Spesimen

Spesimen yang diperlukan untuk pengukuran D-dimer adalah plasma citrat 9:1. Kump

vena dalm tabung bertutup biru (citrat). Cegah jangan sampai hemolisis; campur spesim

lembut dengan membolak-balikkan tabung secara perlahan, tabung jangan dikocok. Spe

dipusingkan selama 15 menit pada 4000 rpm. Pisahkan plasmanya.

PEMERIKSAAN TIMER FIBRINOGEN

Prinsip :



Pada plasma citrate dilakukan pengenceran secara dauble dilutiontiap pengenceran ditambahkan larutan trombin pengenceran tertmana masih terjadi bekuan dicatat.

Alat dan Reagen : 1) Waterbath

2) Trombin (merupakan ampul trombin dalam 0,5 ml salin)

3) Saline

4)Plasma control

5) Tabung serologi 10 x 75 mm, berlapis silicon

6)Pipet ukur 1 ml

7) Centrifuge

Bahan pemeriksaan : Plasma citrate

Cara Kerja:

1) Tempatkan 2 deret tabung masing-masing terdirir dari 10 buah dalam



2) Masing-masing tabung diisi dengan 0,5 ml plasma penderita pada tab

3) Campur dan pindahkan ke tabung 2 sebanyak 0,5 ml campur.

4)Begitu seterusnya sehingga sisa 0,5 ml dibuang.

5) Maka pengencerannya sebagai berikut :

1/1,1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,1/128,1/256,1/512

6) Lakukan juga untuk plasma control

7) Semua tabung ditambahkan 0,1 ml larutan trombin sambil stopwatch

8) Diamkan dalam waterbath selama 15 menit

9) Dilihat pengenceran tertinggi yang masih terjadi bekuan dicatat.

Harga Normal :

Normal titer antara : 1/64 – 1/128



FIBRINOGEN DEGRADATION PRODUCT FDP)

Prinsip

Permukaan sel Staphylococcus aureus mengandung suatu clumping factor (suatumenggumpalkan). Bila dalam serum ditambahkan suspensi Staphylococcus auredapat dari darah dicampur dengan trombin, maka tampak gumpalan dari kumandengan jelas.

Alat dan Reagen :

1) Tabung reaksi

2) Pipet ukur 1 ml

3) Tris buffer

4) Larutan Fibrinogen

5) Staphylococcus reagen

6) Bahan pemeriksaan : Serum

Cara Kerja:

A Membuat larutan fibrinogen standard:



A. Membuat larutan fibrinogen standard:

1) Untuk pemakaian larutan stock standard direncanakan dengan perbandingan 1 : 100 (konsen

2) Tris buffer. Untuk pemakaian larutan tris buffer stock diencerkan dengan aquadest perbandin

mol/l, pH = 7,4)

3) Sediakan tabung 8 buah dan diisi sebagai berikut : (dalam ml)

4) Lakukan seperti no 1 dan 2 tetapi serum diganti dengan larutan fibrinogen standard, sehingg

kosentrasi fibrinogen sebagai berikut: 16,8,4,2,1,1/2,1/4.

5) Pada tabung 1 dan 2 tambahkan 0,05 ml Staphylococcus6) Goyangkan campuran ini 5 – 10 menit, setelah 30 menit lihat pengenceran tertinggi yang ma

gumpalan.

NO Blanko I II III IV V VI VII

1. Tris

buffer

0,1 - 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1

2. Serum - 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,10,1 dibuang

3. Pengence

r

- 1/1 ½ ¼ 1/8 1/16 1/32 1/64

Perhitungan:



Konsentrasi FDP = S X F

Keterangan:

S = Pengenceran tertinggi yang masih terjadi gumpalan pad

F = Pengenceran tertinggi yang masih terjadi gumpalan pad

fibrinogen



Cara Kerja:

1) Darah sitrat diputar pada 3000 rpm selama 10 menit



2) Encerkan 0,5 ml dengan 9 ml aquadest

3) Tambahkan 0,5 ml acetic acid 1%

4) Simpan pada suhu 4oC selama 30 menit supaya terjadi presifitasi dari fraksi Euglobu

5) Presifitas euglobulin dipisahkan dengan memutar 3000 rpm selama 5 menit6) Supernatan dibuang sampai habis, tabung dibalik pada kertas saring untuk menghil

cairan.

7) Tambahkan 0,5 ml larutan borate salin buffer

8) Letakkan pada waterbath 37oC, aduk dengan pengaduk pelan-pelan 5 – 10 menit

9) Tambahkan 0,5 ml CaCl dan stopwatch dijalankan

10) Waktu terjadinya bekuan dicatat11) Bekuan diperiksa apakah ada tanda-tanda lisis dan waktu yang diperlukan untuk lisi

12) Pemeriksaan ini selalu disertai control.

Harga Normal : Lisis total akan terjadi dalam waktu 2 jam.

Mohon maaf jika



ada kata – kata yang tidak berkena

hati anda

sekian wassalamualaikum Wr . W

pemeriksaan hemostasis klp 3.pptx

Documents