BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Ibuprofen merupakan turunan asam fenilasetat dengan nama kimia asam 2-(4-isobutilfenil)propionat. Rumus kimia C13H1802 dan berat molekul 206,3 (The Council of pharm. Society of Great Britain, 2001).

Spektrofotometri fluoresensi merupakan suatu prosedur yang menggunakan pengukuran intensitas cahaya fluoresensi yang dipancarkan oleh zat uji dibandingkan dengan yang dipancarkan oleh suatu baku tertentu. Pada umumnya cahaya yang diemisikan oleh larutan berfluoresensi mempunyai intensitas maksimum pada panjang gelombang yang biasanya 20 nm hingga 30 nm lebih panjang dari panjang gelombang radiasi eksitasi (gelombang pita penyerapan sinar yang membangkitkannya).

Pengukuran intensitas fluoresensi dapat dilakukan dengan suatu fluorometer filter sederhana. Instrument yang dipergunakan bermacam-macam mulai dari yang paling sederhana (filter fluorometer) sampai ke yang sangat kompleks yaitu spektrofotometer.

Komponen-komponen utama dari masing-masing instrument ini yaitu : 1. Sumber energi eksitasi 2. Kuvet untuk sample 3. Detektor 4. Sepasang filter atau monokromator untuk menyeleksi panjang gelombang eksitasi dan emisi.

1

BAB IIPEMBAHASAN

2.1 Ibuprofen

Ibuprofen adalah sejenis obat yang tergolong dalam kelompok

antiperadangan non-steroid (nonsteroidal anti-inflammatory drug) dan digunakan

untuk mengurangi rasa sakit akibat artritis. Ibuprofen juga tergolong dalam

kelompok analgesik dan antipiretik. Obat ini dijual dengan merk

dagang] Advil, Motrin, Nuprin, dan Brufen.

Ibuprofen diindikasikan sebagai analgesik (pengurang rasa nyeri) dan

antipiretik (penurun panas). Secara umum, obat ini digunakan untuk mengurangi

sakit otot, nyeri haid, selesma, flu dan sakit selepas pembedahan.

Nama kimia ibuprofen ialah asam 2-(4-isobutil-fenil)-propionat.

Ibuprofen ada dalam dua enantiomer. Hanya S-ibuprofen saja yang digunakan

sebagai penahan sakit.

Aktivitas analgesik (penahan rasa sakit) Ibuprofen bekerja dengan cara

menghentikan Enzim Sikloosigenase yang berimbas pada terhambatnya

pula sintesis Prostaglandin yaitu suatu zat yang bekerja pada ujung-

ujung syaraf yang sakit.

2

Aktivitas antipiretik (penurun panas) Ibuprofen bekerja di hipotalamus dengan

meningkatkan vasodilatasi (pelebaran pembuluh darah) dan aliran darah piretik.

2.2 Spektrofluorometri

Spektrofotometri fluoresensi merupakan suatu prosedur yang

menggunakan pengukuran intensitas cahaya fluoresensi yang dipancarkan oleh zat

uji dibandingkan dengan yang dipancarkan oleh suatu baku tertentu. Pada

umumnya cahaya yang diemisikan oleh larutan berfluoresensi mempunyai

intensitas maksimum pada panjang gelombang yang biasanya 20 nm hingga 30

nm lebih panjang dari panjang gelombang radiasi eksitasi (gelombang pita

penyerapan sinar yang membangkitkannya).

Instrumentasi

Pengukuran intensitas fluoresensi dapat dilakukan dengan suatu

fluorometer filter sederhana. Instrument yang dipergunakan bermacam-macam

mulai dari yang paling sederhana (filter fluorometer) sampai ke yang sangat

kompleks yaitu spektrofotometer.

Komponen-komponen utama dari masing-masing instrument ini yaitu :

1. Sumber energi eksitasi

Banyak terdapat sumber radiasi. Lampu merkuri relatif stabil dan

memancarkan energi terutama pada panjang gelombang diskret. Lampu tungsten

3

memberikan energi kontinyu di daerah tampak. Lampu pancar xenon bertekanan

tinggi seringkali digunakan pada spektrofluorometer karena alat tersebut

merupakan sebuah sumber 20dengan intensitas tinggi yang menghasilkan energi

kontinyu dengan intensitas tinggi dari ultraviolet sampai inframerah. Pada filter

fluorometer ( fluorimeter ) digunakan lampu uap raksa sebagai sumber cahaya dan

energi eksitasi diseleksi dengan filter. Pada spektrofluorimeter biasanya

digunakan lampu Xenon ( 150 W ) yang memancarkan spectrum kontinu dengan

panjang gelombang 200-800nm. Energi eksitasi diseleksi dengan monokromator

eksitasi ( grating ).

2. Kuvet untuk sample

Sel spesimen yang digunakan dalam pengukuran fluoresensi dapat berupa

tabung bulat atau sel empat persegi panjang (kuvet), sama seperti yang digunakan

pada spektrofotometri resapan, terkecuali keempat sisi vertikalnya dipoles.

Ukuran spesimen uji yang sesuai adalah 2 ml sampai 3 ml, tetapi beberapa

instrumen dapat disesuaikan dengan sel-sel kecil yang memuat 100 μl hingga 300

μl atau dengan pipa kapiler yang hanya memerlukan jumlah spesimen yang kecil.

Spektrofotometer harus dioperasikan sesuai dengan petunjuk pabrik pembuat. Bila

panjang gelombang untuk eksitasi di atas 320nm dapat digunakan kuvet dari

gelas, akan tetapi untuk eksitasi pada panjang gelombang yang lebih pendek

digunakan kuvet dari silika. Kuvet tidak boleh berfluoresensi dan tidak boleh

tergores karena dapat menghamburkan.

3. Detektor

Pada umumnya fluorometer menggunakan tabung-tabung fotomultiplier

sebagai detektor, banyak tipe dari jenis tersebut yang tersedia dan masing-masing

mempunyai ciri khusus yang berkenaan dengan daerah spektral dengan kepekaan

maksimum, menguntungkan dan derau secara elektrik. Arus foto diperbesar dan

dibaca pada sebuah meter atau perekam. Seperti pada spektrofotometri, detektor

yang biasa digunakan adalah ‘fotomultiplier tube’ atau ‘thermocouple’. Pada

umumnya, detektor ditempatkan di atas sebuah poros yang membuat sudut 900

dengan berkas eksitasi. Geometri sudut siku ini memungkinkan radiasi eksitasi

4

menembus spesimen uji tanpa mengkontaminasi sinyal luaran yang diterima oleh

detektor fluoresensi. Akan tetapi tidak dapat dihindarkan detektor menerima

sejumlah radiasi eksitasi sebagai akibat sifat menghamburkan yang ada pada

larutan itu sendiri atau jika adanya debu atau padatan lainnya. Untuk menghindari

hamburan ini maka digunakan instrument yang bernama filter.

4. Sepasang filter atau monokromator untuk menyeleksi panjang gelombang

eksitasi dan emisi.

Fluorometer

Filter pertama hanya meneruskan cahaya ultraviolet dari sumber cahaya

yaitu radiasi dengan panjang gelombang yang cocok untuk eksitasi specimen

uji. Filter kedua meloloskan hanya panjang gelombang yang sesuai dengan

fluoresensi maksimum dari zat yang diperiksa dan menahan setiap cahaya

eksitasi yang terhambur. Jenis filter kedua ini biasanya yang menahan panjang

gelombang pendek. Persoalan yang dihadapi pada pemilihan filter yaitu

panjang gelombang yang lebih panjang yang diteruskan oleh filter pertama

juga lolos pada daerah panjang gelombang yang lebih pendek dari filter kedua,

sehingga menghasilkan blangko yang tinggi. Disamping itu sukar untuk

mendapatkan filter dengan panjang gelombang yang cocok dengan radiasi

eksitasi karakteristik untuk sample.

Spektrofluorimeter

Ini menggunakan sepasang monokromator (grating) untuk menyeleksi radiasi

eksitasi dan emisi yang lebih akurat (memberikan kepekaan yang tinggi)

sehingga kesulitan-kesulitan tersebut diatas dapat diatasi. Monokromator

pertama mendispersikan cahaya dari sumber cahaya sehingga menghasilkan

radiasi eksitasi yang monokromatis. Sample yang tereksitasi kemudian

5

berfluoresensi sehingga merupakan sumber cahaya bagi monokromator kedua.

Dengan alat ini dapat dibuat spekrum eksitasi maupun emisi.

2.3 Penetapan Kadar Ibuprofen Dalam Sediaan Farmasi Dengan

Spektrofluorometri

2.3.1. Apparatus

Semua pengukuran fluoresensi dilakukan pada Shimadzu RF-5301 PC spektrofluorometer dilengkapi dengan lampu 150 W Xenon, menggunakan 1.00 sel cm kuarsa. Parameter eksperimental celah lebar 3 nm, exc = 263 nm 2??; ? em = 288? 1 nm. Pengukuran absorbansi dilakukan pada Beckman DU 640 spektrofotometer menggunakan 1.00 cm sel kuarsa (Bagian 3). Prosedur HPLC dilakukan dengan menggunakan (a) kolom RP-18 LiChroCART 125-4, diameter partikel 5? M / Lichrosp, (b) fase gerak asetonitril (pompa A) asam -phosphoric (pompa B), pH 2,50 di tingkat (A: B) = (55:45), (c) aliran 2 ml / menit, (d) deteksi panjang gelombang: 230 nm, (e) suhu kamar, dan (f) retensi waktu yang terdaftar sekitar 2.73 min (Bagian 3).

2.3.2 Reagen

Ibuprofen: Marsing& Co Ltd A / S. Denmark Batch Lot No. 0840898, kemurniankadar99,9% (batas normal 98,5-101,8%).

Sebuah solusi stok ibuprofen 400 mg / l, dibuat dengan melarutkan ibuprofen (Marsing & Co) di NH3 Merck 0,2 M. Larutan standar disiapkan dari pengenceran larutan stok dengan NH3 Merck 0,2 M.

2.3.3. Sediaan farmasi

Tablet, krim dan sirup diperoleh dari laboratorium berikut: Searle, Sintyal, Monsanto Argentina SAIC (Ibupirac, Ibupiretas,Sirup Ibupirac, Ibupirac fem, Ibupirac flex,

Ibupirac migra, Ibupirac krim), Parke Davis(Ponstin sirup) dan diproses seperti yang dijelaskan di bawah ini.

2.3.4. Kalibrasi

Solusi untuk kurva kalibrasi disiapkan oleh pengenceran yang cocok dari larutan stok dengan NH3 0,2 M dalam labu ukur. Konsentrasi Kisaran adalah 2-73 mg / l. Fluoresensi intensitas diukur pada? em = 288 nm, penyinaran di exc = 263 nm. Persamaan untuk kalibrasi kurva adalah I = A + SM, di mana saya adalah

6

intensitas fluoresensi (dalam satuan yang sewenang-wenang), dan C adalah konsentrasi ibuprofen dalam mg / l. Setelah kuadrat-linear fit dari emisi fluoresensi data, kami memperoleh A = 7.9 (4); B = 5,97 (9); R2 = 0,999 dengan n = 33 (tiga ulangan dari 11 poin). Batas deteksi adalah 2 mg / l dihitung sebagai baik 3SblA / B atau sebagai {k [S2 bl + S2 A + S2 B (A / B)] 1/2} / B di mana k = 3 dan Sbl adalah standar deviasi dari set dari 10 ulangan sesuai dengan analisis sampel kosong [37].

2.3.5. Prosedur untuk sampel air yang tidakdiketahui dan sampel obat

Sampel air dibuatdengan mengencerkan larutan stokndengan NH3 0,2 M. tablet Komersial diproses sebagai berikut: jumlah tablet yang digerus mengandung 20 mg ibuprofen ditimbang, dilarutkan dengan NH3 0,2 M kedalam labu ukur 50 ml, disonikasi selama 20 menit dan disaring. Pengenceran terakhir dengan NH3 0,2 M dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi 20, 40 dan 60 mg / l dalam rentang kalibrasi linier. Pemilihannilaikonsentrasiinitidakberubah-ubah.Sebaliknya, itu didasarkan pada kenyataan bahwa bagian tengah dari kurva kalibrasi (50%, 100% dan 150% dari target pusat nilai 40 mg / l), terpilih.

Untuk krim atau sirup, jumlah yang cocok mengandung 20 mg ibuprofen ditempatkan ke dalam labu volume trik 50 ml dan diencerkan dengan NH3 0,2 M, untuk mendapatkan konsentrasi 20, 40 dan 60 mg / l dalam rentang kalibrasi linier. Namun, dengan mempertimbangkan berbagai kalibrasi linier seluas 2-73 mg / l dan dosis tinggi ibuprofen dalam formulasi (120-400 mg per tablet) pengenceran apapun dapat diperoleh dalam rentang kalibrasi linier.

Ibuprofen larut dalam air dan dalam larutan basa lemah (NH3 atau NaOH). Dalam larutan amonia ibu profen memancarkan cahaya froluresense pada 288+- 1nm, lebih terang pada 263 +- 2nm. Dari spektrum tersebut diharapkan informasi tentang konsentrasi maksimum dimana kesalahan flouresense diharapkan dapat diperoleh dari spektra serapan elektronik.

Batas ini diperkirakan naik sampai 70mg/L. Menurut data tersebut rentang linear dinamis adalah 2-72mg/L. Hasil yang diperoleh menerapkan uji linearitas test ada pada R2= 0,9999 F=14.542(derajat kebebasan dan P<0,01) dibandingkan dengan tabulasi. Selanjutnya dihitung untuk 31 derajat kebebasan adalah 5,14 tabulasi lain.

7

Seperti disebutkan diatas batas deteksi dihitung seperti apa yg disarankan oleh Winefordner dan Long dengan mempertimbangkan statistik yang terlibat dalam perbedaan antara respon yang diberikan dari sinyal kosong dan ketidakpastian ditunjukkan dengan adanya garis kalibrasi. Sampel air yang tidak diketahui dari ibu profen dipelajari dengan menerapkan prosedur deperti diatas

Tabel 1

Penentuan ibuprofen dalam sampel air

Diambil (mg/l) Ditemukana

(mg/l)Recovery (%) RSD (%)

11.65 11.20 96 1.219.80 20.33 102 0.327.72 27.72 100 0.635.64 34.98 98 1.243.56 44.10 101 0.551.48 50.16 97 0.259.40 57.60 97 1.067.32 63.90 95 1.7

a sebuah rata-rata dari tiga penentuan

Dan hasilnya ditunjukkan pada Tabel 1. Metode kemudian diterapkan untuk sediaan farmasi yang berbeda (tablet, sirup dan krim). Hasil diringkas dalam Tabel 2. Mereka sangat baik, meskipun fakta-fakta berikut:

a) Cincin aromatik terisolasi dari ibuprofen menunjukkan moderat fluoresensi asli, tapi itu sudah cukup untuk melayani sebagai dasar untuk penentuan obat ini dalam formula dengan dosis yang tinggi (120-400 mg per tablet).

b) Dalam beberapa kasus (Tabel 2), ibuprofen dikaitkan dengan obat lain dan eksipien yang berbeda. Campur tangan bahan aktif ini dipelajari secara khusus.

Homoatropine metil bromida standar dan Ergotamin disiapkan menurut tingkat per tablet dan pada 263 nm. Spektrum emisi dari mereka diperoleh dan tidak ada yang emisi fluoresensi signifikan yang terdaftar pada kisaran spektral terpilih. Kami berasumsi bahwa kurangnya gangguan dari homatropin dan Ergotamin adalah didasarkan pada kenyataan bahwa konsentrasinya dari dua lipat, lebih rendah dalam formulasi, dibandingkan dengan ibuprofen (Tabel 2). Dalam

8

kasus kafein, tidak ada gangguan ditemukan baik itu terlepas dari kenyataan bahwa itu muncul dalam satu formulasi pada tingkat tinggi dari 100 mg per tablet. Spektrum emisi standar kafein juga diperoleh dan tidak ada fluoresensi yang telah didaftarkan di panjang gelombang kerja.

Spektrum penyerapan juga diperoleh dan kami mendalilkan bahwa alasan sebenarnya dari kurangnya gangguan adalah bahwa pemotongan panjang gelombang kafein yaitu 300 nm dimana spektrum emisi ibuprofen maksimum.

Pengecualian dalam Tabel 2 tampaknya farmasi persiapan Ibuflex, yang berisi chlorzoxazone. Fluoresensi dipancarkan oleh ibuprofen dengan adanya chlorzoxazone adalah lebih rendah dari yang dipancarkan oleh ibuprofen murni dikonsentrasi yang sama. Emisi spektrum standar larutan chlorzoxazone, disiapkan sesuai ke level per tablet, diperoleh menarik di 263 nm dan tidak ada emisi fluoresensi terdaftar dalam kisaran spektral ini. Penyerapan spektrumchlorzoxazone juga diperoleh dan absorbansi yang kuat dalam kisaran spektral yang dipilih ditemukan.Oleh karena itu, kita menerima bahwa alasan dari gangguan adalah bahwa panjang gelombang serapan maksimum dari chlorzoxazone adalah 288 nm hanya mana spektrum emisi dari ibuprofen memiliki maksimum juga.

Tabel 2.

Penentuan ibuprofen dalam sediaan farmasi.

Persiapan Komposisi Ibuprofen menemukan ( Rec. % )

Ibupiretas ( tablet ) Ibuprofen 120 mg excipients

116 ± 1 mg ( 97 % )

9

Ibupirac (tablet ) Ibuprofen 400 mg excipients

396 ± 3 mg ( 99 % )

Ibumigra ( tablet ) Ibuprofen 400 mg caffein 100 mg ergotamine tartrate 4 mg excipients

390 ± 2 mg ( 98 % )

Ibufem ( tablet ) Ibuprofen 400 mg homoatropine methyl bromide 4 mg excipients

408 ± 1 mg ( 102 % )

Ibuflex ( tablet ) Ibuprofen 400 mg chlorzoxazone 250 mg excipients

344 ± 3 mg ( 86 % )

Ibupirac ( cream ) Ibuprofen lisinate 5% P/P excipients

4,98 % P/P ( 99 % )

ibupirac ( syrup ) Ibuprofen 2 g/100 ml excipients

1,99 ± 0,05 g/100 ml ( 99 % )

Ponstin ( syrup ) Ibuprofen 2 g/100 ml excipients

2,08 ± 0,05 g/100 ml ( 104 % )

sebuah rata-rata dari tiga penentuan _S.D. setiap pekerjaan konsentrasi dalam jangkauan linear. Penerimaan dihitung mengingat persiapan mengandung jumlah yang dilaporkan oleh laboratorium manufaktur. Semua nilai-nilai yang diberikan dalam mg per tablet, kecuali dalam kasus krim dan sirup.b abreviation P / P berarti g ibuprofen per 100 gcream.

Tabel:3Penentuan ibuprofen dalam formulasi farmasi oleh HPLC

10

Rata-rata tiga penentuan ± S.D. dari masing-masing pekerjaan konsentrasi dalam jangkauan linear. Recorveri disini dihitung berdasarkan persiapan yang terdiri dari sejumlah yang dilaporkan oleh laboratorium pabrik. Semua nilai diberikan dalam mg per tablet, kecuali dalam hal pemberian sirup dan krim. b Singkatan P / P berarti g ibuprofen per 100 g cream.

Untuk alasan ini, dalam kasus chlorzoxazone, seperti sebuah metode yang tidak dapat diterima.dalam memvalidasi desain metode ini dalam sebuah tulisan jurnal ini, ibuprofen diukur dalam semua formulasi farmasetical oleh HPLC (Bagian 2). Hasilnya akan ditunjukan pada Tabel 3. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara recoveri dari kedua metode ini, kecuali dalam hal Ibuflex, yang mengandung ibuprofen dan chlorzoxazone.

11

BAB IIIPENUTUP

3.1 Kesimpulan

Ibuprofen adalah sejenis obat yang tergolong dalam kelompok

antiperadangan non-steroid (nonsteroidal anti-inflammatory drug) dan digunakan

untuk mengurangi rasa sakit akibat artritis. Ibuprofen juga tergolong dalam

kelompok analgesik dan antipiretik. Obat ini dijual dengan merk

dagang] Advil, Motrin, Nuprin, dan Brufen.

Spektrofotometri fluoresensi merupakan suatu prosedur yang

menggunakan pengukuran intensitas cahaya fluoresensi yang dipancarkan oleh zat

uji dibandingkan dengan yang dipancarkan oleh suatu baku tertentu. Pada

umumnya cahaya yang diemisikan oleh larutan berfluoresensi mempunyai

intensitas maksimum pada panjang gelombang yang biasanya 20 nm hingga 30

nm lebih panjang dari panjang gelombang radiasi eksitasi (gelombang pita

penyerapan sinar yang membangkitkannya).

Komponen-komponen utama dari masing-masing instrument ini yaitu :

Dari percobaan diatas dapat disimpulkan bahwa dalam percobaan ini telah

menunjukkan bahwa ibuprofen dalam sediaan farmasi dapat ditentukan

menggunakan metode spektrofluorometri .

Dari percobaan ini rata-rata tiga penentuan ± S.D. dari masing-masing pekerjaan konsentrasi dalam jangkauan linear. Recorveri disini dihitung

12

berdasarkan persiapan yang terdiri dari sejumlah yang dilaporkan oleh laboratorium pabrik. Semua nilai diberikan dalam mg per tablet, kecuali dalam hal pemberian sirup dan krim. b Singkatan P / P berarti g ibuprofen per 100 g cream.

Untuk alasan ini, dalam kasus chlorzoxazone, seperti sebuah metode yang tidak

dapat diterima.dalam memvalidasi desain metode ini dalam sebuah tulisan jurnal

ini, ibuprofen diukur dalam semua formulasi farmasetical oleh HPLC (Bagian 2).

Hasilnya akan ditunjukan pada Tabel 3. Tidak ada perbedaan yang signifikan

antara recoveri dari kedua metode ini, kecuali dalam hal Ibuflex, yang

mengandung ibuprofen dan chlorzoxazone.

DAFTAR PUSTAKA

13

Anonim.1979.Farmakope Indonesia Edisi III.Jakarta:DepKes RI

Damiani,Patricia C,.2000. Spectrofluorometric determination of ibuprofen in pharmaceutical formulations. Facultad de Ciencias Bioquı´micas y Farmace´uticas, Uni_ersidad Nacional de Rosario.

Gandjar,Ibnu G,.2007.Kimia Farmasi Analisis.Yogyakarta:Pustaka Pelajar

14