hasil dan diskusi
DESCRIPTION
pembahasan semangkaTRANSCRIPT
Hasil dan Diskusi
Aliran cytometry analisis menunjukkan bahwa ploidi tersebut
tingkat nontransformed dan transgenik tanaman T0 adalah
Deteksi diploid.The PCR menunjukkan bahwa T0, T1 dan
Tanaman T2 memiliki gen ZYMV-CP (Gambar 1 A), dan
tidak ada tanaman kontrol nontransformed terkandung
gen. Dalam T1 dan T2 populasi, 71% (57/80) dan
83% (50/60) dari tanaman (masing-masing) mengandung
Gen ZYMV-CP menurut PCR amplifikasi.
Sejak XbaI hanya memotong di satu sisi ZYMV-CP
gen, sisi XbaI lainnya harus datang dari
genom tanaman. Analisis selatan blot menunjukkan bahwa
tanaman kontrol nontransformed tidak memiliki orang
ZYMV-CP gen, dan tanaman yang dipilih oleh PCR
mengandung gen ZYMV-CP sebagai beberapa salinan
T-DNA terintegrasi dalam genom tanaman (Gambar 1 B).
Dalam kedua percobaan, bintik-bintik pada kotiledon, dan lecet
atau bintik-bintik pada helai daun yang absen di nontransgenik
kontrol dan T1 transgenik atau T2 tanaman. Parental
kontrol, dan T1 dan T2 transgenik tanaman yang diploid,
sistem reproduksi mereka berumah satu, dan
kebiasaan pertumbuhan yang pelari. Mengenai sifat-sifat ini,
perbedaan antara genotipe tidak signifikan.
Pada percobaan pertama, tidak ada yang signifikan
Perbedaan antara T1 transgenik dan tanaman kontrol
mengenai batang, cabang, daun, dan bunga segar dan
parameter berat kering (Tabel 1). hipokotil bibit
lebar panjang dan helai daun generasi T1 transgenik
masing-masing adalah 22,04 dan 7,77% lebih tinggi dibandingkan dengan
kontrol nontransgenik (Tabel 2). Namun, bibit
lebar kotiledon dan panjang T1 transgenik yang
16,95 dan 16,48% lebih rendah dibandingkan kontrol orangtua
(Tabel 2).
Dalam percobaan kedua, grooving buah atau marmer,
patch di hilus yang absen, dan warna kulit biji tanah
cokelat dalam kontrol nontransgenik atau T2 transgenik
benih. Perbedaan antara T2 transgenik dan
kontrol nontransgenik mengenai batang, cabang, daun,
bunga, dan buah parameter (Tabel 3 dan 4), dan
biji, berat segar dan kering, hasil total, dan kotiledon
parameter (Tabel 5) tidak signifikan. Namun,
Panjang hipokotil transgenik T2 bibit adalah 8,30%
lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol nontransgenik. Selain itu, Gambar 1. Analisis molekuler: A, ethidium bromide patri
gel agarosa menunjukkan amplifikasi dengan PCR dari
Gen ZYMV-CP hadir dalam tanaman transgenik. sampel dari
tanaman transgenik (jalur 1, 4, 6 dan 8-11), tanaman pelarian
(jalur 2, 3, 5 dan 7), kontrol positif (jalur 12, transgenik
semangka), kontrol positif dari pCIB10 plasmid (jalur P),
dan spidol ukuran molekul (jalur M) ditandai. molekuler
spidol berat (bp) yang tertera pada sisi gel. B,
Analisis Southern blot T2 keturunan. PCR fragmen
Gen ZYMV-CP, diperkuat dari pCIB10 tersebut, digunakan sebagai
probe. Total DNA genomik (10 mg), dari transformasi
tanaman (jalur 1) dan tanaman kontrol nontransformed (jalur 2),
dicerna dengan XbaI. daging ketegasan, ukuran putik bekas luka, dan daging warna *
Nilai buah T2 rekayasa genetika yang masing-masing
7.19, 11.69 dan 8.16% lebih besar dibandingkan dengan kontrol
buah. Buah ketebalan kulit dan panjang batang dari
Tabel 1. Nilai batang, cabang, daun, bunga, dan segar
dan parameter berat kering nontransgenik 'Crimson
Manis '(CS) semangka dan T1 keturunan dengan transgen
ZYMV-CP (T1) (1)
(1)Sarana setiap parameter yang diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak di-
ffer dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.
(2)Menurut Uni Internasional
Perlindungan Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, intermediate
diate; dan 7, kuat.
(3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut;
5, bulat; dan 7, tumpul.
Tabel 2. Nilai bibit dan pisau parameter
nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T1
keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T1) (1)
T2 individu transgenik adalah 7.96 dan 10.88% lebih rendah
dibandingkan dengan individu kontrol. Stripe warna nilai *
buah kontrol nontransgenik lebih tinggi dari itu
T2 transgenik.
Mengenai perbedaan antara air-transgenik
baris melon dengan nontransgenik kultivar orangtua CS,
hanya empat dari 36 karakteristik diselidiki dalam pertama
Percobaan yang signifikan. Dalam percobaan kedua,
hanya tujuh dari 80 yang signifikan. perbedaan
antara berubah dan nontransformed genotipe,
berkaitan dengan lebar dan panjang kotiledon atau helai daun
lebar, tidak jelas, karena perbedaan tersebut
signifikan dalam percobaan pertama (Tabel 2), tetapi tidak di
kedua (Tabel 3 dan 5). Hal ini mungkin disebabkan
perbedaan kondisi lingkungan antara
musim tanam (musim dingin-musim semi dan musim panas-musim gugur),
Tabel 3. Nilai dari batang, parameter cabang, daun, dan bunga
dari nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2
keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1).
(1)Berarti diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak berbeda dengan uji LSD,
pada 5 probabilitas%.
(2)Menurut Uni Internasional untuk perlindungan
tion Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, menengah; dan 7,
kuat.
(3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut; 5, bulat; dan
7, tumpul.
ketika percobaan dilakukan. Sudah
melaporkan bahwa tiga teknologi profil digunakan untuk
membandingkan dua baris jagung transgenik dengan masing-masing
garis kontrol, dan pengaruh kondisi pertumbuhan sebagai
efek lingkungan tambahan juga dievaluasi
dengan membandingkan garis Bt-jagung dengan garis kontrol,
di tiga lokasi yang berbeda dalam satu musim tanam
(Barros et al., 2010). Para penulis menyimpulkan
bahwa faktor lingkungan menyebabkan lebih variasi
profil transkrip / protein / metabolit berbeda dari
genotipe.
Dalam kedua percobaan, dalam karya ini, hipokotil
panjang bibit semangka transgenik adalah
signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan nontransgenik
yang tua (Tabel 2 dan 5). Dalam percobaan kedua,
perbedaan antara transgenik dan nontransgenik
Tabel 4. Nilai parameter buah nontransgenik
'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2 keturunan dengan
transgen ZYMV-CP (T2) (1)
(1)Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak di-
ffer dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.
(2)Menurut kerjasama Eropa
tive Program untuk Sumber Daya Genetik Tanaman (2008): 1, diratakan; 2, bulat;
3, luas elips; 4, elips; 5, pyriform; dan 6, lonjong.
(3)menurut TC Resmi Gazete (1998) dan Uni Internasional untuk Perlindungan
Varietas Baru Tanaman (2004): 1, flat; 2, datar sampai bulat; 3, bulat; 4,
dibulatkan menjadi kerucut; dan 5, kerucut.
individu yang signifikan, tentang buah kulit
ketebalan, daging ketegasan, panjang buah batang, ukuran
dari putik bekas luka, dan daging buah atau warna stripe a * nilai
(Tabel 5). Variasi ukuran putik bekas luka di
baris transgenik tidak diinginkan. Namun, variasi
dalam beberapa karakteristik genotipe transgenik
yang menguntungkan, karena mereka terkait dengan buah dengan
ketebalan kulit kurang, lebih daging ketegasan dan lebih tinggi
daging warna nilai *. Perbedaan antara
baris semangka transgenik dan yang nontransformed
berasal kultivar mungkin akibat efek pleiotropic
transgen, seperti dilansir Montero et al. (2011).
Hasil kami konsisten dengan publikasi sebelumnya
tersedia dalam literatur yang menunjukkan kesamaan yang tinggi
genotipe transgenik nontransgenik mereka
rekan-rekan. Jiao et al. (2010) telah mengungkapkan bahwa
Komposisi pepaya transgenik menunjukkan kesamaan besar
dengan kultivar nontransgenik. Venneria et al. (2008)
menunjukkan bahwa nilai-nilai gizi dari genotipe transgenik
mirip dengan kultivar kontrol nontransgenik dari
gandum, jagung, dan tomat. Tidak ada perbedaan yang signifikan
dilaporkan antara transgenik (dengan ZYMV-CP)
dan mengendalikan genotipe melon, berkaitan dengan L-ascorbic
Tabel 5. Nilai untuk parameter benih, segar dan berat kering,
total hasil, bibit dan buah nontransgenik 'Crimson
Manis '(CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen
ZYMV-CP (T2) (1)
(1) Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak
berbeda dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.
asam, asam malat, asam sitrat, sukrosa, glukosa, fruktosa
(Yalcin Mendi-et al., 2010). Namun, penulis ini
telah menunjukkan bahwa buah keasaman total secara signifikan
berbeda dalam genotipe melon transgenik dan kontrol.
Menurut Baudo et al. (2006) dan Shewry et al.
(2007), modifikasi genetik memiliki efek yang lebih rendah
pada transcriptome dari biji-bijian gandum dibandingkan dengan
pemuliaan raditional. Coll et al. (2009) menunjukkan bahwa
ia ekspresi gen profil jagung (MON810) dan
sebanding varietas jagung non-genetik dimodifikasi
berbudaya di lapangan lebih mirip daripada
garis konvensional.
Beberapa laporan dalam literatur menunjukkan bahwa ada
kesamaan besar antara genotipe transgenik
ransformed dengan satu atau dua transgen dimaksudkan,
dan tetua nontransgenik (Baudo et al., 2006;
Shewry et al., 2007; Venneria et al., 2008; Coll et al.,
2009; Barros et al., 2010). Namun, ketika lebih dari
wo gen dimaksudkan atau faktor gen transkripsi
ditransfer ke genom tanaman, kesamaan
ransformed dan nontransformed rekan mungkin tidak
begitu besar, apa yang menuntut studi yang cermat, seperti yang dilaporkan
oleh Batista et al. (2008). Berdasarkan hasil yang dilaporkan
sini, tidak mungkin untuk menyimpulkan bahwa semua transgenik
dan tanaman nontransgenik sangat mirip; Namun, itu adalah
mungkin untuk menghasilkan genotipe transgenik yang memiliki
kesamaan besar dengan berasal mereka konvensional
kultivar.
kesimpulan
1. Mentransfer Zucchini Yellow Mosaic Virus mantel
protein (ZYMV-CP) gen untuk semangka kultivar
Crimson Manis (CS) melalui Agrobacterium tumefaciens
mempengaruhi hanya beberapa ciri-ciri dari 80 yang diselidiki.
2. Perubahan ketebalan kulit, daging ketegasan, dan
Warna daging nilai * yang menguntungkan, sementara ukuran putik
bekas luka yang tidak diinginkan.
3. Garis semangka transgenik yang mengandung
ZYMV-CP gen dan kultivar orangtua yang CS sangat
serupa.
Ucapan Terima Kasih
Organisasi Perencanaan Negara (Turki), yang
Ilmiah dan Teknologi Research Council of
Turki, dan Mustafa Kemal University (Antakya,
Turki), untuk pendanaan; Prof Rebecca Grumet dan
Michigan State University, untuk murah hati menyediakan
.
A. tumefaciens EHA 105 dengan pCIB10, mengandung
NPTII dan ZYMV-CP gen, dan untuk berbagi
laboratorium selama percobaan transformasi; dan
Dr. Metin Tuna, untuk penentuan tingkat ploidi
kontrol nontransgenik dan semangka transgenik
tanaman dengan sitometri.
Tabel 3. Nilai dari batang, parameter cabang, daun, dan bunga dari nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1). (1)Berarti diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak berbeda dengan uji LSD, pada 5 probabilitas%. (2)Menurut Uni Internasional untuk perlindungan tion Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, menengah; dan 7, kuat. (3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut; 5, bulat; dan 7, tumpul.
Tabel 4. Nilai parameter buah nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1)
(1)Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak differ dengan uji LSD, pada probabilitas 5%. (2)Menurut kerjasama Eropa tive Program untuk Sumber Daya Genetik Tanaman (2008): 1, diratakan; 2, bulat; 3, luas elips; 4, elips; 5, pyriform; dan 6, lonjong. (3)menurut
TC Resmi Gazete (1998) dan Uni Internasional untuk Perlindungan Varietas Baru Tanaman (2004): 1, flat; 2, datar sampai bulat; 3, bulat; 4, dibulatkan menjadi kerucut; dan 5, kerucut.
Tabel 5. Nilai untuk parameter benih, segar dan berat kering, total hasil, bibit dan buah nontransgenik 'Crimson Manis '(CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1)
(2) Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak berbeda dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.
Tabel 1. Nilai batang, cabang, daun, bunga, dan segar dan parameter berat kering nontransgenik 'Crimson Manis '(CS) semangka dan T1 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T1) (1)
(1)Sarana setiap parameter yang diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak differ dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.(2)Menurut Uni Internasional Perlindungan Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, intermediate diate; dan 7, kuat. (3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut; 5, bulat; dan 7, tumpul.
Tabel 2. Nilai bibit dan pisau parametern nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka da T1 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T1) (1)
Gambar 1. Analisis molekuler: A, ethidium bromide patri gel agarosa menunjukkan amplifikasi dengan PCR dari Gen ZYMV-CP yang terdapat dalam tanaman transgenik. Sampel dari tanaman transgenik (jalur 1, 4, 6 dan 8-11), tanaman pelarian (jalur 2, 3, 5 dan 7), kontrol positif (jalur 12, semangka transgenik), kontrol positif dari plasmid pCIB10 (jalur P), dan penanda spidol ukuran molekul (jalur M). Molekuler spidol berat (bp) yang tertera pada sisi gel. B, Analisis blot Southern keturunan T2. PCR dari fragmen gen ZYMV-CP, diperkuat dari pCIB10 tersebut, digunakan sebagai probe. Total DNA genomik (10 mg), dari transformasi tanaman (jalur 1) dan tanaman kontrol nontransformed (jalur 2), dicerna dengan XbaI.