laporan praktikum analisis klinik b · pdf filelaporan praktikum analisis klinik b ... untuk...
Post on 01-Feb-2018
298 Views
Preview:
TRANSCRIPT
LAPORAN PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK B
PENETAPAN KADAR KREATININ
Hari / Tanggal Praktikum : Jumat / 6 MARET 2009
Golongan : IV
Dosen Jaga : Riris Istighfari, M.Si., Apt.
Asisten Jaga : Mba’ Nanda + Mba’ Ainun
Nama / NIM :
1. FITRIA NUR HIDAYAH FA 07932
2. SYAHRI APRIYANTO FA 07940
3. MUROJIL HASAN FA 07941
4. FERAWATI P FA 07945
5. DENTALINA DESITA T.S FA 07948
6. LUCIA WIWIN INDRIYANI FA 07952
7. SHIRLEY ALEXANDER FA 08015
8. ANIS AHMAD PUAZIL FA 08226
9. AMIRATUL NABIHA FA 08227
10. NAEMAH MAT IDRIS FA 08228
11. ILANI ABU BAKAR FA 08229
12. MAZHRUL MUKHIMI MOHD FA 08230
13. AZATUL SHIMA AMDAN FA 08231
14.FAUZIAH TAIB FA 08232
15. MAMTA VESUDAVE FA 08233
16. NURUL HAZWANI FA 08234
17. NURZATUL EFFA FA 08235
18. SUHAINE MAT RAZALI FA 08236
19. SURAIYA HANI FA 08237
20.SUGENG PURWANTO FA 07944
FAKULTAS FARMASI UGM
YOGYAKARTA
2009
PENETAPAN KADAR KREATININ I. TUJUAN
Menetapkan kadar kreatinin dalam sampel urin dan plasma dengan metode Jaffe
modifikasi tanpa deproteinisasi serta menghitung jumlah leukosit, eritrosit, dan
trombosit darah.
II. PRINSIP DASAR PERCOBAAN
Percobaan ini sederhana, untuk penentuan kadar dengan bantuan larutan pikrat – basa
tanpa deproteinisasi. Reaksinya yaitu dengan mereaksikan kreatinin dengan asam
pikrat membentuk kompleks kreatinin – pikrat yang berwarna jingga dan memiliki
serapan λ 492 nm.
III.CARA PERCOBAAN
� Alat Bahan
• Pipet volume 1 ml Sampel urin
• Pipet ukur 2 ml Sampel plasma
• Pipet tetes Reagen 1
• Pro pipet Reagen 2
• Yellow tip Aquadest
• Blue tip Alkohol
• Tabung reaksi Reagen TURK
• Labu takar 100 ml Reagen HAYEM
• Kuvet dan Spektrofotometer Reagen Asam Oksalat 1%
• Mikropipet
• Eppendorf
• Syringe dan jarum
• Mikroskop
• Objek glass
IV. CARA KERJA
Cara I : SAMPLE Blangko Standard 50 µL( Replikasi 3 x) ( Aquadest 50 µL ) ( Baku standard 50 µL )
Tambahkan Reagen I ( 1000 µL )
Campur, kemudian inkubasi selama lima menit pada suhu kamar
Tambahkan Reagen II ( 250 µL )
Baca absorbansi ( 492 nm) pada menit pertama ( A1 )
Setelah 2 menit, baca absorbansi kembali ( A2 ) Cara II : Menggunakan Mono Reagen
SAMPLE Blangko Standard
Campur dengan monoreagen ( 8mL reagen I + 2 mL reagen II )
Baca Absorbansi ( 429 nm )
Cara Kerja Pengamatan Sel-sel Darah :
1. Eritrosit
4 mL Hayem ditambahkan 20 µL darah EDTA
Ditunggu 2-3 menit
Hitung Jumlah eritrosit
2. Leukosit
0,5 mL TURK ditambahkan 20 µL darah EDTA
Ditunggu 15 menit
Hitung Jumlah Leukosit
3. Trombosit
2 mL Amonium Oksalat 1% ditambahkan 20 µL darah EDTA
Ditunggu 3-5 menit
Hitung Jumlah Trombosit
V. Data Percobaan dan Perhitungan
Cara I Cara II No Data
A1 A2 A1 A2
1. Data Urin Replikasi I Replikasi II Replikasi III Baku
0,267 0,212 0,201 0,180
0,327 0,273 0,271 0,207
0,103 0,092 0,114 0,180
0,167 0,139 0,179 0,207
2. Data Plasma Replikasi I Replikasi II Replikasi III Baku
0,058 0,065 0,053 0,045
0,069 0,086 0,071 0,048
0,113 0,121 0,117 0,045
0,123 0,129 0,125 0,048
Hasil Pengamatan Sel-sel Darah :
Gb 1 : Apusan sampel darah
Gb 2 : Eritrosit
Gb 3 : Leukosit
Gb 4 : Trombosit
Data Urin
Cara I
Sampel I = 0,327-0,267 X 1 mg / 100 mL X fp ( 50 X )
0,207-0,180
= 111,11 mg / 100 mL
Sampel II = 0,273-0,212 X 1 mg/!00 mL X fp ( 50 X )
0,207-0,180
= 112,96 mg/100 mL
Sampel III = 0,271-0,201 X 1 mg/!00 mLX fp ( 50 X )
0,207-0,180
= 129, 63 mg/100 mL
Rata-rata = 111,11 + 112,96 + 129,63 = 117,90 mg/100 mL
3
Cara II
Sampel I = 0,167-0,103 X 1 mg / 100 mL X fp ( 50 X )
0,207-0,180
= 118,52 mg / 100 mL
Sampel II = 0,139-0,092 X 1 mg/!00 mL X fp ( 50 X )
0,207-0,180
= 87,04 mg/100 mL
Sampel III = 0,179-0,114 X 1 mg/!00 mLX fp ( 50 X )
0,207-0,180
= 120, 37 mg/100 mL
Rata-rata = 118,52 + 87,04 + 120, 37 = 108,64 mg/100 mL
3
Data Plasma
Cara I :
Sampel I = 0,069-0,058 X 1 mg / 100 mL
0,048-0,045
= 3,67 mg / 100 mL
Sampel II = 0,086-0,065 X 1 mg/!00 mL
0,048-0,045
= 7,00 mg/100 mL
Sampel III = 0,071-0,053 X 1 mg/!00 mL
0,048-0,045
= 6,00 mg/100 mL
Rata-rata = 3,67 + 7,00 + 6,00 = 5, 56 mg/100 mL
3
Cara II :
Sampel I = 0,123-0,113 X 1 mg / 100 mL
0,048-0,045
= 3,33 mg / 100 mL
Sampel II = 0,129-0,121 X 1 mg/!00 mL
0,048-0,045
= 2,67 mg/100 mL
Sampel III = 0,125-0,117 X 1 mg/!00 mL
0,048-0,045
= 2,67 mg/100 mL
Rata-rata = 3,33 + 2,67 + 2,67 = 2,89 mg/100 mL
3
Perhitungan Untuk pengamatan sel-sel darah
Jumlah Sel darah = 1 X fp X n
Volume kotak ( mm3 )
1. Eritrosit
n = 375
fp = 4 + 0,02 = 201 X
0,02
Volume Kotak = 0,04 X 5 = 0,02 mm3
Jumlah Sel darah = 1 X 201 X 375
0,02 ( mm3 )
= 3.768.750 sel / mm3
2. Leukosit
n = 80
fp = 0,5 + 0,02 = 26 X
0,02
Volume Kotak = ( 1x1x1x0,1) mm3 x 4 = 0,4 mm3
Jumlah Sel darah = 1 X 26 X 80
0,02 ( mm3 )
= 5.200 sel / mm3
3. Trombosit
n = 135
fp = 2 + 0,02 = 101 X
0,02
Volume Kotak = 0,04 mm3
Jumlah Sel darah = 1 X 101 X 135
0,04 ( mm3 )
= 340.875 sel / mm3
VI. Interpretasi Klinik dari Hasil Perhitungan
Kadar Kreatinin sampel urin
Ratio kadar kreatinin yang normal dalam urin ialah 14-26 mg / dL
Hasil percobaan melebihi ratio normal ( 117,897 mg/ 100 mL dan 108,64 mg /100
mL )
Hasil percobaan yang tidak sama mungkin disebabkan factor gangguan
makromolekul seperti protein, asam askorbat, dll.
Kadar Kreatinin sampel darah
Kadar Kreatinin normal ( menurut buku clinical chemistry ) sampel darah
# pada wanita
0,37 + ( 0,018 x umur )
# pada pria
0,35 + ( 0,025 x umur )
Sehingga kadar plasma normal pada wanita usia 21 tahun ( probandus ) adalah
0,748 mg/100mL
Sedangkan dari hasil perhitungan didapatkan kadar plasma sebesar
5,56 mg / 100 mL ( cara I )
2,89 mg/100 mL ( cara II )
Sehingga, pada percobaan kadar kreatinin lebih besar daripada kadar kreatinin
normal.
Hal ini disebabkan karena pada percobaan dimungkinkan plasma masih terdapat
makromolekul lain sepeti protein, glukosa, asam askorbat, dll. Yang nantinya
mempengaruhi hasil percobaan.
Pengamatan Sel-sel darah
Berdasarkan jumlah sel darah yang didapatkan (probandus perempuan):
1. Eritrosit : 3.768.750 sel/mm3
Normal = P : 3,6 – 4,8 jt sel/mm3
L : 4,1 – 5,1 jt sel/mm3
2. Trombosit : 340.875 sel/mm3
Normal = 150.000 – 400.000 sel/mm3
3. Leukosit : 5.200 sel/mm3
Normal = 5.000– 10.000 sel/mm3
Hal tersebut menunjukkan bahwa probandus mempunyai jumlah sel darah normal
karena semua hasil data masuk dalam range jumlah normal.
VII. Kesimpulan
1. Kadar kreatinin dalam sampel urin dan plasma pada percobaan ini ditetapkan
dengan metode Jaffe
2. Hasil percobaan kadar kreatinin sampel urin cara I dan II ;
117,897 mg/ 100 mL dan 108,64 mg /100 mL
Kadar kreatinin melebihi normal (14-26 mg / dL)
3. Hasil percobaan kadar kreatinin sampel darah cara I dan II ;
5,56 mg / 100 mL dan 2,89 mg/100 mL
Kadar kreatinin melebihi normal (0,748 mg/100mL)
4. Sedangkan untuk pengamatan jumlah sel darah jumlahnya normal baik
eritrosit, leukosit ataupun trombosit.
Daftar Pustaka
Rai et al, 2005, Plasma Preparation From Whole Blood, Proteomics,5 : 3262 – 3277
Ritchterich, R and Colombo, J.P., 1981, Clinical Chemistry, John Wiley & Sons, USA
top related