USULAN PENELITIAN

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN BIJI KAKAO (Theobroma cacao L.) UNTUK MENURUNKAN KADAR 8-HIDROKSI-2-DEOKSIGUANOSIN DALAM URIN TIKUS SETELAH TERPAPAR ETANOL

MAHARDIKA APRILIA IFLAHAH

PROGRAM PASCASARJANAUNIVERSITAS UDAYANADENPASAR2015

Lembar Persetujuan Pembimbing

USULAN PENELITIAN TESIS INI TELAH DISETUJUIPADA TANGGAL 27 Februari 2015

Pembimbing I,Pembimbing II,

Dra. Ni Made Puspawati, M.Phil., Ph.DDr. Dra. Ni Made Suaniti, M.SiNIP. 19650319 198903 2 001NIP. 19640917 199203 2 009

Mengetahui

Ketua Program Studi Kimia TerapanProgram PascasarjanaUniversitas Udayana

Prof. Dr. Drs. I Made Dira Swantara, M.Si NIP. 19540101 198603 1 001

DAFTAR ISI Halaman

HALAMAN JUDULi

LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBINGii

DAFTAR ISIiii

DAFTAR GAMBARv

DAFTAR TABELvi

DAFTAR LAMPIRANvii

BAB I PENDAHULUAN11.1 Latar Belakang11.2 Rumusan Masalah51.3 Tujuan Penelitian51.4 Manfaat Penelitian6

BAB II TINJAUAN PUSTAKA72.1 Minuman Beralkohol 72.1.2 Absorbsi dan distribusi etanol82.1.3 Metabolisme dan ekskresi etanol92. 2 Radikal Bebas 132. 3 Stres oksidatif152. 4 Antioksidan182.5 8-hidroksi-2-deoksiguanosin222.6 Buah Cokelat252.7 Tikus Wistar272.7.1 Konversi manusia ke tikus282.8 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder282.8.1 Ekstraksi282.8.2 Pemisahan dan Pemurnian292.8.2.1 Partisi292.8.2.2 Kromatografi kolom302.8.2.3 Kromatografi lapis tipis312.9 Karakterisasi Isolat322.9.1 Spektrofotometer UV-Vis322.9.2 Spektrofotometer IR332.10 Uji Antioksidan dengan Metode DPPH342.11 Enzyme Linked Immunosorbent Assay36BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP, DAN HIPOTESIS PENELITIAN373.1 Kerangka Berpikir373.2 Konsep Penelitian403.3 Hipotesis Penelitian41

BAB IV METODE PENELITIAN424.1 Rancangan Penelitian424.2 Lokasi dan Waktu Penelitian434.3 Penentuan Sumber Data444.3.1 Populasi444.3.2 Kriteria sampel444.4.3 Penentuan jumlah ulangan sampel444.4 Variabel Penelitian454.5 Bahan Penelitian454.6 Alat Penelitian454.7 Prosedur Penelitian464.7.1 Preparasi sampel464.7.2 Ekstraksi464.7.3 Pemisahan464.7.4 Penentuan aktivitas antioksidan dengan DPPH474.7.5 Uji fitokimia474.7.6 Kromatografi lapis tipis494.7.7 Kromatografi kolom494.7.8 Identifikasi isolat504.7.8.1 Spektrofotometer IR504.7.8.2 Spektrofotometer UV-Vis504.7.9 Perlakuan hewan uji504.7.10 Pengambilan urin hewan uji514.7.11 Analisis 8-OHdG dalam urin tikus514.8 Analisis Data52

DAFTAR PUSTAKA57LAMPIRAN-LAMPIRAN61

DAFTAR GAMBAR Halaman2.1 Metabolisme etanol92.2 Metabolisme etanol112.3 Mekanisme terjadinya stres oksidatif182.4 Mekanisme perbaikan DNA oleh antioksidan212.5 Struktur 8-OHdG232.6 Struktur 2-deoksiguanosin232.7 Mekanisme oksidasi 2-deoksiguanosin242.8 Buah Cokelat262.9 Tikus wistar272.10 Struktur 2,2-diphenil-1-picrylhidrazyl (DPPH)352.11 Reaksi antioksidan dengan DPPH353.1 Konsep Penelitian404.1 Bagan rancangan penelitian424.2 Proses ekstraksi534.3 proses pemisahan dengan partisi544.4 Proses pemurnian dan identifikasi554.5 Perlakuan terhadap hewan uji56

DAFTAR TABEL Halaman2.1 Serapan infra merah untuk gugus fungsi tertentu34

DAFTAR LAMPIRAN HalamanLampiran 1. Pembuatan larutan61

vii