Alat dan Metode

Formulasi yang diujikan

Produk uji: Rosuvastatin 40 tablet mg, dibuat dan didistribusikan oleh Laboratorios Tecnoquímicas

S.A. di Kolombia. Batch 3P3123.

Produk referensi: Crestor® Rosuvastatin 40 mg tablet, dibuat dan didistribusikan oleh AstraZeneca.

KF476 batch.

Untuk menyatakan pharmaceutical ekuivalensi sebelum pengembangan studi in vivo, sifat fisikokimia

seperti penilaian bahan aktif dan keseragaman dosis yang dievaluasi untuk test dan referensi produk

dan hasilnya:

Subjek

Sebanyak 30 relawan yang sehat dari kedua jenis (15 wanita dan 15 laki-laki), non-perokok, dalam

berbagai usia rata-rata 32 tahun (19 - 49 tahun), berat rata-rata 61 kg (48-84 kg), tinggi rata-rata 161

cm (143-176 cm) dan BMI rata-rata 23,2 kg / m2 (19,0-27,7 kg / m2)

Sebelum tahap klinis, semua relawan harus melalui uji medis dan tes laboratorium untuk

mengkonfirmasi kondisi kesehatan mereka. Wanita juga diminta untuk melakukan tes kehamilan,

sejarah alkoholisme, riwayat penyakit yang membahayakan fungsi hati atau ginjal (diskrasia darah

atau proteinuria dianggap sebagai faktor pengecualian)

Pemeriksaan medis dan tes laboratorium klinis

Menghitung darah lengkap, bilirubin total, kreatinin, glukosa darah, protein total, analisis urin

lengkap, Elisa untuk HIV, antibodi terhadap hepatitis C dan B, elektrokardiogram dan tes kehamilan

pada wanita ditanya seperti tes laboratorium klinis.

informasi persetujuan / kontra :

Protokol dan informasi persetujuan yang disahkan oleh Etika di Komite Penelitian Klinis dari

Universidad de la Sabana (CEIC), yang diatur oleh pedoman hukum dan etika dari resolusi 008.430

dari tahun 1993 dan 002.378 2008 Kementerian Perlindungan Sosial (Kolombia), dari Konferensi

Dunia tentang Harmonisasi untuk Good Clinical Practice untuk lembaga yang melakukan penelitian

dengan manusia dan prinsip-prinsip Majelis Kedokteran Dunia diterbitkan dalam Deklarasi Helsinki,

lalu revisi pada tahun 2013.

perkuliahan dilakukan dengan relawan untuk menjelaskan studi secara rinci tentang penekanan pada

jenis obat yang digunakan, dosis, mungkin efek samping obat, volume darah yang akan ditarik dalam

setiap tahapan penelitian, bahan yang digunakan sampel ini akan diperoleh, beban / resiko yang

mereka peroleh dan pemantauan pengalaman, mereka harus paham akan menghadapi larangan atau

pantangan secara umum, semua informasi yang mereka butuhkan untuk memutuskan bahwa mereka

akan mendaftar sebagai volunteer dalam penelitian. Selanjutnya, masing-masing dari mereka

menandatangani bentuk informasi dan persetujuan.

Studi desain

Sebuah label terbuka, acak, dua periode, dua urutan, Crossover dengan periode washout dari 7 hari

desain yang digunakan. Tiga hari awalsebelum setiap periode, relawan harus menjauhkan diri dari

mengambil jenis obat, alkohol atau makanan atau minuman yang berisi methylxanthines. Pembatasan

ini tetap dipertahankan selama semua waktu sampling dan untuk semua relawan secara acak urutan

pengobatan.

Pemberian obat

- Relawan di puasakan selama 10 jam sebelum pemberian obat, diberi 200 mL air dengan dosis

40 mg Rosuvastatin, berarti 1 tablet 40 mg untuk setiap relawan.

- Selanjutnya 2 jam kemudian, masing-masing relawan diberikan makanan yang sudah menjadi

standar. Relawan diberikan jadwal makan lengkap 3 kali sehari (sarapan, makan siang dan

makan malam) dan 2 kali makanan ringan (di pagi hari dan siang hari) dan diberikan selama

periode pemantauan.

- Tim penguji terdiri atas dokter dan perawat yang berlisensi.

- Sebelum relawan diberikan obat, segera ambil sampel darah terlebih dahulu oleh

venipuncture di lengan menggunakan alat Vacutainer®, yang disebut waktu sampel nol.

Semua relawan menerima Uji produk atau produk referensi secara random, dan 14 sampel

darah vena diambil sesuai dengan waktu berikut: 0; 2, 3, 3,5,4, 4,5, 5, 6, 7, 8, 10, 24, 36 dan

48 jam.

- Sampel diberi label untuk identifikasi dan,

- Selanjutnya disentrifugasi pada 3000 rpm selama 30 menit.

- Plasma yang terbentuk dipindahkan ke dalam tabung yang sudah diberi label dan dibekukan

pada -20 º C untuk di analisis.

- Pemberian obat diulang setelah 7 hari dari waktu terakhir,setelah menyelesaikan periode uji

kedua.

Analisis validasi metode

Validasi ini dilakukan sesuai dengan prosedur validasi metodologi bioanalisa yang ditetapkan

oleh QUASFAR M & F SA (PL-021) dan memenuhi saran FDA untuk menunjukkan

spesifisitas, linearitas, presisi, dan akurasi yang cocok. metode bioanalisa digunakan untuk

Rosuvastatin dalam plasma adalah Ultra High Performance Liquid Chromatography-tandem

Mass Spectrometry (UHPLC-MS / MS) dengan ionisasi electrospray (ESI) mode. Dengan

cara sebagai berikut:

- Plasma sampel uji dibuat asam dengan cara tambahkan metanol dan asam asetat agar

membentuk kompleks ionik dengan tetra-n-butylammoniumhydroxide (0,5%).

- Lakukan ekstraksi cair-cair menggunakan etil asetat.

- Pemisahan analit diperoleh dengan menggunakan Zorbax Eclipse Ditambah C18 RHHD 2,1 x

50 mm, 1,8 mm Kolom.

- Lakukan elusi isokratik dengan fase gerak yang terdiri oleh Buffer: MeOH 20:80 (Buffer:

Asam format 2%). Total waktu berjalan adalah 1,5 menit.

- Injeksikan sampel pada UHPLC sebanyak 10,0 mikroL.

- Rosuvastatin terdeteksi dengan ESI + mode ionisasi, dengan pemantauan 482,2 --- 258,2 m /

z transisi.

Analisis farmakokinetik

Analisis farmakokinetik dilakukan dengan menggunakan WinNonlin 5.3 software (Pharsight

Corporation, Cary USA), dengan analisis non-kompartemen. Konsentrasi maksimum (Cmax) dan

waktu untuk mencapai (tmax) yang langsung diperoleh dari hasil konsentrasi plasma, FDA dan

European Medicines Agency (EMA)sebagai rekomendasi.AUCtotal dihitung dengan jumlah

AUC parsial: a) AUC0-t, antara waktu nol dan waktu terakhir dengan konsentrasi yang

terdeteksi, dihitung menggunakan cara trapesium, dan menjamin perhitungan setidaknya terdapat

AUC 80% dengan sampel terakhir, b) auct-∞ dihitung sebagai rasio C / K, menjadi C konsentrasi

terdeteksi terakhir dan K lereng kurva diperoleh dari titik-titik regresi linier yang sesuai dengan

fase eliminasi obat dari regresi linear logaritma konsentrasi sebenarnya. laju eliminasi konstan

(Ke), waktu paruh (t½), clearance (Cl) dan mean residence time (MRT), disesuaikan dengan

Bioavailabilitas, dihitung setelah melakukan analisis non-kompartemen. Hasil variabel

farmakokinetik dirangkum dalam Tabel 3, dengan Cmax, AUC0-t, AUC0-∞, Tmax dan laju

eliminasi konstan (Ke) nilai-nilai dari masing-masing formulasi yang diujikan.

Analisis statistik

Analisis varians (ANOVA) digunakan untuk menentukan efek yang mungkin bagi masing-

masing variasi faktor untuk sequance, periode atau subjek. Untuk ini, F-test digunakan dengan

signifikansi statistik 5% (α = 0,05%). Perbandingan statistik dari parameter farmakokinetik yang

berubah dari kedua formulasi dibuat menggunakan program statistik versi 5.3 WinNonlin.

Kriteria bioekivalensi berikut sudah ditetapkan dengan protokol: confidence interval 90% dari

Uji Cmax / Cmax obat Referensi dan Uji AUC terakhir obat Referensi, rasio yang dapat diterima

harus berada dalam kisaran 80-125%. Selain itu, parameter AUC terakhir tidak harus kurang dari

80% dari total parameter AUC.

Efek samping yang dilaporkan

Tidak ada efek samping yang dicatat berdasarkan INVIMA (otoritas Kolombia). Panduan,

pengadaan N º (1067-1008), dengan adanya keadaan berat atau ringan, atau tidak terkait dengan

pengujian obat. Kasus ini hanya dilaporkan dari hasil pengujian tanpa estimasi statistik, karena

ukuran sampel tidak memiliki kekuatan statistik yang cukup.