bab 3.docx

2
9 BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN Sugical materials ameloblastoma diperiksa dalam penelitian ini diperoleh dari operasi, dan diagnosa yang dilakukan di Departemen Patologi oral, aichi Gakuin University School of Dentistry, nagoya, Jepang. Kami memilih total 50 kasus ameloblastoma dari file rekama medis bedah, dan 50 kasus histopatologis diperiksa kembali, total 40 kasus amelo blastoma dipilih yang padat / multicystic . Segera setelah penghapusan, bahan bedah difiksasi dalam larutan formalin 10% buffered netral. Spesimen itu kemudian dehidrasi melalui serangkaian etanol, dan ditanam dalam parafin. setelah sectioning, spesimen seri diperiksa oleh histopatologi (HE) pemeriksaan histopatologi.After, kami memeriksa pada distribusi faktor transkripsi Notch1 dan Jagged1 oleh imunohistokimia (IHC) teknik. IHC Pemeriksaan dilakukan menggunakan dako EnVisiontM + Kit (Dako cytomation, Glostrup, Denmark) dengan 2 antibodi berikut: Notch1 kelinci antibodi poliklonal (ab27526, abcam plc, cambridge, pengenceran: 1/1000, 4°C, semalam) dan Jagged1 antibodi poliklonal kelinci (ab7771, abcam plc, cambridge, pengenceran: 1/500, 4°C, semalam). Sebagai pra-pengobatan pewarnaan imunohistokimia menggunakan Yang disebutkan di atas, pretreatment autoclave (120°c, 10 menit) untuk notch dan protease K (suhu ruangan, min 2) untuk Jagged .

Upload: amalia-ramadhani-mufida

Post on 08-Dec-2015

3 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: BAB 3.docx

9

BAB 3

METODOLOGI PENELITIAN

Sugical materials ameloblastoma diperiksa dalam penelitian ini diperoleh dari

operasi, dan diagnosa yang dilakukan di Departemen Patologi oral, aichi Gakuin

University School of Dentistry, nagoya, Jepang. Kami memilih total 50 kasus

ameloblastoma dari file rekama medis bedah, dan 50 kasus histopatologis

diperiksa kembali, total 40 kasus amelo blastoma dipilih yang padat / multicystic .

Segera setelah penghapusan, bahan bedah difiksasi dalam larutan formalin 10%

buffered netral. Spesimen itu kemudian dehidrasi melalui serangkaian etanol, dan

ditanam dalam parafin. setelah sectioning, spesimen seri diperiksa oleh

histopatologi (HE) pemeriksaan histopatologi.After, kami memeriksa pada

distribusi faktor transkripsi Notch1 dan Jagged1 oleh imunohistokimia (IHC)

teknik. IHC Pemeriksaan dilakukan menggunakan dako EnVisiontM + Kit (Dako

cytomation, Glostrup, Denmark) dengan 2 antibodi berikut: Notch1 kelinci

antibodi poliklonal (ab27526, abcam plc, cambridge, pengenceran: 1/1000, 4°C,

semalam) dan Jagged1 antibodi poliklonal kelinci (ab7771, abcam plc,

cambridge, pengenceran: 1/500, 4°C, semalam). Sebagai pra-pengobatan

pewarnaan imunohistokimia menggunakan Yang disebutkan di atas, pretreatment

autoclave (120°c, 10 menit) untuk notch dan protease K (suhu ruangan, min 2)

untuk Jagged . Diaminobendizine (Bubuhkan) diaplikasikan untuk visualisasi

kegiatan dan pewarnaan dilakukan oleh hematoxylin.Mereka termasuk pewarnaan

IHC menggunakan NaCa di tempat antibodi primer yang digunakan sebagai

kontrol negatif.

Untuk urutan secara objektif imunohistokimianya, poin yang digunakan

sebagai pengamatan adalah sebagai berikut :

1) Peripheral cuboidal cells of nests, 2) peripheral columnar cells of nests, 3)

central reticular cells of nests, 4) central squamous cells of nests, and 5)

stromal fibroblasts. Setiap kasus yang disebutkan di atas diukur. Satu

diantara mereka dengan reaksi positif terlepas dari intensitas pewarnaan

dapat diasumsikan positif. Jumlah sel positif mencapai, dan rasio jumlah

sel positif terhadap total sel objek gambar diperbesar yang kuat dengan

mikroskop cahaya diasumsikan cS-index.

Page 2: BAB 3.docx

Tabel 1. Ringkasan Surgical Materials Yang Diperiksa

Umur Jenis Kelamin Lokasi

Rata- rata

27.6

Laki - laki 24 Maxilla 4

Perempuan 16 Mandibula 36

10