identifikasi benzo(a)pyrene pada ikan bakar …repository.ump.ac.id/534/1/cover_felentina dhilah...

1

IDENTIFIKASI BENZO(a)PYRENE PADA IKAN BAKAR

DENGAN METODE GAS CHROMATOGRAPHY-MASS

SPECTROMETRY (GC-MS)

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Diajukan Oleh:

FELENTINA DHIAH PAMUJI

0908010003

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2013

2

IDENTIFIKASI BENZO(a)PYRENE PADA IKAN BAKAR

DENGAN METODE GAS CHROMATOGRAPHY- MASS

SPECTROMETRY (GC-MS)

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Diajukan Oleh:

FELENTINA DHIAH PAMUJI

0908010003

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2013

i

Identifikasi Benzo (a) Pyrene..., Felentina Dhilah Pamuji, Farmasi UMP, 2013

3

ii


4

iii


5

iv


6

INTISARI

FELENTINA DHIAH PAMUJI. Identifikasi Benzo(α)pyrene pada Ikan Bakar

dengan Menggunakan Metode Gas Chromatography Mass Spectrometry

(GCMS).

Dibawah Bimbingan Dr. NUNUK ARIES NURULITA dan SUPARMAN

Latar Belakang : Teknik pengolahan makanan dengan cara dibakar akan

membentuk senyawa HPA. Benzo(α)pyerene merupakan salah satu jenis dari

senyawa hidrokarbon polisiklik aromatik (HPA) yang mempunyai tingkat

karsinogenitas paling tinggi. Batas maksimum kandungan benzo(α)pyrene dalam

makanan tidak boleh lebih dari 10 ppb. Konsentrasi benzo(α)pyrene dalam

makanan sangat kecil sehingga diperlukan metode yang selektif, sensitif dan

mempunyai derajat pemisahan yang tinggi. Salah satu metode analisis yang

memenuhi adalah Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS).

Tujuan Penelitian : Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa

benzo(α)pyrene pada ikan bakar menggunakan Gas Chromatography Mass

Spectrometry (GCMS).

Metode Penelitian : Metode penelitian yang digunakan yaitu penelitian

eksperimental. Sampel ikan bakar dianalisis menggunakan GCMS untuk

mengetahui adanya senyawa benzo(α)pyrene dalam sampel.

Hasil :

Dari validasi metode yang telah dilakukan diperoleh persamaan garis regresi

linear Y = 2088,3x + 948,967 dan nilai koefisien korelasi (r) sebesar 0,997.

Recovery sebesar 34386,20%. Uji presisi dengan nilai SD sebesar 372,016 μg/mL

, KV sebesar 13,78% dan ketelitian alat 86,3%. Nilai LOD sebesar 0,118 ppm dan

LOQ sebesar 0,393 ppm. Berdasarkan kromatogram puncak benzo(α)pyrene

muncul pada waktu retensi antara 20-25 menit.

Kesimpulan :

Hasil dari validasi metode menunjukan nilai linearitas, batas deteksi dan presisi

yang baik tetapi hasil dari nilai recovery tidak memenuhi syarat. Nilai presisi

dikatakan memenuhi syarat jika RSD berkisar antara 5-15 % sedangkan nilai

recovery dikatakan memenuhi syarat apabila harga perolehan kembali 80-120 %.

Hal ini kemungkinan disebabkan dari kondisi alat yang digunakan serta sampel

yang mengandung minyak sehingga masih ada sampel yang tertinggal di dalam

ruang injektor dan menguap pada injekkan berikutnya. Analisis pada kedua jenis

sampel yang dibakar dengan waktu yang berbeda tidak menunjukkan adanya

kandungan benzo(α)pyrene tetapi pada sampel yang digunakan sebagai kontrol

mengandung benzo(α)pyrene yang muncul pada waktu retensi 21,262 menit.

Kata Kunci : Benzo(α)pyrene, PAH, ikan bakar, GCMS

v


7

ABSTRACT

FELENTINA DHIAH PAMUJI. Identification of Benzo(α)pyrene in Roasted

Fish with Method Using Gas Chromatography Mass Spectrometry (GCMS).

Under supervising Dr. NUNUK ARIES NURULITA and SUPARMAN

Background: The grill and roast process on organic compound produce PAH

compound. Benzo(α)pyerene is one of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH)

which has high carcinogenic properties. Maximum limit of benzo(α)pyerene in

food at least 10 ppb. BaP concentration in food is very small that required

methods are selective, sensitive and has a high degree of separation. The method

to analyze in this research is Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS).

Objective: The purpose of this research is to identification benzo(α)pyrene on

roasted fish using Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)

Methods: Roasted fish samples were analyzed using GCMS to determine

benzo(α)pyrene in the sample

Result: Validation method has been done and as a result, obtain it had a linear

regression line equation of Y = 2088.3 x + 948.967 and correlation coefficient (r)

of 0.997. Value recovery (recovery %) of 34386.20%. SD precision test with a

value of 372.016 μg/mL, KV amounted to 13.78% and 86.22 precision tools this

result lower than the standard, the value of LOD is 0.118 ppm and LOQ is 0.393

ppm. Based on chromatogram peak benzo(α)pyrene appeared at a retention time

between 20-25 minutes.

Conclusion: Results of validation method shown the value of linearity, limit of

detection and precision were good, but the result of recovery was not good

because it did not qualify. It happened because the condition of the equipment

which used, samples containing oil injected so there was the possibility that the

sample did not evaporate and remained in the injector chamber. Analysis on the

two types roasted fish samples with different times did not show any compound

benzo(α)pyrene but samples were used as a control containing benzo(α)pyrene

which appears at a retention time of 21.262 minute.

.

Keywords: Benzo(α)pyrene, PAH, Roasted fish, GCMS

vi


8

MOTTO

Jangan mengeluhkan masalah, karena Tuhan mempunyai tujuan

tuk perjuanganmu saat ini. Pelajarilah apa yang hendak Tuhan

ajarkan.

Jangan berhenti berupaya ketika menemui kegagalan. Karena

kegagalan adalah cara Tuhan mengajari kita tentang arti

kesungguhan.

Serta

Syukurilah kesulitan. Karena terkadang kesulitan mengantar

kita pada hasil yang lebih baik dari apa yang kita bayangkan.

vii


9

HALAMAN PERSEMBAHAN

Skripsi ini penulis persembahkan untuk orang-orang yang berpengaruh

dan mewarnai kehidupan penulis.

1. Ayahku tercinta Bapak Kuswanto yang selalu mendukung dan memberikan

semangat untuk menyelesaikan skripsi ini.

2. Ibuku yang tercinta Ibu Suwarsini yang selalu memberikan saya inspirasi,

motivasi, semangat, do’a, dan nasehat kepada penulis.

3. Dosen pembimbingku Bu Nunuk dan Pak Parman, terimakasih untuk

kesabaran, semangat, motivasi dalam membimbing penulis menyelesaikan

skripsi ini.

4. Adikku yang tersayang Wahyu Ramadhan Dwi Wibowo yang selalu

memberikan semangat dan dukungannya kepada penulis.

5. Agung Prisnanto yang selalu memberikan semangat, do’a, dukungan dan

kesabarannya kepada penulis.

6. Semua keluarga besar, terima kasih atas do’a, semangat dan dukungan.

7. Sahabat-sahabatku yang selalu menemani dalam suka dan duka.

8. Teman-teman Fakultas Farmasi angkatan 2009.

viii


10

PRAKATA

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat ALLAH SWT atas segala rahmat

dan hidayahNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian (skripsi) yang

berjudul “IDENTIFIKASI BENZO(α)PYRENE PADA IKAN BAKAR

DENGAN MENGGUNAKAN METODE GAS CHROMATOGRAPHY-MASS

SPECTROMETRY (GC-MS)”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi syarat dalam

memperoleh gelar S1 di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak lain,

penulis tidak dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik. Oleh karena itu, pada

kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :

1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Rektor Universitas Muhammadiyah

Purwokerto

2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si, Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi dan

dosen pembimbing I yang telah memberikan arahan, masukan dan bimbingan

dalam penyusunan skripsi ini.

3. Suparman, M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah memberikan

arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi ini.

4. Seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan ilmunya

sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini.

5. Bapak Andi Suhendi, S.Farm., Apt selaku kepala laborat kimia analisis

Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah membantu dan

membimbing penulis dalam penelitian ini

6. Bapak Alwathoni yang telah membantu jalannya penelitian ini.

7. Kedua orang tuaku tercinta yang telah memberikan dukungan moral, material

dan spiritual.

8. Lusyana Dewi Apriani, Siti Mundiyah, Resti Widyastuti yang telah berjuang

bersama, terimakasih atas kerjasama, kesabaran serta suka dukanya selama

penelitian berlangsung.

ix


11

9. Teman-teman seperjuangan Fakultas Farmasi Kelas A angkatan 2009 (Aan,

Agil, Erma, Dhani, Hendri, Oyi, Sandra), terimakasih atas kekompakan dan

kebersamaannya selama ini.

10. Semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat saya sebutkan satu-

persatu.

Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kata

sempurna, untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang

membangun demi perbaikan penelitian di masa mendatang.

Semoga Allah SWT senantiasa membalas amal baik yang telah

Bapak/Ibu/Saudara berikan, dan harapan penulis semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi penulis sendiri pada khususnya dan bagi semua pihak yang

membutuhkan..

x


12

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN ........................................................................ ii

HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... iii

HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ iv

INTISARI ......................................................................................................... v

ABSTRAK ...................................................................................................... vi

MOTTO .......................................................................................................... vii

PERSEMBAHAN ........................................................................................... viii

PRAKATA ...................................................................................................... ix

RIWAYAT HIDUP .......................................................................................... xi

DAFTAR ISI ................................................................................................... xii

DAFTAR TABEL .......................................................................................... xv

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xvi

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xvii

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang ......................................................................... 1

B. Rumusan Masalah ................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ..................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Benzo(α)pyrene ........................................................................ 4

B. Ikan Gurameh dan Ikan Lele .................................................... 6

C. Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GCMS) ................ 7

D. Gas Chromatography ............................................................... 8

E. Mass Spectrometry .................................................................. 10

xi


13

BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian ......................................................................... 11

B. Variabel Penelitian ..................................................................... 11

C. Definisi Variabel Operasional ................................................... 11

D. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................... 11

E. Bahan dan Alat .......................................................................... 12

1. Bahan .................................................................................. 12

2. Alat ...................................................................................... 12

F. Cara Penelitian .......................................................................... 12

1. Preparasi Sampel ................................................................. 12

2. Ekstraksi .............................................................................. 13

3. Analisis Kualitatif dan Kuantitatif menggunakan GC-MS . 13

4. Pembuatan Larutan Baku dan Kurva Baku ......................... 13

a. Pembuatan Larutan Baku Benzo(α)pyrene 100 ppm ...... 13

b. Pembuatan Kurva Baku .................................................. 13

5. Validasi Metode .................................................................. 14

a. Presisi ............................................................................. 14

b. Linearitas ........................................................................ 14

c. Penentuan LOD dan LOQ .............................................. 15

d. Akurasi ........................................................................... 15

G. Analisis Data ............................................................................. 16

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Preparasi Sampel ....................................................................... 17

B. Pembuatan Seri Konsentrasi Standar ........................................ 18

C. Validasi Metode Analisis ........................................................... 18

1. Linearitas ................................................................................ 18

2. Batas Deteksi LOD (Limit of Detection) dan Batas Kuantitasi

LOQ (Limit of Quantity) ........................................................ 20

3. Presisi ..................................................................................... 21

4. Akurasi ................................................................................... 21

D. Analisis Menggunakan GCMS ................................................. 22

xii


14

BAB V PENUTUP

A. Kesimpulan ................................................................................ 26

B. Saran .......................................................................................... 26

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 27

LAMPIRAN ..................................................................................................... 31

xiii


15

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

Tabel 1. Kondisi alat GCMS ......................................................................... 13

Tabel 2. Hasil ekstraksi 50 gram serbuk daging ikan lele dan gurameh ....... 17

Tabel 3. Uji linearitas larutan standar ............................................................ 19

Tabel 4. Data hasil uji LOD dan LOQ ........................................................... 20

Tabel 5. Data hasil uji presisi ........................................................................ 21

Tabel 6. Data hasil uji recovery ..................................................................... 22

xiv


16

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 : Surat permohonan ijin penelitian

Lampiran 2 : Perhitungan seri konsentrasi larutan standar benzo(α)pyrene

Lampiran 3 : Perhitungan linearitas

Lampiran 4 : Perhitungan limit deteksi

Lampiran 5 : Perhitungan uji presisi

Lampiran 6 : Perhitungan uji recovery

Lampiran 7 : Hasil analisis sampel

Lampiran 8 : Metode GCMS

Lampiran 9 : Pola fragmentasi

xv


identifikasi benzo(a)pyrene pada ikan bakar …repository.ump.ac.id/534/1/cover_felentina dhilah...

Documents