Kromosom Kelenjar Ludah Chironomus

Hasil Pengamatan :

No.

Nama Anggota Kromosom Kelenjar Ludah,pembesaran :100x

1 Hasbi Yusuf

2 Indah Oktaviani

3 Nurul Alfiah

4 Nurul Fauziah

5 Tri Ekawati Heryanto

6 Ririn Rinzani H.

Kelenjar ludah yang belum diwarnai

Tahapan-tahapan isolasi DNA

No.1

2

3

4

Sampel buah Stawberry, pilih yang segar

Larutan ________________, ___________________, ______________

Sampel buah ditumbuk hingga halus agar sarinya dapat keluar

Tambahkan larutan ________, kemudian kocok dengan menggunakan vektor

5

7

8

9

10Setelah di sentrifuge dengan kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit

Warna larutan pink pudar

Terbentuk endapan

Setelah tercampur, isolate dimasukkan ke dalam air dalam suhu

Tambahkan larutan ________, kemudian kocok dengan menggunakan vektor

11

12

13

14

15

Setelah di sentrifuge dengan kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit

Larutan Bening

DNA

Sampel dimasukkan ke dalam sumur yang terdapat dalam gel, alat siap dipasang dan disambungkan ke sumber listrik ( elektroforesis pada daya 100 volt selama 30 menit )

16

Langkah Kerja

1. Mengambil daging buah yang sudah matang atau sayuran sebanyak 50 gram.

2. Kemudian daging buah atau sayuran tersebut dihancurkan dengan menggunakan blender atau sendok atau batang kecil dengan cara ditekan-tekan.

3. Daging buah atau sayuran yang telah dihaluskan ditampung.4. Kemudian memasukkannya ke dalam tabung 1,5 ml sebanyak 0,1 ml atau

100 µl.5. Selanjutnya menambahkan buffer ekstraksi sebanyak 4x voleme total

sampel.6. Lalu, menambahkan SDS 20% sebanyak 20 µl.7. Menghomogenkan dengan alat vorteks selama 5 detik.8. Menginkubasi dalam penangas air pada suhu 65 o C selama 5 detik.9. Menambahkan Potasium asetat sebanyak 100 µl 5 M.10. Menghomogenkan dengan cara membolak-balik tabung sebanyak 50x.11. Menyimpan dalam wadah berisi es selama 10 menit.12. Sampel disentrifuga pada kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit.13. Memindahkan fasa atas ke dalam tabung 1,5 ml yang baru, endapan jangan

sampai terbawa.

14. Menambahkan kloroform: Isoamil alcohol (24:1) sebanyak 12

x volume

total sampel.

15. Selanjutnya, sampel dihomogenkan dengan cara membolak-balik tabung sebanyak 50x.

16. Sampel disentrifuga pada kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit.17. Fasa atas dipindahkan ke dalam tabung baru.18. Kemudian menambahkan alcohol 100% (-20oC) sebanyak minimal 2x

volume total sampel.19. Sampel disentrifuga lagi pada kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit.20. Kemudian, membuang alcohol dengan hati-hati agar endapan DNA tidak

terbuang.21. Selanjutnya, mencuci dengan alcohol 70% 1x, lalu sampel dikeringkan

pada oven dengan suhu 50oC selama 10 menit, atau hingga endapan mongering.

22. Endapan DNA dilarutkan dengan TE sebanyak 30 µl.23. Menyimpan sampel pada suhu 4oC, biarkan minimal selama 24 jam agar

DNA dapat terlarut dengan se\mpurna.24. DNA yang diperoleh akan di elektroforesis dan juga di amplifikasi dengan

alat PCR.

Alat dan BahanAlatMikropipet berbagai ukuranPipet berukuran