aktifitas antioksidan

8/16/2019 Aktifitas Antioksidan

http://slidepdf.com/reader/full/aktifitas-antioksidan 1/5

Aktiftas antioksidan dan eek antimutagenik dari senyawa enolik dalam

eronia limonia (L) buah swingle

Abstrak

L banyak digunakan di india sebagai obat sakit perut, diuretic, kardiotik dan

tonik untuk hati dan paru-paru. Pada studi ini, ree dan ikatan senyawa

enolik telah diekstrak dinyatakan dengan ekstraksi successive dari bubuk

buah matang. andungan enolik total die!aluasi berdasarkan metoda

ciocalteu-olin " aktiftas antioksidan oleh #PP$ kadar logam dan potensial

antimutagen oleh tes Amest. %kstrak &enolik glikosida dinyatakan lebih tinggi

('', mg*g,+A%) kandungan enolik total diikuti oleh enolik ester (,

mg*g) dan enolik bebas (//, mg*g). dimana sebagai aktiftas antioksidan

berturut-turut 00,1, //,01 dan ,0 1. %kstrak enolik dioksida ditun2ukkan

aktifta antioksidan lebih tinggi daripada antioksidan 3rolo4 dagang (56,51)

dan butilat hidroksitoluen (0,'1). Pada ' 7l*plate pengaruh antioksidan

signifkan ditun2ukkan dengan ekstrak enolik glikosida dan urutan aktiftas

antimutagenik yang telah ditemukan glikosida 8 ester enolik 8 enolik

bebas. $asil indikasi korelasi yg baik antara kandungan total enolik, aktiftas

antioksidan dan eek antimutagenik. &enolik glikosida salam feronia lemonia

bubur buah matang ditun2ukkan peluang aktiftas antioksidan, eek

antimutagenik dan diperlukan eksplorasi lebih lan2ut untuk eektinya

digunakan system modern dan tradisional dari kedokteran.

PENDAHULUAN

&eronia limonia (L) swingle (apel kayu), mempunyai amily 9utacea dan

didistribusi luas pada kebanyakan negara tropical dan subtropical. L

alamiahnya dan umum di :ndia, ;ri Lanka, <hina dan :ndonesia, dimana

dibudidayakan di sepan2ang 2alan dan taman dan terkadang di kebun. =uah

L dikenal sebagai tumbuhan medis pada saat >aman ?unani dan 9omawi dan

salah satu tumbuhan paling penting dari @Ayur!ed, obat tradisional :ndia. #i

:ndia, buah ini digunakan untuk sakit perut, diuretic, kardiotonik dan tonik



untuk hati dan paru-paru. Laporan belakangan ini telah mengidentifkasikan

ungsinya dalam gangguan gastrointestinal.

#alam tiga decade akhir ini, obat*ormula bebasis antioksidan untuk

pencegahan dan perlakuan untuk beberapa penyakit seperti atherosclerosis,

struk, diabetes, Al>heimer, dan kanker mulai bermunculan. :ni menarik

banyak kepentingan riset dalam antioksidan alami, dan tren ke arah

penggunaan otokimia alami khususnya senyawa enolik hadir pada tanaman

berry, teh, herbal, minyak sayur, bi2i, buah, dan sayur-sayuran telah

meningkat.

=anyak studi penelitian telah menun22ukan bahwa diet yang kaya akan buah-

buahan" sayuran dan berasal dari produk makanan memiliki keuntungan

kesehatan melawah penyakit cardio!ascular, penyakirt kronis dan beberapa

2enis kanker. Agen utama bertanggung 2awab untuk eek perlindungan dapat

hadir pada senyawa antioksidan yang memperlihatkan eeknya sebagai

penghancur radikal bebas, senyawa penyumbang hydrogen dan pereduksi.

Bamun, akhir-akhir ini polienol telah diteliti se2ak ditemukan dengan

keuntungan sebagai antioksidan yang kuat dang antimutagenik. ;enyawa

enolik adalah molekul yang paling tersebar luas di alam dan sangat banyak

ditemukan pada tumbuhan, bi2i, bi2i-bi2ian dn sayuran yang dilaporkan

memiliki eek bilogis berganda, termasuk aktiftas antioksidan, antitumor,

antimutagenik, dan siat antibakteri. Aktiftas antioksidan dari senyawa

enolik terutama disebabkan oleh siat redoksnya, yang memiliki peran

penting dalam system perlindungan tubuh. arena siat kesehatan mereka,

telah diperbarui minat dalam studi dan pengukuran metabolit enolik dalam

buah-buahan, bi2i, dan sayur-sayuran.

Bamun, se2auh yang kita tau, tidak ada literature untuk aktiftas

antioksidan dan eek antimutagenik dari buah bubur feronia limonia yang

matang yang telah dipublikasikan. Lalu, tu2uan dari karya ini adalah untuk

penya2ian ekstrak senyawa enolik pada buah bubur feronia limonia dan

menentukan kandungan enolik totalnya, aktiftas antioksidan, dan eek

antimitagenik untuk menge!aluasi kemungkinan kontribusinya sebaagai



antioksidan dan antimutagen, yang akhirnya bisa digunakan sebagai

perantara potensial dalam phytomedicine.

BAHAN DAN METODA

Bahan kimia dan reagen

9eagen &olin-<iocalteu didapatkan dari Cerck, Derman, #PP$ E/,/-

dienil-'-pikrilhidra>ilF, =utilat hidroksitulen (=$3), dan 3rolo4 didapatkan dari

;igma-Aldrich (Derman), asam +alik monohidrat, asam Askorbik dan natrium

a>ida didapatkan dari ;.#.&ine-chem (Cumbai, :ndia). Agar Colten halus

didapatkan dari $iCedia (Cumbai, :ndia) ;almonela tipimurium strain 3A/

didapatkan dari 3rino!a =iochem (Derman). ;aat ini, bahan-bahan tersebut

sedang di2aga di laboratorium di Primal Lie ;ciences, Cumbai, :ndia.

Sampel buah pra! perlakuan dan pen"impanan

buah eronia lemonia (L) swingle dipanen dari pohon yg berbeda dari

asal yang sama pada 2anuari '0 di area pedesaan Pune #istrik

Caharashtra. :ndia. ;etelah panen, buah akan diidentifkasi and diu2i di

2urusan pertanian, 3he :nstitute o ;cience, Cumbai, :ndia. ;emua buah segar

dengan ukuran yg sama dan penampilan dan rsa dari kematangan. =uah yg

matang di2aga dari sinar matahari selama dua minggu sampai matang

sempurna. ulit luar dihancurkan dengan alu dan lumpang sampai bubur

keluar dan disaring untuk menghilangkan bi2i dan partikel serat. =ubur

dihomogenkan dibawah nitrogen selama ' menit dan di2aga dalam tempat

kedap udara dalam pendngin (-/0<) sampai penggunaan selan2utnya.

Eks#raksi

;enyawa enolik pada bubur buah matang diekstraksi sebagai pelarut

methanol enolik bebas dan senyawa ikatan enolik contohnya enolik

glikosida dilepaskan setelah dihidrolisis oleh asam, dan ester enolik

dilepaskan setelah hidrolisis alkalin, dengan modifkasi yang sama.

Eks#raksi $en%lik bebas

Gntuk mendapatkan senyawa enolik bebas, 6g bubur disonikasikan

dalam 6ml campuran methanol dan air (6H/) , selama menit. ;etelah



disentrius pada / rpm selama / menit. ;upernatant dipisahkan pada

corong pemisah dan ekstraksi diulang duplo. ombinasi supernatant

diekstraksi dua kali dengan ml heksana. Lapisan organic teratas dibuang

dan lapisan air dipisahkan men2adi dua bgain dan die!aporasi pada tekanan

yg lebih rendah pada 6<. satu bagian residu direkonstitusi dengan /ml

campuran air dan asam ormic (, H ,) dan bagian lainnya di rekonstitusi

dengan /ml #C;I untuk aktiftas antimutagenik. =ubur residu, didapatkan

setelah sonikasi dan fltrasi, yang telah dipisahkan ke dua bagian dan

digunkan untuk enol glikosida danekstraksi senyawa ester enolik .

Eks#raksi $en%l glik%sida

=agian pertama bubur residu dihancurkan dengan /ml ' B asam

hidroklorik dalam methanol < selama 5menit. ;etelah larutan

didingnkan difltrasi dan fltrate diekstraksi dua kali dengan mL dietil eterH

eter petroleum ringan (/H/). Lapisan organic teratas dibuang dan lapisan air

diekstraksi lima kali dengan mL campuran dietil eter dan etil asetat (/H/).

ombinasi lapisan oranik dipisah men2adi dua bagian yang ama dan

die!aporasi pada tekanan yang lebih rendah pada 6<. ;atu bagian dari

residue di rekonstitusi dengan /mL $<l dalam methanol dan yang lainnya

direkosntitusi dengan mL #C;I untuk aktiftas antimutagenik,

Eks#raksi es#er $en%lik

=agian kedua dari residu dihancurkan dengan / mL dari 'C BaI$

pada suhu kamar dan dikocok pada gas nitrogen selama ' 2am. <ampuran

kemudian di asamkan pada p$ '- pad /C asam hidroklorik di dalam

cooling-ice bath dan diekstraksikan dengan /mL heksana untuk

memisahkan lemak dengan corong pemisah. Lapisan air akhir diekstraksikan

lima kali dengan mL dietil eter-etil asetat (/H/) menggunakan corong

pemisah. Lapisan organic yang telah dkombinasikan dipisah men2adi dua

bagian yang sama dan die!aporasi pada tekanan yang lebih rendah pada

6<. ;atu bagian dari residue direkonstitusi dengan 'mL air-asam ormic

dan yang lainnya direkonstitusi dengan mL #C;I untuk aktiftas

antimutagen.



&andungan $en%lik #%#al

andungan enolik tolat dari tiga ekstrak ditentukan dengan metoda

reagen &olin-<iocalteu. Gntuk / Jl dari tiap ekstrak dan larutan asam galik

standar (.',.6,.,.5 and . mg*mL) '. mL dari reagen &olin-<iocalteu

(/B) ditambahkan dan diikuti dengan . mL dari .1 larutan natrium

karbonat ditambahkan dan dicampurkan dengan baik. ;etelah ' 2am inkubasi

pada suhu kamar, absorban diukur pada 5 nm. $asilnya digambarkan

dengan milligram dari asam galik ekui!alen per gram dari berat kering.

Ak#i'#as penghancur radikal DPPH

Aktiftas penghancur dari /, radikal /-dienil-'pikrilhidra>il (#PP$)

radikal bebas dengan tiga ekstrak dan antioksidan yang diketahui diperorm.

;ebuah aliKuot dari ' Jl dari enolik bebas (.'-'.mg*ml) dicampurkan

dengan 0 Jl dari nC 3ris-$<l buer (p$ ,6), campuran kemudian

ditambahkan ke /mL dari Jl #PP$ dalam etanol. Cetanol (' Jl) hanya

digunakan sebagai kontrol eksperimen. <ampuran reaksi diinkubasi selama

menit pada suhu kamar dan penurunan absorban diukur pada / nm.

Persen inhibisi dinyatakan sebagai persentase inbibisiM (1) dari #PP$ pada

berat kering.

9umus absorban

Bilai %< ditentukan dari grafk plot dari aktiftas oenghancur melawan

!ersus konsentrasi dari ekstrak, yang diartikan sebagai 2umlah antioksidan

yang penting untuk penurunan konsentrasi radikal#PP$ awal sebanyak 1.

aktifitas antioksidan

Documents