5/19/2018 BAB II

1/4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Kromatografi

Kromatografi adalah cara pemisahan molekul berdasarkan perbedaan struktur

dan atau komposisinya. Prinsip kerja khromatografi yaitu contoh bahan yang akan

dipisahkan (fase bergerak) dilewatkan pada media tetap (fase stasioner). Molekul-

molekul berbeda yang terkandung dalam contoh bahan akan mempunyai interaksi

yang berbeda dengan media tetap. Molekul yang mempunyai interaksi kuat dengan

fase stasioner akan lewat lebih lambat dibandingkan dengan molekul yang

mempunyai interaksi lebih lemah. Dengan cara ini, jenis molekul yang berbeda dapat

dipisahkan selagi molekul tersebut bergerak/melewati fase stasioner (Candra, 2011).

Secara fisik kromatografi kertas memiliki teknik-teknik yang sama dengan

kromatografi lapis tipis, tetapi sebenarnya merupakan tipe khusus kromatografi cair-

cair yang fasa diamnya hanya berupa air yang diadsorpsikan pada kertas dimana

kertas hanya bertindak sebagai pendukung. Tekniknya sangat sederhana dengan

menggunakan lembaran selulosa yang mengandung kelembaban tertentu. Cuplikan

yang akan dipisahkan ditotolkan pada pinggir kertas selulosa yang telah diatur

sedemikian rupa selanjutnya dimasukkan ke dalam bejana pengembang dan dijaga

agar atmosfer dalam bejana selalu jenuh dengan fasa gerak (Raharjo, 2010).

2.2 Jenis-jenis Kromatografi

a. Kromatografi Lapis Tipis

Yaitu kromatografi yang menggunakan lempeng gelas atau aluminium yang

dilapisi dengan lapisan tipis alumina, silika gel, atau bahan serbuk lainnya.

Kromatografi lapis tipis pada umumnya dijadikan metode pilihan pertama

pada pemisahan dengan kromatografi.

b. Kromatografi Penukar Ion

Merupakan bidang khusus kromatografi cairan-cairan. Seperti namanya,

sistem ini khusus digunakan untuk spesies ion. Penemuan resin sintetik

dengan sifat penukar ion sebelum Perang Dunia II telah dapat mengatasi

pemisahan rumit dari logam tanah jarang dan asam amino.

5/19/2018 BAB II

2/4

c.

Kromatografi Penyaringan Gel

Merupakan proses pemisahan dengan gel yang terdiri dari modifikasi

dekstran-molekul polisakarida linier yang mempunyai ikatan silang. Bahan

ini dpaat menyerap air dan membentuk susunan seperti saringan yang dapat

memisahkan molekul-molekul berdasarkan ukurannya. Molekul dengan

berat antara 100 sampai beberapa juta dapat dipekatkan dan dipisahkan.

Kromatografi permeasi gel merupakan teknik serupa yang menggunakan

polist irena yang berguna untuk pemisahan polimer.

d. Elektroforesis

Merupakan kromatografi yang diberi medan listrik di sisinya dan tegak

lurus aliran fasa gerak. Senyawa bermuatan positif akan menuju ke katoda

dan anion menuju ke anoda. Sedangkan kecepatan gerak tergantug pada

besarnya muatan.

e.

Kromatografi Kertas

Merupakan kromatografi cairan-cairan dimana sebagai fasa diam adalah

lapisan tipis air yang diserap dari lembab udara oleh kertas jenis fasa cair

lainnya dapat digunakan.

(Sholihat, 2011)

2.3 Prinsip Kromatografi Kertas

Mekanisme pemisahan dengan kromatografi kertas prinsipnya sama dengan

mekanisme pada kromatografi kolom. Adsorben dalam kromatografi kertas adalah

kertas saring, yakni selulosa. Sampel yang akan dianalisis ditotolkan ke ujung kertas

yang kemudian digantung dalam wadah. Kemudian dasar kertas saring dicelupkan

kedalam pelarut yang mengisi dasar wadah. Ada beberapa metode dalam pemisahandengan kromatografi kertas diantaranya :

1.

Metode penurunan yaitu berupa bejana yang terbuat dari gelas , platina atau

logam tahan karat yang di atasnya ditutup untuk mencegah dari pelarut.

2. Metode penaikan. Bejana yang digunakan untuk kromatografi penaikan sama

seperti untuk kromatografi penurunan, tetapi pelarut diletak dibagian bawah

bejana dan kertas dicelupkan di atasnya.

5/19/2018 BAB II

3/4

3.

Metode mendatar. Dalam cara ini kertas dibentuk bulat ditengahnya diberi

lubang sebagai tempat untuk meletakkan sumbu yang terbuat baik dari gulungan

kertas atau dari benang dimana melalui ini pelarut akan naik yang kemudian

akan membesahi kertas untuk kemudian mengembang, melingkar, membawa

senyawa yang dipisahkan.

(Rahmayani, 2008).

2.4 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Harga Rf

Harga Rf merupakan parameter karakteristik kromatografi kertas dan

kromatografi lapis tipis. Harga ini merupakan ukuran kecepatan migrasi suatu

senyawa pada kromatogram dan pada kondisi konstan merupakan besaran

karakteristik dan reprodusibel. Harga Rf didefinisikan sebagai perbandingan antara

jarak senyawa dari titik awal dan jarak tepi muka pelarut dari titik awal.

Rf =

(Setiadi, 2012).

Ada beberapa faktor yang menentukan harga Rf, yaitu:

1. Pelarut. Disebabkan pentingnya koefisien partisi, maka perubahan-perubahan

yang sangat kecil dalam komposisi pelarut dapat menyebabkan perubahan-

perubahan harga Rf.

2.

Suhu. Perubahan dalam suhu merubah koefisien partisi dan juga kecepatan

aliran.

3. Ukuran dari bejana. Volume dari bejana mempengaruhi homogenitas dari

atmosfer jadi memengaruhi kecepatan penguapan dari koponen-komponen

pelarut dari kertas.

4. Kertas. Pengaruh utama kertas pada harga-harga Rf timbul dari perubahan ion

dan serapan, yang berbeda untuk macam-macam kertas.

5. Sifat dari campuran. Berbagai senyawa mengalami partisi diantara volume-

volume yang sama dari fase tetap dan bergerak. Mereka hampir selalu

mempengaruhi karakterisrik dari kelarutan satu terhadap lainnya hingga

terhadap harga-harga Rf mereka.

(Pratiwi, 2011).

5/19/2018 BAB II

4/4

2.5 Aplikasi Kromatografi Kertas

Analisa Zat Warna Sintetik Terlarang untuk Makanan yang Beredar di

Pasaran

Warna dari suatu produk makanan ataupun minuman merupakan salah satu ciri

yang penting. Warna merupakan salah satu kriteria dasar untuk menentukan kualitas

makanan, antara lain warna dapat member petunjuk mengenai perubahan kimiam

dalam makanan, seperti pencoklatan (deMan JM. 1997). Selain itu, beberapa warna

spesifik dari buah juga dikaitkan dengan kematangan. Warna juga mempengaruhi

persepsi akan rasa. Oleh karena itu, warnamenimbulkan banyak pengaruh terhadap

konsumen dalam memilih suatu produk makanan dan minuman (Fennema OR. 1996;

Smith J. 1991).

Tujuan dari penggunaan zat warna tersebut adalah untuk membuat

penampilan makanan dan minuman menjadi menarik, sehingga memenuhi keinginan

konsumen. Awalnya, makanan diwarnai dengan zat warna alami yang diperoleh dari

tumbuhan, hewan, atau mineral, akan tetapi proses untuk memperoleh zat warna

alami adalah mahal. Selain itu, zat warna alamiumumnya tidak stabil terhadap

pengaruh cahaya dan panas sehingga sering tidak cocok untuk digunakan dalam

industri makanan. Maka, penggunaan zat warna sintetik pun semakin meluas.

Keunggulan-keunggulan zat warna sintetik adalah lebih stabil dan lebih tahan

terhadap berbagai kondisi lingkungan. Daya mewarnainya lebih kuat dan memiliki

rentang warna yang lebih luas. Selain itu, zat warna sintetik lebih murah dan lebih

mudah untuk digunakan (deMan JM. 1997; Smith J. 1991; Nollet LML. 1996).

Oleh karena itu, adanya zat warna sintetik yang tidak diijinkan dalam

makanan, dapat terjadi karena kesengajaan produsen makanan menggunakan zatwarna sintetik itu, misalnya zat warna tekstil, untuk menghasilkan warna yang lebih

menarik. Atau, hal itu bisa terjadi karena ketidaktahuan produsen makanan membeli

zat warna sintetik yang dikiranya aman, tetapi ternyata Vol. IV, No.1, April 2007 9

mengandung zat warna sintetik yang tidak diijinkan. Penelitian ini bertujuan untuk

manganalisis beberapa merek zat warna sintetik yang digunakan untuk makanan

yang beredar di pasaran (Azizahwati dkk, 2007).