materi praktikum mikrobiologi hari ke-2

7/21/2019 Materi Praktikum Mikrobiologi Hari Ke-2

1/4

I. M O R F O L O G I S E L

A. Pewarnaan GRAM (dilakukan)

Dalam pewarnaan gram bakteri diberi zat warna lebih dari satu macam dan diberikan

secara berurutan. Melalui pewarnaan gram, bakteri dapat dikelompokan menjadi dua

kelompok yaitu : (1). ram positi!, dinding sel akan berwarna ungu dan ("). ram negati!,

dinding sel akan berwarna merah.

1. #uat preparat ulas dari suspensi kuman seperti :E. coli, S. aureus, S. typhidll.

". $akukan !iksasi dengan hati%hati

&. enangi preparat dengan kristal ungu dan dibiarkan selama &' detik

. uci dengan air mengalir dan dikeringkan

*. enangi preparat dengan kalium iodida dan dibiarkan selama * detik

+. uci dengan air mengalir

. uci dengan alkohol aseton sampai warna ungu hilang dan dikeringkan

-. enangi preparat dengan sa!ranin dan dibiarkan selama &' detik

. uci dengan air mengalir dan dikeringkan

1'. /mati preparat dengan mikroskop.

Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu-IlmuKesehatan

Jurusan Kedokteran

nsoed-!ur"okerto


2/4

B. Pewarnaan SPORA Menurut Schaeffer Dan Fultn

0pora bakteri yang terkenal dengan sebutan endospora karena terdapat di dalam sel,

sukar menyerap zat warna. 0ekali diberi warna dan diserap, warna itu tidak dapat dilunturkan

dan sebagai akibatnya zat warna lain tidak dapat diserap. ewarnaan endospora menurut

0chae!!er dan 2ulton disebut juga pewarnaan 3Malakhit #i$au3 karena menggunakan zat

warnaMalachit %reenpanas yang akan melekat pada spora dan sukar dilunturkan baik pada

saat pencucian maupun saat pemberian warna penutup. 4ndospora berwarna hijau dan bagian

sel 5egetati! lainnya6 berwarna merah muda.

1. #uat preparat ulas dari&acillussp. dan 'lostridiumsp., dan dikeringkan di udara

". $akukan !iksasi dengan cara melewatkan preparat (objeck glass) di atas api bunsen.

&. $etakkan preparat pada rak yang ada di atas penangas air (air yang sedang mendidih)


Jurusan Kedokteran

nsoed-!ur"okerto


3/4

. 7utup preparat dengan kertas merang an basahai dengan larutan Malachit reen * 8 dan

dibiarkan selama * menit

*. uci preparat dengan air mengalir dan dikeringanginkan

+. 7etesi preparat dengan zat warna penutup 0a!ranin dan dibiarkan selama &'%+' detik

. uci preparat dengan air mengalir dan dikeringanginkan

-. /mati preparat di bawah mikroskop menggunakan minyak imersi.

!. Pewarnaan A!ID"FAS# (Ba$il #ahan A$a% & B#A)

ewarnaan ini dikenal dengan sebagai pewaranaan 9iehl elson, yaitu pewarnaan

bakteri yang mengandung banyak lemak. #akteri semacam ini tidak dapat diwarnai baik

dengan pewarnaan sederhana maupun pewarnaan gram. ewarnaan yang sudah melekat pada

sel, tidak dapat dilunturkan dengan pelarut biasa.

(. #uat preparat ulas dari sputumMycobacterium tuberculosis


Jurusan Kedokteran

nsoed-!ur"okerto


4/4

a. ;bjeck glass dibersihkan dengan alkohol sampai kotoran yang melekat hilang,

kemudian objeck glass dipanaskan di atas api bunsen dan diolesi sputum 7#

b. ;bjeck glass dibersihkan dengan alkohol sampai kotoran yang melekat hilang,

kemudian objeck glass diolesi sputum 7# dibarkan kering di suhu ruang

). $akukan !iksasi dengan cara melewatkan preparat (objeck glass) di atas api bunsen.

*. a. 7eteskan karbol !ukhsin di atas apusan sputum 7# dan panaskan dengan api bunsen

sampai * menit dan diusakan zat warna tidak sampai mendidih

b. 7eteskan karbol !ukhsin di atas apusan sputum 7# dan panaskan di atas air mendidih

sampai * menit dan diusakan zat warna tidak sampai kering

+. uci dengan air mengalir dan dikeringanginkan

. 7etesi dengan zat peluntur warna (peluntur asam) : "'8 < "0;atau campuran alkohol

*8 dengan ",*8

materi praktikum mikrobiologi hari ke-2

Documents