BA K T I H U S A D

A

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

Setelah menyelesaikan sesi ini peserta mampu melakukan pemeriksaan laboratorium dengan benar & sesuai standar

Peserta mampu :1.Mengetahui pemeriksaan HIV menjadi bagian integral dari pelayanan2.Mengetahui strategi pemeriksaan & ragam metode pemeriksaan HIV3.Mengetahui kelebihan dan kekurangan pemeriksaan HIV rapid & EIA4.Melaksanakan pemeriksaan HIV metode rapid & interpretasi hasil pemeriksaan

UMUM

KHUSUS

TUJUAN

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

1. Uji Saring Darah: di PMI (penerima)Keamanan darah transfusi & jaringan transplantasi 2. Surveilans: di Balai Labkes (masyarakat) Besarnya masalah 3. Diagnosis : VCT dan PITC (individu) Status HIV secara klinis

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

PERAN & FUNGSI LABORATORIUM

• Bagian integral dari pelayanan kesehatan, berperan dalam mendukung upaya kesehatan

(UU Kesehatan 36/2009)

• Fungsi Laboratorium : - Diagnosis etiologi penyakit menentukan terapi

- Monitoring & evaluasi terapi - Skrining - Deteksi dini masalah kes masy surveilans

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

Serial - Sampel diperiksa dengan Uji/ reagen I

- Uji pertama menentukan apakah di perlukan

uji tambahan Paralel

Sampel diperiksa sekaligus/ secara bersamaan dgn 2 atau 3 uji / reagen yang berbeda

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

Tujuan Pemeriksaan

Prevalensi infeksi HIV

Strategi Pemeriksaan

Keamanan transfusi/transplant

Semua prevalensi I

Surveilans > 10%< 10%

III

Diagnosis:- Bergejala infeksi HIV / AIDS

- Tanpa gejala

> 30%< 30%> 10%< 10%

IIIIIIII

WHO & UNAIDS

STRATEGI PEMERIKSAAN

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

Kegunaan REAGENScrening / penyaring darah, transfusi & transplantasi PMI (Strategi I)

Rapid / ELISASensitivitas 99% 99%

Surveilans HIV (Strategi II) Rapid/ ELISA R/ I : Sensitivitas > 99 %R/ II : Spesifitas > 98 %

Diagnosis (Strategi III)Permenkes No.241/Menkes/ IV/2006 – Standar t Pelayanan Kesehatan pemeriksaan HIV/AIDS

Rapid / ELISA Reagen I : Sensitivitas > 99 %Reagen I : Spesifisitas > 98 %Reagen III: Spesifisitas > 99 %

prinsip tes berbeda, Hasil diskordan < 5%

Pemeriksaan secara serial

Petugas terlatih dan tersertifikasi

Harus melakukan PMI dan mengikuti PME

Reagen yang digunakan sudah lulus evaluasi dari LRN RSCM

PERSYARATAN REAGENSIA YANG DIREKOMENDASIKAN

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

● Keadaan reagen

● Tanggal kadaluarsa reagen

● No lot pada reagen

● penyimpanan reagen◦ Packet Insert (instruksi kerja)

Peralatan dan reagensia untuk tes HIV

- Reagen kit HIV

- mikropipet 5 – 50µl

- Tip kuning/ biru

- wadah sampah infeksius, Hipoclorit 5%

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

Diwajibkan membaca Packet Insert (instruksi kerja) yang ada di kotak reagensia setiap kali membuka kotak reagensia yang baru.

Walaupun Merek reagensia yang sama, instruksi kerja dapat berbeda setiap lot. No

Perhatikan juga penyimpanan reagensia , harus sesuai instruksi kerja, apakah suhu ruang atau suhu 2 – 8o C

Jangan mencampur reagen dari kotak lama dengan kotak yang baru.

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

DIAGNOSISDIAGNOSIS

A1A1

A1 positifA1 positif A1 negatifA1 negatif

Lapor Lapor sebagai sebagai

“Non-reaktif”“Non-reaktif”

ALUR PEMERIKSAAN

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

A1 pos A1 pos A2 posA2 pos

A2A2

A3A3

A1 pos A1 pos A2 negA2 neg

Ulangi A1&A2Ulangi A1&A2A1 pos A1 pos A2 posA2 pos

A1 pos A1 pos A2 negA2 neg

Lapor Lapor sebagai sebagai

“Non-reaktif”“Non-reaktif”

A1 neg A1 neg A2 negA2 neg

Lapor Lapor sebagai sebagai “reaktif”“reaktif”

A1 pos A1 pos A2 pos A2 pos A3 posA3 pos

A1 pos A1 pos A2 pos A2 pos

ALUR PEMERIKSAAN

DIAGNOSISDIAGNOSIS

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

A1 pos A1 pos A2 posA2 pos

A2A2

A1 pos A1 pos A2 negA2 neg

Ulangi A1&A2Ulangi A1&A2A1 pos A1 pos A2 posA2 pos

A1 pos A1 pos A2 negA2 neg

Lapor Lapor sebagai sebagai

“Non-reaktif”“Non-reaktif”

A1 neg A1 neg A2 negA2 neg

A1 pos A1 pos A2 neg A2 neg A3 posA3 pos

A1 pos A1 pos A2 pos A2 pos A3 negA3 neg

Lapor Lapor sebagai sebagai

“Indeterm”“Indeterm”

ALUR PEMERIKSAAN

DIAGNOSISDIAGNOSIS

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

A1 pos A1 pos A2 posA2 pos

A2A2

A1 pos A1 pos A2 negA2 neg

Ulangi A1&A2Ulangi A1&A2A1 pos A1 pos A2 posA2 pos

A1 pos A1 pos A2 negA2 neg

Lapor sebagai Lapor sebagai “Non-reaktif”“Non-reaktif”

A1 neg A1 neg A2 negA2 neg

A1 pos A1 pos A2 neg A2 neg A3 negA3 neg

Lapor sebagai Lapor sebagai “Indeterm”“Indeterm”

DIAGNOSISDIAGNOSIS

ALUR PEMERIKSAAN

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

A1 pos A1 pos A2 neg A2 neg A3 negA3 neg

Risiko Risiko tinggitinggi

Risiko Risiko rendahrendah

Lapor Lapor sebagai sebagai

“Non-reaktif”“Non-reaktif”

Lapor Lapor sebagai sebagai

“Indeterm”“Indeterm”

ALUR PEMERIKSAAN

DIAGNOSISDIAGNOSIS

BA K T I H U S A D

A

ALUR STRATEGI IIIPositif Negatif

P I positifP II positif

P I positifP II negatif

P I positifP II positif

Pemeriksaan I

Pemeriksaan II

Ulang Pemeriksaan I dan Pemeriksaan II

NON REAKTIF

P I negatif P II negatif

P I negatifP II positif

Pemeriksaan III

NON REAKTIF

P I positifP II negatif

P I positifP II positifP III positif

REAKTIF

P I positifP II positifP III negatif

P I negatifP II positifP III positif

P I positifP II negatifP III positif

INDETERMINATE

P I positifP II negatifP III negatif

Risiko tinggi Risiko rendah

Rujuk ke Laboratorium ....

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

Untuk individu yang “baru” didiagnosis perlu dilakukan pemeriksaan ulang dengan bahan baru, sebelum dikonfirmasi

Untuk hasil yang “indeterminate”, perlu diulang dengan bahan baru yang diambil sedikitnya 14 hari sesudah yang pertama

Bila hasil tetap “indeterminate” dengan bahan baru, lakukan pemantauan ulang pada 3, 6 atau 12 bulan. Bila setelah 1 tahun hasil tetap “indeterminate”, dianggap tidak terinfeksi HIV

Catatan penting :

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

1. Diagnosis HIV (Antibodi/Antigen)•Enzyme Immunoassay (EIA) •Pemeriksaan Rapid•Western Blot (WB) / tes komfirmasi HIV

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

2. Diagnosis awal untuk bayi usia < 18 bulan

• EID HIV DNA (kualitatif)• HIV RNA Viral Load • Antigen p24

Minimal usia 4 minggu, idealnya 6 – 8 minggu

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

3. Menginisiasi,memantau pengobatan HIV • CD4 :untuk inisiasi dan pemantauan terapi ARV

◦ Non flowcytometry (POCT) Darah EDTA 3 cc (stabilitas 6 jam)◦ Flowcytometry Darah EDTA 3 cc (stabilitas 24 jam)

• Viral Load :menentukan jumlah virus, pemantauan dan respon terapi ARV

Plasma EDTA dipisahkan < 6 jam

stabilitas 7 hari (2 – 8oC)

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

NO KELEBIHAN KEKURANGAN1 Cepat (< 30 menit) Pembacaan secara visual

(subjektivitas)2 Tidak menggunakan listrik Waktu pembacaan harus tepat 3 Reagensia dapat disimpan

pada suhu kamar (maksimal 25°C)

Umumnya tidak disertai bahan kontrol

4 Mudah di gunakan, efektif u/ layanan 1 hari

Jika Spesimen gagal mengalir ke samping, harus di ulang

56

Keahlian teknis minimalBisa di lakukan di lapangan

- Jumlah pemeriksaan < 20 - Tidak dapat menyimpan bukti pemeriksaan- Resiko kontaminasi > tinggi ( jika pemeriksaan dilakukan di lapangan)

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A

NO

KELEBIHAN KEKURANGAN

1 Dapat membedakan hasil reaktif berasal dari adanya antigen P24/antibodi (dual signaling)

Dilakukan oleh petugas lab. yang terlatih & trampil

2 Dapat menyaring individu dengan ag positif & ab negatif di populasi prevalensi infeksi HIV tinggi

Menggunakan listrikReagen harus di simpan suhu 2 -8 oC

3

45

Dapat memperkecil window period (lebih akurat)Jumlah pemeriksaan > 60Kontaminasi rendah ( memenuhi kaidah lab.)

Waktu pemeriksaan rata-rata 2 jam

BA K T I H U S A D

A

             

No. Kit ManufacturerType of

kit Sensitivity Specificity Month1 Abbott HIV 1/2 gO Abbott EIA 100.00 99.43 December 20012 Enzygnost anti-HIV 1/2 Plus Dade Behring EIA 99.34 98.30 December 20013 Murex HIV-1.2.O Abbott EIA 100.00 97.16 December 20014 HIV Uniform II Ag.Ab Organon Teknika EIA 98.68 96.59 December 20015 Vidas HIV Duo BioMerieux EIA 98.68 97.16 December 20016 Serodia HIV-1/2 Fujirebio Rapid 98.68 93.71 December 20017 Entebe HIV Dipstick Hepatika Laboratories Rapid 98.03 99.43 December 2001

8 Immunocomb II HIV 1&2 BiSpot PBS Orgenics Rapid 98.68 99.43 December 2001

9 HIV Spot Genelabs Diagnostics Rapid 94.70 100.00 December 2001

10 Hexagon HIV Human Rapid 97.37 100.00 December 200111 Determine HIV ½ Abbott Rapid 98.68 100.00 December 200112 HIV 1&2 Antibody Rapid

PemeriksaantOncoprobe Biotech Rapid 97.39 98.86 December 2001

13 Eucardio HIV EIA Lab Inc EIA 49.34 98.30 December 200114 HIVase 1+2 General Biologicals EIA 84.21 90.91 December 200115 dBest One Step HIV-1/HIV-2

Pemeriksaant StripAmeriTek Rapid 98.03 80.11 December 2001

16 Capillus HIV-1/HIV-2 Trinity Biotech Rapid 96.05 99.43 December 200117 Genie II HIV-1/HIV-2 BioRad Rapid 95.39 99.43 December 2001

HASIL EVALUASI REAGEN HIV DARI RSCM

(Per Mei 2010)

BA K T I H U S A D

A

18SD HIV 1/2 ELISA 3.0 Standard Diagnostics EIA 98.03 98.86 August 2002

19SD HIV 1/2 3.0 Standard Diagnostics Rapid 99.33 99.44 August 2002

20Rapid HIV 1&2 Double Spot Biotech Atlantic Rapid 95.97 100.00 August 2002

21Vironostika Uniform II HIV Plus O Organon Teknika/BioMerieux

EIA 100.00 99.43 August 2002

22HIV 1&2 Antibody Rapid Pemeriksaant version 2002

Oncoprobe Biotech Rapid 98.68 98.30 18 November 2002

23Virolisa HIV 1 + 2 Index Union Diagnostics

EIA 99.40 100.00 27 December 2002

24HIV Tridot J Mitra Rapid 95.36 100.00 31 December 2002

25Ortho HIV-1/HIV-2 Antibody Capture

Ortho Diagnostics EIA 98.68 99.43 28 February 2003

26BioPemeriksaant Anti-HIV Tetra ELISA

BioPemeriksaant EIA 100.00 100.00 17 June 2003

27Human HIV-1+ 2 Human EIA 98.68 97.16 30 June 2003

28HIV Combi EIA Roche Diagnostics EIA 98.03 100.00 2 July 2003

29Hexagon HIV 3rd generation Human Rapid 99.34 98.30 30 July 2003

30Advance Quality Rapid HIV Pemeriksaant

Intec Rapid 98.68 98.86 6 August 2003

31Acon HIV 1/2 Acon Rapid 99.34 97.73 25 August 2003

32Detect HIV Adaltis EIA 98.68 94.32 31 August 2003

33Entebe anti-HIV Cassette Hepatika Laboratories Rapid 98.68 98.86 31 August 2003

34Entebe anti-HIV Strip Hepatika Laboratories Rapid 98.03 98.30 31 August 2003

HASIL EVALUASI REAGEN HIV DARI RSCM (Per Mei 2010)

BA K T I H U S A D

A

35Vitros HIV ECI Ortho Diagnostics EIA 98.68 99.44 12 December 2003

36Diaspot HIV 1/2 ? Rapid 98.68 89.20 23 February 200437Vironostika HIV Uniform II Ag/Ab

(2004)BioMerieux EIA 100.00 100.00 30-Sep-04

38Uni-Gold Recombigen HIV Trinity Biotech Rapid 98.00 98.86 24 November 2004

39HIV 1/2 Human Immunodeficiency Virus Rapid Pemeriksaant Singke Use Kit

Elitzmedi Rapid 97.33 99.43 19 January 2005

40Architect HIV Ag/Ab Combo Abbott Diagnostics EIA 100.00 99.43 18 February 2005

41 Instant Chek HIV EY Laboratories Rapid 95.33 86.36 22 March 2005

42Acon HIV 1/2/O Triline Acon Rapid 99.33 96.59 15 April 2005

43Elecsys HIV Combi Roche Diagnostics EIA 100.00 93.75 30 May 2005

44Genedia HIV 1/2 Rapid 3.0 Green Cross Rapid 99.33 98.30 30 May 2005

45Vitros HIV ECI Ortho Diagnostics EIA 100.00 98.30 1 July 2005

46Onsight HIV Stat Rapid HIV-1/2 Serum/Plasma Pemeriksaant

Amgenix Rapid 97.33 99.43 1 July 2005

47Master Screen Rapid Screen Pemeriksaant for HIV 1 and HIV 2

Masters Health Labs Rapid 99.33 100.00 4 July 2005

48Axsym HIV 1/2 Combo Abbott Diagnostics EIA 100.00 100.00 16 September 2005

49Wantai Screening HIV 1+2 Beijing Wantai Biolocical Pharmacy Enterprice

EIA 100.00 94.89 5 October 2005

50Murex HIV Ag/Ab Combination Abbott Diagnostics EIA 100.00 99.43 5 October 2005

51HIV 1&2 Antibody Rapid Pemeriksaant 4th generation

Oncoprobe Rapid 100.00 100.00 26 October 2005

52Genscreen Ultra HIV Ag-Ab BioRad EIA 100.00 97.16 8 April 2006

53Vidas HIV Duo Ultra BioMerieux EIA 98.68 98.30 10 February 2006

54Fokus Diagnostic Rapid Pemeriksaant Anti-HIV 1/2 Cassette

Fokus Diagnostic Rapid 100.00 99.43 2 March 2006

BA K T I H U S A D

A

55Advance HIV 1&2 ELISA Pemeriksaant kit (3rd generation)

InTec Product Inc EIA 100.00 99.43 2 March 2006

56Microlisa HIV J Mitra EIA 96.67 96.02 13 March 2006

57One Step Anti-HIV (1&2) Tri-line Pemeriksaant

InTec Product Inc Rapid 99.33 99.43 12 April 2006

58Bioelisa HIV 1+2 Biokit EIA 98.67 98.30 5 May 2006

59Carestart TM HIV 1/2 Access Bio Rapid 98.67 99.43 5 May 2006

60Virolisa anti-HIV 1+2 Indec Diagnostica EIA 100.00 89.20 23 June 2006

61Anti-HIV 1+2 ELISA Axiom EIA 99.33 96.02 23 June 2006

62HIVase 1+2 General Biologicals EIA 99.33 98.86 10 July 2006

63Rapid HIV 1+2 Blood Pemeriksaant

? (Distributed by PT Asia Agrindo Internasional)

Rapid 82.67 100.00 27 November 2006

64Core HIV 1 & 2 Core Diagnostics Rapid 96.67 98.86 27 November 2006

65Determine HIV 1/2 Abbott Diagnostics Rapid 99.33 99.43 13 December 2006

66Foresight HIV 1/2/O EIA Acon EIA 100.00 96.59 18 June 2007

67 Immunocomb II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab

Orgenics Rapid 96.71 98.86 3 September 2007

68Serodia HIV-1/2 Fujirebio Rapid 99.33 90.91 29 November 2007

69Signal HIV-1/2 Span Diagnostics Rapid 98.67 99.43 7 January 2008

70AIM HIV 1/2 Rapid Card Akurat Intan Madya Rapid 94.00 99.43 9 January 2008

71Vikia HIV 1/2 BioMerieux Rapid 100.00 100.00 1 February 2008

BA K T I H U S A D

A

72 One Step Cassette Style Anti HIV 1+2 2 lines

IND Diagnostics Inc Rapid 99.33 99.43 18 April 2008

73 HIV 1/2 Ultra Rapid Fast Rapid 89.12 99.43 15 May 2008

74 Determine HIV 1/2 Inverness Medical Rapid 99.33 97.73 26 May 2008

75 Mirawell Rapid HIV Pemeriksaant

Medmira Rapid 95.33 98.30 26 May 2008

76 Fokus Diagnostic Rapid Pemeriksaant Anti-HIV 1/2 Cassette

Fokus Diagnostic Rapid 100.00 98.86 14 July 2008

77 Entebe HIV Dipstick Hepatika Laboratories Rapid 98.00 98.86 6 October 2008

78 SFD HIV 1/2 PA Fujirebio-Biorad Rapid 100.00 78.98 10 November 2008

79 One Step Anti-HIV (1&2) Tri-line Pemeriksaant

InTec Product Inc Rapid 99.34 100.00 22 December 2008

80 Axsym HIV 1/2 gO Abbott Diagnostics EIA 100.00 99.43 2 March 2009

81 Oraquick Advance Rapid HIV-1/2 Antibody Pemeriksaant

Orasure Rapid 98.00 99.43 22 May 2009

82 Insti HIV 1+2 Biolytica Rapid 99.33 100.00 22 June 2009

83 Uji HIV Pakar Biomedika Rapid 99.33 94.89 22 June 2009

84 Doublecheck HIV-1 & HIV-2 Orgenics Rapid 99.33 99.43 6 August 2009

85 Determine 1/2 HIV Ab/Ag Combo Inverness Medical Rapid 98.00 98.30 7 December 2009

86 Vironostika HIV Ag/Ab BioMerieux EIA 100.00 100.00 7 December 2009

87 Acon HIV 1/2/O Triline Acon Rapid 99.33 100.00 5 May 2010

BA K T I H U S A D

ABA K T I H U S A D

A