rufy kuljar acara i-v.doc

7/26/2019 rufy kuljar acara I-V.doc

1/53

1

ACARA I

STERILISASI ALAT, PEMBUATAN LARUTAN STOCK, DAN

PEMBUATAN MEDIA

A. Pendahuluan

1. Latar Belakang

Teknik kultur jaringan yang harus dilakukan adalah sterilisasi alat

dan media kultur. Sterilisasi alat perlu dilakukan untuk menghindari

adanya kontaminasi dari mikroorganisasi. Media kultur diperlukan untuk

eksplan agar memenuhi nutrisi dan zat-zat dalam pertumbuhan dan

perkembangan. Perbanyakan kultur jaringan ini dilakukan menggunakanbagian vegetati tanaman dan dilakuakan ditempat yang steril.

Sterilisasi dimaksudkan untuk men!iptakan serta memelihara

kondisi aseptik. "kuran sumber kontaminan #bakteri dan jamur$ yang

sangat ke!il mengharuskan media tumbuh dan eksplan bebas dari sumber

kontaminan untuk menghindari kontsminasi. Perlunya sterilisasi guna

men!egah kontaminasi yang akan memba%a k%gagalan bagi

keberhasilan kultur jaringan.

&ultur jaringan tanaman adalah suatu metode atau teknik

mengisolasi bagian tanaman #protplasma' sel' jaringan' dan organ$ dan

menumbuhkannya pada media buatan dalam kondisi aseptik di dalam

ruang yang terkontrol sehingga bagian-bagian tanaman tersebut dapat

tumbuh dan berkembang menjadi tanaman lengkap didalam %adah

tertutup yang tembus !ahaya. &ultur jaringan mengandung dua prinsip

yaitu bahan tanam yang bersiat totipotensi dan budidaya yang

terkendali. &egiatan dalam kultur jaringan dipengaruhi oleh' keadaanmedia tanam' lingkungan tumbuh atau aktor lingkungannya' #p(' suhu'

kelembaban serta sterilitasnya perlu terjamin dan !ahaya$ serta sterilitas

mutlak harus terjamin juga mendukung keberhasilan.

Salah satu pembatas dalam keberhasilan kultur jaringan adalah

kontaminasi yang dapat terjadi pada setiap saat dalam masa kultur.

&ontaminasi dapat berasal dari aktor internal maupun eksternal' untuk

itu diperlukannya pemahaman mengenai pentingnya sterilisasi alat dalam

men!egah terjadinya kontaminasi. )aktor lainnya berupa media untuk1


2/53

*

mendukung pertumbuhan eksplan #bagian tanaman yang akan

dikulturkan$' media setidaknya mengandung unsur hara makro' hara

mikro' karbohidrat' zat tumbuh' maupun bahan pemadat #agar$.

Pentingnya memahami dan mampu melaksanakan mengenai prinsip-

prinsip sterilisasi alat' pembuatan larutan stok dan pembuatan media ini'

agar setiap mahasis%a mampu melaksanakan kultur jaringan.

*. Tujuan Praktikum

Praktikum &ultur +aringan a!ara , mengenai Sterilisasi lat'

Pembuatan Larutan Sto!k' dan Pembuatan Media memiliki tujuan

sebagai berikuta. Mengetahui metode dan ma!am sterilisasi dalam kultur jaringan

yang meliputi sterilisasi alat' ruang' dan eksplan

b. Mengetahui prosedur sterilisasi alat-alat penanaman #diseksi$ dan alt

ka!a seperti botol kultur' petridish' erlemeyer dan lain-lain

!. Mengetahui langkah-langkah dalam pembuatan media kultur

jaringan terutama dalam pembuatan sto!k makro nutrient' mikro

nutrient' larutan buer #)e-/0T$' vitamin' dan at Pengatur

Tumbuh #PT$

2. 3aktu dan Tempat Praktikum

Praktikum &ultur +aringan a!ara , mengenai Sterilisasi lat'

Pembuatan Larutan Sto!k' dan Pembuatan Media dilaksanakan pada

&amis' *2 pril *415' pada &amis' 24 pril *415' dan pada &amis 6

Mei *415 pukul 17.24-15.24 3,B di Laboratorium &ultur +aringan'

)akultas Pertanian' "niversitas Sebelas Maret' Surakarta.

B. Tinjauan Pustaka

Teknik kultur jaringan tumbuhan atau kultur in vitro dapat dijadikan

sebagai alternati peme!ahan masalah bagi perbanyakan bibit dan perolehan

metabolit sekunder dari tanaman ini. Teknik ini dapat menghasilkan metabolit

sekunder dalam jaringan tanaman dan juga dalam sel-sel yang dipelihara pada


3/53

2

media buatan se!ara aseptik. Metabolit sekunder bisa diperoleh melalui kultur

kalus. Metabolit yang dihasilkan dari kalus sering kali kadarnya lebih tinggi

dari pada metabolit yang diambil langsung dari tanamannya. Salah satu !ara

yang dapat dilakukan untuk meningkatkan pertumbuhan kalus adalah dengan

menambahkan pra zat ke dalam media. Media kultur jaringan tumbuhan

berisi garam-garam mineral' hormon' vitamin' sumber karbon' dan asam

amino. Pemilihan media kultur jaringan merupakan kun!i sukses dalam

kultur jaringan. (al ini menyebabkan banyak diadakan penelitian untuk

memodiikasi media-media yang memberikan respon berbeda terhadap

berbagai ma!am tanaman #Sitorus *411$.

Media yang digunakan dalam kultur jaringan sebaiknya terdiri atas

garam-garam anorganik #paling sedikit membutuhkan 18 unsur hara untuk

pertumbuhan$. at-zat organik' %alaupun tanaman yang tumbuh dalam

kondisi normal bisa mensintesa semua kebutuhan organiknya' namun tidak

menghasilkan vitamin dalam jumlah yang !ukup untuk pertumbuhan sehat'

maka biasa diberi tambahan mio inositol' asam amino' dan vitamin' bila perlu

ditambahkan air kelapa' ragi' tauge' dan lain-lain. Sumber karbon' untuk

men!ukupi kebutuhan sintesis karbonnya' biasa diberikan sukrosa ke dalam

media. Bahan pemadat' biasanya menggunakan agar supaya media tetap

stabil tidak goayang-goyang. &easaman media' p( media diatur berkisar 5'8

-5'9 agar tidak mengganggu ungsi membran sel dan p( sitoplasma. at

pengatur tumbuh' kepekaan jaringan terhadap penambahan zpt ditentukan

oleh konsentrasi hormon yang ada dalam jaringan. :uadest dan arang akti'

arang akti berguna mengadsorpsi persenya%aan to;i! yang terdapat dalam

media yang dapat menghambat pertumbuhan kultur. Buer' penambahan

asam amino yang biasa digunakan )eSunus *414$.

Lingkungan aseptik sebagai salah satu syarat utama suksesnya kegiatan

kultur jaringan perlu diterapkan dengan sungguh-sungguh. "ntuk itu perlu

adanya usaha sterilisasi peralatan yang akan digunakan dalam proses kultur.

Sterilisasi ruang' bagian dalam laminar air flowdisemprot dengan alkohol

64?. &emudian lampu ultraviolet #"@$ dinyalakan selama 1 jam. Saat akan


4/53

7

digunakan' lampu neon dan kipas dinyalakan. Sterilisasi alat, alat-alat

dissecting setdanglass wareyang akan digunakan di!u!i terlebih dahulu dan

dikeringkan kemudian dibungkus dengan kertas payung' sedangkan mulut

botol ditutup dengan alumunium oil. Selanjutnya alat-alat disterilisasi di

dalam auto!la dengan suhu 1*1A selama 15 menit. Proses inokulasi

eksplan' alat-alat disse!ting set disterilisasi dengan alkohol C8? dan dibakar

dengan nyala api spiritus setiap kali akan digunakan di laminar air flow.

Sterilisasi media yang digunakan adalah media Murashige and Skoog atau

MS di masukkan ke dalam botol kultur dan disterilisasi dengan autokla

dengan suhu 1*14 selama 15 menit. Sterilisasi eksplan' permukaan eksplan

daun terdiri dari * tahap sterilisasi yaitu sterilisasi tahap , yang dilakukan di

ruang persiapan dan sterilisasi tahap ,, yang dilakukan di laminar air flow.

Sterilisasi tahap , meliputi 0aun tembakau muda #daun ketiga sampai kelima

dari pu!uk$ diambil dari green house dibilas dengan air mengalir hingga

bersih. Sedangkan sterilisasi tahap ,, dilakukan setelah sterilisasi tahap ,'

meliputi 0aun direndam dalam larutan etanol 64? selama *5 detik'

kemudian dibilas dengan a:uades steril selama 5 menit' &emudian dibilas

dengan a:uades steril selama 5 menit sebanyak 2 kali. Selanjutnya eksplan

diambil dengan pinset dan ditiriskan pada !a%an petri yang berisi kertas

saring #ulkarnain' *44C$.

at pengatur tumbuh tanaman berperan penting dalam mengontrol proses

biologi dalam jaringan tanaman. Perannya antara lain mengatur ke!epatan

pertumbuhan dari masing-masing jaringan dan mengintegrasikan bagian-

bagian tersebut guna menghasilkan bentuk yang kita kenal sebagai tanaman.

ktivitas zat pengatur tumbuh didalam pertumbuhan tergantung dari jenis'

struktur kimia' konsentrasi' genotipe tanaman serta ase isiologi tanaman.

0alam proses pembentukan organ seperti tunas atau akar ada interaksi antara

zat pengatur tumbuh eksogen yang ditambahkan kedalam media dengan zat

pengatur tumbuh endogen yang diproduksi oleh jaringan tanaman #3inata

1C96 dalam Lestari *411$.


5/53

5

Larutan sto!k adalah larutan dengan konsentrasi lebih pekat

dibandingkan dengan konsentrasi yang seharusnya. +ika ingin memakainya'

tinggal mengambil larutan stok tersebut untuk dien!erkan sesuai ormula

media kultur. Semua unsur hara' vitamin' hormon dan gula lalu ditambahkan

air sampai satu liter dan diaduk sampai semua bahan larut. Se!ara umum'

hormon yang digunakan dalam kultur jaringan ada tiga kelompok besar' yaitu

auksin' sotokinin dan giberil.uksin berungsi untuk merangsang

pertumbuhan akar' siitokinin untuk pertumbuhan tunas pu!uk' dan giberelin

untuk dierensiasi atau perubahan ungsi sel terutama pembentukan kalus.

ontoh hormon kelompok auksin adalah ,' =' atau ,B. ontoh hormon

kelompok sitokinin adalah BP. sedangkan !ontoh hormon kelompok

giberelin adalah D 2' D * dan D 1 #Sandra *444$. Gibberellic Acid#D$

terdapat dalam semua organ tanaman' dengan tingkat yang berbeda-beda'

terdapat banyak pada buah' biji' tunas' daun muda dan akar #Eahayu *449$.

C. Alat, Bahan, dan Caa Keja

1. lat

a. Peralatan untuk peanaman eksplan' meliputi

1$ Laminar ir )lo% abinet #L)$' lengkap dengan lampu

bunsen yang berisi spirtus


6/53

8

*$ Petridish dan botol-botol kultur

2$ Peralatan diseksi' yaitu pinset besarFke!il' pisau pemes' gunting

eksplan.

lat-alat penanaman' yaitu petridish dan peralatan diseksi

dibungkus dengan kertas' kemudian disterilisasi di dalam autokla

pada tekanan 1'5 kgF!m* selama 75 menit. Setelah disterilisasi' alat-

alat tersebut disimpan di dalam oven.

b. Peralatan untuk pembuatan media' meliputi

1$ Timbangan analitik

*$ Botol-botol kultur

2$ Magnetik stirrer

7$ p( meter 5$ Delas piala

8$ Pipet

6$ Plastik pp 4'2 mm

9$ &aret gelang

C$ &ertas label

*. Bahan-bahan untuk pembuatan media

a. Media Murashige and Skoog #MS Medium$

b. :uadest

!. Larutan sto!k' terdiri atas hara makro dan mikro' vitamin serta PT

d. gar-agar

e. Dula

. =a


7/53

6

ara membuat larutan sto!k masing-masing PT adalah

sebagai berikut

a$ Menghitung kebutuhan bahan BP 144 ppm sebanyak 244

ml adalah sebagai berikut

144 ppm G 144 mgFl

G 24 mgF4'2 l

G 24 mgF244 ml

b$ Menghitung kebutuhan bahan ,B 144 ppm sebanyak 144

ml adalah sebagai berikut

144 ppm G 144 mgFl

G14 mgF4'1 lG14 mgF144 ml

!$ Melarutkan bahan dengan lkohol atau =ausnita *447$

Langkah-langkah pembuatan media #1 liter$ adalah sebagai

berikut

1$ Mengambil masing-masing larutan sto!k sesuai dengan ukuran

yang telah ditentukan dan memasukkannya ke dalam gelas piala

*$ Mengambil larutan sto!k PT sesuai dengan perlakuan'

misalnya

a$ "ntuk membuat media 1 L dengan konsentrasi BP * ppm'

maka volume larutan sto!k yang diambil adalah

@1 H M1 G @* H M*

@1 H 144 ppm G 1444 ml H * ppm


8/53

9

@1 G *4 mlFL

b$ "ntuk membuat media 1 L dengan konsentrasi , 4'5

ppm' maka volume larutan sto!k yang diambil adalah

@1 H M1 G @* H M*

@1 H 144 ppm G 1444 ml H 4'5 ppm

@1 G 5 mlFL

&eterangan @1 G volume larutan sto!k yang diambil

M1 G dosis larutan sto!k yang tersedia

@* G volume media yang akan dibuat

M* G dosis media yang akan dibuat

!$ Menambah a:uadest sampai 1444 ml

d$ Menambah gula sebanyak 24 gr

e$ Mengatur p( dalam kisaran 5'9- 8'2 dengan menambahkanbeberapa tetes =a


9/53

C

D. !asil dan Pe"#ahasan

1. (asil Pengamatan

Tabel 1.1 Peralatan dan Bahan !ara Sterilisasi lat' Pembuatan

Larutan Stok dan Pembuatan Media

=o Dambar

1.

Dambar 1.1 Botol kultur

Botol-botol kultur yang sudah dibersihkan

menggunakan sabun !air kemudian diangin-

anginkan selama satu hari. Botol ysng

digunakan sebanyak 5 botol per individu

*.

Dambar 1.* Bahan Media

@itamin sebanyak 65 ml.

Bubuk agar sebanyak 1* gr.

Dula pasir digunakan sebanyak 75 gr.

"ntuk a:uadest sebanyak 1544 ml.

2.

Dambar 1.2 Pegambilan

bahan

Pengambilan bahan dan PT menggunakan

pipet dalam pembuatan media sebagai

nutrisi bagi eksplan

7.

Dambar 1.7 p( media

Mengukur p( dengan alat p( meter sampai

berkisar 5'9-8'2. Pada praktikum ukuran p(

larutan stok 5'C.

5.

Dambar 1.5 Pen!ampuran

Pen!ampuran media sedang dilakukan

didalam didalam gelas piala dan diaduk

dengan menggunakan magnetik stirrer.


10/53

14

Media

8.

Dambar 1.8 Delas ukur

Delas ukur untuk menakar jumlah

komponen media !air yang dibutuhkan.

6.

Dambar 1.6 Media MS

yang siap digunakan

Media yang sudah jadi dimasukkan kedalam botol-botol kultur kemudian ditutup

dengan plastik dan dimasukkan kedalam

autokla untuk proses sterilisasi.

9.

Dambar 1.9 Mesin

autoclave

utokla digunakan untuk proses sterilisasi

dengan tekanan 1'5kgF!m*

selama 75 menit.

Sumber 0okumentasi

*. Pembahasan

Menurut 0ebergh #1C92$ dalam Merlin #*412$' bentuk isik media

kultur sanagat mempengaruhi penyerapan dan pemanaatan hara bagi

tanaman kultur. Penggunaan MS media !air dan adanya komposisi hara

makro' hara mikro dan vitamin yang lengkap dalam MS media !air

sangat diperlukan oleh tanaman untuk meningkatkan pembentukan akar.

&eberhasilan penggunaan metode kultur jaringan tergantung dari

pemilihan bahan tanam sebagai eksplan menetukan keberhasilan

perbanyakan se!ara in vitro. Selain itu' perkembangan eksplan selama

periode kultur dapat dipa!u dengan memodiikasi ketersediaan hara dan

zat pengatur tumbuh dalam media kultur. Proses pembentukan organ

tanaman in vitrodapat diinduksi melalui dire!t organogenesis maupun


11/53

11

undire!t organogenesis' melalui proses pembentukan kalus menurut

Deorge dan Sherrington #1C97$ dalam Marlin. &alus merupakan

sekelompok massa sel yang berkembang dengan !epat tetapi belum

terorganisir.

Baik atau tidaknya media yang buat atau ditandai dengan tidak atau

adanya sumber kontaminan yang menyebabkan media akan mun!ul

bakteri pada media. Media yang terkena bakteri %arnanya akan kuning

atau menghitam sebelum digunakan sebagai media tanam. Pada dasarnya

peralatan yang digunakan dalam kultur jaringan harus bersih dan steril.

Peralatan yang tidak steril dapat menyebabkan tanaman yang ditanam

pada kultur jaringan menjadi terkontaminasi sehingga bahan eksplan

tidak dapat tumbuh kembang dan menghambat proses pertumbuhan

karena jamur dan bakteri. Media kultur jaringan menyedia tidak banyak

unsur hara mikro dan makro' tetapi pada karbohidrat yang pada

umumnya beberapa gula untuk menggantikan karbon yang didapat dari

otosintesis.

Tingkat keasaman #p($ pada media juga perlu diperhatikan. Sel-sel

tanaman yang dikembangkan dengan teknik kultur jaringan mempunyai

toleransi yang dikembangkan dengan teknik kultur jairngan mempunyai

toleransi p( yang relati sempit dengan titik optimal antara p( 5'9-8'2

#0aisy 1CC7 dalam Marlin$ sebab pada keasaman ini merupakan p(

yang optimum untuk penerapan hara oleh tanaman. Pada praktikum

digunakan =a


12/53

1*

sangat diperlukan untuk melarutkan bahan yang digunakan oleh

mikroorganisme untuk bisa hidup. @itamin adalah bahan yang perlu

ditambahkan dalam media kultur in vitro' sebab sel bagian tanaman yang

dikulturkan se!ara in vitrobelum mampu membuat vitamin sendiri untuk

kehidupannya. Dula digunakan sebagai sember energi dalam media

kultur' karena umunya bagian tanaman atau eksplan yang dikulturkan

tidak autotro dan mempunyai laju otosintesis yang rendah.


13/53

12

1. &esimpulan

0ari praktikum a!ara , Sterilisasi lat' Pembuatan Larutan Stok dan

Pembuatan Media dapat diambil kesimpulan' sebagai berikut

a. MS #Mueashige & Skoog$ memiliki kandugan garam-garam yang

lebih tinggi daripada media yang lain.

b. Media tanam harus berisi semua media zat yang diperlukan untuk

menjamin kebutuhan eksplan.

!. p( dan kesterilan peralatan diseksi' botol kultur beserta bahan

praktikum mempengaruhi pertumbuhan eksplan.

*. Saran

0ari praktikum a!ara , Sterilisasi lat' Pembuatan Larutan Stokdan Pembuatan Media dapat diambil saran' bah%a praktikan perlu

berhati-hati dalam melakukan sterilisasi botol kultur dan peralatan

diseksi agar tidak terjadi kontaminasi. Saat proses pemindahan bahan

praktikum menuju mediapun juga perlu berhati-hati. Praktikan harus

memperhatikan o ss agar saat parktikum tidak banyak bertanya utnuk

menghindari terjadinya kontaminasi.

DA%TAR PUSTAKA

/ndang D Lestari *411. Peranan at Pengatur Tumbuh dalam Perbanyakan

Tanaman melalui &ultur +aringan.Jurnal AgroBiogen6#1$82-89. Bogor.

Marlin *412. Pengembangan Teknologi Mikroprogasi Tanaman +ahe Dajah Bebas

Penyakit Layu Bakteri Ralstonia solanacearum. a!oran Tahun 1

Penelitian (ibah &ompetisi Bantuan


14/53

17

Eahayu' (esti *449. (asil &andungan Protein &edelai #Gl"cine Ma# . Merril$

pada Berbagai Tingkat Pemberian =itrogen dan Diberelin. Jurnal

Agrosains6#2$ 169-191. )akultas Pertanian "=S. Surakarta.

Sitorus /= *411. ,nduksi &alus Binahong #Basella rubra .$Se!ara ,n @itro Pada

Media Murashige Skoog 0engan &onsentrasi Sukrosa >ang Berbeda.

Jurnal B%MA. @ol.12 #1$6-1*

>unus' hmad' Samanhudi' malia T Sakya' Muji Eahayu *414. 'eknologi

(ultur Jaringan. "=S Press. Surakarta

ulkarnain *44C.(ultur Jaringan 'anaman. Bumi ksara. +akarta

ACARA II

KULTUR TANAMAN K!ASIAT OBAT

&'A!E(

A. Pendahuluan

1. Latar Belakang

Tanaman khasiat obat merupakan bahan baku obat herbal yang

memiliki kandungan dan khasiat bagi kesehatan manusia. Sebagian


15/53

15

besar tanaman yang digunakan sebagai obat atau bahan obat merupakan

metabolit sekunder. &ultur jaringan adalah menumbuhkan sel atau

jaringan pada medium tertentu dalam kondisi su!i hama #aseptis$'

melalui kultur sel perbanyakan tumbuhanFhe%an dapat dilakukan se!ara

!epat' jumlahnya terbatas' hemat tempat dan %aktu' serta memiliki siat

identik. Perbanyakan tanaman yang sesuai adalah dengan teknik kultur

jaringan' dimana tanaman yang didapat dalam jumlah besar' seragam'

bebas virus dan penyakit' sehingga aman di konsumsi manusia.

+ahe banyak digunakan sebagai obat pembantu pen!ernaan karena

eek panasnya terhadap perut dan sebagai obat anti ra!un. Manaat lain

dari tanaman beraroma khas ini adalah sebagai persediaan makanan

segar dan obat pen!egah penyakit kulit para pelayar pada pelayaran

antara ina dan sia Tenggara. "munya jahe telah dibudidayakan oleh

penduduk dan jarang diketemukan se!ara liar di +a%a' meskipun

beberapa ahli mengatakan bah%a jenis ini sekarang sudah tersebar luas

dihampir seluruh kepulauan ,ndonesia. ,ndonesia merupakan slah satu

negara pengekspor tanaman bioarmaka diantaranya jahe' ken!ur' kunyit

dan temula%ak.

Tanaman obat mempunyai peranan yang sangat besar dalam bidang

kesehatan dikarenakan dapat memproduksi zat-zat kimia yang memiliki

kegunaan yang potensial dalam pengobatan. Tanaman berkhasiat obat

yang terkenal khasiatnya dan sering dikonsumsi masyarakat ,ndonesia

adalah jenis tanaman jahe' kunyit' temula%ak dan ken!ur. Pengadaan

bibit se!ara besar untuk menunjang kebutuhan obat maupun menunjang

kesehatan diperlukan se!ara mutlak. Perbanyakan tanaman yang sesuai

adalah dengan teknik kultur jaringan' dimana tanaman yang didapat

dalam jumlah besar' seragam' bebas virus dan penyakit' sehingga aman

di konsumsi manusia.

*. Tujuan Praktikum

Praktikum &ultur +atingan a!ara ,, mengenai &ultur Tanaman

&hasiat


16/53

18

b. Mengetahui pengaruh BP dan ,B terhadap pertumbuhan dan

perkembangan eksplan jahe dan ken!ur.

2. 3aktu dan Tmpat Praktikum

Praktikum &ultur +aringan a!ara ,, mengenai &ultur Tanaman

&hasiat


17/53

16

kenal sebagai tanman. ktivitas zpt di dalm pertumbuhan tergantung dari

jenis' struktur kmia' konsentrasi' genotipe tanman serta ase isiologi tanaman

#bdillah *412$.

Tanaman jahe #)ingiber offici*nale Rosc.$' temula%ak #+urcuma

#anthorrhia Rosc.$' kunyit #+urcuma domestica$' dan bangle #)ingiber

cassumunar$' merupakan tanaman dari kelompok temu-temuan yang

potensial untuk dikembangkan. Selain bermanaat sebagai obat' tanaman

tersebut juga banyak digunakan sebagai bumbu masak' pe%arna makanan

maupun kosmetik. +ahe sering digunakan untuk kar-minati' stimulan dan

diooretik' obat penambah nasu makan' memperbaiki pen!ernaan' en!ok'

sakit kepala' batuk kering' gatal-gatal' !holera' diteri dan masuk angin. +ahe

sangat bermanaat sebagai antikoagulan' menurunkan tekanan darah' obat

!a!ing' abat asma' penambah darah' obat sakit perut' diare' usus buntu dan

rematik. Eimpang temula%ak yang berkhasiat obat mampu mengatasi

penyakit kelainan pada hatiF lever' kantong empedu' pankreas. Selain itu juga

dapat menambah nasu makan' menurunkan kadar kolesterol dalam darah'

dapat meningkatkan sistim immunitas tubuh' berkhasiat anti bakteri' anti

diabetik' anti hepatotoksik' anti inlamasi' anti oksidan' anti tumor' diuretika'

depresan dan hipolipodemik#Eaharjo dan Eostiana *449$.

&eberhasilan perbanyakan in vitro dipengaruhi oleh berbagai aktor'

antara lain respon tanaman' jenis media tumbuh yang digunakan dan garam-

garam mineral' vitamin' zat pengatur tumbuh #PT$ yang tepat' serta kondisi

lingkungan kultur #Deorge 1CC2 &ristina dan Syahid *41*$. Benzyl denin

#B$ merupakan salah satu jenis PT yang umum digunakan dalam proses

multiplikasi tanaman se!ara in vitro. PT ini berperan penting dalam

pembelahan sel' yaitu dalam pembentukan benang gelondong pada proses

metaphase #Deorge dan Sherrington 1C97 dalam &ristina dan Syahid *41*$.

Eegenerasi tanaman dengan menggunakan teknik kultur jaringan dapat

dilakukan melalui jalur organ ogenesis dan embriogenesis somatik.

Perbanyakan tanaman dengan menggunakan teknik kultur jaringan melalui

jalur embriogenesis somatik lebih menguntungkan dibandingkan melalui


18/53

19

organogenesis karena dapat menghasilkan tanaman baru dengan jumlah yang

lebih banyak. Selain itu' karena embriosomatik berasal dari sel tunggal maka

akan lebih mudah utuk memonitor proses pertumbuhan setiep individu

tanaman. /mbrigenesis somatik juga merupakan jalur yang lebih eisien

untuk penelitian yang melibatkan produksi tanaman yang ditransormasikan

se!ara genetik #+imenez *441 dalam 0e%i ,brahim *414$.

/ksplan adalah bagian tanaman yang dipergunakan sebagai bahan a%al

untuk perbanyakan tanaman. )aktor eksplan yang penting adalah

genotipeFvarietas' umur eksplan' letak pada !abang' dan seks #jantanFbetina$.

Bagian tanaman yang dapat digunakan sebagi eksplan adalah pu!uk muda'

batang muda' daun muda' kotiledon' hipokotil' endosperm' ovari muda'

anther' embrio' dll. 0alam praktikum ini menggunakan eksplan mata tunas

ken!ur Lingkungan Tumbuh. Lingkungan tumbuh yang dapat mempengruhi

regenerasi tanaman meliputi temperatur' panjang penyinaran' intensitas

penyinaran' kualitas sinar' dan ukuran %adah kultur #&arjadi *44C$.


1. lata. L) lengkap dengan lampu Bunsen

b. Petridish dan botol-botol kultur

!. Peralatan diseksi yaitu pinset besarFke!il dan pisau pemes

*. Bahan

a. /ksplan +ahe -)ingiber officinale Eos!.$

b. Media kultur

c. lkohol C8?

d. :uadest steril

e. Spirtus

f. hloro; #Sun!lin$.

2. ara &erja


19/53

1C

a. Persiapan eksplan

1$ Melakukan persemaian pada semua bahan tanaman dan

melakukan pegamatan sampai tumbuh tunas

*$ Mengambil tunas dengan mengikut sertakan sedikit bagian

daging buah

2$ Memotong bagian tunas dengan ukuran tertentu' maksimal 8

!m atau bisa kurang

7$ Men!u!i bagian tunas yang telah dipotong sebelumnya dengan

air mengalir hingga bersih

5$ Menyiapkan media steril dalam botol brisi a:uadest kemudian

menggojok bagian tunas tersebut dengan a:uadest sebanyak 2-7kali.

b. Sterilisasi eksplan #dilakukan dalam L)$

1$ Merendam eksplan dengan !hloro; 54? #Sun!lin 144?$

selama K 8-9 menit

*$ Membilas eksplan dengan a:uadest steril

2$ Mengangkat dan menaruh eksplan setelah dibersihkan pada

botol kosong

7$ Mengambil eksplan dan memotong tunas hingga *'5 !m dengan

tetap mengikutsertakan daging buah5$ Men!elupkan tunas yang telah dipotong ke dalam larutan

spiritus lalu dibakar

8$ Mengupas atau membersihkan kembali sampai bagian yang

terbakar hilang.

!. Penanaman eksplan

1$ Membuka plastik penutup botol media kultur

*$ Mengambil eksplan dan menanamnya di media kultur dengan

pinset. Setelah digunakan' pinset harus selalu dibakar diatas api

2$ Mendekatkan mulut botol dengan api selama penanaman untukmenghindari kontaminasi.

d. Pemeliharaan

1$ Menempatkan botol-botol media berisi eksplan di rak-rak kultur

*$ Menjaga keadaan suhu' kelembaban dan !ahaya pada

lingkungan di luar botol

2$ Menyemprotkan botol-botol kultur dengan spirtus dilakukan *

hari sekali untuk men!egah kontaminasi.

e. Pengamatan selama 5 minggu' yang diamati


20/53

*4

1$ Mengamati setiap hari pengamatan saat mun!ul akar' tunas'

daun' dan kalus #(ST$

*$ Mengamati satu minggu sekali pengamatan jumlah akar' jumlah

tunas' dan jumlah daun

2$ Melakukan deskripsi kalus #struktur dan %arna kalus$ pada

akhir pengamatan

7$ Membuat persentase keberhasilan dan melakukan perhitungan

data analisis pada akhir pengamatan.


1. (asil Pengamatan

a. Tabel *. Pengaruh BP terhadap Pertumbuhan dan Perkembangan

/ksplan +ahe.

/ksplan Tgl

Saat Mun!ul #(ST$ +umlah &eterangan

kar Tunas 0aun &alus kar Tunas 0aun

&ontaminasi

#bakteriF jamur$F

hidup

+ahe 12F5F15 - - - - - - -Terkontaminasi

jamurF mati

Sumber Logbook

b. )oto

Dambar *. #1$' #*$ +ahe 4' 6 (ST #terkontaminasi$

*. Pembahasan

+ahe atau )ingiber officinale merupakan tumbuhan rumpun

berbatang semu. Tanaman ini bisa bertahan hidup didaerah tropis dan

dikenal memiliki rasa pedas dan hangat. Pada rimpang memiliki

beberapa !irri umum seperti' tumbuh tegak dengan ketinggian 24-84 !m'

beralur' daun ber%arna hijau tua' tangkai daun berbulu halus' helai daun


21/53

*1

berbentuk lan!et' bagian tepi ratadan bagian ujung run!ing' tumbuh dari

dalam tanah berbentuk tongkat' panjang malai 2'5-5 !m' buah berbentuk

bulat panjang ber%arna !oklat' akar serabut %arnanya putih kotor'

rimpang tebal tumbuh ber!abang-!abang' %arna rimpang kuning pu!at'

bagian dalam berserat agak kasar.

Bahan perbanyakan jahe berasal dari rimpang jahe. Eimpang

tanaman jahe berumur minimal sembilan bulan. /ksplan berasal dari

tunas muda' yaitu tunas yang sudah mun!ul sekitar 4'5-1 !m. /ksplan

diambil dengan memotong mata tunas dengan ukuran sekitar minimal 1

!m dari tunas jahe.&eberhasilan perbanyakan in vitro dipengaruhi oleh berbagai aktor'

menurut &os%ara #*414$ adapun aktor-aktor keberhasilan dalam kultur

jaringan jahe' genotip tanaman yaitu eksplan tanaman sangat bervariasi

tergantung dari spesies' bahkan varietas' atau tanaman asal eksplan

tersebut. Media kultur terdiri dari komposisi media' komposisi hormon

pertumbuhan dan keadaan isik media. Lingkungan tumbuh seperti

halnya dipengaruhi oleh suhu' kelembaban dan !ahaya. &ondisi eksplan

mempengaruhi keberhasilan teknik mikropropagasi adalah jenis eksplan'

ukuran' umur dan ase isiologis jaringan yang digunakan sebagai

eksplan.

Ben"l Adenin #B$ merupakan salah satu jenis PT yang umum

digunakan dalam proses multiplikasi tanaman se!ara in vitro. PT ini

berperan penting dalam merangsang pertumbuhan dan morogenesis

dalam kultur sel' jaringan dan organ. at pengatur tumbuh #PT$ dalam

kultur jaringan diperluksn untuk mengendalikan dan mengatur

pertumbuhan kultur tanaman. +enis dan konsentrasi PT tergantung pada

tujuan dan tahap pengulturan. Sitokinin yang biasa digunakan adalah

Ben"l Amino urin#BP$. Sitokinin adlah zat pengatur tumbuh yang

berungsi dalam mendorong pembentukan sel' merangsang inisiasi dan

pertumbuhan tunas. Sitokinin dalam konsentrasi yang tinggi dapat

menginduksi pertumbuhan tunas' namun menghambat pertumbuhan akar.


22/53

**

0isamping merangsang multiplikasi tunas aksilar dan mela%an domiasi

apikal #Beyl *446$.

Sedangkan aktor kegagalan kultur jaringan yang paling umum

adalah terkontaminasi oleh patogen' inokulum yang tumbuh abnormal'

dan eksplan tidak berkembang sama sekali. Teknik sterilisasi dan

pemenuhan kandungan dalam media merupakan hal terpenting yang

menentukan keberhasilan teknik ini. +ika alat' media' bahan tanam atau

lingkungan kerja tidak steril maka eksplan dapat terkontaminasi oleh

virus' jamur atau bakteri. Bahkan kemungkinan eksplan tidak dapat

tumbuh menjadi tanaman baru karena unsur penting dalam media kultur

yang jumlahnya terbatas telah terkontaminasi atau telah digunakan untuk

tumbuh jamur. Selain kontaminasi yang disebabkan oleh kurang sterilnya

peralatan kultur jaringan' terdapat aktor kegagalan lain dalam teknik ini

yaitu kurangnya kandungan unsur dalam media kultur jaringan. "dara

juga mempengaruhi ada tidaknya kontaminasi. 0iperlukan adanya aliran

udara yang bertekanan dari dalam keluar ruangan agar terjadi pertukaran

udara yang bebas dari kontaminasi. &elembaban relati lingkungan

kultur dapat diatur. &elembaban ruang kultur yang tinggi akan

menyebabkan terjadinya pertumbuhan mikroba yang akan

mengkontaminasi kultur dan alat-alat laboratorium.

Penanaman tanaman eksplan jahe tidak berhasil' ini ditunjukkan dari

tanaman eksplan yang terkontaminasi jamur #putih-putih disekitar

eksplan$. /ksplan yang terkontaminasi jamur bisa sampai menutupi

eksplan. Minggu pertama tanaman jahe sudah terkontaminasi jamur.


23/53

*2

E. Kesi"$ulan dan Saan

1. &esimpulan

Berdasarkan hasil pengamatan mengenai &ultur Tanaman &hasiat


24/53

*7

bdillah' Eahmat (ani *412. emanfaatan /mbriogenesis Somatik dalam

0saha en"ediaan Bibit 'anaman bat. Makalah Seminar &amis'

* Mei *412. httpFelisa.ugm.a!.id di akses pada 1* Mei *415.

&arjadi *44C.otensi enera!an 'eknik (ultur Jaringan dan erban"akan +e!at

dalam engadaan Bibit (entang Berkualitas. Balai enelitian 'anaman

Sa"uran embang. Makalah Seminar Sehari Pengembangan &SP

Sayuran sembalun =TB' Mataram


25/53

*5

ACARA III

KULTUR TANAMAN CAM &SANSE)IERIA(

A. Pendahuluan

1. Latar Belakang

Tanaman M adalah tumbuhan sukulen yang pada umumnya tidak

memiliki lapisan sel palisade yang terratur. Tanaman sansevieria mudah

dikenal dari daunnya yang tebal dan banyak mengandung air #flesh"dan

succulent$ sehingga dengan struktur daun seperti ini membuat

sansevieria tahan terhadap kekeringan karena proses penguapan air dan

laju transpirasi dapat ditekan. Selain mempunyai !orak daun yang indah

dan unik' mempunyai bentuk dan ukuran bervariasi' tanaman ini juga

berungsi sebagai penyerap polutan di udara sekitar tempat tumbuhnya.

&ultur in vitropada dasarnya merupakan suatu proses perbanyakan

sel' jaringan' organ atau protoplas dengan teknik steril. Teknik kultur

jaringan tersebut dapat men!iptakan bibit yang resisten penyakit dan

dapt menyediakan bibit dalam jumlah yang banyak dalam %aktu yang

relati singkat. Manaat perbanyakan Sansivera dengan !ara kultur

jaringan dapat menghemat bahan eksplan dan menghemat %aktu. Bahan

eksplan dalam %aktu singkat dapt menghasilkan kultur jaringan tanaman

dalam jumlah banyak.

&ultur jaringan pada sansievera biasanya untuk menghasilkan

anakan dalam jumlah yang banyak pada varietas yang langka.

Perbanyakan ini dilakukan karena sulitnya perkembangbiakan sansivera

se!ara vegetative. oleh karena itu' kultur jaringan sangat bermanaat bagi

peningkatan varietas baru dan pengembangbiakan varietas-varietaslangka yang sulit dikembangbiakkan. Pada dasarnya kultur in vitro

merupakan suatu proses perbanyakan sel' jaringan' organ atau protoplas

dengan teknik steril. Berbeda dengan perbanyakan melalui stek daun'

anakan yang dihasilkan melalui metode kultur jaringan akan lebih

sergam dengan siat siatnya sama seperti tanaman induknya. Pada

sansevieria' metode ini lebih sering diterapkan untuk membiakkan jenis

*6


26/53

*8

yang lama menghasilkan anakan seperti jenis S. !yilindri!a dan jenis

yang langka.

*. Tujuan Praktikum

Praktikum &ultur +atingan a!ara ,,, mengenai &ultur Tanaman

M #Sansevieria$ memiliki tujuan sebagai berikut

a. Mengetahui teknik kultur jaringan Sansevieria

b. Mengetahui pengaruh BP dan ,B terhadap pertumbuhan dan

perkembangan eksplan Sansevieria.

2. 3aktu dan Tempat Praktikum

Praktikum &ultur +aringan a!ara ,,, mengenai &ultur Tanaman

M #Sansevieria$ dilaksanakan pada 9 Mei *415 pukul 17.24-15.243,B di Laboratorium &ultur +aringan' )akultas Pertanian' "niversitas

Sebelas Maret' Surakarta.

B. Tinjauan Pustaka

Sansivera merupakan jenis tanaman M #+rassulation Acid

Metabolisme$. Tumbuhan ini biasanya tumbuh dengan berdaun atau

berbatang tebal yangbertranspirasi rendah. Tumbuhan Sansivera termasuk

tumbuhan sukulen yang pada umumnya tidak memiliki lapisan sel palisade

yang teratur. Sel daun atau batang merupakan sel mesoil bunga karang dan

terdapat sel bundle sheath#Bratayuda *449$.


27/53

*6

Menjelaskan bah%a naungan dapat memperbaiki kemampuan berakar

pada stek batang setelah bagian aerialnya mendapatkan !ukup !ahaya untuk

melakukan otosintesis dan penimbunan karbohidrat. Senya%a enolat

dikenal sebagai pema!u atau penghambat internal untuk pembentukan akar

adventi. Pemberian !ahaya merah dari diode peman!ar-!ahaya #L/0$ pada

planlet in vitro rotea c"naroides' meningkatkan perakaran hingga 86?

dibandingkan bila mendapatkan !ahaya putih lampu neon biasa dengan hasil

6? saja. Pada saat bersamaan !ahaya merah tersebut berpengaruh

menurunkan kandungan senya%a enolat pada planlet yang akhirnya berhasil

menginduksi tumbuhnya akar #3u dan Lin *41*$.

Menurut Moore #1C6C$ dalam =ursyamsi #*414$' zat pengatur tumbuh

#PT$ adalah senya%a organik bukan nutrisi yang dalam jumlah sedikit #I1

milimole #mM$$ mampu mema!u' menghambat atau mengubah proses

isiologi tanaman. PT yang penting untuk kultur jaringan tanaman antara

lain adalah auksin dan sitokinin. at pengatur tumbuh yang termasuk dalam

golongan auksin adalah , #,ndole !eti! !id$' P #Phenyl !eti! !id$'

7-!hloro, #7-!hloro ,ndole !eti! !id$' dan ,B. Beberapa lainnya

merupakan auksin sintetik' misalnya = #=apthalene !eti! !id$' *7 0

#*'7 0i!hloro Pheno;y !eti! !id$' dan MP #*-methyl-7 !hloro Pheno;y

!eti! !id' sedangkan yang termasuk dalam golongan sitokinin antara lain

BP #Benzil mino Purin$' kinetin' dan lain-lain.

Transport auksin pada sel tanaman bersiat polar' yaitu dari atas ke

ba%ah. Menurut hipotesis pertumbuhan asam' pompa proton yang terletak di

dalam membran plasma memiliki peranan penting dalam respon sel-sel

tumbuhan terhadap keberadaan auksin. Saat auksin disintesis oleh sel' p(

dinding sel menurun dimana pengasaman dinding sel ini mengaktikan enzim

ekspansin yang meme!ahkan ikatan hidrogen yang terdapat di antara

mikroibril selulosa sehingga melonggarkan serat-serat dinding sel. 0engan

begitu air dari lingkungan dapat masuk ke dalam sel se!ara osmosis dan

menyebabkan penambahan volume sel. &etika sel mulai bervolume dinding

sel akan mengaktikan enzim e;tensin yang berungsi untuk merekatkan


28/53

*9

kembali mikroibril selulosanya' perlahan-lahan auksin akan mengalir

melalui jaringan loem ke sel yang ada di ba%ahnya dan melakukan

mekanisme yang sama dengan sel sebelumnya sehingga terjadilah

pembesaran suatu jaringan #/rmavitalini *41*$.

"ntuk menginduksi pertunasan' kalus dibelah-belah dengan ukuran

kurang lebih 1 ; 1 !m* se!ara aseptik' lalu ditanam dalam media pertunasan.

Media ini mengandung unsur mineral dan vitamin MS atau 3P' yang masing-

masing dikombinasikan dengan = 4.5 mgFL berungsi sebagai media

dasar. &edua jenis media dasar tersebut diperkaya dengan BP dengan dua

tingkat konsentrasi #5 dan 6 mgFL$. Media-media pertunasan diberi nama

M(1 #MS J BP 5 mgFL$' M(* #MS J BP 6 mgFL$' 3(1 #3P J BP 5

mgFL$ dan 3(* #3P J BP 6 mgFL$ #Eatnade%i *415).

Salah satu alternati metode perbanyakan yang dapat ditempuh adalah

melalui kultur in vitro. Metode ini diharapkan mampu menghasilkan tanaman

dalam skala besar dengan %aktu yang relati !epat serta kualitas tanaman

yang dihasilkan menjadi lebih baik melalui kultur jaringan kebutuhan

ketersediaan bibit tanaman dalam jumlah yang banyak dapat terpenuhi. at

pengatur tumbuh memegang peranan penting dalam pertumbuhan dan

perkembangan kultur. )aktor yang perlu mendapat perhatian dalam

penggunaan zat pengatur tumbuh antara lain jenis zat pengatur tumbuh yang

akan digunakan' konsentrasi' urutan penggunaan' dan periode masa induksi

dalam kultur tertentu #Duna%an 1CC5 dalam Siregar *412$.

C. Alat, Bahan, dan Caa Keja1. lat

a. L) lengkap dengan lampu Bunsen



*. Bahan

a. /ksplan Sansevieria

b. Media kultur

!. lkohol C8?

d. :uadest steril

e. Spirtus

. hloro; #Sun!lin$.


29/53

*C

2. ara &erja

a. Pesiapan eksplan

b. Sterilisasi eksplan #dilakukan dalam L)$1$ Merendam eksplan dalam larutan 0ithane M-75 2 mgFl selama K

1* jam' dilanjutkan dengan !hloro; 5'*5 ? #Sun!lin 144?$

selama K 2 menit

*$ Merendam dalam larutan t%een-94 untuk menghilangkan lapisan

lilinFkutikulaF duri-duriF rambut

2$ Membilas eksplan dengan a:uadest steril



*$ Mengambil eksplan dan menanamnya di media kultur denganpinset. Setelah digunakan' pinset harus selalu dibakar diatas api

2$ Selama penanaman' mulut botol harus selalu dekat dengan api

untuk menghindari kontaminasi

d. Pemeliharaan

1$ Botol-botol media berisi eksplan ditempatkan di rak-rak kultur

*$ Lingkungan di luar botol harus dijaga suhu' kelembaban dan

!ahayanya

2$ Penyemprotan botol-botol kultur dengan spirtus dilakukan * hari

sekali untuk men!egah kontaminasi.e. Pengamatan selama 5 minggu' yang diamati

1$ Saat mun!ul akar' tunas' daun' dan kalus #(ST$' diamati setiap

hari

*$ +umlah akar' tunas dan daun' diamati 1 minggu sekali

2$ 0eskripsi kalus #struktur dan %arna kalus$' dilakukan pada akhir

pengamatan

7$ Persentase keberhasilan' dilakukan pada akhir pengamatan


30/53

24


1. (asil Pengamatan

a. Tabel 2.1 Pengaruh BP terhadap Pertumbuhan dan Perkembangan

/ksplan Sansivera.

/ksplan Tgl


kar Tunas 0aun &alus kar Tunas 0aun&ontaminasi

#bakteriF jamur$F

hidup

Sansivera

12F5F15 - - - - - - -

1 Terkontaminasi

jamurF mati

1 Tidak

terkontaminasiF

hidup

*1F5F15 - - - - - - -* Terkontaminasi

jamurF mati

Sumber Logbookb. )oto

Dambar 2. #1$' #*$' #2$ Sansivera 4' 6 dan 15 (ST dari kiri ke kanan

*. Pembahasan0alam marga vaga!eae' Sansivera adalah salah satu dari

sekurangnya 84 jenis herba rimpang' berdaun tegak tersusun se!ara

roseta serta tidak bertangkai #>uzzami *414$. Tanaman Sansivera' yang

digunakan sebagai eksplan adalah bagian batang yang ber%arna hijau

dan segar tidak kering. Batang bagian kuning dibuang' lalu dipotong

menjadi ke!il persegi panjang minimal K *'5 !m dan bisa ditanam di

botol kultur. Penanaman tanaman eksplan Sansivera tidak berhasil'


31/53

21

ditunjukkan dengan tanaman eksplan yang terkontaminasi jamur #putih-

putih disekitar eksplan$ sampai bisa menutupi eksplan pada minggu

pertama 1 dari * tanaman Sansivera yang dikulturkan. Minggu ke-*

tanaman eksplan Sansivera keduanya terkontaminasi ini dilihat dari

eksplan yang sepenuhnya tertutupi jamur.

&eberhasilan pertumbuhan eksplan dipengaruhi oleh unsur-unsur

dalam media kultur jaringan' karena eksplan tidak dapat men!ari unsur

tersebut seperti saat berada ditanah.


32/53

2*

media' komposisi hormon pertumbuhan dan keadaan isik media'

perbedaan komposisi media sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan

eksplan. Selain itu lingkungan tumbuh seperti halnya dipengaruhi oleh

suhu' kelembaban dan !ahaya' serta kondisi eksplan mempengaruhi

keberhasilan teknik mikropropagasi adalah jenis eksplan' ukuran' umur

dan ase isiologis jaringan yang digunakan sebagai eksplan. (asil

pengamatan dapat terlihat bah%a pada minggu pertama 1 dari * eksplan

Sansivera masih baik dan stgnan'belum ada tanda-tanda kontaminasi dan

1 yang lainnya terkontaminasi jamur pada eksplan' ditunjukkan dengan

adanya putih-putih #hia$ pada eksplan. Minggu kedua' ke-* eksplan

sudah mengalami kontaminasi. Terlihat dari media dan bahan eksplan

yang penuh dengan hia ber%arna putih dipermukaan media dan diujung

eksplan. &ontaminasi dapat berasal dari eksplan' organisme ke!il yang

masuk kemedia' botol kultur' alat tanam yang kurang steril' lingkungan

kerja' udara atau ruang kultur yang kotor dan ke!erobohan dalam

pelaksanaan.

Teknik sterilisasi dan pemenuhan kandungan dalam media

merupakan hal terpenting yang menentukan keberhasilan teknik ini. +ika

alat' media' bahan tanam' atau lingkungan kerja tidak steril maka eksplan

dapat terkontaminasi oleh virus' jamur' atau bakteri. Bahkan

kemungkinan eksplan tidak dapat tumbuh menjadi tanaman baru karena

unsur penting dalam media kultur yang jumlahnya terbatas telah

terkontaminasi atau digunakan untuk tumbuh jamur.


1. &esimpulan


33/53

22

Berdasarkan hasil pengamatan mengenai &ultur Tanaman M

#Sansivera$' maka dapat diambil bebrapa kesimpulan' sebagai berikut

a. &ultur jaringan merupakan teknik perbanyakan tanaman untuk

mendapatkan bibit tanaman se!ara !epat.

b. Pada minggu pertama media tidak terkontaminasi oleh jamur' tetapi

pada 1 dari * bahan eksplan terkontaminasi jamur. Pada minggu

kedua ' ke-* bahan eksplan terkontaminasi dengsn mun!ulnya jamur

putih pada seluruh permukaan media dan eksplan.

!. Presentase keberhasilan kultur jaringan Sansivera sebesar 4?.

d. )aktor penentu keberhasilan kultur jaringan ditinjau dari genotip

tanaman' media kultur' lingkungan tumbuh dan kondisi eksplan.e. )aktor yang menyebabkan kegagalan kultur jaringan kurang

sterilnya alat-alat kultur dan saat penanaman eksplan' udara' proses

kultur jaringan yang kurang sesuai prosedur dan kondisi lingkungan

tumbuh yang kurang mendukung yang menyebabkan terkontaminasi

oleh jamur.

*. Saran

Saran yang dapat penulis sampaikan adalah praktikan harus lebih

mengutamakan sterilisasi dari alat' bahan tanam eks!lant, media dan

lingkungan kerja agar memperke!il tingkat kontaminasi memperbesar

keberhasilan dalam kultur jaringan. (indari media yang sudah

terkontaminasi.

DA%TAR PUSTAKA

isya ,ntan Paramartha' 0ini /rmavitalini' dan Siti =uradilah *41*. Pengaruh

Penambahan &ombinasi &onsentrasi PT = dan BP terhadap

Pertumbuhan dan Perkembangan Biji 0endrobium Taurulinum +.+ Smith

Se!ara ,n @itro.Jurnal Sains dan Seni,TS @ol. 1' =o. 1. Surabaya.

Bratayuda . *449. Sansivera (ybrid ,n!reased. Makalah Seminar 0epartemen

gronomi dan (ortikultura. )akultas Pertanian ,nstitut Pertanian Bogor.

@ol. 11 (al. 1*1-124.


34/53

27

0iah Eatnade%i' i =urhasanah (uznul ,zzati' ris Tjahjoleksono *415.

Pertumbuhan Planlet Lidah Mertua #Sansevieria sp.$ Blue Lea dari

&ultur &alus. Jurnal Sumberda"a 1a"ati @ol. 1 =o. 1' hlm 15-19.Bogor.

Lili (era%ati Siregar' Luthi M Siregar' Lollie P Putri *412. Pengaruh N-

Benzil mino Purina dan N-sam setat =talena terhadap

Pertumbuhan kar Boesenbergia lava se!ara ,n @itro. Jurnal nline

[email protected]' =o.2. Medan.

=ursyamsi *414. 'eknik (ultur Jaringan Sebagai Alternatif erban"akan

'anaman untuk Mendukung Rehabilitasi ahan. Makalah pada /kspose

(asil-(asil. Makassar.

3u (' Lin *41*. Eed light-emitting diode #L/0s$ light irradiation improves

root and lea ormation in dii!ult to propagate Protea !ynaroides L.plantlets in vitro.J. 1ortSci. 7617C4-17C7

>uzzami' 3itono +E' (idayat S' (andayani T' Sugiarti' Mursida%ati S' Triono T'

stuti ,P' Sudarmono' 3a%aningrum ( *414. /nsiklopedia2lora Jilid %.

PT &harisma ,lmu. +akarta.

ACARA I)

SUB KULTUR &KRISAN(

A. Pendahuluan

1. Latar Belakang

&egiatan subkultur dilakukan untuk mengganti media tanam kultur

jaringan dengan media yang baru' sehingga kebutuhan nutrisi terpenuhi.

Sedangkan tahapan-tahapan dari kultur jaringan itu sendiri dimulai dari


35/53

25

pemilihan dan penyiapan tanaman induk eksplan' inisiasi kultur'

multiikasi dan perbanyakan propagul' pemanjangan tunas dan

pertumbuhan akar dan aklimatisasi. Pada tahapan multiikasi dan

elongasi media untuk eksplan harus diganti' pergantian dari media lama

ke media baru disebut dengan subkultur.

Setiap tanaman memiliki karakteristik dan ke!epatan tumbuh yang

berbeda-beda. Sehingga !ara dan %aktu subkultur juga berbeda-beda.

Tanaman yang harus segera atau relati !epat di subkultur adalah jenis

pisang-pisangan' alokasia' ken!ur' dan sebagainya. Tanaman yang relati

lama adalah aglaonema. Batang tanaman krisan tumbuh agak tegak

dengan per!abangan yang agak jarang' berstruktur lunak' dan ber%arna

hijau tetapi bila dibiarkan tumbuh terus' batang berubah menjadi keras

#berkayu$ dan ber%arna hijau ke!oklatan' serta berdiameter batang

sekitar 4'5 !m. Bunga krisan tegak pada ujung tanaman dan tersusun

dalam tangkai berukuran pendek sampai panjang' serta termasuk bunga

lengkap. Bunga krisan merupakan bunga majemuk yang terdiri atas

bunga pita dan bunga tabung. Pada bunga pita terdapat bunga betina

#pistil$' sedangkan bunga tabung terdiri atas bunga jantan dan bunga

betina #biseksual$ dan biasanya ertil.

Pada dasarnya subkultur kita memisahkan' memotong' membelah

dan menanam kembali eksplan yang telah tumbuh sehingga jumlah

tanaman akan bertambah banyak. Tujuannya adalah supaya kultur tetap

mendapatkan unsur hara atau nutrisi untuk pertumbuhannya.

Perkembangan tanaman anggrek se!ara vegetati juga sulit dilakukan

karena kemungkinan hidup tunas tanaman sangat rendah. ara mengatasi

sulitnya perkembangbiakan anggrek salah satu upaya yang dapat

dilakukan adalah perbanyakan tanaman anggrek melalui kultur jaringan

dengan bahan tanam berupa polong anggrek yang sudah matang dan

dilakukan di dalam laboratorium.

*. Tujuan Praktikum

Praktikum &ultur +atingan a!ara ,@ mengenai Sub &ultur

#nggrek$ memiliki tujuan sebagai berikut

29


36/53

28

a. Mengetahui teknik memindahkan atau sub-kultur tanaman se!ara

invitropada kultur jaringan anggrek

b. Mengetahui tingkat keberhasilan sub kultur pada aggrek


Praktikum &ultur +aringan a!ara ,@ mengenai Sub &ultur

#nggrek$ dilaksanakan pada 12 Mei *415 pukul 14.44 3,B di

Laboratorium &ultur +aringan ' )akultas Pertanian' "niversitas Sebelas

Maret' Surakarta.

B. Tinjauan Pustaka

"ntuk tanaman yang tipe pertumbuhannya dengan pemanjangan batang

maka subkultur bisa dilakukan dengan memotong tanaman perruas tanaman

yang ada. =amun jika ada planlet yang masih terlalu ke!il dan beresiko tinggi

untuk dipotong' maka subkulturnya !ukup dilakukan dengan dipisahkan dari

induknya dan ditanam kembali se!ara terpisah. ontoh tanamannya adalah

jati' krisan' dan tanaman lain yang memiliki karakteristik pertumbuhan yangsama. kita dapat menghitung ke!epatan produksi tanaman dengan mengetahui

ke!epatan tanaman melakukan multiikasi hingga siap disubkultur. Teknik

subkultur tanaman pada media padat lebih mudah dilakukan yaitu hanya

dengan meletakkan kalus yang sudah terbentukdi atas !a%an petri' kemudian

membelah-belahnya menjadi bagian-bagian ke!il lagi dengan menggunakan

pertolongan skalpel dan pinset. Setelah terjadi potonganpotongan kalus ke!il-

ke!il' maka segeradimasukkan kembali ke dalam erlenmeyer baru yang berisi


37/53

26

mediadengan komposisi bahan kimia sama seperti media lama. Selanjutnya

erlenmeyer ditutup dan diinkubasikan kembali Semua pekerjaan

harusdilakukan dalam suasana steril #Deorge *414$.

Bunga seruni' krisan atau krisantemum adalah sejenis tumbuhan

berbunga yang sering ditanam sebagai tanaman hias pekarangan atau bunga

petik. Tumbuhan berbunga ini mulai mun!ul pada zaman kapur. Bunga seruni

adalah bagian dari bunga suku kenikir-kenikiran atau stera!eae yang

men!akup berma!am-ma!am jenis hrysanthemum. Bunga nasional +epang

ini dalam bahasa +epang disebut sebagai Okiku. &arena aromanya yang

%angi' bunga ini sering ditambahkan kedalam the agar lebih %angi dan

nikmat #@ernent *412$.

plikasi kultur jaringan pada a%alnya ialah untuk propagasi tanaman.

Selanjutnya penggunaan kultur jaringan lebih berkembang lagi yaitu untuk

menghasilkan tanaman yang bebas penyakit' koleksi plasma nutah'

memperbaiki siat genetika tanaman' produksi dan ekstraksi zat-zat kimia

yang bermanaat dari sel-sel yang dikulturkan. &emudian dijadikan tanaman

yang tumbuh sehat dan bebas penyakit #aitlin dan Palukaitis *449$.Bahan pemadat #gelling agents$ merupakan salah satu komponen yang

penting di dalam media kultur jaringan tanaman maupun mikroorganisme.

Media yang dipadatkan se!ara sempurna dapat menjadi media yang baik

untuk pertumbuhan jaringan tanaman maupun mikroorganisme' karena dapat

memelihara proses biokimia dan isiologisnya #Maliro dan Lame!k *447

dalam Priadi$. Bahan pemadat yang digunakan dalam kultur jaringan tanaman

adalah jenis agar standar khusus untuk kultur jaringan tanaman yang

umumnya masih diimpor' misalnya merek Ba!to'


38/53

29

mengisolasi bagian tanaman' baik berupa organ' jaringan' sel atau pun

protoplasma dan selanjutnya mengkultur bagian tanaman tersebut pada media

buatan dengan kondisi lingkungan yang steril dan terkendali. Bagian-bagian

tersebut dapat beregenerasi hingga membentuk tanaman lengkap kembali

#Basri *449$.


1. lat

a. L) lengkap dengan lampu bunsen



*. Bahana. /ksplan kultur krisan usia 2 bulan

b. Media kultur krisan

!. lkohol C8?

d. :uadest steril

e. Spirtus

. hloro; #Sun!lin$

2. ara &erja

a. Persiapan media sub kultur

b. Sub kultur #dilakukan dalam L)$

1$ Mengeluarkan eksplan kultur anggrek pada petridish

*$ Membersihkan eksplan dari media yang ada' akar pada eksplan

tidak boleh dihilangkan hanya dibersihkan dari bagian yang

mati



*$ Mengambil eksplan dan menanamnya di media subkultur

dengan pinset. Satu botol kultur diisi * tanaman. Setelah

digunakan' pinset harus selalu dibakar di atas api


39/53

2C

2$ Selama penanaman' mulut botol harus selalu dekat dengan api

untuk menghindri kontaminasi

d. Pemeliharaan

1$ Botol Q botol media berisi eksplan ditempatkan di rak Q rak

kultur

*$ Lingkungan di luar botol harus dijaga suhu' kelembaban dan

!ahayanya

2$ Penyemprotan botol-botol kultur dengan spirtus dilakukan *

hari sekali untuk men!egah kontaminsi

e. Pengamatan selama dua minggu' yang diamati

1$ Saat mun!ul akar' tunas' daun' dan kalus #(ST$' diamati setiap

hari

*$ +umlah akar' tunas' dan daun' diamati 1 minggu sekali

2$ 0eskripsi kalus #struktur dan %arna$' dilakukan akhir

pengamatan

7$ Presentase keberhasilan' dilakukan pad akhir pengamatan


40/53

74


1. (asil pengamatan

a. Tabel 5.1 Tingkat &eberhasilan Sub &ultur pada &risan

#+hr"santhemum morifolium ramat$

/ksplan Tgl


kar Tunas 0aun &alus kar Tunas 0aun

&ontaminasi

#bakteriF jamur$F

hidup

&risan

*1F5F15 - - - - 2 * 8 hidup

*9F5F15 - - - - 8 2 15 hidup

7F8F15 - - - - 6 2 15 &ontamF jamur

Sumber Logbook

b. )oto

Dambar 7. #1$' #*$' #2$ &risan & 4' 6' 17' *1 (ST #dari kiri ke kanan$

*. Pembahasan

&risan merupakan tanaman bunga berupa perdu dengan sebutan

lain seruni' bunga emas #golden flower$ atau !hrysanthemum berasal dari

daratan !ina. Tanaman krisan tumbuh tegak' pada ujung tanaman

tersusun dalam tangkai #tandan$ berukuran pendek sampai panjang'berstruktur lunak dan ber%arna hijau' bila dibiarkan tumbuh terus batang

menjadi keras #berkayu$ dan ber%arna hijau ke!oklat-!oklatan. kar

tanaman menyebar kesemua arah pada kedalam 24-74 !m. akarnya

mudah mengalami kerusakan akibat pengaruh lingkungan yang kurang

baik' hal tersebut dikarenakan akar tanaman berjenis serabut.

Sub kultur merupakan salah satu tahap metode dalam kultur

jaringan' yaitu suatu teknik yang dilakukan diantara tahapan kultur. Sub

kultur atau over!lanting adalah pemindahan planlet yang masih sangat


41/53

71

ke!il #planlet muda$ dari medium lama kedalam medium baru yang

dilakukan se!ara aseptis di dalam entkas atauaminar Air 2low#L)$.

Tanaman yang tipe pertumbuhannya dengan pemanjangan batang

maka sub kultur bisa dilakukan dengan memotong perruas tanaman.

Planlet yang masih terlalu ke!il dan beresiko tinggi untuk dipotong'

maka subkulturnya !ukup dilakukan dengan dipisahkan dari induknya

dan ditanam kembali se!ara terpisah. &esepakatan produksi tanaman

dapat dihitung dengan mngetahui ke!epatan tanaman melakukan

multiikasi hingga siap disub kultur. Sub kultur dilakukan saat media

sudah terlihat habis atau setiap * bulan sekali. +umlah subkultur juga

sekitar *-2 kali sebelum aklimatisasi #&us%andi *41*$. +ika terlalu

sering melakukan sub kultur dapat mengakibatkan perubahan pada

tanaman krisan yang disebut dengan keragaman somaklonal.

&eberhasilan penanaman eksplan dipengaruhi oleh beberapa aktor'

yaitu sterilisasi' pemilihan bahan eksplan' aktor lingkungan seperti p('

!ahaya dan temperatur' serta kandungan PT #at Pengatur Tumbuh$

dalam medium kultur. )aktor yang mempengaruhi kegagalan dalam

penanaman eksplan adalah media dan alat yang tidak steril' perlakuan'

pengovenan yang kurang baik serta lingkungan yang mudah

mengkontaminasi bagi media penanaman.

&egiatan sub kultur ini menggunakan tanaman krisan. &ontaminasi

tersebut organisme ke!il yang masuk kemedia' botol kultur' alat tanam

yang kurang steril' lingkungan kerja' ruang kultur yang kotor dan

ke!erobohan dalam pelaksanaan. danya kontaminasi diharapkan dalam

melakukan sub kultur dilakukan sesuai prosedur dan mengusahakan agar

pelaksanaan' ruang kultur dan peralatan selalu steril.

)aktor yang turut menentukan keberhasilan pelaksanaan kultur

jaringan adalah genotip #varietas$ tanaman serta komposisi media yang

digunakan. Sejumlah laporan sebelumnya telah menunjukkan bah%a

setiap genotip #varietas$ tanaman membutuhkan komposisi media

tertentu guna mendukung pertumbuhan eksplan yang optimal #Takumi

and Shimada 1CC6R ,seret 1CCCR Basri *442$. Selanjutnya' aspek penting


42/53

7*

yang harus diperhatikan pada komposisi suatu media yaitu kebutuhan

terhadap zat pengatur tumbuh' khususnya kombinasi dan konsentrasi dari

zat pengatur tumbuh yang paling sering digunakan' yaitu auksin' seperti

= dan ,B' serta sitokinin seperti BP. Penggunaan auksin #=

dan ,B$ bersama sitokinin #BP$ pada konsentrasi yang tepat mema!u

pertumbuhan eksplan' terutama dalam pembentukan daun' tunas dan ruas

yang intensi #Duna%an 1C99$.

(asil pratikum menunjukkan bahan eksplan krisan hidup.

0itunjukkan dengan mun!ulnya * tunas' 5 akar yang masih terlihat putih'

dan 8 daun ditunas' setelah 6 (ST pada planlet dan 2 tunas' 8 akar

terlihat ber%arna !oklat' dan 15 daun ditunas setelah 17 (ST. Pada

minggu pengamatan ketiga atau *1 (ST jumlah tunas masih 2' akar

tumbuh menjadi 6 dan ber%arna !oklat' jumlah daun tetap 15' namun

tanaman mengalami kontaminasi jamur. &ontaminasi menutupi media

dan terbentuk hitam setengah media terlihat dari ba%ah media dan putih

diseluruh media dan sekitar eksplan. Pertumbuhan tunas terletak diketiak

daun pada krisan.


1. &esimpulan

Berdasarkan hasil pengamatan mengenai Sub &ultur #&risan$' maka

dapat diambil bebrapa kesimpulan' sebagai berikut

a. &ultur jaringan merupakan teknik perbanyakan tanaman untuk

mendapatkan bibit tanaman se!ara !epat.


43/53

72

b. /ksplan yang digunakan adalah &risan meliputi batang dan daun.

!. Pada a%al penanaman sub kultur jumlah daun sebanyak 2 helai pada

tangkai.

d. )aktor penentu keberhasilan kultur jaringan ditinjau dari genotip

tanaman' media kultur' lingkungan tumbuh dari kondisi eksplan.

e. +umlah daun semakin banyak ditiap minggunya.

. /ksplan mengalami kontaminasi pada minggu ketiga pengamatan.

*. Saran


mengutamakan sterilisasi dari alat' bahan tanam eks!lant, dan

lingkungan kerja agar memperke!il tingkat kontaminasi dan

memperbesar keberhasilan dalam kultur jaringan.

DA%TARPUSTAKA

Basri *447.(ultur Jaringan 'anaman. Palu "niversitas Tadulako Press.

Deorge / ) dan Sherrington P 0 *414.lant ro!agation b" 'issue +ulture.

Priadi' 0oy' dkk.*449. Pertumbuhan ,n vitro Tunas "bi &ayu #Manihot es!ulenta

rantz$ pada Berbagai Bahan Pemadat lternati Pengganti gar. +urnal

B%3%4/RS%'AS. @ol. C#1$C-1*.

@erent M/ *412. onservation Ta!ti!s or onstant risis. ,n Perspe!tives on

Biodiversity +ase Studies of Genetic Resources +onsewallion and 3eve

+o!ment.Potter S et all #/ds$. MS Publi!ation. 3ashington.


44/53

77

aitlin M and P Palukaitis *449.Advances in understanding !lant viruses and

virus disease. nnu. Eev. Phytopathol. 29 116-172.

ACARA )

AKLIMATISASI &AN**REK(

A. Pendahuluan

1. Latar Belakang

klimatisasi dilakukan dengan mengeluarkan anggrek dari dalam

botol dengan !ara menarik bibit anggrek satu per satu dengan

menggunakan ka%at atau meme!ah botol pada bagian pangkal botol.

nggrek merupakan salah satu anggota amili


45/53

75

dijumpai hampir diseluruh belahan dunia terutama daerah tropis mulai

dari dataran rendah hingga tinggi' bahkan sampai ke daerah perbatasan

pegunungan bersalju. Tanaman anggrek mempunyai pola pertumbuhan

yang berbeda dengan tanaman hias lainnya. Pertumbuhan anggrek' baik

vegetati #pertumbuhan tunas' batang' daun' dan akar$ serta pertumbuhan

generati #pertumbuhan primordial bunga' buah' dan biji$ tidak hanya

ditentukan oleh aktor genetik' tetapi juga oleh aktor iklim dan aktor

pemeliharaan. =amun yang menjadi !irri umum bunga anggrek ialah

bah%a anggrek memiliki tiga lembar daun bunga dan tiga lembar

kelopak bunga yang mirip dengan daun bunga. Satu diantara daun bunga

itu disebut bibir dan lebih lebar daripada daun bunga' selebihnya terletak

paling ba%ah pada bunga bibir ini berungsi sebagai landasan bagi

serangga penyerbuk.

Prinsip media aklitmatisasi !ukup halus' dapat memegang air

dengan baik' serta bebas dari jamur dan penyakit. Media aklimatisasi

sebaiknya distreilisasi dengan !ara menggunakan autokla' disemprot

ungisida dan di!ampur dengan uradan. klimatisasi anggrek bertujuan

untuk mengadaptasikan anggrek dengan lingkungan luar. &elembapan

media aklimatisasi sekitar 94? dan kebutuhan sinar sekitar 74?. &arena

itu' tempat aklimatisasi perlu dinaungi dengan plastik supaya

kelembaban media terjaga baik dan tidak terkena sinar matahari

langsung.

*. Tujuan PraktikumPraktikum &ultur +atingan a!ara @ mengenai klimatisasi

#nggrek$ memiliki tujuan sebagai berikut

a. Mengetahui teknik aklimatisasi pada tahapan akhir dari kultur

jaringan

b. Meningkatkan pemahaman dan memberikan keterampilan

melakukan aklimatisasi planlet anggrek

!. Mengetahui adaptabilitas planlet anggrek pada tahap aklimatisasi


7C


46/53

78

Praktikum &ultur +aringan a!ara @ mengenai klimatisasi

#nggrek$ dilaksanakan pada &amis' *1 Mei *415 pukul 17.24 3,B di

Laboratorium &ultur +aringan' )akultas Pertanian' "niversitas Sebelas

Maret' Surakarta.

B. Tinjauan Pustaka

,ndonesia terkenal sebagai negara yang memiliki banyak spesies anggrek

alam. 0iperkirakan setengah dari spesies ini terdapat di Papua' sedangkan

*.444 spesies lainnya terdapat di &alimantan dan sisanya tersebar di pulau-

pulau lain di ,ndonesia #Lubis' *414$.

Teknik perbanyakan mikro yang merupakan suatu bentuk aplikasi teknik

kultur jaringan dan bertujuan untuk perbanyakan tanaman telah terbukti

sesuai untuk perbanyakan anggrek termasuk dendrobium. "ntukmemanaatkan teknik ini se!ara optimal diperlukan penguasaan kondisi yang

tepat untuk pertumbuhan dan perkembangan anggrek se!ara in vitro. Salah

satunya adalah pemakaian media kultur dengan kandungan komponen-

komponennya yang tepat dan mampu merangsang perbanyakan !rotocorm

like bodies#PLB$ ataupun tunas #Tuhuteru *41*$.

klimatisasi bertujuan untuk mempersiapkan planlet agar siap ditanam di

lapangan. Tahap aklimatisasi mutlak dilakukan pada tanaman hasil


47/53

76

perbanyakan se!ara in vitro karena planlet akan mengalami perubahan

isiologis yang disebabkan oleh aktor lingkungan. (al ini bisa dipahami

karena pembiakan in vitro #dalam botol$ semua aktor lingkungan terkontrol

sedangkan di lapangan aktor lingkungan sulit terkontrol. klimatisasi

merupakan tahap kritis karena kondisi iklim mikro dirumah ka!a' rumah

plastik' rumah bibit dan lapangan sangat jauh berbeda. &ondisi ini diluar

botol berkelembaban nisbi jauh lebih tinggi daripada kondisi didalam botol.

Planlet atau tunas mikro lebih bersiat heterotroik karena sudah terbiasa

tumbuh dalam kondisi berkelembaban sangat tinggi' asepti!' serta suplai hara

mineral dan sumber energy berke!ukupan #(era%an *44C$.

Tahapan aklimatisasi ini diperlukan oleh planlet karena terdapat

perbedaan kritis antara kedua tempat tumbuh tersebut. Tanpa proses

aklimatisasi planlet tidak akan mampu tumbuh dan beradaptasi dengan

kondisi luar' meliputi kelembaban udara' intensitas !ahaya' suhu dan media

tumbuh. Pada umumnya tanaman yang tumbuh se!ara in vitromembutuhkan

proses aklimatisasi untuk meningkatkan ketahanannya ketika dipindahkan ke

lapangan #=ugroho dan Sugito 1CC8 dalam /ndin ,zudin *412$.

klimatisasi adalah masa adaptasi tanaman hasil pembiakan pada kultur

jaringan #in*vitro$ yang semula kondisinya terkendali kemudian berubah pada

kondisi lapangan yang kondisinya tidak terkendali lagi' disamping itu

tanaman juga harus mengubah pola hidupnya dari tanaman heterotrop ke

tanaman autotrop. klimatisasi merupakan tahapan yang sanggat penting

untuk dilalui dalam proses perbanyakan in vitro. danya perbedaan yang

sangat tajam terutama kelembaban dan intensitas !ahaya lingkungan di dalam

botol dan di luar botol menyebabkan proses aklimatisasi ini merupakan

tahapan yang kritis. Media tanam merupakan salah satu aktor pendukung

pertumbuhan tanaman agar dapat tumbuh dengan baik. Media tanam

berungsi sebagai tempat melekat dan tempat menyimpan air yang dapat

diperlukan untuk pertumbuhan. Syarat media tanam anggrek tidak menjadi

sumber penyakit' mempunyai aerasi dan drainase yang bagus mampu

mengikat air dan zat hara #Tangti et al. *41*$.


48/53

79

nggrek 0enrobium merupakan salah satu jenis tanaman yang sulit

berkembangbiak se!ara vegetati maupun se!ara generati.


49/53

7C


1. (asil Pengamatan

a. Tabel 5.1 daptabilitas Planlet nggrek pada Tahap klimatisasi

/ksplan Tgl


Tinggitunaskar Tunas 0aun &alus kar Tunas 0aun

&ontaminasi

#bakteriFjamur$F hidup

nggrek

*9F5F15 - - - - - - * hidup 1 !m

7F8F15 - - - - - - 2 hidup 1 !m

11F8F15 - - - - - -

Sumber Logbook

b. )oto

Dambar 5. #1$' #*$' #2$' #7$ nggrek 4' 6' 17' *1' *9 (ST#dari kiri ke kanan$

*. Pembahasan

Struktur tanaman anggrek akarnya berbentuk silidris dan berdaging'

lunak dan mudah patah dengan ujung akar yang merun!ing' li!in dan

sedikit lengket. 0alam keadaan kering akan tampak ber%arna putih

keperakan pada bagian luarnya dan hanya pada bagian ujung akar saja

yang ber%arna hijau atau keuguan. kar yang telah tua mnejadi !oklat

dan mongering. Batang anggrek dapat dibedakan menjadi dua


50/53

54

berdasarkan pola pertumbuhannya yaitu monopodial dan sympodial.

nggrek monopodial pertumbuhannya lurus keatas pada satu batang

tanpa batas. nggrek sympodial' tidak memiliki batang utama.

klimatisasi adalah masa adaptasi tanaman hasil pembiakan pada

kultur jaringan yang semula kondisinya tidak terkendali lagi' disamping

itu tanaman juga harus mengubah pola hidupnya dari tanaman heterotrop

ke tanaman autotrop. Menurut iv #1C98 dalam Slamet *411$'

aklimatisasi adalah masa adaptasi planlet dari kultur heterotroik menjadi

autotroik' yang merupakan tahap akhir dari kegiatan kultur in vitro.

klimatisasi merupakan adaptasi planlet dari lingkungan yang terkendali

#in vitro$ke lingkungan in vitrosebelum ditanam di lapangan.

Berdasarkan praktikum kultur jaringan anggrek #3endrobium s!$

sebagai eksplan. Pada a%al penanaman aklimatisasi pada anggrek jumlah

daun sebanyak * helai pada 1 tunas' sampai pada minggu pertama 6

(ST pengamatan diperoleh jumlah daun yang tumbuh masih sama

sebanyak * helai daun. Pada minggu kedua 17 (ST jumlah daun 2 helai.

+umlah akar pada tanaman tidak diketahui.

Media merupakan hal terpenting dalam menunjang keberhasilan

pertumbuhan aklimatisasi anggrek. Pada praktikum ini menggunakan

media dengan susunan media arang diba%ah dan pakis diatas. ampuran

media tanam ini sangat !o!ok digunakan untuk tanaman anggrek di

daerah dengan kelembaban tinggi. Media ini juga berperan dalam

menjaga drainase' aerasi serta kelembaban tanaman.

rang kurang mampu mengikat air dalam jumlah banyak. &eunikan

dari media jenis arang adalah siatnya yang buer #penyangga$' dapatmenetralisir kekeliruan unsur hara' tidak mudah lapuk sehingga tidak

ditumbuhi jamur atau !enda%an. &eunggulan media batang pakis lebih

dikarenakan siat-siatnya yang mudah mengikat air' memiliki aerasi dan

drainase yang baik' serta bertekstur lunak sehingga mudah ditembus oleh

akar tanaman. "nsur-unsur dalam media kultur jaringan harus

mendukung pertumbuhan eksplan' karena eksplan tidak dapat men!ari

unsur tersebut seperti saat berada didalam tanah.


51/53

51

Selain itu menurut >ustina #*447$ lingkungan juga sangat

berpengaruh terhadap keberhasilan aklimatisasi. &eadaan lingkungan

yang mempengaruhi seperti kelembaban' suhu dan !ahaya. ahaya

dalam keadaan in vitro kelembaban udara C5? agar planlet dapat tumbuh

ketika aklimarisasi maka se!ara bertahap udara diturunkan dari C5? in

vitromenjadi 64-94? pada kondisi in vivo. 0engan ini lapisan kutikula

terbentuk dan stomata mulai berungsin #3ardiyati 1CC9$. Perbedaan

suhu dari keadaan in vitroke in vivoakan berpengaruh' agar planlet tidak

mati maka ketika aklimatisasi' suhu di tempat aklimatisasi harus dijaga

agar tanaman atau planlet dapat beradaptasi dengan suhu pada keadaan

in vivo. ,ntensitas' tanaman harus mampu beradaptasi dari !ahaya lab

yang hanya penyinaran kemedia dengan lampu menuju keadaan !ahaya

langsung dari matahari. Bila tanaman tidak tahan denga intensitas !ahaya

yang lebih tinggi pada lingkungan maka tanaman akan mati.

Sumber kontaminasi mikroorganisme pada system kultur jaringan

bisa dipengaruhi oleh medium sebagai akibat proses sterilisasi yang tidak

sempurna. Limgkungan kerja dan pelaksanaan penanaman yang kurang

hati-hati. /ksplan atau serangga atau he%an ke!il yang berhasil masuk

kedalam botol kultur setelah diletakkan kedalam ruang kultur jaringan.



52/53

5*

1. &esimpulan

Berdasarkan hasil pengamatan mengenai klimatisasi nggrek

#3endrobium s!$' maka dapat diambil bebrapa kesimpulan' sebagai

berikut

a. klimatisasi adalah masa adaptasi tanaman hasil pembiakan pada

kultur jaringan #in*vitro$ yang semula kondisinya terkendali

kemudian berubah pada kondisi lapangan yang kondisinya tidak

terkendali lagi' disamping itu tanaman juga harus mengubah pola

hidupnya dari tanaman heterotrop ke tanaman autotrop.

b. rang kurang mampu mengikat air dalam jumlah banyak. &eunikan

dari media jenis arang adalah siatnya yang buer #penyangga$'

dapat menetralisir kekeliruan unsur hara' tidak mudah lapuk

sehingga tidak ditumbuhi jamur atau !enda%an.

!. Pakis baik untuk media anggrek karena memiliki daya mengikat air'

serta aerasi dan drainase yang baik' pakis juga sangat a%et karena

melapuk se!ara perlahan-lahan dan mengandung unsure hara yang

dibutuhkan.

d. Pertumbuhan tanaman anggrek lama.

*. Saran


mengutamakan sterilisasi dari alat' bahan tanam eks!lant, agar

memperke!il tingkat kontaminasi dan memperbesar keberhasilan dalam

kultur jaringan.

DA%TAR PUSTAKA

/ndin ,zudin *412. Teknik klimatisasi Tanamaan (asil &ultur +aringan'

!!limatization Te!hni:ue or Tissue ulture Plants. Jurnal %nformasi

Teknis @ol.11 =o. *. 7C Q 58. >ogyakarta.


53/53

52

Lubis == *414. Mikropropagasi Tunas nggrek (itam #oelogyne pandurata

Lindl$ 0engan Pemberian Benzil mino Purin dan =atalen sam

setat. Skri!si "niversitas Sumatera "tara. Medan.

E (era%an *44C. enuntun raktikum 'eknik (ultur Jaringan 'anaman

3e!artemen endidikan 5asional."niversitas Bengkulu. Bengkulu.

S Tuhuteru' ML (ehanussa. S(T Eaharjo *41*. Pertumbuhan dan Perkembangan

nggrek #3endrobium anosmum$ pada Media &ultur ,n @itro dengan

Beberapa &onsentrasi ir &elapa. grologia' @ol. 1. =o. 1. 1-1*.

mbon.

Tangti >osepa' hairani Siregar' /vi Dusmayanti *41*. Pengaruh Penggunaan

+enis media Terhadap klimatisasi nggrek 0endrobium sp #hibrida$.

Jurnal Sains Mahasiswa ertanian*#*$ 72 Q 75.

rufy kuljar acara i-v.doc

Documents