proposal fix

7/21/2019 Proposal Fix

http://slidepdf.com/reader/full/proposal-fix-56dcaf71447da 1/33



baru harus terus dilakukan. Antimikroba dengan senya'a anorganik yang dapat

di$adikan alternatif anti$amur salah satunya adalah nanopartikel. anopartikel

memiliki sifat fisik dan kimia yang unik sehingga dapat dimanipulasi sesuai

aplikasi yang diinginkan (Raishankar 3amuna, 2012).

Zinc Oxide (4n/) adalah salah satu material yang banyak disintesis

men$adi nanopartikel. 5ibandingkan dengan senya'a organik, bahan anorganik

seperti 4n/ memiliki daya tahan yang tinggi, selektiitas yang besar, lebih tahan

panas, serta biokompatibilitasnya baik terhadap sel manusia. %elain itu, ink

merupakan unsur mineral yang penting untuk kesehatan manusia (admaathy

Ra$agopalan, 200&). 5i samping itu, 4n/ memiliki beberapa kelebihandiantaranya adalah struktur kimia yang stabil, tidak bera#un, dan dapat digunakan

sebagai aditif ke dalam berbagai bahan, serta harganya murah karena ketersediaan

di alam yang sangat melimpah (Astuti, 2006). "erdasarkan penelitian 7l85iasty et

al ., (2019), nanopartikel 4n/ mempunyai aktiitas anti$amur terhadap $amur

dermatofit, diantaranya Candida albicans dan Trichophyton mentagrophytes

dengan penghambatan $amur terbesar ditun$ukan pada konsentrasi dari

nanopartikel 4n/ yaitu, :0mg;ml.

eneliti sebelumnya, yaitu <aryanti et al ., (201:) telah berhasil

mensintesis nanopartikel 4n/ dalam medium ekstrak air daging buah lerak

(Sapindus rarak DC ) dengan metode hidrotermal dan belum diketahui mengenai

aktiitas anti$amur dari nanopartikel 4n/ yang disintesis. "erdasarkan latar

belakang tersebut, maka perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui aktiitas

anti$amur dari nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging

buah lerak hasil sintesis (<aryanti et al ., 201:) terhadap $amur Pityrosporum

ovale.

1.2 Rumusan Masalah

2



1. Apakah nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging

buah lerak Sapindus rarak DC! mempunyai aktifitas anti$amur terhadap

$amur Pityrosporum ovale=

2. "erapakah konsentrasi nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium

ekstrak air daging buah lerak Sapindus rarak DC! yang optimal dalam

menghambat pertumbuhan $amur Pityrosporum ovale=

1.3 Tujuan Peneltan

"erdasarkan rumusan masalah diatas, maka pelaksanaan penelitian ini bertu$uan >

1. <enentukan aktiitas anti$amur nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam

medium ekstrak air daging buah lerak Sapindus rarak DC! terhadap

$amur Pityrosporum ovale.

2. <enentukan konsentrasi yang efektif dari nanopartikel 4n/ yang

disintesis dalam medium ekstrak air daging buah lerak Sapindus rarak

DC! dalam menghambat pertumbuhan $amur Pityrosporum ovale.

1.! Man"aat Peneltan

1.!.1 Bag Penelt

Hasil dari penelitian ini dapat berguna bagi peneliti untuk mengetahui

efektiitas nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging

buah lerak Sapindus rarak DC! terhadap daya hambat pertumbuhan $amur

Pityrospo rum ovale se#ara in"vitro#

1.!.2 Bag Instans Terkat

Hasil penelitian dapat bermanfaat bagi suatu instansi kesehatan, untuk

mengembangkan penelitian ini pada tahap lebih lan$ut sehingga teru$i se#ara

preklinik dan klnik serta dapat di$adikan sebagai bahan dasar obat dalam

mendapatkan efektiitas nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium

ekstrak air daging buah lerak Sapindus rarak DC! terhadap daya hambat

3



pertumbuhan $amur Pityrosporum ovale sebagai penyebab ter$adinya ketombe

se#ara in"vitro.

1.!.3 Bag Pr#gram $tu% Pen%%kan D#kter

Hasil penelitian ini dapat memberikan informasi tentang efek yang

ditimbulkan nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air

daging buah lerak Sapindus rarak DC! terhadap daya hambat pertumbuhan

$amur Pityrosporum ovale sebagai penyebab ter$adinya ketombe se#ara in"

vitro.

1.!.! Bag Mas&arakat

Hasil penelitian dapat memberikan pengetahuan bagi masyarakat

bah'a nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging

buah lerak Sapindus rarak DC! tersebut terbukti dapat digunakan dalam

penatalaksanaan penyakit yang disebabkan oleh $amur Pityrosporum ovale.

1.' Batasan Masalah

Agar penelitian ini lebih terarah, maka masalah penelitian dibatasi pada

pengu$ian aktiitas anti$amur nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium

ekstrak air daging buah lerak Sapindus rarak DC! yang dilakukan dengan

metode difusi sumuran dengan mengukur diameter ona hambat disekitar

sumuran.

BAB II

4



TIN(AUAN PU$TA)A

2.1 )et#m*e

!etombe atau Pityriasis capitis merupakan se$enis kelainan kulit karena

ter$adinya peradangan pada kulit kepala ringan, namun sering men$adi masalah

bagi penderita dan disertai gatal yang sangat mengganggu kenyamanan dan

estetika. %e#ara periodik kulit kapala yang mati akan dikeluarkan ke permukaan

kulit. ?apisan sel kulit kepala yang mati selan$utnya akan lepas dengan

sendirinya, namun dalam kondisi tertentu pelepasan ini tidak ter$adi sehingga sel

yang mati tersebut menumpuk dipermukaan kulit kepala (@$arta, 2009).

Pityriasis capitis disebabkan oleh $amur Pityrosporum ovale# lora normal

pada kulit kepala ini $umlahnya dapat meningkat dan menghasilkan lipase#

Trigliserida yang dihasilkan oleh lipase akan merombak asam8asam lemak yang

merangsang hiperploriferasi sel8sel epidermis. %ehingga ter$adi pelepasan

keratosit se#ara pesat dan ter$adi perlekatan antara keratin yang mati, lalu

dilepaskan sebagai serpihan yang menggumpal (%eptian, 200&).

ambaran klinik Pityriasis capitis berupa sisik8sisik halus atau serbuk

kering, ber'arna putih abu8abu yang dapat menggumpal pada beberapa

permukaan kulit kepala atau menyeluruh. enderita biasanya mengeluhkan rasa

gatal pada kulit kepala, terutama bila udara panas, berkeringat dan disertai

kerontokan rambut.apabila skuama yang terlepas ari kulit kepala $atuh ke pakaian

atau bahu penderita maka akan menimbulkan gangguan estetika. 3ika ke$adian

terus berlan$ut dapat timbul kebotakan setempat atau merata (-asitaatmad$a,

2002).

7tiopatogenesis ketombe belum diketahui kepastiannya (+ardin, 1&).

amun ada beberapa faktor yang dianggap mempunyai peranan penting terhadap

ter$adinya Pityriasis capitis, antara lain>

5



1. roduksi sebumroduksi sebum oleh kelen$ar sebasea merupakan faktor penting ter$adinya

Pityriasis capitis bagi petumbuhan Pityrosporum ovale yang bersifat lipofilik

atau lipid8dependent. %ekresi sebum akan menurun seiring bertambahnya usia.

Hal ini disebabkan karena kelen$ar sebasea dirangsang oleh androgen yang

berasal dari testis, oarium dan kelen$ar adrenal yang berkembang saat masa

pubertas. %ebelum dihasilkan sebum oleh kelen$ar sebasea, Pityrosporum

ovale merupakan flora normal pada kulit kepala.

2. %tresseningkatan kadar asam lemak bebas yang merupakan salah satu dari

senya'a yang akan membentuk sebum dapat dipengaruhi oleh stress

emosional (-i$aya, 2001).

9. 5iet lemak

?emak merupakan komponen yang dibutuhkan tubuh, tetapi konsumsi se#ara

berlebihan dapat mempengaruhi kelen$ar sebasea dan akhirnya men$adi bahan

pembentuk sebum yang akan membuat kulit kepala berminyak (lo'ing,

2009).

:. Iritasi mekanis dan kimiaaktor fisik seperti pH, transport +/2 dan kandungan air mempengaruhi

timbulnya Pityriasis capitis, dimana suhu dan kelembaban rendah akan

memperburuk Pityriasis capitis, tetapi peningkatan suhu dan kelembaban pun

meningkatkan risiko ter$adinya Pityriasis capitis (-asitaatmd$a, 2002).

. enetik

aktor genetik memiliki peran penting dalam pathogenesis Pityriasis capitis.

Pityrosporum ovale dapat menginduksi Pityriasis capitis bila disertai fa#tor

predidposisi (+ardin,1&B -i$aya, 2001).

C. Hiperploriferasi sel epidermis Pityriasis capitis merupakan gangguan hiperploriferasi sel epidermis kulit

kepala yang menyebabkan peningkatan produksi sel tanduk yang mengalami

deskuamasi (lo'ing, 2009).

2.2 (amur Pityrosporum ovale

2.2.1 )las"kas Taks#n#m menurut +,astellan et al .- 113/0

6



5iisio > "asiodiomy#ota

%ubdiisi > Dstilaginomy#otina

!elas > 7Eobasidiomy#etes

/rdo > <alasseiales

amilia > +rypto#o##a#eae

%ub family > +rypto#o##oidae

enus > ityrosporum atau <alasseia

%pesies > Pityrosporum ovale

ambar 2.1. 3amur Pityrosporum ovale

(%umber> rahan, 2002)

2.2.2 M#r"#l#g %an I%ent"kas

Pityrosporum ovale adalah $amur lipofilik angota genus mallaseia

yang merupakan flora normal pada kulit. <orfologi Pityrosporum ovale

berkarakteristik oal seperti botol, berukuran 182 E 28: mm, gram positif dan

memperbanyak diri dengan #ara blastospora ; tunas (-asitaatmad$a et al .,

2002).

<orfologi yang dibentuk dari spesies $amur Pityrosporum ini berupa

ragi dan miselium. Ragi merupakan yang paling sering dikaitkan dengan flora

normal meskipun dominan ditemukan pada kultur. %e#ara in8itro dengan

7



menggunakan berbagai media, beberapa spesies $uga dapat menghasilkan

miselium, meskipun tidak semua isolat dari Pityrosporum mampu men$alani

transformasi tersebut.

5inding sel dari genus Pityrosporum memiliki diferensiasi yang

kurang baik. !arena dinding dari genus Pityrosporum ini sangat tebal

dibandingkan dengan ragi lainnya (sekitar 0,12<) dan merupakan 2C896*

dari olume sel $amur. !omponen yang dimiliki dari dinding sel adalah gula

(60*), lipid (1820*) dan protein (10*), dengan nitrogen dan sulfur dalam

$umlah yang sangat sedikit. Pityrosporum ovale meiliki dinding yang terdiri

dari dua lapisan dengan lekukkan pada lapisan bagian dalam dan lapisan luar

lamelar di sekitar dinding sel. ?apisan lamelar se$enis dengan

pseudomembran, yang berperan dalam adhesi pada kulit. %itoplasma

membran melekat pada permukaan dalam dinding sel. 3umlah dan bentuk

mitokondria dalam sel masing8masing dapat berariasi. ukleus memiliki

membran yang dikelilingi oleh nukleoplasma homogen granular. Fakuola

berisi lipid dan berariasi dalam ukuran yang sesuai dengan umur sel pada

$amur Pityrosporum ovale tersebut (<i#hael, 1&&).

2.3 Nan#artkel n

anopartikel merupakan suatu partikel dengan ukuran nanometer, yaitu

sekitar 18100nm (Hosoka'a, 2006).

8



nanometer yang disebut dengan nanocarrier dan senya'a obat yang melalui suatu

#ara tertentu dibuat berukuran nanometer yang disebut dengan nanokristal

(<ohanra$ +hen, 200C).

ada penelitian sebelumnya, <aryanti et al ., (201:) telah mensintesis

nanopartikel 4n/ dalam medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak

DC ). 7kstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) digunakan untuk

mengontrol agregasi dan stabilitas nanopartikel sehingga dapat membatasi

pertumbuhan nanoparikel serta menstabilkan dari penggumpalan dan dalam

sintesis nanopartikel 4n/ bertindak sebagai prekursor pengorol ukuran,

morfologi dan sifat nanopartikel (Rahdar, 2019).

2.! Buah Lerak + Sapindus rarak D, )

2.!.1 Menurut taks#n#mn&a- Sapindus rarak D, %klas"kaskan %alam

+Ang#serm Ph&l#gen& 4r#u III- 255/0

5iisi > %permatophyta

%ubdiisi > Angiospermae

!elas > 5y#otyledonae

"angsa > %apindales

%uku > %apinda#eae

<arga > %apindus

%pesies > Sapindus rarak

"uah lerak (Sapindus rarak DC ) merupakan tumbuhan dengan bahan

alami dan relatif mudah untuk diperoleh (Ddarno, 200). "uah lerak

(Sapindus rarak DC ) sering dipergunakan untuk men#erahkan 'arna yang

diperoleh dari soga alam;pe'arna alam, mem#u#i kain batik dan emas. %e#ara

tradisional, lerak digunakan sebagai sabun 'a$ah untuk mengurangi $era'at.

%ementara khasiat farmakologiknya antara lain sebagai anti$amur,

10



bakterisidal, anti radang, anti spasmodinamik, peluruh dahak, dan diuretik

(Heyne !., 1&6).

ambar 2.9 "uah lerak (Sapindus rarak DC ).

(%umber> oian, 2002)

enelitian menun$ukan bah'a lerak mengadung saponin 12*,

alkaloid 1*, steroid 0,09C*, dan triterpen 0,02*. 7kstrak lerak

mengandung saponin dan flaaoid terdapat pada kulit buah, bi$i, kulit batang

dan daun. %edangkan polifenol dan alkaloid terdapat pada kuit buahnya (Asao

et al ., 200).

<enurut Irham (2009), ekstrak buah lerak (Sapindus rarak DC )

memiliki sifat antibakteri terhadap Streptococcus mutans. 7kstrak tumbuhan

ini $uga menun$ukan aktiitas yang kuat dalam menghambat pertumbuhan

Candida albicans serta memiliki sifat bakterisida dan fungisida yang baik

(Gulinah et al#, 200).

?erak (Sapindus rarak DC ) mengandung senya'a saponin yang

beker$a sebagai antimikroba yang berfungsi sebagai surfaktan atau detergen

melalui ikatan gugus polar dan non polar yang menyerang lapisan batas sel.

%aponin yang merupakan kandungan utama dari buah lerak (Sapindus rarak

DC ) $uga dapat dikembangkan sebagai bahan baku membuat sampo.

laonoid merupakan senya'a yang dapat merusak membran sel karena

11



sifanya yang lipofilik dan kemampuannya membentuk kompleks dengan

protein ekstraseluler. %enya'a fenol menghambat enim penting

mikroorganisme, sedangkan alkaloid digunakan untuk mela'an sel asing

melalui ikatan 5A sel sehingga mengganggu fungsi sel (Asao et al ., 200).

2.' at Antmkr#*a %an Pengg#l#ngann&a

4at antimikroba merupakan bahan yang dapat menggangu pertumbuhan

dan metabolisme mikroba seperti sel $amur, bakteri, alga ataupun sel protooa

patogen lainnya. %el antimikroba digolongkan men$adi fungistatik, fungisida dan

antibiotik (<i#hael, 1&&).

1. ungistatik

ungistatik merupakan at kimia yang menghambat perkembangan sel8sel

$amur meskipun membunuh sel $amur se#ara tidak langsung. ungistatik

menyebabkan sel $amur men$adi sangat sensitif terhadap perubahan

lingkungan, sehingga sel $amur mudah mati. Hal itu disebabkan karena

adanya at fungistatik yang bersifat antimikroba khususnya sel8sel $amur. %el

$amur dapat tumbuh kembali $ika, at fungistatik hilang atau dikurangi

konsentrasinya. ungistatik dapat digolongkan men$adi sikonaol (mi#atin),

klotrimaol (lotrimin), haloprogin, mi#honaol dan imidaol. ungistatik

memiliki mekanisme ker$a untuk menghambat pertumbuhan analog, misalnya

at fungistatik sofonafida. ada umumnya mikroorganisme memerlukan

senya'a para8aminobenoat (A"A) untuk menghasilkan asam folat yang

diperlukan dalam sintesis purin (oor, 2000)

2. ungisida

ungisida merupakan at antimikroba memiliki kemampuan untuk membunuh

sel $amur. 4at antimikroba ini dapat membunuh sel8sel $amur penyebab

dermatomokisis diantaranya yaitu #ampuran asam asetat dan asam benoat.

Asam salisinat atau selenium sulfide $uga termasuk sebagai at fungisida

(oor, 2000).

12



9. Antibiotik

Antibiotik adalah at yang diperoleh dari atau dibentuk oleh berbagai spesies

mikroorganisme, dalam konsetrasi rendah namun dapat membunuh

pertumbuhan mikroorganisme lainnya. Antibiotik menurut mekanisme

ker$anya dibagi men$adi bakteriosida yang menhambat pertumbuhan dan

bakteriostatik yang berfungsi membunuh sel bakteri. ada umumnya

antibiotik bersifat bakteriosida dengan menhambat sintesis dinding sel,

merusak membrane sitoplasma, menghambat biosintesis protein dan

menghambat sintesis asam nukleat (<i#hael, 1&&).

13



2.6 )et#k#na7#l

!etokonaol merupakan turunan imidaol sintetik dengan struktur miripklotrimaol dan mikonaol. /bat ini bersifat lipofilik dan larut dalam air pada

pH asam. !etokonaol aktif sebagai anti$amur baik se#ara sistemik maupun

nonsistemik (!atung, 16). !etokonaol beker$a sebagai penghambat sterol

1:88demetilase (sistem enim yang tergantung pada sitokrom :0 mikosomal,

dengan #ara mengganggu biosintesis ergosterol dalam sel $amur dan

dinding sel untuk membran sitoplasma sehingga menyebabkan penumpukan 1:8

8metilsterol. <etilsterol memiliki efek yang dapat merusak kerapatan rantai asli

pada fosfolipid serta merusak fungsi enim, yaituB A@ase dan enim8enim

transpor elektron yang terikat pada membran (ilman et al ., 2012).

2.8 Uj Akt9tas Antjamur

engu$ian anti$amur diukur se#ara in8itro, sehingga dapat ditentukan

potensi suatu at anti$amur dalam larutan untuk mengetahui kepekaan suatu $amur

terhadap konsentrasi8konsentrasi obat. D$i aktiitas anti$amur dapat dilakukan

dengan salah satu dari dua metode utama berikut yaitu u$i dilusi dan difusi(3a'et et al ., 2001).

1. <etode 5ilusi

<etode dilusi terdiri dari dua teknik yaitu teknik dilusi agar dan dilusi

perbenihan #air. <etode dilusi ini bertu$uan untuk menentukan aktiitas

antimikroba se#ara kuantitatif. Antimikroba dilarutkan kedalam media agar

atau kaldu, yang kemudian ditanami mikroorganisme yang akan diu$i. %etelah

diinkubasi selama 2: $am, konsentrasi terendah yang dapat menghambat

pertumbuhan bakteri disebut dengan <I+ (minimal inhibitory concentration).2. <etode 5ifusi

<etode difusi merupakan metode yang menggunakan kertas #akram, yang

telah dibubuhkan antimikroba dalam $umlah tertentu yang ditempatkan pada

media yang telah ditanami organisme yang akan diu$i se#ara merata.

14



@ingginya konsentrasi dari antimikroba ditentukan oleh difusi dari #akram

dan pertumbuhan organisme u$i yang terdapat daya hambat dan ona $ernih

disekitar #akram, sehingga bakteri tersebut merupakan bakteri yang sensitif

terhadap antimikroba. %eperti yang diukur oleh metode dilusi dan diameter

ona daya hambat pada metode difusi, konsentrasi terendah yang dapat

menghambat pertumbuhan bakteri disebut dengan <I+ (minimal inhibitory

concentration) (3a'et et al ., 2001).

2.: $terlsas

%terilisasi adalah proses kimia atau fisik yang bertu$uan untuk membunuh

atau menghilangkan mikroorganisme yang tidak diinginkan pada suatu ob$ek

atau spesimen pada suatu penelitian. +ara8#ara sterilisasi yaitu>

1. %terilisasi panas kering (/en)

%terilisasi panas oen biasa digunakan untuk alat8alat atau bahan8bahan yang

terbuat dari ka#a atau tidak dapat berpenetrasi se#ara mudah. ada metoda ini,

pembunuhan mikroorganisme ter$adi melalui mekanisme oksidasi hingga

ter$adi koagulasi protein pada sel (5'id$oseputro 5., 200).

2. %terilisasi dengan tekanan atau sterilisasi uap (autoclave)

%terilisasi uap merupakan proses pemaparan uap $enuh pada tekanan tertentu

selama 'aktu dan suhu tertentu pada suatu ob$ek, sehingga mengakibatkan

kematian mikroorganisme akibat denaturasi atau koagulasi protein sel. %uhu

$enuh uap air (100o+) pada tekanan 1 atmosfir ternyata tidak dapat membunuh

mikroorganisme yang resisten. /b$ek disimpan dalam 'adah tertutup rapat

sehingga dapat men#apai suhu sterilisasi, yaitu 121o+ atau lebih. %iklus

sterilisasi uap meliputi pada fase pemanasan conditioning!, pemaparan uap

exposure!, pembuangan exhaust!, dan pengeringan. aktor8faktor yang

mempengaruhi sterlisasi uap adalah 'aktu, suhu, kelembaban (Hadioetomo,

19).

15



9. %terilisasi radiasi

%terilisasi radiasi dapat dilakukan dengan menggunakan radiasi sebagai

berikut>

a. Dltraiolet

Dltraiolet merupakan gelombang elektromagnetik dengan pan$ang

gelombang 1008:00 mm dengan efek optimal pada 2: nm. %umbernya

adalah lampu uap merkuri dengan daya tembus hanya 0,0180,2 mm.

<etode ini digunakan untuk sterilisasi ruangan pada penggunaan aseptik.

b. Ion%inar langsung yang diberikan langsung ke pusat kehidupan mikroba

(kromosom) atau se#ara tidak langsung dengan sinar terlebih dahulu

membentuk molekul yang menyebabkan ter$adinya reaksi sekunder pada

bagian molekul 5A mikroba.

#. amma

amma bersumber dari +oC0 dan +s196 dengan aktiitas sebesar 0800

kilo #urie serta memiliki daya tembus sangat tinggi. 5osis efektifitasnya

adalah 2, <Rad. <etode ini digunakan untuk mensterilkan alat8alat yangterbuat dari logam, karet serta bahan sintesis seperti polietilen (Agus et al .,

1:).

:. %terilisasi filtrasi

5i dalam sterilisai se#ara mekanik (filtrasi), menggunakan suatu saringan

yang berpori sangat ke#il (0.22 mikron atau 0.: mikron) sehingga mikroba

tertahan pada saringan tersebut. roses ini ditu$ukan untuk sterilisasi bahan

yang peka panas, misalnya larutan enim dan antibiotik (Agus et al ., 1:).

2. )erangka Te#r

16

lora normal kulit kepala

( Pityrosporum ovale!



2.15 )erangka )erja

17

@umbuh dalam

$umlah berlebihan

@umbuh dalam

$umlah normal

%tress 5iet

lemak

Iritasi

mekanis

kimia

enetik Hiperplori

8ferasi sel

epidermis

roduksi

sebum

!etombe

!etokonaol

(senya'a organik)

Resistensi

Alternatif

antimikroba

anopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air

daging buah lerak (Sapindus rarak DC )

anopartikel 4n/ yang disintesis dalam

medium ekstrak air daging buah lerak

(Sapindus rarak DC )

engen#eran

menggunakan a+l 0,*

D$i Aktiitas

Anti$amur terhadap

Pityrosporum ovale

!ontrol ositif



2.11 H#tess

"erdasarkan perumusan masalah di atas, maka dibuat hipotesis yaitu>

H0 > anopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging

buah lerak Sapindus rarak DC! tidak mempunyai aktiitas

anti$amur yang dapat menghambat pertumbuhan $amur

Pityrosporum ovale#


buah lerak Sapindus rarak DC! dapat menghambat pertumbuhan


18

<enggunakan

metoda difusi

#akram

Anti$amur

standar

!etokonaol

3amur

Pityrosporum ovale

Ada daya hambat @idak ada daya

hambat




buah lerak Sapindus rarak DC! mempunyai efek anti$amur yang

sama dengan !etokonaol terhadap $amur Pityrosporum ovale#

BAB III

METDE PENELITIAN

3.1 (ens %an Desan Peneltan

enelitian ini merupakan penelitian eksperimental. enelitian ini

menggunakan nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air

daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) sebagai anti$amur terhadap $amur

Pityrosporum ovale.

3.2.1 ;aktu %an Temat

19



engu$ian aktiitas anti$amur nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam

medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) terhadap $amur

Pityrosporum ovale se#ara difusi #akram dilaksanakan di ?aboratorium

<ikrobiologi akultas !edokteran dan Ilmu !esehatan Dniersitas "engkulu

pada bulan /ktober 201: sampai bulan April 201.

3.3 Alat %an *ahan

3.3.1 Alat

Alat yang digunakan untuk u$i aktiitas anti$amur meliputi> 1)

erlenmayerB 2) #a'an petriB 9) gelas ukurB :) tabung reaksiB ) ka#a arlo$iB C)

lumpang dan aluB 6) botol semprotB &) pinsetB ) sundipB 10) ka'at oseB 11)

kapasB 12) cork borer atau pipetB 19) alumunium $oil B 1:) lampu spiritusB 1)

nera#a analitikB 1C) laminar air $lo%B 16) shaker B 1&) incubator B 1) orteksB

20) be$ana ultrasonikB 21) spektrofotometerB 22) autoklafB 29) hot plateB 2:)

spuitB 2) mikro pipetB 2C) penggaris ukuran 20 #m dengan ketelitian 0, mm.

3.3.2 Bahan

"ahan yang digunakan untuk penelitian ini meliputi> 1) kultur $amur Pityosporum ovaleB 2) ketokonaolB 9) alkohol 60*B :) kertas #akramB )

akuadesB C) a+l 0.*B 6) media padat Saboroud Dextrose &gar (%5A)B &)

media #air 'utrient (roth (")B ) sampel u$i nanopartikel 4n/ dalam

medium ekstrak air daging buah lerak dengan konsentrasi 2,* b; yang telah

disintesis oleh <aryanti et al . (201:).

3.! ,ara )erja

3.!.1 $terlsas Alat %an Bahan

%emua alat sepeti labu erlenmeyer, pipet ukur, gelas ukur, #a'an petri,

tabung reaksi, pipet tetes, batang pengaduk, pen$epit, gelas kimia, medium

Saboroud Dextrose &gar (%5A) sebelumnya telah ditutup dengan alumunium

foil dan plastik tahan panas, setelah itu dimasukkan ke dalam autoklaf selama

20



1 menit dengan suhu 121o + dengan tekanan 1 pound per se)uence inch

(psi) untuk proses sterilisasi. roses sterilisasi dimulai dengan memasukkan

semua alat dan bahan ke dalam autoklaf sampai dengan batas yang ditentukan

untuk menempatkan alat dan bahan yang akan disterilkan.

3.!.2 Pem*uatan Me%a

1. <edia Saboroud Dextrose &gar (%5A)

%ebanyak C0 gram Saboroud Dextrose &gar (%5A) ditambahkan akuades

hingga 1000 m?, kemudian dipanaskan sambil diaduk menggunakan hot

plate magnetic stirrer hingga homogen. %etelah itu media disterilkan

dengan autoklaf selama 1 menit pada suhu 121

0

+.2. <edia 'utrient (roth (")

%ebanyak & gram 'utrient (roth (") ditambahkan akuades hingga 1000

m?, kemudian dipanaskan sambil diaduk menggunakan hot plate

magnetic stirrer hingga homogen. %etelah itu media disterilkan dengan

autoklaf selama 1 menit pada suhu 1210+.

3.!.3 Pem*uatan Bakan Peremajaan (amur Pityrosporum ovale

erema$aan $amur, perlu dilakukan terlebih dahulu sebelum memulai

pengu$ian dengan menggunakan media agar miring %5A selama 2: $am untuk


embuatan agar miring %5A dilakukan dengan #ara memasukkan

media %5A ke dalam tabung reaksi, setelah itu media disterilkan dengan

autoklaf selama 1 menit pada suhu 1210 +, kemudian miringkan tabung

reaksi dengan kemiringan 900 :0. 3amur yang akan diu$ikan kemudian

dimasukkan ke dalam agar miring dengan #ara menggoreskan biakan ke

dinding agar miring. %elan$utnya lakukan inkubasi selama 2: $am pada suhu

960 +.

21



3.4.4 Pem*uatan $usens (amur Pityrosporum ovale

embuatan suspense $amur Pityrosporum ovale yaitu dengan #aramengambil hasi perema$aan $amur Pityrosporum ovale sebanyak dua ose dan

di#ampurkan ke dalam 100 ml media " kemudian di shaker selama 289 E 2:

$am.

3.!.' Pem*uatan Larutan Nan#artkel n &ang Dsntess %alam Me%um

Ekstrak Ar Dagng Buah Lerak + Sapindus rarak DC /

5ilakukannya u$i a'al untuk menentukan konsentrasi hambatan

karena belum adanya standar konsentrasi nanopartikel 4n/ yang disintesis

dalam medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) untuk u$i

efektiitas sebagai anti$amur. Adapun konsentrasi larutan nanopartikel 4n/

yang disintesis dalam medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak

DC ) di ariasikan sebagai berikut>

!J K !etokonaol 2*

!8 K 0*A K 20*

" K :0*

+ K C0*

5 K &0*7 K 100*

Fariasi konsentrasi tersebut ber$umlah C ariabel dengan konsentrasi

0* sebagai kontrol negatif dan !etokonaol 2* sebagai kontrol positif.

!onsentrasi ini dibuat dengan #ara pengen#eran sebagai berikut > untuk

konsentrasi 20* diambil 0,2 gram nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam

medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ), kemudian

dilarutkan dengan1 ml a+l 0,*. Dntuk konsentrasi :0*, diambil 0,: gram

nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging buah lerak

(Sapindus rarak DC ) menggunakan 1 ml a+l 0,*, begitu seterusnya untuk

pembuatan konsentrasi lainnya. <aka didapatkan nanopartikel 4n/ yang

disintesis dalam medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC )

22



yang akan ditimbang berturutturut sebanyak 1) 0,2 grB 2) 0,: grB 9) 0,C grB :)

0,& grB ) 1 gr dengan menggunakan olume a+l 0, * yang sama untuk

setiap perlakuan yaitu 1 ml.

3.!.6 Pem*uatan Larutan Pem*an%ng )et#k#na7#l

!onsentrasi standar !etokonaol adalah 2* (ran#himont +, et al .,

2001). !etokonaol tablet dihaluskan dengan menggunakan lumpang, lalu

ditimbang sebanyak 90 mg kemudian dilarutkan dengan akuades sebanyak 1,

ml pada gelas ukur, sehingga kadar konsentrasi yang didapat 2*.

!etokonaol sebagai pembanding bertu$uan untuk mengetahui apakah


(Sapindus rarak DC ) lebih efektif atau tidak efektif dibandingkan dengan

!etokonaol.

3.!.8 Uj A<al Penentuan Minimum Inhibitory Conentration +MI,/

5ilakukannya u$i a'al untuk penentuan konsentrasi hambatan karena

belum adanya standar konsentrasi nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam

medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) untuk u$i aktiitas

sebagai anti$amur. D$i aktiitas anti$amur ini menggunakan metode difusi

sumuran.

Dntuk pembuatan media agar Pityrosporum ovale dengan metode

difusi sumuran yaitu media %5A sebanyak C gram ditambahkan akuades

sebanyak 100 ml kemudian dipanaskan sambil diaduk menggunakan hot plate

magnetic stirrer sampai homogen setelah itu disterilisasi dengan autoklaf pada

suhu 1210+ selama 1 menit. ?arutan media %5A ditambahkan 2 ml biakan

suspensi $amur kemudian digoyang sampai homogen dan tuangkan sebanyak

: ml ke masing8masing #a'an petri, biarkan sampai memadat.

23



%elan$utnya lubangi bagian tengah media agar di #a'an petri dengan

menggunakan cork borer ;pipet yang berdiameter C mm, kemudian isi

sumuran yang telah dibuat dengan sampel berbagai ariasi pada masing8

masing #a'an petri sebanyal 10 Ll dan beri label pada masing8masing #a'an

petri. %etelah itu diinkubasi dengan suhu 960+ selama 2E2: $am, kemudian

diamati adanya penghambatan pertumbuhan $amur Pityrosporum ovale

berdasarkan ona hambat yang berbentuk pada sekeliling sumuran dan media

agar. engu$ian ini dibuat dengan kali pengulangan.

3.!.: Uj E"ekt9tas Antjamur %ar Nan#artkel n &ang Dsntess %alam

Me%um Ekstrak Ar Dagng Buah Lerak + Sapindus rarak DC /

embuatan media %5A yang akan dibuat untuk u$i efektiitas


(Sapindus rarak DC ) terhadap Pityrosporum ovale sama seperti pada u$i <I+

sebelumnya kemudian setiap #a'an petri diberi sumuran dengan cork

borer ;pipet, kemudian diisi dengan nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam

medium ekstrak air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) dengan

konsentrasi yang didapatkan pada u$i Minimum *nhibitory Concentration

(<I+), yaitu A1, A2 M9N A:, A dengan !8 sebagai kontrol negatif, dan A9

sebagai daya hambat minimum yang termasuk kategori kuat.

<enurut 5aid et al. (200&), pada penelitian in itro ini sampel

diperhitungkan dengan Rumus ederer>

( t 8 1) E ( n 1) O 1

t K $umlah sampel

n K $umlah replikasi

(81) E (n81) O 1

:(n81) O 1

24



:n 8 : O 1

:n O 1

n O :,6

ilai n yang diperoleh dari rumus ini adalah sampel, dengan kali

pengulangan, kemudian diinkubasi pada suhu 960+ selama 182E2: $am.

engamatan dilakukan dengan mengukur diameter ona hambat disekitar

sumuran yang berisi sampel u$i.

ada kontrol positif yaitu ketokonaol 1 Ll;ml masing8masing

dilakukan kali pengulangan, kemudian diinkubasi pada suhu 960+ selama

2E2: $am.

3.!. Perhtungan #na Ham*at

4ona hambat merupakan area yang tidak memperlihatkan adanya

pertumbuhan $amur Pityrosporum ovale di sekitar sumuran yang berisi larutan


(Sapindus rarak DC ) dan kontrol positif. enghitungan ona hambat dengan

#ara u$i difusi sumuran di ukur dengan penggaris. Adanya area bening yang

terdapat pada sekitar sumuran mengindikasi adanya hambatan pertumbuhan

mikroorganisme oleh agen anti$amur pada permukaan media agar. Hambatan

akan terlihat sebagai area yang tidak memperlihatkan adanya petumbuhan

$amur Pityrosporum ovale di sekitar sumuran. erhitungan diameter daya

hambat termasuk diameter sumuran (C mm). erhitungan ona hambat ini

dilakukan 9 kali pada sisi yang berbeda.

Ta*el 3.1 )etentuan )ekuatan Mkr#*a

N#. Daerah Ham*atan )etentuan

1.

2.

N20 mm

10820 mm

%angat !uat

!uat

25



3.

!.

810 mm

Mmm

%edang

?emah

%umber > (5ais dan %tout, 161)

3.' I%ent"kas =ara*el

Fariabel bebas pada penelitian ini adalah penambahan berbagai ariasi

konsentrasi larutan nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak

air daging buah lerak (Sapindus rarak DC ) tersebut pada inokulasi $amur

Pityrosporum ovale# %kala ariabel yang digunakan pada ariabel terikat ini

adalah skala rasio8kontinu. Fariabel terikat pada penelitian ini adalah ona

hambat yang terbentuk di sekitar #akram pada perlakuan ariasi konsentrasi

larutan nanopartikel 4n/ yang disintesis dalam medium ekstrak air daging

buah lerak (Sapindus rarak DC ) tersebut.

3.6 Analss Data

5ata yang diperoleh dalam penelitian ini adalah besarnya diameter

ona hambat petumbuhan $amur Pityrosporum ovale pada berbagaikonsentrasi sampel u$i serta kontrol positif dan kontrol negatif. enelitian ini

menggunakan Ran#angan A#ak ?engkap (RA?) dengan perlakuan perbedaan

ariasi konsentrasi sampel u$i. %e#ara statistik, data yang dianalisis dengan

menggunakan u$i one %ay A/FA ( &nalysis o$ +ariance) pada program

%%% 1C.0. Apabila data yang diperoleh signifikan maka dilan$utkan dengan

u$i 5un#an taraf 0,0 (*) (ingsih %%, 201:).

26



3.8 (a%<al )egatan

Ta*el 3.2 (a%<al )egatan

3enis !egiatan %eptembe8

/ktober

oember 5esember 3anuari ebruari8

April

<inggu ke <inggu ke <inggu ke <inggu ke <inggu ke

1 2 9 : 1 2 9 : 1 2 9 : 1 2 9 : 1 2 9 :

enga$uan $udul dan

enyusunan proposal

enelitian

engumpulan data dan

Analisis data

!onsultasi laporan

penelitian dan

embuatan laporan

penelitian

27



DA>TAR PU$TA)A

Agus, %., +hatim, A., %oebandrio, A., !urnia'ati, A., (1:). "uku A$ar

<ikrobiologi !edokteran 7disi Reisi. %taf enga$ar !DI. 3akarta> "inarupa

Aksara.

Asao, G., @oshio, <., Guanyuan, P., <asaki, /., <atoko, H., Hisasi, <., /samu, <.,

dan <asayuki, G. (200). %tru#tures of A#etilated /leanane8@ype @riperpene

%aponins, Rarasaponins IF, F, FI anti8hyperlipidmi# +onstituens from the

eri#arps of Sa$indus rarak DC . +hem. harm. "ull. 6(2)> 1&8209.

Astuti, 4. H (2006). !ebergantungan Dkuran anopartikel @erhadap-arna yang

5ipan#arkan pada roses 5eeksitasi, %kripsi 5epartemen isika I@", "andung.

Angiosperm hylogeny roup. (200). An Dpdate /f @he Anngiosperm /f @he

Angiosperm hylogeny roup +lassifi#ation or @he /ther And amilies /f

lo'ering lant. A III. "otani#al 3ournal /f @he ?innier %o#iety.

+ardin, +. Isolated dandruff. In> "aran R, <alba#h HI, editors. (1&). @eEtbook of

#osmeti#s dermatology. 2nd ed. ?ondon > <artin dunieB. pp. 19 200.

28



+astellani, A., +halmers, A. 3. (119). <anual of @ropi#al <edi#ine. e' 4ealand.

"aillere.

5ais -.-. and @.R %tout. (161). 5is# late <ethods of <i#robiologi#al Antibiotik

Assay. <i#robiology 22> C8CC.

5'id$oseputro, 5. (200). 5asar 5asar <ikrobiologi. 5$ambatan > 3akarta.

7l85iasty, 7. <., <. A. Ahmed, aga'a, /., %al'a, . <., %amaa I. 7., Hanna, <.,

<ariam, H. G. (2019) Antifungal A#tiity of 4in# /Eide anoparti#les Against

5ermatopyti# ?esions of +attle. Romanian 3. "iophys. 29(9), pp.118202.

itrah, D. ". (2010. 7fek Analgetik 7kstrak ?erak (Sapinds rarak DC ) pada igi8gigi

!elin#i 3antan (enelitian In io). %kripsi %ar$ana (%1), Dniersitas %umatera

Dtara, <edan.

ran#hmont +, ierard 7, Arrese 37, 5on#ker . (2001). 7ffe#t of !etokonaole

1* and 2* %hampoos on %eere 5andruff and %eborrhoei# 5ermatitis +lini#al,

%Quamometri# ang <y#ologi#al Assesments. 5ematology., 202> 161816C.

.+. Gi., +. -ang, -., ark. F. (200). 4n/ nanorods> synthesis, #hara#teriation and

appli#ations. %emi#ondu#tor %#ien#e and @e#hnology, pp. 2289:.

ilman, ., Hardman, 3., ?imbird, ?., (2012). 5asar farmakologi terapi.

3akarta>7+, pp> 126:8126.

rahan, R., @.". "urns. (2002). ?e#ture otes on 5ermatology. 7d. &. "la#k'ell

%#ien#e ?td.

unalan, %., %iara$, R., Ra$endran, F., (2019). reen %ynthesied 4n/

anoparti#les Against "a#terial and ungal atogen. rogress In atural

%#ien#e> <aterial International. 22(C)> C98600.

29



Hadioetomo., Ratna %iri. (19). <ikrobiologi 5asar 5alam raktek. 3akarta > .@.

ramedia ustaka Dtama.

Hanum, R. A. (2012). %intesis nanopartikel 4n/>% dan u$i aktiitas anti$amur

terhadap $amur Aspergillus niger. %kripsi. akultas <atematika dan Ilmu

engetahuan Alam. Dniersitas "engkulu.

Heyne, !. (1&6). @umbuhan "erguna Indonesia. Fol. III. @er$emahan> "adan

enelitian dan engembangan !ehutanan. 3akarta> %arana 3aya.

Hosoka'a, <. (2006). anoparti#le @e#hnology 1st 7dition. 7lseier ?ina#reHaouse. D!.

Irham, . (2006). 7fek Antibakteri "erbagai %ediaan dari "uah ?erak @erhadap

Streptococcus mutans, akultas !edokteran igi Dniersitas %umatra Dtara.

3a'et., 7, <elni#k 3?, 7delberg 7A. (2001). Reie' of <edi#al <ikrobiology. 29th

7d. 7lferia R, ener$emah> 3akarta. pp. 19&819, :69.

!atung, "etram, . (16). armakologi 5asar dan !linik >3ilid 1. enerbit "uku

!edokteran 7+. 3akarta.

!urnia'ati, A. (200). 7aluasi %uplementasi 7kstrak ?erak (%apindus rarak 5+)

terhadap populasi protooa, bakteri dan karakteristik fermentasi rumen sapi

peternakan ongloe se#ara In Fitro. %kripsi %ar$ana (%1) akultas eternakan,

Institut ertanian "ogor.

?iposky, A., itan, A., edanken, A., ?ubart, R., (2011). Antifungal A#tiity of

4n/ anoparti#les the Role of R/% <ediated +ell In$ury. anote#hnology>

I/%#ien#e. 22(10).

?ukas, %tefanus. (200C). ormulasi %teril. Gogyakarta > Andi.

30



<ansfeld, R. (2001). <ansfelds 7n#y#lopedia of Agri#ultural and Horti#ultural

+rops. e' Gork> %pringer.

<aryanti, 7., 5emi, 5., Irfan, ., %alprima, G. %. (201:). %yinthesis of 4n/

anoparti#les by Hydrotermal <ethod in AQueous Rinds 7Etra#t of %apindus

rarak 5+. <aterial ?etters. 11&> C1869.

<elinda, Arini. (2011). engaruh Aktiitas Antiketombe 7kstrak 7tanol 60* andan

'angi ( Pandanus amarylli$olius ,oxb#). @erhadap lora ormal di !ulit

!epala, 3akarta> Dniersitas an#asila, pp.19.

<i#hael, 3. el#ar. (1&&). 5asar8dasar <ikrobiologi. 3akarta> Dniersitas Indonesia,

pp.0180C.

<ohanra$, F. 3. +hen G. (200C). anopartikel > A Riie'. @ropi#al 3ournal of

harma#euti#al Resear#h, >1.

ingsih %%. (201:). %krining itokimia dan D$i Akitiitas Antibakteri 7kstrak @irhau

%in$e ( Pycnoporus sanguineus) @erhadap "akteri -scherichia coli dan Shigella

dysentriae. %kripsi. Dniersitas "engkulu. "engkulu.

oor, Hu$$atusnaini. (2000). engaruh 7kstrak 5aun !etepeng +ina (Cassia alata l#!

@erhadap enghambatan ertumbuhan Trichopyton sp# alangkaraya> DAR,

pp. .

oian. (2002). <embuat dan <emanfaatkan estisida Ramah ?ingkungan.

@anggerang. Agro<edia ustaka.

admaathy, . Ra$agopalan, F. (200&). 7nhan#ed "ioa#tiity of 4n/

anoparti#les an Antimi#robial %tudy. %#ien#e @e#nology of Adan#ed

<aterials. , pp.16.

31



lo'ing ., 3ansen @. (2009). %eborrhea 5ermatitis. 5alam> reed beg I<, editor.

5ermatologu in general medi#ine. e' Gork> <#ra'8Hill "ook, pp.1&820:.

u#kett, %.5., @aylor, 7., Raimondo@. (2010). "iomateterials, 91> 60C8619.

uspita. (2010). erandingan 7fektiitas 7kstrak 5aun !angkung ( *pomea reptans)

dengan !etekonaole 1* se#ara In8Fitro terhadap ertumbuhan Pityrisporum

ovale pada !etombe, Dniersitas 5iponegoro> %emarang.

Rahdar, A. (2019). %tudy of 5ifferent +apping Agent 7ffe#t on @he %tru#tural and

/pti#al roperties of <n 5oped 4n% anostru#ture. -orld Appli#ationrogramming. 9> C8C0.

Raishankar, R. F. 3amuna, ". A. (2011). anoparti#les ang @heir otential

Appli#ation as Antimi#robial. %#ien#e Againist <i#robial athogen. 1(1)> 168

20.

%ala, H.., Habib, %.%., !han, 4.H., <emi#, A., Aam, A., Alafra$, 7., 4ahed, .,

Intl.3. (2011). anomed, C > &C98&C.

%eptian, %.. (200&). D$i "anding 7fektiitas Air Rendaman !angkung ( *pomea

reptans! dengan !etokonaol 1* se#ara In8Fitro terhadap ertumbuhan

Pityrosporum ovale pada !etombe. %kripsi %ar$ana (%1) akultas !edokteran,

Dniersitas 5ipoegoro> %emarang.

%hen, ?., "ao, ., Ganagisa'a, !., 5omen, !., upita, A.,rimes, +.A., (200C).

anothe#nology, 16 > 1168129.

@$arta, A., %ularsito, %.A., !urniati, 5.5., Rihatma$a, R. (2009). <etode 5iagnostik

dan enatalaksanaan soriasis dan 5ermastitis %eboroik> akultas !edokteran

Dnersitas Indonesia, pp.618&0.

32



Ddarno, ?. (200). ?erak Sapindus rarak DC! @anaman Industri engganti %abun.

-arta enelitian dan engembangan @anaman Industri 7disi Agustus 200

Folume 1. o.12 , pp.6.

Ds'atun, Hasanah. (2012). D$i 5aya Antifungi ropolis @erhadap Candida albicans

dan Pityrosporum ovale. Dniersitas <uhammadiyah> %urakarta, pp.11.

-asiatmad$a, %<., <enaldi, %?%., 3a#oeb, @A., -idaty, %., editors. (2002).

!esehatan dan keindahan rambut. 3akarta > !elompok %tudi 5ermatologi

!osmetik IndonesiaB pp. 18 11.

-i$aya, ?. (2001). engaruh $umlah Pityrosporum ovale dan !adar %ebum terhadap

!e$adian !etombe (kasus pada mahasis'a akultas !edokteran Dniersitas

5iponegoro semester FII). Dniersitas 5iponegoro> %emarang, pp.819.

Pie, G., He, G., Ir'in, ?., @ony, 3., %hi, P,. (2011). Antiba#terial A#tiity and

<e#anism of A#tion of 4in# /Eide anoparti#les Against +ampyloba#ter

$e$uni. %#hool of Agri#ulture and "iology. %hanghai 3iao @ong Dniersity.

+hina.

proposal fix

Documents