5. pengujian aktivitas hormon

Percobaan Aktivitas Hormon dan Terapi Pengganti Hormon _________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________ Laboratorium Farmakologi

PERCOBAAN V

PENGUJIAN AKTIVITAS HORMON DAN TERAPI PENGGANTI HORMON

Tujuan Percobaan

Setelah menyelesaikan percobaan ini, mahasiswa diharapkan dapat:

1. Mengetahui secara lebih baik mengenai hormon dan terapi pengganti hormon

2. Mengenal secara lebih baik teknik untuk mengevaluasi aktivitas hormon dan terapi

pengganti hormon

Teori

Hormon merupakan zat atau senyawa yang dieksresikan ke dalam darah oleh

kelenjar khusus (kelenjar endokrin) dalam jumlah yang sangat kecil, yang kemudian

dibawa oleh aliran darah ke bagian tubuh lain untuk berinteraksi dengan reseptornya

pada sel target atau organ target dan menimbulkan respon biologi khusus.

Dalam sistem endokrin, sel menerima informasi pesan kimia (chemical

message) dari darah pada membawa hormon yang dikeluarkan oleh sel endokrin. Sel

endokrin dapat mendeteksi adanya perubahan konsentrasi hormon lain atau ion-ion (mis.

ion Na) atau nutrien (mis. glukosa) dalam darah. Bila terdeteksi adanya perubahan yang

berarti dari faktor-faktor tersebut, sel endokrin akan mengubah kecepatan pelepasan

hormonnya. Kecepatan sekresi hormon oleh sel endokrin diatur dengan mekanisme

pengaturan timbal balik (feedback regulation) untuk memelihara homeostasis.

Umumnya pengaturan timbal balik itu merupakan negative feedback.

Sel endokrin mensekresikan hormon yang memberikan efek pada sel target,

hormon menimbulkan respon biologik yang spesifik pada sel target, dan besarnya respon

akan terdeteksi oleh sel endokrin yang mengeluarkan hormon tersebut. Bila responnya

sangat kecil, sel endokrin akan menghasilkan dan mensekresikan hormon lebih banyak

sehingga responnya menjadi normal. Sebaliknya, bila responnya sangat besar, sel

endokrin akan mengurangi pengeluaran hormon sampai responnya mencapai normal.

Pada percobaan ini akan dilihat pengaruh tiroksin dan TSH (Thyroid Stimulating

Hormone) pada laju metabolik, juga obat propiltiourasil yang menghambat produksi

tiroksin. Akan digunakan tikus normal, tikus tiroidektomi (dihilangkan kelenjar

tiroidnya), dan tikus hipofisektomi (dihilangkan kelenjar pituitarinya).



Dari percobaan ini akan diperoleh penentuan laju metabolik standar, laju

metabolik setelah diinjeksi dengan tiroksin, laju metabolik setelah diinjeksi dengan TSH,

dan laju metabolik setelah diinjeksi dengan propiltiourasil.

Selanjutnya akan dipelajari percobaan terapi pengganti hormon, yaitu hormon

estrogen yang berhubungan dengan uterus. Ovariektomi, yaitu ovari yang dihilangkan

akan menghilangkan pula sumber estrogen dan dapat menyebabkan atropi uterus. Pada

percobaan ini akan dilihat pengaruh hormon pengganti estrogen pada pertumbuhan

uterus. Akan digunakan dua tikus betina yang dilakukan ovariektomi sehingga tidak

dapat memproduksi estrogen, kemudian akan diberikan terapi pengganti hormon

estrogen pada salah satu tikus dan tikus lainnya mendapat salin, kemudian uterus kedua

tikus tersebut akan dibandingkan.

Gambar 5.1 Layar eksperimen laju metabolisme



Percobaan I: Pengukuran Standar Laju Metabolisme

1. Klik dan drag tikus normal ke dalam chamber dan lepaskan tombol mouse

2. Pastikan katup pada sisi kiri tabung terbuka agar udara dapat masuk, bila

tertutup klik katup untuk membukanya

3. Pastikan indikator pada T-connector terbaca chamber and manometer

connected, bila tidak, klik untuk membukanya

4. Klik pada tombol weigh, catat pada Baseline di chart 1 untuk berat

5. Klik tombol (+) pada timer sehingga terbaca 1.00

6. Klik pada katup untuk menutupnya, sehingga udara dari luar tidak masuk,

pastikan hanya oksigen dari sistem tertutup ini yang dihirup oleh tikus

7. Klik tombol start pada layer timer, perhatikan ketinggian air pada tabung U-

shaped

8. Timer akan berhenti otomatis setelah satu menit, kemudian klik pada tombol T-

connector maka akan terbaca manometer and syringe connected

9. Klik katup untuk membuka sehingga tikus dapat menghirup udara luar

10. Lihat perbedaan antara tinggi kiri dan kanan tabung U dan perkiraan volume O2

yang perlu disuntikkan. Klik tombol (+) dibawah O2 sampai layar memberikan

nilai, kemudian klik tombol inject sampai volume pada kedua sisi sama (akan ada

kata level berkedip dan menghilang). Bila terlalu tinggi, dapat diulangi dengan

menekan tombol reset. Catat pengukuran ini pada bagian baseline di grafik 1,

untuk pemakaian O2 selama 1 menit

11. Hitung pemakaian oksigen tiap jam pada tikus dengan rumus

mL pemakaian O2 x 60 menit

12. Hitung laju metabolik perkilogram bobot badan dengan rumus:

= mL O2/jam 1 menit jam

Laju metabolisme = mL O2/jam

13. Klik record data

= ___________ mL O2/kg/jam

Kg bb

14. Klik dan drag tikus dari chamber kembali ke kandangnya

15. Klik tombol reset pada kotak apparatus

16. Ulangi langkah 1-15 untuk tikus tiroidektomi (Tx) dan hipofisektomi (Hypox).

Rekamlah data pada bagian baseline grafik 1.



Pertanyaan

1. Tikus yang manakah yang paling cepat laju metaboliknya?

2. Mengapa laju metabolik tersebut berbeda?

3. Bila hewan dilakukan tiroidektomi, hormon apa yang akan hilang dari darah? Dan

apa yang dapat terjadi pada tubuh?

4. Apa yang dapat dilakukan pada hewan tiroidektomi sehingga tubuhnya dapat

berfungsi seperti hewan normal?

5. Bila hewan dilakukan hipofisektomi, bagaimana kadar hormon dalam tubuh?



Percobaan II: Pengukuran Pengaruh Tiroksin pada Laju Metabolik

1. Pada data set, pilihlah tikus yang akan diuji (normal, Tx, atau Hypox)


3. Klik dan drag alat suntik thyroxine pada tikus dan lepaskan tombol mouse untuk

menginjeksi hewan tersebut

4. Klik dan drag tikus kembali ke dalam chamber. Ulangi langkah 1-12 percobaan I,

tetapi rekamlah data pada bagian with thyroxine grafik 1

5. Klik record data

6. Klik dan drag tikus kembali ke dalam kandangnya, dan klik clean untuk

menghilangkan semua efek dari tiroksin

7. Ulangi langkah 1-6 pada tikus berikutnya. Rekamlah data pada bagian with

thyroxine grafik 1 pada kolom sesuai tikus yang di uji

Pertanyaan

1. Apakah efek tiroksin pada laju metabolik tikus normal? Bagaimana bila

dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus normal?

2. Apakah efek tiroksin pada laju metabolik untuk tikus tiroidektomi? Bagaimana

bila dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus tiroidektomi?

3. Apa pengaruh tiroksin pada laju metabolik tikus hipofisektomi? Bagaimana bila

dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus hipofisektomi?



Percobaan III: Pengukuran Pengaruh TSH pada laju metabolik



3. Klik dan drag alat suntik TSH pada tikus dan lepaskan tombol mouse untuk

menginjeksi hewan tersebut


tetapi rekamlah data pada bagian with TSH grafik 1

5. Klik record data


menghilangkan semua efek dari TSH

7. Ulangi langkah 1-6 pada tikus berikutnya. Rekamlah data pada bagian with TSH

grafik 1 pada kolom sesuai tikus yang di uji

Pertanyaan

1. Apakah efek TSH pada laju metabolik tikus normal? Bagaimana bila


2. Apakah efek TSH pada laju metabolic untuk tikus tiroidektomi? Bagaimana

bila dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus tiroidektomi?

3. Apa pengaruh TSH pada laju metabolik tikus hipofisektomi? Bagaimana bila

dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus hipofisektomi?



Percobaan IV: Pengukuran Pengaruh TSH pada laju metabolik



8. Klik dan drag alat suntik Propylthiouracil pada tikus dan lepaskan tombol mouse

untuk menginjeksi hewan tersebut


tetapi rekamlah data pada bagian with propylthiouracil grafik 1



menghilangkan semua efek dari propilurasil

12. Ulangi langkah 1-6 pada tikus berikutnya. Rekamlah data pada bagian with

propylthiouracil grafik 1 pada kolom sesuai tikus yang di uji

Pertanyaan

1. Apakah efek propiltiourasil pada laju metabolik tikus normal? Bagaimana bila


2. Apakah efek propiltiourasil pada laju metabolik untuk tikus tiroidektomi?

Bagaimana bila dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus

tiroidektomi?

3. Apa pengaruh propiltiourasil pada laju metabolik tikus hipofisektomi?

Bagaimana bila dibandingkan dengan standar laju metabolik tikus

hipofisektomi?



Gambar 5.2 Layar eksperimen terapi pengganti hormon

Percobaan VI: Terapi Pengganti Hormon

1. Klik pada alat suntik, drag pada botol saline dan lepaskan tombol mouse alat

suntik akan terisi secara otomatis 1 mL salin

2. Drag alat suntik pada tikus kontrol, letakan ujung jarum pada daerah bagian

bawah abdominal (intraperitonial) dan lepaskan tombol mouse untuk menginjeksi

hewan tersebut dan alat suntik otomatis kembali pada tempatnya. Klik Clean

untuk membersihkan alat suntik dari residu obat

3. Klik lagi alat suntik, drag ke botol estrogen dan lepaskan tombol mouse, alat

suntik otomatis terisi 1 mL estrogen

4. Drag alat suntik pada tikus eksperimen, letakan ujung jarum pada daerah bagian

bawah abdominal (intraperitonial) dan lepaskan tombol mouse untuk menginjeksi



hewan tersebut dan alat suntik otomatis kembali pada tempatnya. Klik Clean

untuk membersihkan alat suntik dari residu obat

5. Klik clock diatas layar elapsed days, akan terlihat jam berputar 24 jam

6. Ulangi langkah 1-5 sampai semua tikus mendapat 7 kali suntikan selama 7 hari (1

suntikkan/hari). Tikus kontrol mendapat 7 kali suntikan saline dan tikus

eksperimen mendapat 7 kali suntikkan estrogen

7. Kemudian klik kotak kertas timbang, klik dan drag kertas timbang yang muncul

ke atas timbangan, kemudian lepaskan tombol mouse

8. Skala timbangan akan memberikan nilai berat kertas timbang, klik tombol tare

untuk menara timbangan (0,00 g)

9. Sekarang uterus siap dihilangkan. Pada percobaan biasa perlu dilakukan

pembedahan, tetapi disini dilakukan dengan klik tombol remove uterus pada

kandang, tikus akan hilang dan uterus akan tampak di setiap kandang

10. Klik dan drag uterus dari tikus kontrol ke atas timbangan dan lepaskan tombol

mouse. Klik tombol weigh untuk menimbangnya. Catat beratnya.

Berat uterus (kontrol): ___________ gram


12. Klik clean pada timbangan untuk membuang kertas timbang dan uterus

13. Ulangi langkah 7 dan 8. Kemudian klik dan drag uterus dari tikus eksperimen ke

atas timbangan dan lepaskan tombol mouse. Klik tombol weigh untuk

menimbangnya. Catat beratnya.

Berat uterus (eksperimen): ___________ gram


15. Klik clean pada timbangan untuk membuang kertas timbang dan uterus



Pertanyaan

1. Bandingkanlah berat uterus control dengan berat uterus eksperimen!

2. Apakah pengaruh pemberian suntikan estrogen pada tikus eksperimen?

3. Bagaimanakah kemungkinan yang terjadi bila testosteron diberikan

menggantikan estrogen? Jelaskanlah!

Telah diperiksa Asisten

Tanggal :

Nilai :

Paraf Asisten :

5. pengujian aktivitas hormon

Documents