RECTAL SWAB

A. Tujuan1. Untuk mengetahui cara pengambilan sampel rectal Swab2. Untuk mengetahui cara pemeriksaan sampel rectal Swab3. Untuk dapat melakukan identifikasi bakteri yang tumbuh pada media hasil penanaman sampel rectal swab

B. PrinsipDiambil lidi kapas menggunakan pinset Ose disterilkan dioleskan lidi kapas ke media Digores dengan ose difiksasi ditutup

C. MetodeMetode yang digunakan adalah penanaman bakteri metode gores.

D. Dasar TeoriPemeriksaan rectum merupakan suatu bagian yang penting dalm pemeriksaan abdomen dan pemeriksan geniturinaria. Pemeriksaan ini penting dalam pemeriksaan untuk penyakit gastrointestinal namun juga untuk mendeteksi penyakit lain pada organ pelvis lainnya. Rectal swab merupakan apusan yang dilakukan pada daerah rectum ( 2-3 cm diatas lubang anus ). Kuman kuman yang ditemukan dari swab rectum juga terdapat dalam saluran pencernaan.Salah satu efek dari kuman pathogen penyebab gastroenteritis pada saluran pencernaan adalah diare disentri. Disentri berasal dari bahasa Yunani, yaitu dis ( gangguan ) dan enteron ( usus ), yang berarti radang usus yang menimbulkan luka atau ulkus di kolon ditandai dengan gejala khas yang disebut disentri, yakni :1. Sakit diperut yang sering disertai dengan tenesmus2. Diare3. Tinja mengandung darah dan lenderPenyebab utama disentri akut adalah Shigella, penyebab lain adalah Camplybaster jejuni, E.coli. Dimana tujuan dari pemeriksaan rectal swab ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi kuman pathogen ( penyebab gastroenteritis ) pada saluran pencernaan.Ada empat spesies Shigella, yaitu Shigella flexneri, Shigella boydii, Shigella dysentriae dan Shigella sonnei. Pada umumnya S. flexneri, S.boydii, dan S.dysentriae paling banyak ditemukan di Negara berkembang seperti Indonesia.Salmonella merupakan penyebab diare bacterial tersering pada anak dibawah lima tahun. Salmonella sering menjadi penyebab diare nasokomial bersama C difficile dan lebih sering mengenai pasien imunodefisiensi dengan gejala klinis yang dapat membahayakan jiwa serta bersifat sering kambuh. Pemberian antimikroba tidak efektif untuk tata laksana. Salmonella bahkan dapat memperlambat pengeluaran bakteri dari usus. Sehingga pengobatan primer adalah penggantian cairan. Salmonellasis akut biasanya akibat dari konsumsi daging yang terkontaminasi, susu dan produk unggas. Karena infekasi sakmonella biasanya membutuhkan seluruh inokulum yang relative besar, jarang disebabkan penularan daro orang ke orang. Salmonella terutama non tifosa menyerang ileum distal dan menghasilkan toksik serta inflamasi usus. Maka inkubasi yaitu 24 sampai 36 jam kemudian muncul gejala klinis diare 2 sampai 3 hari bisa disertai darah di tinja dengan demam, muntah, dan nyeri perut.1. Mac Conkey Agar (MCA)Pembenihan ini bersifat selektif untuk hasil gram negative baik Enterobacteriateae maupun yang non fermented basilgram negative, sedangakn bakteri lainnya umumnya tidak tumbuh / tumbuh dengan tidak subur.Persenyawaan utama dalam media ini adalah laktosa, garam empedu dan nerah netral. Media ini menghambat pertumbuhan bakteri garam poditif yang di sebabkan oleh garam empedu dan kristal violet, bakteri gram negatif yang tumbuh di bedakan dalam kemampuannya memfermentasekan laktosa.Koloni dari bakteri yang memfermentasekan laktosa berwarna merah bata dan di kelilingi oleh endapan garam empedu. Endapan ini di sebabkan oleh enguraian laktosa menjadi asam yamg bereaksi dengan garam empedu.Bakteri yang tidak memfermentasekan laktosa biasanya bersifat pathogen. Golongan bakteri ini tidakmemperlihatkan perubahan pada media. Warna koloni di lihat pada bagian koloni terpisah.Komposisi:a. Peptone Yeast extract b. Agarc. Protease Pepton d. Netral Red ( indicator )e. Lactosa ( sumber karbohidrat )f. Crystal Violet ( zat penghambat )g. Bile salt ( zat penghambat )h. Aquadesti. Sodium Cloride

2. Salmonella Shigella Agar (SSA)Perbenihan ini mirip MCA, hanya penggunaanya lebih khusus lagi untuk basil gram negative pathogen enteric, sehingga di pakai untuk isolasi dari specimen yinja terutama salmonella shigella yang keduanya memperlihatkan pertumbuhan koloni yang tidak berwarna. Sebagai bahan penghambat utama adalah garam empedu dan brilliant green yang tidak hanya mengam,bat bakteri asam positif saja tetapi menekan pertumbuhan basil pathogen non enteric lainnya.Komposisi:a. Ekstark sapi b. Proteose peptone c. Laktosa d. Garam bile e. Natrium sitart f. Ferrik sitratg. Agar h. Merah netral i. Hijau brilliant j. Aquadest

E. Alat dan Bahan1. Alata. Pinsetb. Incubatorc. Lampu spiritusd. Jarum Osee. Kertas labelf. Lidi kapasg. Objek glass2. Bahana. Rectal Swab3. Reagena. Carry and Blairb. SS Agarc. Mac Conkey Agard. TCBS Agar

F. Cara Kerja1. Pengambilan sampela. Orang yang hendak diambil swabnya disuruh untuk bersimpuh atau menungging di atas tempat tidur.b. Lubang anus dibuka menggunakan tangan kanan.c. Dimasukkan lidi kapas steril ke dalam lubang anus menggunakan tangan kanan dengan cara memutar ke arah kanan sampai 2-3 cm ke dalam lubang anus.d. Ditarik lidi kapas keluar dengan sambil diputar ke arah kanan.e. Dimasukkan lidi kapas ke dalam media Carry and Blair sampai tertanam kedalam media.f. Dipotong lidi kapas sehingga botol bisa ditutup dengan rapat.g. Diberi label kemudian di bawa ke laboratorium.2. Cara Penanaman pada Media TCBS Agar, Mac Conkey Agar, SS Agara. Disiapkan media TCBS Agar, Mac Conkey Agar, SS Agar. Diberi label sesuai dengan sampel yang akan ditanam.b. Sampel ( lidi kapas ) pada media Carry and Blair diambil dengan menggunakan pinset secara aseptis dengan memutarnya dan dioleskan pada media TCBS Agar / Mac Conkey Agar / SS Agar.c. Diambil ose, dipanaskan sampai membara kemudian didinginkan dengan cara menempelkan pada media, stelah itu dibuat goresan pada masing-masing media.d. Semua media yang telah digores diinkubasi pada incubator pada suhu 35C-37C selama 18 24 jam.

G. Hasil PengamatanPenanaman Rectal Swab setelah inkubasia. TCBS Agar

Merupakan media TCBS yang ditumbuhi oleh Vibrio sp. Yang dapat dibedakan dengan melihat warna koloninya.

b. SS Agar

Kelompok 1Sampel Pak Mastar: KuningSampel Siswa: Kuning

Kelompok 2Sampel Pak Mastar : Kuning & colorlessSampel Siswa : Bersih ( negative )

Kelompok 3Sampel Pak Mastar : Kuning & merah mudaSampel Siswa : Merah muda

Kelompok 4Sampel Pak Mastar : Kuning, merah mudaSampel Siswa : Bersih ( negatuf )

c. MC Agar

Kelompok 1Sampel Pak Mastar: Kuning, pinkSampel Siswa: Kuning, pink

Kelompok 2Sampel Pak Mastar: colorlessSampel Siswa : Bersih

Kelompok 3Sampel Pak Mastar: pink, colorlessSampel Siswa: Bersih

Kelompok 4Sampel Pak Mastar: merah mudaSampel Siswa: Bersih

H. PembahasanPemeriksaan rectum merupakan suatu bagian yang penting dalam pemeriksaan abdomen dan pemeriksaan genitourinaria. Pemeriksaan ini penting dalam pemeriksaan untuk penyakit gastroinstestinal namun juga untuk mendeteksi penyakit lain pada organ pelvis lainnya.Dalam percobaan kali ini, sampel yang digunakan adalah Rektal Swab. Rektal Swab merupakan apusan yang dilakukan pada daerah rectum ( 2-3 cm diatas lubang anus ). Kuman-kuman yang ditemukan dari Rectal Swab juga terdapat dalam saluran pencernaan.Dalam praktikum kali ini kita menggunakan media TCBS Agar, SSA ( Salmonella Shigella Agar ), dan MCA ( Mac Conkey Agar ) untuk menumbuhkan hasil apusan Rektal Swab. Hasil yang diharapkan dari media ini adalah Vibrio sp, Salmonella, Shigella, dan Eschericia coli.1. TCBS AgarTiosulfat-sitrat-garam empedu-sukrosa agar atau TCBS agar adalah jenis budidaya agar plate selektif yang digunakan dalam laboratorium mikrobiologi untuk mengisolasi Vibrio sp. TCBS Agar sangat selektif untuk isolasi V.cholerae dan V.parahaemolyticus, serta vibrio lainnya. Penghambatan bakteri gram positif dicapai oleh penggabungan empedu sapi, yang merupakan xat alami yang mengandung campuran empedu, dan kolat natrium, garam empedu murni. Natrium tiosulfat berfungsi sebagai sumber sulfur dan dalam kombinasi dengan sitrat besi, mendeteksi produk hydrogen sulfide. Sakrosa ( sukrosa ) dimasukkan sebagai karbohidrat difermentasi untuk metabolisme pH basa medium meningkatkan pemulihan V.cholerae. Timol biru dan biru bromothymol termasuk sebagai indicator perubahan pH.Berdasarkan pengamatan yang kita lakukan, kita menemukan berbagai bakteri yang dapat dibedakan berdasarkan warna, bentuk, dan ukuran koloni yang tumbuh pada suhu kamar ( 30C ). Ada enam spesies yang pathogen, yaitu:a. Vibrio anguillarium, mempunyai ciri-ciri warna putih kekuning-kuningan , bulat, menonjol, dan berkilau.b. Vibrio alginolyticus, mempunyai ciri-ciri berwarna kuning, diameter 3-5 mm.c. Vibrio cholera, mempunyai ciri-ciri yaitu berwarna kuning, datar, diameter 2-3 mm, warna media berubah menjadi kuning.d. Vibrio salmonicida, mempunyai ciri-ciri berwarna bening, diameter < 1 mm, bulat, menonjol, dan utuh.e. Vibrio vulnificus, mempunyai ciri-ciri berwarna hijau, diameter 2-3 mm.f. Vibrio parahaemolyticus, mempunyai cirri-ciri berwarna biru samapi hijau, diameter 3-5 mm, dipusat koloni berwarna hijau tua.Dalam praktikun yang saya lakukan pada media TCBS ada beberapa bakteri ada berwarna kuning, hijau bahkan hitam. Untuk yang berwarna kuning itu ada dugaan Vibrio cholera ( presumtif vibrio ). Sedangkan yang berwarna hijau adalah Vibrio parahaemolyticus karena dia berwarna hijau dan memiliki diameter 3-5 mm. Vibrio parahaemolyticus merupakan bakteri yang menyebabkan penyakit gastroenteritis akut dan diare.Untuk uji control positif dan control negative pada media TCBS agar, dapat dilihat pada table di bawah ini:Positive ControlsHasil yang diharapkan

Vibrio funnisi NTC 11218Vibrio parahaemolyticus NTC 10885Tumbuh baik, koloni kuningTumbuh baik, koloni hijau

Negative Controls

Eschericia coliTidak Tumbuh

2. SSA ( Salmonella Shigella Agar )Media SSA (Salmonella Shigella Agar) SSA digunakan untuk menyeleksi salmonella dan beberapa strains shigella dari specimen tinja (stoll).SSA juga digunakan untuk membedakan bakteri yang mengandung koloni yang karakteristik pada medium.SSA mengandung garam empedu,Na-sitrat,dan briliant green yang mehambat pertumbuhan gram positif dan gram negatif LF normal yang ada di tinja.laktosa merupakan sumber karbohidrat ,indikator yang dipakai adalah neutrad red.jika bakteri tumbuh dan memfermentasi laktosa maka akan menghasilkan asam dan mengubah indikator menjadi pink-merah.Na-tiosulfat sebagai sumber sulfur untuk produksi H2S .H2S yang diproduksi,maka akan dapat terbentuk presipitasi hitam ditengah koloni karena telah bereaksi dengan FeCl3 pada medium.Inokulum yang mengandung banyak bakteri dan tinja (stool) dapat ditanam pada media SSA karena formula yang mengandung inhibitor,Strain shigella mungkin tidak dapat tumbuh pada SSA dan medium SSA digunakn sebaiknya untuk plat medium utama Shigella sebagai isolat potensial. Pada praktikum yang telah dilakukan,di media SSA ditemukan warna koloni yang berbeda .Pada Sampel Kelompok 1 sampel pak mastra dan sampel siswa berwarna kuning. Kelompok 2 sampel pak matra berwarna kuning dan colorless. Pada sampel kelompok 3 sampel pak mastra berwarna kuning dan merah muda sedangkan pada sampel siswa berwarna merah muda. Dan untuk sampel kelompok 4 sampel pak mastra berwarna kuning dan merah muda. Dicurigakan untuk koloni berwarna kuning merupakan Salmonella yang berwarna colorless adalah Shigella dan yang berwarna merah muda adalah E.coli.

3. MCA ( Mac Conkey Agar )Media MCA (Mac Conkey Agar) Media MCA adalah media selektif diferensial untuk menyeleksi Enterobacteriaceae dan batang gram negatif lainnya pada Flora campuran serta membedakannya menjadi lactose-fermenter (LF)dan non lactose fermenter (NLF) komposisi pada media ini adalah garam empedu dan kristal violet akan menghambat beberapa bakteri gram-positif tetapi menumbuhkan gram-negatif .Lactose sebagai sumber karbon .Batang gram-negatif (LF) akan menghasilkan koloni pink sampai merah,yang dikelilingi presipitrat empedu.Produksi asam dan fermentasi laktosa menyebabkan garam empedu tidak larut.Batang gram-negatif (NLF)akan menghasilkan koloni tidak berwarna atau transparan secara lambat dan lemah .LF koloni yng tidak berwarna selama 24 jam atau kelihatan berwarna pink selama 24-48 jam.Beberapa batang gram-negatif bisa gagal tumbuh pada medium ini karena diperpanjangnya inkubasi,gram-positif seperti Eterococcus bisa menghasilkan koloni yang kecil sekali.Inkubasi pada suhu kamar bisa menyebabkan ditemukannya Yersinia enterocolitica.Kondisi agar dinaikkan untuk mencegah pengerumunan spesies proteus.Formula MC tanpa tanpa kristal violet dapat digunakamn membantu identifikasi Mycobacteria.Medium ini juga digunakan untuk isolasi E.coli koloni sorbital negatif tampak tidak berwarna menunjukkan kemungkinan E.coli dan perlu diuji lebih lanjut. Pada praktikum yang telah dilakukan,pada media MCA terdapat koloni merah bata,bentuk koloninya datar yang dicurigai bakteri E.coli pathogen. Pada media MCA kelompok I sampel Pak Mastra dan sampel siswa koloni berwarna kuning dan merah muda. Pada sampel Kelompok 2 sampel pak mastra koloni berwarna colorless. Pada sampel kelompok 3 sampel pak mastra berwarna merah muda dan colorless. Dan untuk sampel kelompok 4 sampel pak mastra koloni berwarna merah muda. Sehingga dicurigai untuk koloni berwarna merah muda adalah E.coli dan yang berwarna kuning adalah Shigella.

I. Kesimpulan1. Pada media TCBS ada beberapa bakteri ada berwarna kuning, hijau bahkan hitam. Untuk yang berwarna kuning itu ada dugaan Vibrio cholera ( presumtif vibrio ). Sedangkan yang berwarna hijau adalah Vibrio parahaemolyticus karena dia berwarna hijau dan memiliki diameter 3-5 mm.2. Pada media SSA ditemukan koloni berwarna kuning merupakan Salmonella yang berwarna colorless adalah Shigella dan yang berwarna merah muda adalah E.coli.3. Pada media MCA ditemukan koloni berwarna merah muda adalah E.coli dan yang berwarna kuning adalah Shigella.

J. Daftar PustakaMastra, Nyoman.DKK. 2014.Bakteriologi 1. Denpasar : Politeknik Kesehatan DenpasarIntan, syarah.2011. Media dan Reagensia. Online : http://ruangki naryadaluang.blogspot.com/2011/01/media-dan-reagensia.html ( 15 juni 2014 pukul 21.00 WITA )Anonim.2010.Media Selektif