BAB IPENDAHULUAN

A. Latar BelakangMikroorganisme di dunia ini ada yang menguntungkan dan ada juga yang merugikan. Mikroorganisme yang menguntungkan dapat kita manfaatkan untuk kepentingan kesejahteraan hidup manusia. Akan tetapi, banyak juga mikroorganisme yang tidak menguntungkan kita yaitu dengan menyebabkan terjadinya penyakit pada tubuh manusia. Salah satu mikroorganisme yang dapat menyebabkan atau menginfeksi manusia adalam Mycobacterium tuberculosis. Bakteri ini dapat mengakibatkan penyakit tuberculosis pada manusia. Tuberculosis merupakan salah satu penyakit yang mematikan dan berbahaya di dunia. Percobaan tentang transmisi penyakit TBC pertama kali dilakukan oleh Klencke pada tahun 1843. Klencke memproduksi TBC di dalam tubuh kelinci dengan inokulasi jaringan TBC secara intravena. Infeksi oleh kuman TBC juga dibuktikan oleh Villemin pada tahun 1865 dengan cara memproduksi penyakit ini pada kelinci dengan inokulasi jaringan TBC tipe human dan bovine. Dia yang pertama kali mendemonstrasikan perbedaan resistensi kelinci terhadap organisme tipe human dan bovine. Villemin menyimpulkan bahwa TBC adalah penyakit spesifik, TBC disebabkan oleh agen inocilable, penyakit ini dapat menular dari manusia ke kelinci, TBC adalah penyakit yang mematikan. Robert Koch merupakan penemu Mycobacterium tuberculosis pada tanggal 24 Maret 1882, sehingga untuk mengenang jasanya bakteri tersebut diberi nama baksil Koch. Bahkan, penyakit TBC pada paru-paru kadang disebut sebagai Koch Pulmonum (KP). Bakteri ini berbentuk batang dan bersifat tahan asam sehingga dikenal juga sebagai Batang Tahan Asam (BTA).Bakteri tahan asam merupakan bakteri yang kandungan lemaknya sangat tebal sehingga tidak bisa diwarnai dengan reaksi pewarnaan biasa, tetapi harus dengan pewarnaan tahan asam. Kelompok bakteri ini disebut bakteri tahan asam (BTA) karena dapat mempertahankan zat warna pertama sewaktu dicuci dengan larutan pemucat. Golongan bakteri ini biasanya bersifat patogen pada manusia contohnya adalah Mycobacterium tuberculosis. Bakteri Mycobacterium tuberculosis dapat diisolasi dari sputum penderita TBC. Reaksi hasil pewarnaannya jika positif terdapat bakteri TBC berwarna merah. Selain menyerang manusia juga menyerang hewan seperti marmut, dan kera. Penularannya dapat melalui udara yang masuk ke saluran pernafasan.

B. Batasan MasalahDalam makalah ini, penulis hanya membatasi pada tujuan yang dilakukannya pewarnaan. Selain dari tujuan tidak akan di bahas dalam makalah ini.

C. Rumusan MasalahApa perbedaan kuman tahan asam dan kuman tak tahan asam?D. TujuanUntuk membedakan antara kuman tahan asam dan tak tahan asam

E. Manfaat1. Mahasiswa dapat mengetahui cara melakukan pewarnaan terhadap kuman2. Mahasiswa dapat mengetahui morfologi kuman yang diwarnai dengan pewarnaan Ziehl Nielsen3. Mahasiswa dapat mengetahui perbedaan kuman tahan asam dan kuman tak tahan asam.

BAB IITINJAUAN PUSTAKA

A. Kajian TeoriBakteri genus mycobacterium dan beberapa spesies nocardia pada dinding selnya mengandung banyak zat lipoid (lemak) sehingga bersifat permiable dengan pewarnaan biasa. Bakteri tersebut bersifat tahan asam (+) terhadapa pewarnaan tahan asam. Pewarnaan tahan asam dapat digunakan untuk membantu menegakkan diagnosa tuberkulosis. Pewarnaan tahan asam menggunakan larutan ziehl-Neelsen A (cat karbol fuchsin), Ziehl-Neelsen B (alkohol asam :HCL 3% dalam metanol 95%) dan ziehl neelsen C (cat biru metilen). Hasil pewarnaan maka bakteri tahan asam akan berwarna merah dan bakteri tidak tahan asam akan berwarna biru.Pewarnaan Ziehl Neelsen, termasuk pewarnaan tahan asam. Biasanya dipakai untuk mewarnai golongan Mycobacterium (M. tuberculosis dan M. leprae) dan Actinomyces. Bakteri genus Mycobacterium dan beberapa spesies nocardia pada dinding selnya mengandung banyak zat lipid (lemak) sehingga bersifat permeable dengan pewarnaan biasa. Bakteri tersebut bersifat tahan asam (+) terhadap pewarnaan tahan asam. Pewarnaan tahan asam dapat digunakan untuk membantu menegakkan diagnosa tuberculosis. Pewarnaan ini merupakan prosedur untuk membedakan bakteri menjadi 2 kelompok tahan asam dan tidak tahan asam.Bila zat warna yang telah terpenetrasi tidak dapat dilarutkan dengan alkohol asam, maka bakteri tersebut disebut tahan asam sedangkan sebaliknya disebut tidak tahan asam. Bahan pemeriksaan TB biasanya berupa sputum yang diambil dari pasien tersangka KP (Koch pulmonum), tetapi dapat pula diambil dari lokasi lain seperti cairan otak (Liquor Cerebro Spinalis), getah lambung, urine, ulkus, dll.Prinsip dasar dari pewarnaan ini adalah Dinding bakteri yang tahan asam mempunyai lapisan lilin dan lemak yang sukar ditembus cat. Oleh karena pengaruh fenol dan pemanasan maka lapisan lilin dan lemak itu dapat ditembus cat basic fuchsin. Pada waktu pencucian lapisan lilin dan lemak yang terbuka akan merapat kembali. Pada pencucian dengan asam alkohol warna fuchsin tidak dilepas. Sedangkan pada bakteri tidak tahan asam akan luntur dan mengambil warna biru dari methylen blue.

BAB IIIMETODOLOGI

A. Waktu dan TempatWaktu: Pukul 14.00 16.00 WIB.Tanggal: 26 September 2014Tempat: Laboratorium Media dan Laboratorium Bakteriologi

B. Alat dan BahanAlat Ose bulat Lampu Spiritus Mikroskop Obyek Glass Kapas Korek Api

Bahan Suspensi kuman HCl 5% Methylen Blue Carbol Fuchsin Xylol Oil Immersi

Prinsip : Bakteri Tahan AsamBakteri yang jika diwarnai dengan karbol fuchsin dan dipanaskan sampai menguap maka lapisan lilin menjadi lunak sehingga cat dapat terikat kuat oleh bakteri dan setelah dicuci dan dilunturkan dengan alcohol HCl 5% tidak dapat luntur, pada saat digenangi Methylen Blue cat nya tidak terserap sehingga bakteri tetap berwarna merah.

Bakteri Tidak Tahan Asam Bakteri yang jika diwarnai dengan carbol fuchsin dan dipanaskan sampai menguap tidak menyerap dengan kuat sehingga setelah dicuci dan diberi alcohol HCl5% akan luntur dan pada saat digenangi Methylen Blue mampu mengikat cat tersebut sehingga bakteri berwarna biru.

C. Prosedur1. Siapkan obyek glass yang bersih 2. Ambil sediaan dengan menggunakan ose bulat yang sebelumnya ose telah disterilkan 3. Sebelum dan sesudah mengambil sediaan tabung di flaming 4. Sediaan difiksasi 5. Sediaan digenangi dengan carbol fuchsin6. Panasi sediaan sampai menguap jangan sampai mendidih7. Cat dibuang dan dicuci dengan air kran 8. Lunturkan dengan alcohol HCl 5% selama 30 detik9. Sediaan dicuci10. Sediaan digenangi dengan Methylen Blue selama 1-2 menit11. Cuci dengan air kran dan keringkan 12. Periksa di bawah mikroskop dengan perbesaran 100x

BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Hasil dari pewarnaan Ziehl Nielsen yang telah dilakukan :Bentuk: batangWarna: biruSusunan: menyebarSifat: tidak tahan asam

B. Pembahasan

Komposisi karbol fuchsina. Cat induk fuchsin 10mlPhenol pekat 4mlAquadest 100mlb. Basic fuchsin 1 gramAlcohol 96% 10mlCarbolic acid Kristal 5 gramAquadest 100ml Komposisi alcohol HCl 5%HCl pekat 5mlAlcohol 96% 100ml Komposisi Leoffler Methylen BlueCat induk methylen blue 30ml10% NaOH / KOH 0,1mlAquadest 100ml Kuman tahan asam akan berwarna merah Kuman tak tahan asam akan berwarna akan berwarna biru Yang termasuk bakteri tahan asam Mycobacterrum tuberculse Mycobacterrum leprae Yang termasuk bakteri tidak tahan asam Escherechia coli Shigella Salmonella typhi Kuman golongan cocos Dalam pewarnaan Ziehl Nielsen perlu dipanaskan karena bakteri tahan asam punya lapisan lemak / lilin dan jika dipanaskan lapisan lilin akan lunak atau terbuka sehingga mudah untuk menyerap carbol fuchsin. Pemanasan ini bertujuan untuk melunakkan lapisan lilin sehingga mudah diwarnai, jika sampai mendidih sediaan akan rusak dan sulit diamati di bawah mikroskop.

BAB VPENUTUP

A. KESIMPULANJadi, dari pengamatan dengan menggunakan pewarnaan Ziehl Nielsen ditemukan bakteri dengan bentuk batang, berwarna biru, susunannya menyebar, dan sifatnya tidak tahan asam.

B. SARAN1. Sebaiknya praktikan menggunakan APD (Alat Pelindung Diri) sebelum melakukan pemeriksaan.2. Pemeriksaan dilakukan sesuai prosedur yang ada.3. Jagalah kebersihan.

DAFTAR PUSTAKA

Anonym. 2013. Laporan Praktikum Mikrobiologi Medis. [online] http://nexthealthleader.blogspot.com/2013/09/laporan-praktikum-mikrobiologi-medis.html diakses pada 6 Desember 2014Anonym. 2012. Pewarnaan Bakteri Tahan Asam. [online] http://labmikrobiologi.blogspot.com/2012/02/pewarnaan-bakteri-tahan-asam-bta.html diakses pada 6 Desember 2014Maria, Zita. 2011. LAPORAN BAKTERIOLOGI : BAKTERI TAHAN ASAM. [online] http://justzita.blogspot.com/2011/10/laporan-bakteriologi-bakteri-tahan-asam.html diakses pada 6 Desember 2014.