1. Setelah mendapatkan jaringan beku, sebaiknya dibekukan dalam nitrogen cair. Penting bahwa jaringan harus dibekukan secepat mungkin untuk menghindari pembentukan kristal es pada jaringan.2. Pastikan cryostat adalah pada suhu operasi yang tepat -20 C hingga -30 C Tempatkan sejumlah kecil OCT atau embedding media bagian beku lain yang sesuai pada disk objek cryostat (pastikan disk pada suhu kamar. Sebelum pemasangan spesimen).3. Posisikan spesimen beku di tengah obyek disk dan menempatkan disk pada cryobar dalam cryostat untuk memulai proses pembekuan cepat4. Menggunakan "Histo-Freeze" atau aerosol pendingin lainnya yang sesuai, semprot sekitar pinggiran objek disk, sebagai OCT membeku akan mulai berbalik dari gel yang jelas untuk zat padat putih.5. Sebelum disk dibekukan add cukup padat OCT untuk menutupi bagian atas spesimen dan cepat menempatkan extractor panas di atas spesimen. Ekstraktor panas melayani dua tujuan, (1) cepat membeku OCT dan jaringan dan (2) menghasilkan permukaan tertanam datar untuk memotong mudah.6. Semprot dengan pendingin jika diperlukan untuk mempercepat proses pembekuan7. Tempatkan disk objek dalam pemegang objek disk yang mikrotom dan mengencangkan sekrup set atau penjepit.8. Pastikan bahwa ada cukup clearance antara blok dan pisau mikrotom.9. .Pindahkan blok ke arah ujung pisau. Pastikan ratchet terlepas dari gigi mikrometer. Putar roda gila dengan tangan kanan dan mulai memutar bruto menyesuaikan roda (pada stoke bawah) perlahan-lahan dengan tangan kiri. Menghadapi off cukup Oktober sampai bagian penuh spesimen terlihat.10. Melibatkan ratchet pada gigi mikrometer, memotong dan membuang dua atau tiga bagian pertama.11. Memiliki fiksatif yang tepat (95% ETOH untuk H & E) dan slide siap. Hidupkan roda gila dengan tangan kanan. Sebagai blok datang dalam kontak dengan pisau tepi bagian akan bergerak ke bawah pisau dan mulai menggulung. Tahan bagian bawah dengan sedikit kekuatan mungkin dan membimbing di sepanjang pisau menggunakan cat unta rambut kuas di tangan kiri. Lanjutkan dipotong sampai bagian spesimen penuh telah diperoleh, namun berhenti sebelum melewati Oktober tersisa. Salah satu tepi bagian diadakan datar dengan semak cat dan yang lainnya dengan ujung pisau.12. Mengambil slide dengan tangan kanan dan mengubahnya sehingga sisi atas menghadap ke arah pisau.13. 13. Hati-hati menurunkan slide ke pisau, menjaga paralel geser ke bagian. Sebagai jaringan datang ke dalam kontak dengan slide OCT dan jaringan akan mencair menyebabkan jaringan untuk mematuhi slide.14. 14. Tempatkan slide dalam fiksatif. Jika pewarnaan H & E bagian, menggunakan 95% ETOH dan memperbaiki selama 30 detik.

Spesimen diletakkan pada gamit metal dan dibekukan secara cepat pada suhu sekitar -20o C. Pada suhu ini, semua jaringan akan mengeras. Selanjutnya dipotong beku dengan microtome yang merupakan bagian cryostatPotongan itu diletakkan pada slide kaca dan diwarnai (biasanya dengan hematoxylin dan eosin). Persiapan sampel sangat cepat dibandingkan teknik histologi tradisional (sekitar 10 menit).