perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id pengaruh ... · perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGARUH KOMBINASI EKSTRAK KUNYIT (Curcuma longa L.) DAN

EKSTRAK PARE (Momordica charantia L.) TERHADAP KADAR

KOLESTEROL TOTAL TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

Candrika Izzatika P.

G.0008067

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

Surakarta

2011


commit to user ii

PERSETUJUAN

Skripsi dengan judul: Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kunyit (Curcuma longa

L.) dan Ekstrak Pare (Momordica charantia L.) terhadap Kadar Kolesterol

Total Tikus Putih (Rattus norvegicus)

Candrika Izzatika P., G.0008067, Tahun 2011

Telah disetujui untuk dipertahankan di hadapan Tim Ujian Skripsi Fakultas

Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta

Pada Hari , Tanggal 2011

Pembimbing Utama

Yul Mariyah, dra., M. Si., Apt

NIP : 19510329 198303 2 001

Pembimbing Pendamping

Lilik Wijayanti, dr., M.Kes

NIP: 19690305 199802 2001

Penguji Utama

Kisrini, dra., M.Si., Apt

NIP : 19550804 198303 2 001

Anggota Penguji

H. Andy Yok, drg., M.Kes

NIP: 19521120 198601 1001

Tim Skripsi

Nur Hafidha Hikmayani, dr., M.Clin Epid.

NIP: 19761225 200501 2 001


commit to user

iii

PERNYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang

pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi,

dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang

pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali secara tertulis diacu dalam

naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 2011


NIM. G.0008067


commit to user

iv

ABSTRAK

Candrika Izzatika P., G.0008067, 2011. Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kunyit (Curcuma longa L.) dan Ekstrak Pare (Momordica charantia L.) terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus norvegicus). Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak pare dalam menurunkan kadar kolesterol total pada tikus putih (Rattus norvegicus). Metode Penelitian: Penelitian ini adalah eksperimen laboratorik dengan rancangan penelitian pre and post test control group design. Subjek dari penelitian ini adalah 25 ekor tikus putih (Rattus norvegicus), berumur kurang lebih 3 bulan dengan berat 200 gram. Subjek dibagi ke dalam 5 kelompok perlakuan. Seluruh kelompok diadaptasikan selama 7 hari. Pada hari ke-8, dilakukan pengambilan sampel darah dari pleksus retroorbitalis untuk pengukuran kadar kolesterol total pre test. Kemudian kelima kelompok tersebut diinduksi dengan pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml/200 gram BB dua kali sehari. Untuk kelompok kontrol positif diberi tambahan simvastatin 0,5 mg/200 gram BB/hari, kelompok perlakuan 1 diberi dosis ekstrak kunyit 80 mg/200 gram BB/hari, kelompok perlakuan 2 diberi dosis ekstrak pare 100 mg/200 gram BB/hari dan kelompok perlakuan 3 diberi dosis kombinasi ekstrak kunyit 40 mg serta ekstrak pare 50 mg/200 gram BB/hari. Pada hari ke-22, dilakukan pengambilan sampel darah dari pleksus retroorbitalis untuk pengukuran kadar kolesterol total post test. Kemudian data dianalisis menggunakan uji One way ANOVA. Hasil Penelitian: Hasil analisis statistik dengan menggunakan uji One way ANOVA menunjukkan bahwa terdapat perbedaan kadar kolesterol total yang nyata antara kelima kelompok perlakuan (p = 0,019). Post Hoc Test menunjukkan kelompok perlakuan 1, 2, dan 3 memiliki efektivitas yang sama dengan kelompok kontrol positif dalam menurunkan kadar kolesterol total. Simpulan Penelitian: Kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak pare berpengaruh terhadap penurunan kadar kolesterol total tikus putih yang diinduksi pakan hiperkolesterolemik. Kata kunci: ekstrak kunyit, ekstrak pare, kadar kolesterol total


commit to user

v

ABSTRACT Candrika Izzatika P., G.0008067, 2011. The Combination Effect of Turmeric (Curcuma longa L.) Extract and Bitter Melon (Momordica charantia L.) Extract to the Serum Total Cholesterol Level in White Rats (Rattus norvegicus) Objective: The purpose of this research is to find out whether the combination of turmeric and bitter melon extract has an effect to the serum total cholesterol level in white rats (Rattus norvegicus) fed by high fat diet. Methods: This research is a laboratoric experiment using experimental randomized control pre and post test group design. Subjects of this research are 25 male white rats (Rattus norvegicus), 3 months of age and 200 grams of body weight. Subjects were divided into five groups. All groups were adapted for 7 days. On the 8th day, blood samples were collected from the retroorbitalis plexus of white rats for the measurement of serum total cholesterol level. Furthermore those groups were fed by 2,5 ml/200 gram body weight of high fat diet twice a day. For the treatment, the positive control group received 0,5 mg/200 gram body weight/day of simvastatin, the first group received 80 mg/200 gram body weight/day of turmeric extract, the second group received 100 mg/200 gram body weight/day of bitter melon extract and the third group received combination of 40 mg/200 gram body weight/day of turmeric extract and 50 mg/200 gram body weight/day of bitter melon extract. On the 22nd day of treatment, blood samples were collected from the retroorbitalis plexus of white rats for the measurement of serum total cholesterol level. Data was then analyzed by using One way ANOVA. Results: The statistical analysis by using One way ANOVA shows a significant difference in serum cholesterol level among the five groups of treatment with p value = 0,019. Post Hoc Test shows that group 1, 2 and 3 have the same effectiveness as the positive control group to decrease the serum total cholesterol level. Conclusion: The combination extract of turmeric and bitter melon has an effect to decrease the serum total cholesterol level in white rats fed by high fat diet. Key words: turmeric extract, bitter melon extract, total cholesterol level


commit to user

vi

PRAKATA

Puji syukur kehadirat Allah Subhanahu Wata’ala atas rahmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang berjudul “Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kunyit (Curcuma longa L.) dan Ekstrak Pare (Momordica charantia L.) terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus norvegicus)”. Penyusunan skripsi ini digunakan dalam rangka memenuhi salah satu syarat yang ditetapkan untuk memperoleh gelar sarjana kedokteran di Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Pada kesempatan ini, penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada: 1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., SpPD-KR-FINASIM, selaku Dekan FK

UNS Surakarta. 2. Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. 3. Yul Mariyah, Dra., Apt., M.Si., selaku Pembimbing Utama yang telah

memberikan bimbingan, masukan, dan motivasi bagi penulis. 4. Lilik Wijayanti, dr., M.Kes., selaku Pembimbing Pendamping , yang telah

memberikan bimbingan, masukan, dan motivasi bagi penulis. 5. Kisrini, Dra., Apt., M.Si., selaku Penguji Utama yang telah memberikan

kritik dan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi ini. 6. Andy Yok, drg., M.Kes., selaku Penguji Pendamping yang telah memberikan

kritik dan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi ini. 7. Staf Instansi Farmasi RSUD Dr. Moewardi yang telah banyak membantu

kelancaran penyusunan skripsi ini. 8. Kedua orang tuaku tercinta beserta kakak dan adikku yang telah memberikan

doa dan motivasi untuk penyelesaian skripsi ini. 9. Semua pihak yang telah membantu penyusunan skripsi ini yang tidak dapat

penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih

jauh dari sempurna, oleh karena itu penulis mengharap saran dan kritik yang membangun kedepannya. Semoga penelitian ini bermanfaat bagi ilmu kedokteran pada umumnya dan bagi para pembaca pada khususnya.

Surakarta, Desember 2011



commit to user

vii

DAFTAR ISI

halaman

PRAKATA ........................................................................................................... vi

DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ................................................................................................ ix

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ x

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xi

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ......................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ......................................................................... 3

BAB II LANDASAN TEORI .......................................................................... 4

A. Tinjauan Pustaka ........................................................................... 4

1. Kunyit ........................................................................................ 4

2. Pare............................................................................................. 8

3. Simvastatin ................................................................................. 9

4. Kolesterol .................................................................................. 11

5. Interaksi Obat ............................................................................ 13

B. Kerangka Pemikiran ...................................................................... 15

C. Hipotesis ....................................................................................... 16

BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 17

A. Jenis Penelitian .............................................................................. 17


commit to user

viii

B. Lokasi Penelitian ........................................................................... 17

C. Subjek Penelitian ........................................................................... 17

D. Teknik Pengambilan Sampel ......................................................... 17

E. Penentuan Besar Sampel ............................................................... 18

F. Identifikasi Variabel ...................................................................... 18

G. Definisi Operasional Variabel ....................................................... 19

H. Rancangan Penelitian .................................................................... 24

I. Alat, Bahan dan Cara Kerja ........................................................... 25

J. Teknik Analisis Statistik ................................................................. 29

BAB IV HASIL PENELITIAN ......................................................................... 30

A. Hasil Penelitian .............................................................................. 30

B. Analisis Data ................................................................................. 31

BAB V PEMBAHASAN .................................................................................. 35

BAB VI SIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 43

A. Simpulan ........................................................................................ 43

B. Saran .............................................................................................. 43

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 44

LAMPIRAN


commit to user

ix

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan Sesudah Perlakuan...29

Tabel 2. Hasil Uji Normalitas Data Shapiro-Wilk .............................................. 31

Tabel 3. Hasil Uji Homogenitas Varians ............................................................ 32

Tabel 4. Hasil Uji One Way ANOVA ................................................................ 32


commit to user

x

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Senyawa Kurkumin, Demetoksikurkumin, Bisdemetoksikurkumin....6


commit to user

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan Setelah Perlakuan

Lampiran 2. Uji Normalitas Distribusi

Lampiran 3. Uji Homogenitas dan Uji One way ANOVA

Lampiran 4. Hasil Post Hoc Test

Lampiran 5. Volume Maksimal Larutan Sediaan Uji yang Dapat Diberikan pada

Hewan Uji

Lampiran 6. Konversi Dosis untuk Manusia dan Berbagai Jenis Hewan

Lampiran 7. Pembuatan Ekstrak Kunyit

Lampiran 8. Pembuatan Ekstrak Pare

Lampiran 9. Surat Keterangan Pengukuran Kadar Kolesterol Total

Lampiran 10. Foto-Foto Penelitian

Lampiran 11. Ethical Clearance


commit to user

xii

PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsi dengan judul : Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kunyit (Curcuma longa

L.) dan Ekstrak Pare (Momordica charantia L.) terhadap Kadar Kolesterol

Total Tikus Putih (Rattus norvegicus)

Candrika Izzatika P., NIM : G.0008067, Tahun: 2011

Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret

Pada Hari Sabtu, Tanggal 3 Desember Tahun 2011

Pembimbing Utama

Nama : Yul Mariyah, dra., M.Si., Apt. NIP : 19510329 198303 2 001 ……………………… Pembimbing Pendamping

Nama : Lilik Wijayanti, dr., M.Kes NIP : 19690305 199802 2 001 .……………………...

Penguji Utama

Nama : Kisrini, dra., M. Si., Apt NIP : 19550804 198303 2 001 ………………………

Anggota Penguji

Nama : H. Andy Yok, drg., M.Kes NIP : 19521120 198601 1 001 ……………………… Surakarta, Desember 2011

Ketua Tim Skripsi Dekan FK UNS Muthmainah, dr., M.Kes Prof. Dr. dr. Zainal Arifin Adnan, SpPD-KR NIP : 19660702 199802 2 001 NIP : 19510601 197903 1 002


commit to user

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Penyakit Jantung Koroner (PJK) merupakan penyebab kematian

tertinggi di dunia (Davis dan Donnan, 2006). Menurut data yang dikeluarkan

oleh World Health Organization (WHO), 7,2 juta orang meninggal akibat

PJK (Mangoenprasodjo, 2005). Grundy (2006) menyebutkan bahwa

penyebab terpenting penyakit ini ialah aterosklerosis koroner. Aterosklerosis

adalah suatu kelainan dari arteri besar dan sedang, di mana lesi lemak timbul

pada permukaan dalam dinding arteri. Faktor yang paling penting dalam

menyebabkan aterosklerosis adalah konsentrasi kolesterol yang tinggi dalam

plasma darah atau hiperkolesterolemia (Guyton dan Hall, 2007).

Perkembangan aterosklerosis dapat dihambat apabila kadar kolesterol

dalam darah berhasil dikontrol dengan baik. Penurunan kadar kolesterol dapat

dilakukan dengan cara non-farmakologis melalui pengaturan diet dan olah

raga, serta secara farmakologis yaitu dengan penggunaan obat-obatan. Dalam

pelaksanaan, terbukti cukup sulit untuk menurunkan kadar kolesterol melalui

cara non-farmakologis saja. Obat-obatan seperti golongan statin, fibrat dan

asam nikotinik, berperan penting dalam kesuksesan terapi penurunan kadar

kolesterol (Suyatna, 2007).

Salah satu golongan statin yang cukup terkenal yaitu simvastatin. Obat

ini dapat menghambat sintesis kolesterol dalam hati dengan cara menghambat


commit to user

2

enzim hidroksi metil glutaril KoA (HMG KoA) reduktase (Suyatna, 2007).

Saat ini, simvastatin masih cukup efektif dan aman untuk pengobatan

penyakit kardiovaskuler seperti PJK (Bahri, 2004).

Akhir-akhir ini, telah banyak pula dilakukan penelitian mengenai

kandungan dari tanaman herbal yang berkhasiat untuk menurunkan kadar

kolesterol. Jang dkk (2008) menyebutkan bahwa kurkumin, suatu senyawa

polifenol yang terkandung di dalam kunyit (Curcuma longa L.), mampu

menurunkan kadar kolesterol total. Namun, Monson dan Schoenstadt (2010)

mengemukakan bahwa kurkumin ternyata memiliki efek samping berupa

perdarahan pada mukosa gastrointestinal. Selain kunyit, terdapat herbal lain

yang juga berkhasiat menurunkan kadar kolesterol, yaitu pare. Momordisin,

senyawa aktif yang terkandung dalam pare, tidak hanya mampu menurunkan

kadar kolesterol, tetapi juga memiliki efek proteksi pada saluran

gastrointestinal (Alam dkk, 2009).

Sampai saat ini, penelitian mengenai pengaruh kombinasi ekstrak

kunyit dan pare terhadap kadar kolesterol total belum banyak dilakukan. Oleh

karena itu, peneliti ingin mengetahui pengaruh pemberian kombinasi ekstrak

kunyit dan pare dalam menurunkan kadar kolesterol total pada tikus putih.

B. Rumusan Masalah

Apakah pemberian kombinasi ekstrak kunyit (Curcuma longa L.) dan

ekstrak pare (Momordica charantia L.) dapat menurunkan kadar kolesterol

total tikus putih (Rattus norvegicus)?


commit to user

3

C. Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian

kombinasi ekstrak kunyit (Curcuma longa L.) dan ekstrak pare (Momordica

charantia L.) dalam menurunkan kadar kolesterol total pada tikus putih

(Rattus norvegicus).

D. Manfaat Penelitian

1. Aspek Teoritik:

Penelitian ini diharapkan dapat memperkaya pengetahuan di

bidang farmasi dan berbagai disiplin ilmu terkait penggunaan kunyit dan

pare untuk menurunkan kadar kolesterol total.

2. Aspek Aplikatif:

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi bagi

masyarakat mengenai pemanfaatan ekstrak kunyit dan pare dalam terapi

untuk menurunkan kadar kolesterol total.


commit to user

4

BAB II

LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka

1. Kunyit

a. Klasifikasi

Dalam taksonomi tumbuhan, kunyit diklasifikasikan sebagai

berikut:

a. Kingdom : Plantae

b. Divisio : Magnoliophyta

c. Kelas : Liliopsida

d. Ordo : Zingiberales

e. Famili : Zingiberaceae

f. Genus : Curcuma

g. Spesies : Curcuma longa L.

(Rukmana, 2003)

b. Morfologi

Secara umum, tanaman kunyit merupakan terna parenial yang

tumbuh membentuk rumpun. Batangnya semu, tegak, silindris, dan

berwarna hijau kekuningan. Bunga muncul dari ujung batang semu dan

daunnya berbentuk lanset memanjang. Bagian terpenting dari tanaman

kunyit ialah rimpangnya. Rimpang kunyit berbentuk seperti umbi,


commit to user

5

terdapat dalam tanah, bercabang banyak, tebal, berdaging seperti

gasing, dan bagian dalamnya berwarna kuning jingga (Sinaga, 2002).

c. Sifat dan Khasiat

Dewasa ini, kunyit telah banyak digunakan dalam industri obat-

obatan karena mengandung senyawa dengan aktifitas farmakologi yang

beragam. Beberapa penelitian sebelumnya membuktikan bahwa

senyawa yang terkandung dalam kunyit memiliki sifat sebagai

antiaterosklerosis, antiinflamasi, antidiabetik dan antikanker (Joe dkk,

2004; Chattopadhyay dkk, 2004; Araujo dan Leon, 2001).

Peranan kunyit sebagai antiaterosklerosis dibuktikan oleh Quiles

dkk (2002), yang menyatakan bahwa kunyit dapat menurunkan kadar

kolesterol total serta menghalangi oksidasi lipid pada Low Density

Lipoprotein (LDL). Sifat kunyit yang lain, yaitu sebagai antiinflamasi,

dapat dimanfaatkan untuk mengurangi gejala pada osteoartritis. Liacini

dkk (2007) meneliti pengaruh kunyit dalam menekan ekspresi Tumor

Necrosis Factor-α (TNF-α) pada sel kondrosit primer sehingga mampu

mencegah terjadinya penghancuran kartilago pada penyakit

osteoartritis. Pada penyakit diabetes, kunyit berkhasiat menurunkan

kadar gula darah, meningkatkan kadar insulin plasma, dan

menyeimbangkan kadar enzim hepatik (Murugan dan Pari, 2005). Di

samping itu, kunyit juga berpotensi sebagai antikanker. Kunyit mampu

mencegah pertumbuhan sel kanker dari berbagai organ, seperti darah,


commit to user

6

otak, payudara, pancreas, hati, usus, prostat, ovarium, dan kulit (Anand

dkk, 2008; Kunnumakkara dkk, 2008).

d. Kandungan Kimia

Kandungan terpenting pada rimpang kunyit terdapat pada

pigmen warnanya, yaitu kurkuminoid. Kurkuminoid terkandung dalam

rimpang kunyit sebanyak 3 – 4 % (Joe dkk, 2004). Senyawa ini terdiri

dari kurkumin (diferuloilmetana), demetoksikurkumin (hidroksisinamoil

feruloilmetan), dan bisdemetoksi-kurkumin (hidroksisinamoil metana). Di

antara ketiga senyawa kurkuminoid tersebut, kurkumin merupakan

komponen penyusun yang paling dominan, yaitu sekitar 50 - 60 %

(Ishita dkk, 2004).

Gambar 1. Senyawa Kurkumin, Demetoksikurkumin dan

Bisdemetoksikurkumin (Rosmawani dkk, 2007)

Beberapa kandungan zat gizi lain yang terkandung dalam 100

gram kunyit di antaranya : 8,5 gram protein; 8,9 gram lemak; 69,9 gram

karbohidrat; 0,2 gram kalsium; 260 miligram fosfor; 30 miligram

sodium; 2 gram kalium; 47,5 gram zat besi; 0,09 miligram tiamin; 0,19


commit to user

7

miligram riboflavin; 4,8 miligram niasin; dan 50 miligram asam

askorbat (Peter, 1999).

e. Pengaruh Kurkumin terhadap Kadar Kolesterol Total

Kemampuan kurkumin dalam menurunkan kadar kolesterol total

pada serum diperoleh melalui beberapa mekanisme tertentu. Jang dkk

(2008) menyebutkan bahwa kurkumin secara signifikan dapat

meningkatkan hepatic cholesterol-7α-hydroxylase, enzim yang

berperan dalam metabolisme kolesterol. Peningkatan enzim ini

menyebabkan terjadinya peningkatan katabolisme kolesterol sehingga

kadar kolesterol total dalam darah akan menurun. Selain itu, kurkumin

juga berperan dalam menghambat aktivitas enzim HMG KoA

reduktase. Penghambatan tersebut mengganggu sintesis kolesterol

dalam hepar, yang pada akhirnya menyebabkan penurunan kadar

kolesterol total dalam darah (Peschel dkk, 2006).

Penelitian selanjutnya, yang dilakukan oleh Bower dkk (2010),

menunjukkan bahwa terdapat mekanisme lain yang dapat menyebabkan

penurunan kadar kolesterol total oleh kurkumin. Di mana kurkumin

mampu meningkatkan kecepatan pembuangan kolesterol dalam bentuk

asam empedu dan meningkatkan pembuangan kotoran. Penyerapan

kembali asam empedu dan pengubahannya menjadi kolesterol secara

otomatis turun, sehingga kadar kolesterol dalam darah juga akan turun.


commit to user

8

2. Pare

a. Klasifikasi

Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Ordo : Cucurbitales

Famili : Cucurbitaceae

Genus : Momordica

Spesies : Momordica charantia L.

(Subahar, 2004)

b. Morfologi

Batang tanaman pare berusuk lima, daunnya tunggal dengan

bentuk menjari dan warnanya hijau tua. Buahnya bulat memanjang

berbentuk seperti silindris, permukaan buahnya bintil-bintil tidak

beraturan. Warna buah hijau dan jika sudah masak jika dipecah akan

berwarna oranye (Deptan, 2009).

c. Sifat dan Khasiat

Secara umum, buah pare mempunyai berbagai khasiat antara lain

antiinflamasi dan antelmintik. Selain itu juga dapat sebagai obat untuk

penyakit batuk, radang tenggorokan, sakit mata merah, demam,

malaria, menambah nafsu makan, kencing manis, rhematik, sariawan,

bisul, abses, demam, malaria, sakit liver, serta sembelit (Subahar,

2004).


commit to user

9

d. Kandungan Kimia

Buah pare mengandung albuminoid, karbohidrat, zat warna,

karantin, hydroxytryptamine, vitamin A, B dan C. Per 100 gr bagian

buah yang dapat dimakan mengandung 29 kilo kalori; 1,1 gram

protein; 0,3 gram lemak; 6,6 gram karbohidrat; 45 mg kalsium; 64 mg

fosfor; 1,4 mg besi; 0,08 mg vitamin B1; 52 mg vitamin C dan 91,2 gr

air. Selain itu juga mengandung saponin, flavonoid, polifenol, alkaloid,

triterpenoid, momordisin, glikosida cucurbitacin, charantin, asam

butirat, asam palmitat, asam linoleat, dan asam stearat (Subahar, 2004).

e. Pengaruh Ekstrak Pare terhadap Kadar Kolesterol Total

Gaamoussi dkk (2010) menyatakan bahwa ekstrak pare dapat

menurunkan kadar kolesterol total melalui beberapa mekanisme, di

antaranya penghambatan HMG-KoA reduktase, stimulasi cholesterol-

7α-hydroxylase yang dapat meningkatkan katabolisme kolesterol, serta

penghambatan absorbsi kolesterol pada usus. Ketiga mekanisme

tersebut mengakibatkan penurunan kadar kolesterol total darah secara

signifikan.

3. Simvastatin

Simvastatin merupakan derivat statin yang menginduksi penurunan

kadar kolesterol darah melalui penghambatan terhadap enzim dalam hati

(HMG KoA reduktase) yang diperlukan dalam sintesis kolesterol.

a. Farmakodinamik

Bentuk aktifnya merupakan analog struktural HMG KoA reduktase


commit to user

10

intermediat yang dibentuk oleh HMG KoA reduktase dalam sintesis

mevalonat. Obat ini mengalami pemekatan yang besar lintas pertama

oleh hati, sehingga efek utamanya terjadi di hati (Katzung, 2001).

b. Farmakokinetik

Pemberian statin per oral pada hewan dan diduga juga pada

manusia diabsorbsi sebanyak 30 %. Obat ditemukan dalam plasma

berupa metabolit aktif atau inaktif setelah metabolisme lintas pertama

di hati. Sebagian besar metabolit statin terikat protein plasma. Produk

degradasi diekskresi melalui feses dan urin. Kadar puncak dalam

plasma terlihat 2 - 4 jam setelah pemberian oral tunggal. (Suyatna,

2007).

c. Efek Samping

Efek samping obat golongan statin yang yang ringan antara lain

gangguan saluran cerna, sakit kepala, dan kemerahan. Efek samping

lain yang perlu diperhatikan adalah peningkatan kadar kreatin

fosfokinase plasma asimtomatik, serum transaminase asimptomatik,

miopati, rhabdomiolisis, mioglobinuria dan gagal ginjal. Simvastatin

dikontraindikasikan pada wanita hamil karena punya efek teratogenik

pada hewan (Suyatna, 2007).

d. Posologi

Dosis Simvastatin pada manusia adalah 5 - 80 mg/hari. Dosis

maksimal Simvastatin yang digunakan pada manusia adalah 80 mg/hari

(Katzung, 2001). Statin merupakan terapi utama untuk penderita dengan


commit to user

11

risiko tinggi infark miokard karena hiperkolesterolemia, termasuk

pasien dengan kadar kolesterol total lebih dari 300 mg/dl atau lebih dari

240 mg/dl yang juga menderita PJK atau ada faktor-faktor risiko lain

(Suyatna, 2007).

4. Kolesterol

a. Deskripsi

Kolesterol merupakan salah satu turunan lemak berwarna

kekuningan yang beredar dalam darah. Fungsi kolesterol bagi tubuh

adalah untuk membuat : hormon seks (penting bagi perkembangan dan

fungsi organ seksual), hormon korteks adrenal (penting pada

metabolisme dan keseimbangan garam dalam tubuh), vitamin D

(membantu penyerapan kalsium), dan garam empedu (membantu

penyerapan lemak oleh usus) (Budiana, 2007).

Kolesterol dalam tubuh berasal dari dua sumber utama, yaitu

dari dalam tubuh manusia (kolesterol endogen) dan dari makanan

(kolesterol eksogen). Semua jaringan yang mengandung sel berinti

memiliki kemampuan untuk mensintesis kolesterol, khususnya hati,

korteks adrenal, kulit, usus, testis dan aorta (Mayes, 2003). Sedangkan

kolesterol eksogen bisa didapatkan dari makanan yang dikonsumsi

sehari-hari, terutama kuning telur, kerang-kerangan seperti udang,

kepiting, jeroan (usus, babat, hati, limpa, otak, ginjal, dan jantung)

serta makanan yang berasal dari susu. Kolesterol dalam jumlah


commit to user

12

terbatas sangat penting untuk kesehatan tubuh. Namun bila jumlahnya

berlebihan dapat menimbulkan hiperkolesterolemia. Kadar kolesterol

dalam darah sebaiknya tidak lebih dari 200 mg/dl (Budiana, 2007).

b. Sintesis

Biosintesis endogen kolesterol dibagi menjadi beberapa tahap.

Pertama acetyl-CoA membentuk HMG-KoA dan mevalonat. Reaksi ini

terjadi di luar mitokondria yang dikatalisis oleh enzim tiolase. HMG-

KoA dikonversi menjadi mevalonat yang dikatalis oleh enzim HMG-

KoA reduktase. Selanjutnya mevalonat membentuk unit isoprenoid

yang aktif. Enam unit isoprenoid membentuk skualen. Skualen

dikonversi menjadi skualen 2,3- epoksida. Proses ini menggunakan

enzim oksidase di dalam retikulum endoplasmik (enzim skualen

epoksidase). Setelah proses ini, terjadi penutupan cincin skualen

menjadi lanosterol. Lanosterol dikonversi menjadi kolesterol. Proses

ini berlangsung di dalam membran retikulum endoplasma (Mayes,

2003).

c. Metabolisme

Ester kolesterol dalam makanan akan dihidrolisis menjadi

kolesterol bebas. Kolesterol bebas akan dikombinasikan dengan garam

empedu untuk mendapatkan bentuk negatif polimolekuler yang disebut

micelles. Micelles akan diabsorbsi dan digabungkan dengan protein.

Bentuk ini dikenal sebagai kilomikron. Kilomikron akan didegradasi

oleh lipoprotein lipase pada jaringan dan mengambil trigliserida. Sisa


commit to user

13

dari kilomikron yang ”miskin” trigliserida dan ”kaya” kolesterol ini

disebut kilomikron remnant, yang kemudian dibawa ke hepar dan

diubah menjadi VLDL atau LDL. VLDL dengan cepat diubah menjadi

LDL yang memiliki densitas rendah, dan selanjutnya akan diedarkan

melalui pembuluh darah (Grundy, 2006).

5. Interaksi Obat

Interaksi obat adalah perubahan efek suatu obat akibat pemakaian obat

lain (interaksi obat-obat) atau oleh makanan, obat tradisional dan senyawa

kimia lain (Harkness, 2000). Dua atau lebih obat yang diberikan pada

waktu yang sama dapat berubah efeknya secara tidak langsung atau dapat

berinteraksi. Interaksi bisa bersifat potensiasi atau antagonis efek satu obat

oleh obat lainnya, atau adakalanya beberapa efek yang lain (British

Medical Association, 2009).

Secara umum, ada dua mekanisme interaksi obat :

a. Interaksi Farmakokinetik

Interaksi farmakokinetik terjadi ketika suatu obat mempengaruhi

absorbsi, distribusi, metabolisme dan ekskresi obat lainnya sehingga

meningkatkan atau mengurangi jumlah obat yang tersedia untuk

menghasilkan efek farmakologisnya (British Medical Association,

2009).


commit to user

14

b. Interaksi Farmakodinamik

Interaksi farmakodinamik adalah interaksi yang terjadi antara obat

yang memiliki efek farmakologis, antagonis atau efek samping yang

hampir sama. Interaksi ini dapat terjadi karena kompetisi pada

reseptor atau terjadi antara obat-obat yang bekerja pada sistem

fisiologis yang sama. Interaksi ini biasanya dapat diprediksi dari

pengetahuan tentang farmakologi obat-obat yang berinteraksi (British

Medical Association, 2009).

Interaksi farmakodinamik biasanya dihubungkan dengan

kemampuan suatu obat untuk mengubah efek obat lain tanpa

mengubah sifat-sifat farmakokinetiknya. Interaksi farmakodinamik

meliputi aditif (efek obat A = 1, efek obat B = 1, efek kombinasi

keduanya = 2), potensiasi (efek A = 0, efek B = 1, efek kombinasi

A+B = 2), sinergisme (efek A = 1, efek B = 1, efek kombinasi A+B =

3) dan antagonisme (efek A = 1, efek B = 1, efek kombinasi A+B =

0). Mekanisme yang terlibat dalam interaksi farmakodinamik adalah

perubahan efek pada jaringan atau reseptor (Harkness, 2000).


commit to user

15

B. Kerangka Pemikiran

Keterangan :

= Mengandung atau memicu

= Menghambat atau menurunkan

HMG-KoA reduktase

Kadar Kolesterol Total ↑

Diet hiperkolesterolemik Resistensi

hormon tiroid

Propiltiourasil

Kurkumin

↑ Ekskresi kolesterol dan asam empedu

↑ hepatic cholesterol-7α-

hydroxylase

↑ Katabolisme kolesterol

Ekstrak kunyit Ekstrak pare Simvastatin

Momordisin

HMG-KoA reduktase

↑ hepatic cholesterol-7α-

hydroxylase

↑ Katabolisme kolesterol

Absorbsi kolesterol

Kadar Kolesterol Total ↓

HMG-KoA reduktase

↓ Sintesis kolesterol




commit to user

16

C. Hipotesis

Pemberian ekstrak kunyit (Curcuma longa L.) dan ekstrak pare

(Momordica charantia L.) dapat menurunkan kadar kolesterol total pada

tikus putih (Rattus norvegicus).


commit to user

17

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik dengan

desain pre and post test control group design.

B. Lokasi Penelitian

Perlakuan pada tikus putih dilakukan di Laboratorium Biokimia

Universitas Sebelas Maret (UNS), sedangkan pemeriksaan kadar kolesterol

total dilakukan di Laboratorium Klinik Rahanu.

C. Subjek Penelitian

Tikus diperoleh dari Laboratorium Histologi UNS berupa tikus putih

(Rattus norvegicus) jantan, strain Wistar, sehat dan mempunyai aktivitas

normal, berumur kurang lebih 3 bulan dengan berat badan 200 gram.

D. Teknik Sampling

Dengan teknik simple random sampling, tikus putih dibagi menjadi 5

kelompok. Kelompok K 1 sebagai kelompok kontrol negatif, kelompok K 2

sebagai kelompok kontrol positif, sedangkan kelompok P 1, P 2 dan P 3

sebagai kelompok perlakuan.


commit to user

18

E. Penentuan Besar Sampel

Penentuan besar sampel dilakukan dengan menggunakan rumus

Federer (Maryanto dan Fatimah, 2004). Rumus Federer :

Keterangan:

n= besar sampel tiap kelompok

t= banyaknya kelompok

(n-1) x (5-1) 15

(n-1) x 4 15

n – 1 3,75

n 4,75

Dengan demikian, setiap kelompok terdapat minimal 5 ekor tikus

putih. Peneliti memilih untuk menggunakan 5 ekor tikus putih tiap kelompok

dengan jumlah kelompok sebanyak 5 kelompok sehingga jumlah seluruh

subjek penelitian sebanyak 25 ekor.

F. Identifikasi Variabel

1. Variabel bebas : Ekstrak kunyit, ekstrak pare, kombinasi ekstrak kunyit dan

ekstrak pare, simvastatin

2. Variabel terikat : Kadar kolesterol total tikus putih

3. Variabel luar :

a. Dapat dikendalikan

(n-1) x (t-1) 15


commit to user

19

Makanan, genetik, umur, berat badan dan jenis kelamin.

b. Tidak dapat dikendalikan

Stres, hormon, penyakit hepar dan penyakit pankreas.

G. Definisi Operasional Variabel

1. Variabel bebas

a. Ekstrak kunyit

Kunyit yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak etanol

70 % kunyit yang berupa ekstrak kental yang diperoleh dari proses

ekstraksi perkolasi di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu

(LPPT) Universitas Gajah Mada (UGM).

Penetapan dosis ekstrak kunyit untuk tikus putih berdasarkan

pada penelitian yang telah dilakukan sebelumnya. Majithiya dkk (2004)

telah melakukan penelitian tentang efek kurkumin yang terkandung

dalam kunyit terhadap tikus yang hiperkolesterolemik. Penelitian

dilakukan dengan menggunakan dosis kurkumin sebesar 80 mg/200 g

BB tikus putih/hari. Setiap dosis dari ekstrak kunyit dilarutkan dalam 1

ml aquades dan 0,25 % carboxylmethylcellulose (CMC). Variabel ini

mempunyai skala nominal.

b. Ekstrak Pare

Ekstrak pare yang digunakan dalam penelitian ini berupa ekstrak

kental yang diperoleh dari proses ekstraksi maserasi di LPPT UGM.

Penetapan dosis ekstrak pare untuk tikus putih berdasarkan pada


commit to user

20

penelitian yang telah dilakukan oleh Adimunca dan Nainggolan (2009).

Penelitian dilakukan dengan menggunakan dosis ekstrak pare sebanyak

100 mg/200 gram BB tikus putih/hari. Setiap dosis dari ekstrak pare

dilarutkan dalam 1 ml aquades dan 0,25 % CMC. Variabel ini

mempunyai skala nominal.

c. Kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak pare

Penetapan dosis pada kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak pare

diambil dari setengah dosis ekstrak kunyit pada kelompok P 1 dan

setengah dosis ekstrak pare pada kelompok P 2, yaitu 40 mg dan 50

mg/200 gram BB tikus putih/hari. Setiap dosis dari masing-masing

ekstrak tersebut dilarutkan dalam 1 ml aquades dan 0,25 % CMC.

Variabel ini mempunyai skala nominal.

d. Simvastatin

Simvastatin diberikan dalam bentuk tablet yang sudah

dihaluskan. Dosis yang biasa digunakan pada manusia adalah 5 - 80 mg

perhari, dengan anjuran dosis awal 30 mg perhari (Ratnawati dan

Widowati, 2011). Dosis pada manusia seberat 70 kg tersebut dikonversi

untuk tikus seberat 200 gram.

0,018 x 30 mg = 0,54 mg

Simvastatin diberikan untuk tikus dengan dosis 0,5 mg/200 gram BB

tikus/hari dengan cara sonde lambung.

2. Variabel terikat : Kadar kolesterol total darah

Dalam penelitian ini yang diamati dan dicatat adalah kadar kolesterol


commit to user

21

total darah, yang diukur dalam satuan mg/dl. Sebelum dan sesudah

perlakuan diadakan pengukuran kadar kolesterol total tikus putih pada

seluruh kelompok. Variabel ini mempunyai skala rasio.

3. Variabel luar yang dapat dikendalikan

a. Makanan

Selama satu minggu adaptasi (7 hari), tikus putih diberi pakan

standar pelet BR-2. Pada hari perlakuan (hari ke-8 hingga hari ke-21),

tikus putih diberikan pakan hiperkolesterolemik.

Komposisi pakan hiperkolesterolemik yang dipakai adalah

kuning telur itik 50 ml, minyak babi 100 ml, minyak kelapa 10 ml dan

serbuk kolesterol 1 gram (Phyto Medica, 1993). Pakan

hiperkolesterolemik diberikan sebanyak 2,5 ml secara oral menggunakan

sonde lambung dua kali sehari.

b. Genetik

Faktor genetik berperan dalam menentukan kadar kolesterol.

Faktor genetik tidak dapat dikendalikan secara mutlak. Hal ini diatasi

dengan pemilihan subjek penelitian yang berasal dari galur yang sama

(strain Wistar) dan menggunakan sistem randomisasi sehingga

diharapkan distribusi dari faktor genetik ini merata pada tiap kelompok

penelitian.

c. Umur

Umur tikus putih berpengaruh pada penelitian ini. Kolesterol

tikus putih meningkat pada umur 4 minggu dan menurun dalam


commit to user

22

beberapa minggu. Kadar kolesterol lebih stabil pada usia 11 - 16 minggu

(Uchida, 2008), setelah itu kadarnya meningkat terutama setelah

berumur 63 minggu. Peneliti memilih umur tikus putih berusia 3 bulan

(12 minggu) karena pada usia tersebut kadar kolesterol lebih stabil

sehingga memudahkan pemantauan terhadap kadar kolesterol dalam

darah (Saap, 2007).

d. Berat badan

Berat badan akan mempengaruhi dosis ekstrak kunyit dan ekstrak

pare yang digunakan. Berat badan dapat dikendalikan dengan cara

mengunakan tikus putih (Rattus norvegicus) yang beratnya 200 gram.

e. Jenis kelamin

Jenis kelamin sangat berpengaruh pada penelitian ini. Tikus putih

jantan memiliki sedikit hormon estrogen dibandingkan dengan betina.

Hormon estrogen dapat mempengaruhi kadar kolesterol (Ganong, 2003).

Oleh karena itu peneliti memilih menggunakan tikus putih jantan sebagai

subjek penelitian.

4. Variabel luar yang tidak dapat dikendalikan

a. Stres

Kondisi stres dapat merangsang pelepasan epinefrin. Epinefrin

akan merangsang insulin. Insulin yang dikeluarkan akan merangsang

pengeluaran enzim lipoprotein lipase yang akan meningkatkan kadar

kolesterol (Murray dkk, 2003).


commit to user

23

b. Hormon

Tikus putih merupakan hewan yang resisten terhadap kenaikan

kolesterol sebab kadar hormon tiroid cenderung tinggi dan menurunkan

kadar kolesterol serum. Pemberian propiltiourasil (PTU) akan

menurunkan hormon tiroid dan mempermudah timbulnya peningkatan

kolesterol pada tikus (Mayes, 2003). Preparat PTU diberikan pada tikus

melalui air minumnya. Air minum dicampur dengan PTU sehingga

didapatkan konsentrasi PTU adalah 0,1 %, artinya dalam satu liter air

terlarut 100 gram PTU. Air minum tersebut diberikan ad libitum (Phyto

medica, 1993). Faktor hormonal ini tidak dapat dikendalikan

sepenuhnya, karena kesulitan untuk mengetahui apakah status eutyroid

sudah tercapai atau belum.

c. Penyakit hepar

Penyakit pada hepar akan mengakibatkan defisiensi enzim

hepatik lipase yang dapat mengganggu katabolisme kolesterol.

Katabolisme kolesterol yang terganggu akan menyebabkan kadar

kolesterol dalam darah meningkat (Botham dan Mayes, 2003).

d. Penyakit pankreas

Penyakit pankreas yang dimaksud dalam penelitian ini adalah

kerusakan yang terjadi pada sel beta Langerhans pankreas. Kerusakan ini

menyebabkan penurunan produksi insulin, yang mengakibatkan

defisiensi lipoprotein lipase sehingga menghambat katabolisme

kolesterol (Mokhtar cit Kamaluddin, 2008).


commit to user

24

H. Rancangan Penelitian

Sampel 25 ekor tikus putih

Analisis data dengan uji statistik

5 ekor

Pada hari ke-1 sampai ke-7 diadaptasikan dan diberi pakan standar

Uji normalitas untuk menentukan jenis uji statistik yang sesuai

Pengukuran kadar kolesterol total sebelum perlakuan (pre test)

5 ekor

5 ekor

5 ekor

5 ekor

K 2 Perlakuan

hiper-kolesterolemik

dengan simvastatin

pada hari ke-8 sampai ke-21

P 1 Perlakuan

hiper-kolesterolemik dengan ekstrak

kunyit 80 mg/200 gram BB pada hari ke-8 sampai

ke-21

P 2 Perlakuan

hiper-kolesterolemik dengan ekstrak

pare 100 mg/200 gram BB pada hari ke-8 sampai

ke-21

P 3 Perlakuan

hiper-kolesterolemik

dengan kombinasi

ekstrak kunyit 40 mg dan

pare 50 mg/200 gram BB pada hari ke-8 sampai

ke-21

K 1 Perlakuan

hiper-kolesterolemik pada hari ke-8 sampai ke-21

Pengukuran kadar kolesterol total setelah perlakuan (post test)


commit to user

25

I. Alat, Bahan dan Cara Kerja

1. Alat yang digunakan :

a. Kandang beserta kelengkapan pemberian makan

b. Sonde lambung

c. Tabung mikro kapiler

d. Spuit needle feeding

e. Timbangan Sartorius

f. Gelas ukur

g. Alat dan tabung sentrifugasi

h. Rak tabung reaksi

i. Pengaduk

j. Pipet berskala

k. Spektrofotometer

2. Bahan-bahan yang digunakan :

a. Ekstrak kunyit

b. Ekstrak pare

c. Akuades

d. CMC Na 0,25 % dan 0,5 %

e. Pakan standar pelet BR-2

f. Pakan hiperkolesterolemik (minyak kelapa, minyak babi, kristal

kolesterol, dan propiltiourasil)

g. Simvastatin

h. PTU


commit to user

26

i. Reagen pemeriksaan kolesterol

3. Cara Kerja

a. Langkah I : Pembuatan ekstrak kunyit dan ekstrak pare

1) Pembuatan ekstrak kunyit

Rimpang kunyit dicuci, diiris dengan ketebalan ± 3 mm, dan

dikeringkan dalam almari pengering suhu 450C selama 48 jam,

kemudian diserbuk menggunakan mesin penyerbuk dengan

saringan. Serbuk rimpang kunyit yang terbentuk dimasukkan ke

dalam alat perkolator ditambah ethanol 70 %, diamkan 24 jam, lalu

dialirkan tetes demi tetes dan ditambah ethanol 70 % sampai filtrat

yang menetes jernih. Filtrat tersebut diuapkan dengan vacuum

rotary evaporator pemanas water bath suhu 700C. Ekstrak kental

yang terbentuk dituang ke dalam cawan porselin dan dipanaskan

dengan water bath sambil terus diaduk hingga didapatkan ekstrak

rimpang kunyit.

2) Pembuatan ekstrak pare

Buah pare dibelah dan dibuang isinya kemudian diiris ± 3

mm, lalu dikeringkan dalam almari pengering suhu 450C selama 48

jam dan diserbuk menggunakan mesin penyerbuk dengan saringan.

Serbuk buah pare kemudian ditambah ethanol 70 % dan diaduk

selama 30 menit. Setelah didiamkan 24 jam, larutan disaring dan

diulang dengan perlakuan yang sama sebanyak 3 kali. Filtrat yang

terbentuk kemudian diuapkan dengan vacuum rotary evaporator


commit to user

27

pemanas water bath suhu 700C. Ekstrak kental lalu dituang ke

dalam cawan porselin dan dipanaskan dengan water bath sambil

terus diaduk hingga didapatkan ekstrak buah pare.

3) Pembuatan larutan simvastatin

Tablet simvastatin yang digunakan dalam penelitian ini

adalah simvastatin tablet @ 20 mg. Sebanyak 2 tablet simvastatin

ini dilarutkan dalam 160 ml aquades yang nantinya akan diberikan

peroral sekali dalam sehari menggunakan sonde lambung dengan

dosis 0,5 mg/2 ml/200 gram BB tikus putih/hari.

b. Langkah II : Penentuan besar sampel dan adaptasi

Sebanyak 25 ekor tikus putih jantan dibagi menjadi 5 kelompok

(berdasarkan Rumus Federer), diadaptasikan selama 1 minggu di

laboratorium dan diberi pakan standar.

c. Langkah III : Pengukuran kadar kolesterol total pre test

Pengambilan darah dilakukan melalui vena orbitalis mata dengan

tabung mikrokapiler sebanyak 1 ml setiap ekor, kemudian darah akan

mengalir di dalam pipa kapiler dan dimasukkan ke dalam tabung

sentrifuge. Darah dipusingkan selama 10 - 15 menit dengan kecepatan

3000 rpm sehingga didapatkan serum darah untuk diperiksa kadar

kolesterol total pre test.

d. Langkah IV : Pemberian perlakuan pada kelima kelompok

1) Kelompok K 1 : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dua

kali sehari selama dua minggu.


commit to user

28

2) Kelompok K 2 : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dua

kali sehari ditambah simvastatin 0,5 mg secara oral dengan

menggunakan sonde lambung selama dua minggu.

3) Kelompok P 1 : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dua

kali sehari ditambah ekstrak kunyit 80 mg/200 gram BB selama

dua minggu.


kali sehari ditambah ekstrak pare 100 mg/200 gram BB selama dua

minggu.


kali sehari ditambah ekstrak kunyit 40 mg dan ekstrak pare 50

mg/200 gram BB selama dua minggu.

e. Langkah V : Pengukuran kadar kolesterol total post test

Pengambilan darah dilakukan melalui vena orbitalis mata dengan

tabung mikrokapiler sebanyak 1 ml setiap ekor, kemudian darah akan

mengalir di dalam pipa kapiler dan dimasukkan ke dalam tabung

sentrifuge. Darah dipusingkan selama 10 - 15 menit dengan kecepatan

3000 rpm sehingga didapatkan serum darah untuk diperiksa kadar

kolesterol total post test.

f. Langkah VI : Analisis hasil pengukuran kolesterol total pre test dan

post test secara statistik.


commit to user

29

J. Teknik Analisis Statistik

Data kadar kolesterol total dari semua subjek penelitian dianalisis

secara statistik dengan uji normalitas data Shapiro Wilk Test menggunakan

program SPSS Windows 17.0. Selain itu, data diuji dengan Levene Test untuk

mengetahui homogenitas variansnya. Jika seluruh data terdistribusi normal dan

varians data homogen, maka uji statistik yang digunakan adalah uji statistik

parametrik. Uji statistik parametrik yang digunakan pada penelitian ini yaitu

One Way ANOVA test untuk menguji perbedaan rata-rata kadar kolesterol dari

kelima kelompok sampel (α = 0.05). Apabila terdapat perbedaan yang

signifikan maka dilanjutkan dengan uji komparatif Post Hoc test (Budi, 2006).


commit to user

30

BAB IV

HASIL PENELITIAN

A. Hasil Penelitian

Setelah dilakukan penelitian mengenai pengaruh kombinasi ekstrak kunyit

dan ekstrak pare terhadap kadar kolesterol total pada tikus putih, didapatkan

data kadar kolesterol total sebelum perlakuan (pre test) dan sesudah perlakuan

(post test) yang disajikan pada Tabel 1.

Tabel 1. Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan Sesudah Perlakuan

Kelompok Mean Kadar Kolesterol Total (mg/dl) ± SD

Sebelum perlakuan Setelah perlakuan Selisih

K 1

K 2

P 1

P 2

P 3

73,00 ± 9,618

67,60 ± 8,325

75,60 ± 9,864

69,20 ± 22,819

52,80 ± 19,383

133,80 ± 29,012

92,00 ± 12,469

81,20 ± 22,465

86,00 ± 28,749

81,80 ± 17,108

60,80 ± 33,274

24,40 ± 11,970

5,60 ± 20,803

16,80 ± 27,653

29,00 ± 19,300

Keterangan:

K 1 : diberi pakan hiperkolesterolemik dosis 2,5 ml/200 gram BB dua kali

sehari.

K 2 : diberi pakan hiperkolesterolemik dosis 2,5 ml/200 gram BB dua kali

sehari dan simvastatin dosis 0,5 mg/1 ml/200 gram BB/hari.


commit to user

31

P 1 : diberi pakan hiperkolesterolemik dosis 2,5 ml/200 gram BB dua kali

sehari dan ekstrak kunyit dosis 80 mg/1 ml/200 gram BB/hari.


sehari dan ekstrak pare dosis 100 mg/1 ml/200 gram BB /hari.


sehari dan kombinasi ekstrak kunyit 40 mg/1 ml/200 gram BB dan

ekstrak pare 50 mg/1 ml/200 gram BB/hari.

Dari data Tabel 1. terlihat bahwa pada semua kelompok perlakuan terjadi

peningkatan kadar kolesterol total. Namun jumlah peningkatan tersebut

berbeda-beda pada tiap kelompok. Kelompok K 1, sebagai kontrol negatif

mengalami peningkatan kadar kolesterol total paling tinggi, yaitu sebesar

60,80 mg/dl. Pada kelompok K 2, sebagai kontrol positif, terjadi peningkatan

kadar kolesterol total sebesar 24,40 mg/dl. Sedangkan pada kelompok

perlakuan, yaitu kelompok P 1, P 2, dan P 3, masing-masing mengalami

peningkatan kadar kolesterol total sebesar 5,60 mg/dl, 16,80 mg/dl dan 29,00

mg/dl. Dari ketiga kelompok perlakuan tersebut, peningkatan kadar kolesterol

total yang paling rendah terjadi pada kelompok P 1.

B. Analisis Data

Data pengukuran efek hipokolesterolemik yang digunakan adalah data

selisih kadar kolesterol total tikus putih sebelum perlakuan (pre test) dan


commit to user

32

setelah perlakuan (post test). Pada data tersebut nantinya akan dilakukan uji

One Way ANOVA yang merupakan salah satu uji parametrik. Syarat

dilakukannya uji One Way ANOVA adalah distribusi data harus normal dan

varians data harus sama (Santoso, 2004). Jika tidak memenuhi syarat, maka

diupayakan untuk melakukan transformasi data supaya distribusi menjadi

normal dan varians menjadi sama (Dahlan, 2009).

Uji yang dapat digunakan untuk mengetahui normalitas sebaran data yaitu

uji Kolmogorov-Smirnov atau Shapiro-Wilk. Uji Kolmogorov-Smirnov

digunakan untuk sampel yang besar (lebih dari 50) sedangkan Shapiro-Wilk

untuk sampel yang sedikit (kurang atau sama dengan 50). Hasil uji Shapiro-

Wilk dapat dilihat pada Tabel 2.

Tabel 2. Hasil Uji Normalitas Data Shapiro-Wilk

Kelompok Shapiro-Wilk

Statistic df Sig.

Selisih Kelompok K 1 .972 5 .887

Kelompok K 2 .816 5 .109

Kelompok P 1 .803 5 .085

Kelompok P 2 .922 5 .541

Kelompok P 3 .969 5 .870

Hasil uji Shapiro-Wilk didapatkan nilai p > 0,05 untuk kelima kelompok

sehingga secara keseluruhan data yang digunakan memenuhi asumsi distribusi

normal. Uji Levene digunakan untuk mengetahui varians data. Jika varians


commit to user

33

data p > 0,05 maka data tersebut mempunyai varians data yang sama. Hasil uji

Levene disajikan pada Tabel 3.

Tabel 3. Hasil Uji Homogenitas Varians

Pengujian homogenitas varians (levene test) menghasilkan signifikansi

sebesar 0,177 (p > 0,05) yang artinya asumsi varians data sama. Setelah kedua

syarat terpenuhi, maka uji One Way ANOVA dapat dilakukan. Tabel 4 berikut

ini menunjukkan hasil dari uji One Way ANOVA.

Tabel 4. Hasil Uji One Way ANOVA Sum of Squares df Mean Squares F Sig.

Between Groups 8573.440 4 2143.360 3.800 .019

Within Groups 11282.000 20 564.100

Total 19855.440 24

Dari hasil uji One Way ANOVA tersebut didapatkan p = 0,019 (p < 0,05)

yang artinya terdapat perbedaan efek hipokolesterolemik secara bermakna di

antara kelima kelompok perlakuan. Uji One Way ANOVA kemudian

dilanjutkan dengan uji Least Significant Difference (LSD) untuk menunjukkan

adanya perbedaan bermakna antara masing-masing kelompok. Kriteria ujinya

adalah pasangan perlakuan yang diuji dikatakan ada perbedaan kadar

Levene Statistic df1 df2 Sig.

1.758 4 20 .177


commit to user

34

kolesterol total yang nyata bila nilai p < 0,05. Sebaliknya, dikatakan tidak ada

perbedaan kadar kolesterol total yang nyata, bila nilai p > 0,05.

Hasil uji LSD disajikan dalam tabel pada Lampiran 4. Pada tabel terlihat

kadar kolesterol total kelompok K 2, P 1, P 2 dan P3 berbeda secara nyata

dengan kadar kolesterol total kelompok K 1 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan

bahwa perlakuan dengan pemberian simvastatin, ekstrak kunyit, ekstrak pare,

maupun kombinasi ekstrak kunyit dan pare mempunyai efek

hipokolesterolemik pada tikus yang diinduksi dengan pakan

hiperkolestrolemik. Selanjutnya dapat dilihat bahwa kadar kolesterol total

kelompok K 2 dengan kelompok P 1, P 2 dan P 3 tidak berbeda secara nyata

(p > 0,05). Hal ini berarti ekstrak kunyit, pare dan kombinasi keduanya

memiliki efektivitas yang sama dengan simvastatin pada kelompok kontrol

positif. Dari ketiga kelompok perlakuan tersebut, kelompok P 1 mempunyai

efek hipokolesterolemik paling baik karena peningkatan kolesterol kelompok

3 tidak berbeda secara nyata dengan kelompok kontrol positif (p > 0,05) dan

memiliki rerata peningkatan kolesterol paling rendah yaitu sebesar 5,60 mg/dl

(Tabel 1).


commit to user

54 3553

35

BAB V

PEMBAHASAN

Berdasarkan analisis statistik melalui beberapa tahapan didapatkan hasil

yang mendukung hipotesis peneliti bahwa kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak

pare berpengaruh terhadap penurunan kadar kolesterol total tikus putih yang

diinduksi pakan hiperkolesterolemik.

Hasil uji normalitas distribusi (Shapiro-Wilk) menunjukkan nilai

signifikansi (p) dari kelima kelompok perlakuan lebih besar dari 0,05 yang berarti

data kolesterol total terdistribusi secara normal. Uji homogenitas dengan Levene

test menunjukkan nilai p sebesar 0,177 (lebih besar dari 0,05) sehingga dapat

diketahui bahwa varian data sama. Kemudian dari uji komparatif One Way

ANOVA didapatkan nilai p sebesar 0,019 (kurang dari 0,05) yang berarti terdapat

perbedaan kadar kolesterol total yang nyata di antara kelima kelompok perlakuan

yang diteliti. Untuk mengetahui perbedaan peningkatan kadar kolesterol total

antarkelompok perlakuan satu dengan lainnya, dilanjutkan dengan Post Hoc Test

dengan uji Least Significance Difference (LSD). Dari Post Hoc Test uji LSD

didapatkan perbedaan kadar kolesterol total yang nyata antara kelompok K 1

dengan kelompok K 2, P 1, P 2, dan P 3 (Lampiran 4). Perbedaan ini

menunjukkan bahwa pemberian simvastatin, ekstrak kunyit, ekstrak pare serta

kombinasi kedua ekstrak tersebut pada masing-masing kelompok mampu

menurunkan tingginya kadar kolesterol total akibat induksi pakan

hiperkolesterolemik pada tikus putih. Peningkatan kadar kolesterol total akibat


commit to user

36

induksi pakan hiperkolesterolemik dapat dilihat dari rerata kelompok K 1 yaitu

sebesar 60,80 mg/dl (Lampiran 1). Tingginya rerata kadar kolesterol total pada

kelompok K 1 karena tikus putih pada kelompok ini hanya diberi pakan

hiperkolesterolemik tanpa diberi simvastatin maupun ekstrak kunyit dan ekstrak

pare.

Hasil Post Hoc Test menunjukkan bahwa terdapat perbedaan kadar

kolesterol total yang bermakna antara kelompok K 1 dengan kelompok K 2

dengan nilai p sebesar 0,025 (Lampiran 4). Hal ini disebabkan kelompok K 2,

selain diinduksi dengan pakan hiperkolesterolemik, juga mendapatkan

simvastatin. Simvastatin merupakan obat antihiperkolesterol golongan statin yang

menginduksi penurunan kadar kolesterol darah melalui penghambatan terhadap

enzim dalam hati, yaitu HMG KoA reduktase (Suyatna, 2007).

Perbedaan kadar kolesterol total yang bermakna juga terdapat antara

kelompok K 1 dengan kelompok P 1 yang diberi perlakuan ekstrak kunyit dengan

dosis 80 mg/200 gram BB/hari, dengan nilai p sebesar 0,002 (Lampiran 4).

Perbedaan yang bermakna ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak kunyit

tersebut dapat menurunkan kadar kolesterol total pada tikus putih akibat induksi

pakan hiperkolesterolemik.

Kandungan terpenting dari ekstrak kunyit terletak pada pigmen warnanya,

yaitu kurkumin. Beberapa penelitian sebelumnya membuktikan bahwa senyawa

yang terkandung dalam kunyit bersifat sebagai antiaterosklerosis, antiinflamasi,

antidiabetik, antikanker dan memiliki aktivitas hipokolesterolemik (Joe dkk, 2004;

Chattopadhyay dkk, 2004; Araujo dan Leon, 2001). Adanya aktivitas


commit to user

37

hipokolesterolemik ini dimungkinkan karena kemampuan kurkumin dalam

meningkatkan hepatic cholesterol-7α-hydroxylase, di mana enzim ini berperan

dalam metabolisme kolesterol. Peningkatan enzim ini menyebabkan terjadinya

peningkatan katabolisme kolesterol sehingga kadar kolesterol total dalam darah

akan menurun (Jang dkk, 2008).

Penelitian yang dilakukan oleh Peschel dkk (2006) mengenai efek

hipokolesterolemik dari kurkumin, menunjukkan bahwa kurkumin menghambat

aktivitas enzim HMG CoA reductase. Penghambatan tersebut mengganggu

sintesis kolesterol dalam hepar, yang pada akhirnya menyebabkan penurunan

kadar kolesterol total dalam darah. Selain itu, Bower dkk (2010) merumuskan

adanya mekanisme lain yang dapat menyebabkan penurunan kadar kolesterol total

oleh kurkumin. Di mana kurkumin mampu meningkatkan kecepatan pembuangan

kolesterol dalam bentuk asam empedu dan meningkatkan pembuangan kotoran.

Penyerapan kembali asam empedu dan pengubahannya menjadi kolesterol secara

otomatis turun, sehingga kadar kolesterol dalam darah juga akan turun.

Aktivitas hipokolesterolemik ekstrak kunyit dalam penelitian ini selaras

dengan beberapa penelitian yang telah dilakukan sebelumnya meskipun dengan

metode yang berbeda-beda. Penelitian yang dilakukan oleh Jang dkk (2008)

menunjukkan bahwa kurkumin (0,05 gram/100 gram diet) mampu menurunkan

kadar kolesterol total pada Hamster yang diberi diet hiperkolesterolemik (10 %

minyak kelapa; 0,2 % kolesterol). Sedangkan Majithiya dkk (2004) meneliti

pengaruh pemberian kurkumin (100 mg/kg) pada tikus hiperlipidemia yang

diinduksi dengan injeksi triton. Pada penelitian tersebut, terjadi penurunan kadar


commit to user

38

kolesterol total pada tikus sebesar 6,2 %. Sementara itu, Asai dan Miyazawa

(2001) melaporkan adanya perbedaan signifikan pada kadar kolesterol total antara

kelompok tikus yang hanya diberi diet tinggi lemak (15 gram minyak/100 gram

diet) dengan kelompok tikus yang diberi diet tinggi lemak beserta kurkumin (0,2

gram/100 gram diet).

Nilai p pada hasil Post Hoc Test kelompok K1 dan P 2 sebesar 0,008

mengindikasikan adanya perbedaan yang bermakna antara kedua kelompok

tersebut. Kelompok P 2 yang diberi perlakuan ekstrak pare dosis 100 mg/200

gram BB/hari mengalami penurunan kadar kolesterol total dibandingkan dengan

kelompok K 1 yang hanya diberi pakan hiperkolesterolemik. Hasil ini sesuai

dengan beberapa penelitian terdahulu mengenai efek ekstrak pare terhadap kadar

kolesterol total.

Berdasarkan penelitian Adimunca dan Nainggolan (2009), pemberian

ekstrak pare dosis 100 mg/200 gram BB/hari dapat menurunkan kadar kolesterol

total pada tikus putih yang diinduksi pakan hiperkolesterolemik. Selain itu,

penelitian yang dilakukan oleh Bano dkk (2011) juga menunjukkan bahwa

kelompok tikus putih yang diberi ekstrak pare mengalami penurunan kadar

kolesterol total dibandingkan dengan kelompok kontrol. Sedangkan penelitian

Jayasooriya dkk (2000), memperlihatkan bahwa pemberian ekstrak pare dapat

menurunkan kadar kolesterol total pada kelompok yang diinduksi diet

hiperkolesterolemik maupun yang tidak diinduksi.

Peranan ekstrak pare dalam aktivitas hipokolesterolemik tidak terlepas dari

kandungan zat aktifnya, yaitu momordisin. Mekanisme penurunan kolesterol oleh


commit to user

39

momordisin di antaranya melalui penghambatan HMG-KoA reduktase, stimulasi

cholesterol-7α-hydroxylase yang dapat meningkatkan katabolisme kolesterol,

serta penghambatan absorbsi kolesterol pada usus. Ketiga mekanisme tersebut

mengakibatkan penurunan kadar kolesterol total darah secara signifikan

(Gaamoussi dkk, 2010).

Perbedaan kadar kolesterol total yang tidak bermakna antara kelompok K

2 dengan kelompok P 1, P 2, dan P 3 ditunjukkan dengan nilai p yang lebih besar

dari 0,05 yaitu berturut-turut 0,225, 0,618 dan 0,763 (Lampiran 4). Hal ini

menunjukkan bahwa efek hipokolesterolemik dari ekstrak kunyit, ekstrak pare,

serta kombinasi ekstrak kunyit dan pare tersebut pada kelompok P 1, P 2, dan P 3

sama dengan efek hipokolesterolemik dari simvastatin pada kelompok K 2.

Tingkat efektivitas hipokolesterolemik pada masing-masing ekstrak dapat

dilihat dari data selisih kadar kolesterol pre dan post test pada ketiga kelompok

perlakuan (Lampiran 1). Berdasarkan data tersebut dapat disimpulkan urutan

kelompok-kelompok perlakuan mulai dari yang paling tinggi efek

hipokolesterolemiknya yaitu kelompok P 1, kelompok P 2, dan yang terakhir

adalah kelompok P 3.

Rendahnya efektivitas pada kelompok P 3 kemungkinan diakibatkan oleh

adanya interaksi antara kedua zat aktif yang terkandung dalam ekstrak kunyit dan

ekstrak pare, yaitu kurkumin dan momordisin. Kurkumin merupakan senyawa

polifenol dengan berat molekuler yang rendah (Saifudin dkk, 2006). Senyawa ini

tergolong senyawa non polar yang sukar larut dalam air dan memiliki

bioavailabilitas yang tidak terlalu baik (Sharma dkk, 2007). Sedangkan


commit to user

40

momordisin termasuk dalam golongan triterpenoid yang dapat larut dalam pelarut

non polar (Juliana dkk, 2010). Interaksi antara kedua zat aktif tersebut

kemungkinan dapat terjadi melalui mekanisme interaksi farmakokinetik atau

interaksi farmakodinamik.

Interaksi farmakokinetik terjadi ketika suatu obat mempengaruhi absorbsi,

distribusi, metabolisme dan ekskresi obat lainnya sehingga meningkatkan atau

mengurangi jumlah obat yang tersedia untuk menghasilkan efek farmakologisnya

(British Medical Association, 2009). Dalam penelitian ini, kemungkinan yang

terjadi ialah zat aktif dalam pare, yaitu momordisin, telah mempengaruhi absorbsi,

distribusi, metabolisme, ataupun ekskresi dari zat aktif dalam kunyit, yaitu

kurkumin, sehingga mengubah kadarnya untuk menghasilkan efek farmakologis.

Sedangkan dalam interaksi farmakodinamik, mekanisme yang terlibat

adalah perubahan efek pada jaringan atau reseptor. Interaksi ini biasanya

dihubungkan dengan kemampuan suatu obat untuk mengubah efek obat lain tanpa

mengubah sifat-sifat farmakokinetiknya. Interaksi farmakodinamik meliputi aditif

(efek obat A = 1, efek obat B = 1, efek kombinasi keduanya = 2), potensiasi (efek

A = 0, efek B = 1, efek kombinasi A+B = 2), sinergisme (efek A = 1, efek B = 1,

efek kombinasi A+B = 3) dan antagonisme (efek A = 1, efek B = 1, efek

kombinasi A+B = 0) (Harkness, 2000). Pada penelitian ini, interaksi

farmakodinamik dapat terjadi disebabkan adanya persamaan efek farmakologis

pada kurkumin dan momordisin. Kemungkinan terjadi kompetisi pada reseptor

yang sama karena kedua zat aktif tersebut sama-sama bekerja untuk meningkatkan


commit to user

41

aktivitas enzim hepatic cholesterol 7-α-hydroxylase dan menghambat aktivitas

enzim HMG-KoA reduktase.

Jika dilihat pada hasil rerata peningkatan kadar kolesterol total, kelompok

P 3 mengalami peningkatan kolesterol yang sedikit lebih tinggi dari K 2

(Lampiran 1). Hal ini dimungkinkan oleh karena simvastatin yang diberikan pada

kelompok K 2 sudah sesuai dengan anjuran dosis awal yang optimal yaitu sebesar

0,5 mg pada tikus putih (Ratnawati dan Widowati, 2011), sedangkan dosis

kombinasi ekstrak yang diberikan pada kelompok P 3 hanya setengah dari dosis

optimal masing-masing ekstrak yaitu sebesar 40 mg dosis ekstrak kunyit dan 50

mg dosis ekstrak pare. Namun, meski tingkat efektivitas hipokolesterolemik

paling rendah terdapat pada kelompok P 3, dalam kelompok ini dapat

meminimalisir terjadinya efek samping kurkumin yang berupa iritasi mukosa

gastrointestinal. Hal ini disebabkan adanya momordisin yang bersifat protektif

terhadap mukosa saluran gastrointestinal tersebut. Selain itu, di antara ketiga

kelompok perlakuan, kelompok P 3 merupakan kelompok dengan tingkat

efektivitas hipokolesterolemik yang paling mendekati kelompok K 2. Sedangkan

pada kelompok P 1 dan P 2 kadar kolesterol total jauh lebih rendah dibandingkan

kelompok K 2. Hal ini dapat menjadi pertimbangan untuk menggunakan terapi

kombinasi ekstrak kunyit dan pare tersebut sebagai substitusi terapi simvastatin,

mengingat penurunan kolesterol yang terlalu rendah juga dapat memberikan

dampak negatif. Penelitian yang dilakukan Boscarino dkk (2009) menunjukkan

adanya hubungan antara kadar kolesterol yang terlalu rendah dengan angka

kejadian depresi. Byrne (2010) juga menyebutkan bahwa rendahnya kadar


commit to user

42

kolesterol dapat meningkatkan risiko terjadinya kelahiran prematur pada ibu

hamil.


commit to user

43

BAB VI

SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan

Kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak pare berpengaruh terhadap

penurunan kadar kolesterol total tikus putih yang diinduksi pakan

hiperkolesterolemik.

B. Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis yang

tepat pada pemberian kombinasi ekstrak kunyit dan ekstrak pare agar

memberikan efek hipokolesterolemik yang optimal.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai gambaran mukosa

gastrointestinal sehingga dapat dinilai bagaimana pengaruh efek iritatif

dari ekstrak kunyit serta efek protektif dari ekstrak pare pada mukosa

gastrointestinal tikus putih.

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id pengaruh ... · perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id...

Documents