1. Uji benedict (semikuantitatif)

Tujuan : menghitung secara kasar kadar glukosa dalam urin

Teori singkat:

a) Glukosa

Glukosa (C6H12O6, berat molekul 180.18) adalah heksosa—monosakarida yang mengandung

enam atom karbon. Glukosa merupakan aldehida (mengandung gugus -CHO). Lima karbon dan satu

oksigennya membentuk cincin yang disebut "cincin piranosa", bentuk paling stabil untuk aldosa berkabon

enam. Dalam cincin ini, tiap karbon terikat pada gugus samping hidroksil dan hidrogen kecuali atom

kelimanya, yang terikat pada atom karbon keenam di luar cincin, membentuk suatu gugus CH2OH.

Struktur cincin ini berada dalam kesetimbangan dengan bentuk yang lebih reaktif, yang proporsinya

0.0026% pada pH 7.

b) Glukosa Urin

Darah disaring oleh jutaan nefron, sebuah unit fungsional dalam ginjal. Hasil penyaringan (filtrat)

berisi produk-produk limbah (mis. urea), elektrolit (mis. natrium, kalium, klorida), asam amino, dan

glukosa. Filtrat kemudian dialirkan ke tubulus ginjal untuk direabsorbsi dan diekskresikan; zat-zat yang

diperlukan (termasuk glukosa) diserap kembali dan zat-zat yang tidak diperlukan kembali diekskresikan

ke dalam urin.

Kurang dari 0,1% glukosa yang disaring oleh glomerulus terdapat dalam urin (kurang dari 130

mg/24 jam). Glukosuria (kelebihan gula dalam urin) terjadi karena nilai ambang ginjal terlampaui (kadar

glukosa darah melebihi 160-180 mg/dl atau 8,9-10 mmol/l), atau daya reabsorbsi tubulus yang menurun.

Untuk Mengetahui kadar glukosa dalam urin dapat dilakukan uji benedict.

c) Uji Benedict

Pemeriksaan glukosa urine dengan tes reduksi atau menggunakan benedict ini memanfaatkan sifat

glukosa sebagai pereduksi. Zat yang paling sering digunakan untuk menyatakan adanya reduksi adalah

yang mengandung garam cupri. Reagen terbaik yang mengandung garam cupri adalah larutan Benedict.

Prinsip dari tes Benedict = glukosa dalam urine akan mereduksi kuprisulfat (dalam benedict) menjadi

kuprosulfat yang terlihat dengan perubahan warna dari larutan Benedict tersebut. Jadi, bila urine

mengandung glukosa, maka akan terjadi reaksi perubahan warna seperti yang dijelaskan di atas. Namun,

bila tidak terdapat glukosa, maka reaksi tersebut tidak akan terjadi dan warna dari benedict tidak akan

berubah.

Tes reduksi ini tidak spesifik karena ada zat lain yang juga mempunyai sifat pereduksi seperti

monosakarida (galaktosa, fruktosa, pentosa), disakarida (laktosa), dan beberapa zat bukan gula (asam

homogentisat, formalin, salisilat kadar tinggi, vitamin C).

Bahan:

1. Larutan benedict

2. Urin sendiri

Cara kerja:

o Siapkan alat dan bahan (tabung reaksi, pipet, waterbath, larutan benedict dan urin normal

serta patologis)

o Masukkan 5 ml reagen Benedict ke dalam tabung reaksi A (untuk urin sendiri) dan tabung

reaksi B (untuk urin patologis)

o Teteskan sebanyak 5-8 tetes urin sendiri ke tabung reaksi A dan urin patologis ke tabung

reaksi B

o Masukkan tabung A dan B tadi ke dalam air mendidi (water bath) selama 5 menit atau

langsung dipanaskan di atas lampu spiritus selama 3 menit mendidih.

o Angkat tabung, kocok isinya dan bacalah hasil reduksi dari kedua jenis urin.

BAHAN Tabung

1

Larutan benedict 2 mL

Urin sendiri dan urin patologis 4 tetes

Panaskan selama 3 menit dalam air mendidih (100oC), lalu biarkan dingin perlahan

HASIL:

Bandingkan dengan seri pemeriksaan yang

sudah disiapkan

-Tidak ada perubahan warna pada urin sendiri

-Terdapat perubahan warna menjadi merah bata

pada urin yg patologis

Acuan kadar gula (disiakan petugas)

Warna Penilaian Kadar

Biru jernih - 0

Hijau + < 0,5 %

Kuning kehijauan ++ (0,5-1) %

Jingga +++ (1,0-2,0) %

Merah bata ++++ >2%

Keterangan: % = gram glukosa/dL

KESIMPULAN :

Pada urin yang normal atau yang tidak mengandung glukosa jika diteteskan larutan benedict tidak terjadi

perubahan warna (merah bata) sedangkan pada urin yang mengandung glukosa ditemukan adanya

perubahan warna menjadi merah bata. Hal ini disebabkan karena glukosa yang ada pada urin mereduksi

larutan benedict yang mengandung kupri sulfat sehingga membentuk kuprosulfat yang terlihat dengan

adanya perubahan warna menjadi merah bata.

2. Uji Rothera (Zat Keton)

Tujuan : memeriksa adanya zat keton dalam urin

Teori singkat:

a. Gambaran Umum

Keton bisa berarti gugus fungsi yang dikarakterisasikan oleh sebuah gugus karbonil (O=C) yang

terhubung dengan dua atom karbon ataupun senyawa kimia yang mengandung gugus karbonil.

Senyawa karbonil yang berikatan dengan dua karbon membedakan keton dari asam

karboksilat, aldehid, ester, amida dan senyawa-senyawa beroksigen lainnya. Ikatan ganda gugus karbonil

membedakan keton dari alkohol dan eter. Keton yang paling sederhana adalah aseton (secara sistematis

dinamakan 2-propanon).

Atom karbon yang berada di samping gugus karbonil dinamakan karbon-α. Hidrogen yang

melekat pada karbon ini dinamakan hidrogen-α. Dengan keberadaan asam katalis, keton mengalami

tautorisme keto enol. Reaksi dengan basa kuat menghasilkanenolat.

b. Zat Keton

Zat-zat keton atau benda-benda keton dalam urin ialah aceton, asam aceto-acetat dan asam beta-

hidroxibutirat. Karena aceton, yaitu zat yang terpenting diantara benda-benda keton bersifat mudah

menguap, maka urin yang diperiksa harus segar; kalau urin dibiarkan asam aceto-acetat berubah menjadi

aceton, begitu pula asam beta-hidroxibutirat yang lebih dulu menjadi asam aceto-acetat, sehingga zat-zat

itu juga menghilang dari urin.

Keton itu sebenarnya adalah hasil pemecahan protein, disaat tubuh sudah kehilangan glukosa,

disaat lemak sudah tidak ada maka protein akan di bongkar tubuh menjadi asam amino dan benda-benda

keton, keton tinggi biasanya kita temukan pada pasien Diabetes melitus, karena pada DM (diabetes

melitus) itu gula/glukosa tidak dapat masuk sel, sehingga sel akan kelaparan(tidak dapat menghasilkan

energi), sehingga yang jadi korban adalah protein yang dibongkar (untuk menghasilkan energi) jadilah

keton, bahaya keton tinggi adalah dapat menyebabkan ketoasidosis metabolik (salah satu komplikasi DM

yang berbahaya) yaitu pembongkaran protein besar-besaran yang menyebabkan kadar keton sangat tinggi.

Pasien akan shock berat, PH darah akan menjadi sangat asam (asidosis).

Gejala-gejala adanya senyawa keton dengan pemeriksaan urin:

Ketika pengujian gula darah lebih tinggi dari 250 mg / dL (ketika tes lebih dari sekali).

Bila Anda merasakan penyakit atau tekanan.

Ketika rasa gangguan di perut Anda.

Jika Anda menderita infeksi.

Jika seorang wanita sedang hamil dan tanya dokter itu.

Jika seseorang menderita diabetes (tipe I).

Jika seseorang menderita diabetes (Type II) dan dokter memintanya untuk bekerja Keton tes.

c. Prosedur Pengujian

a) Prinsip Pengujian :

Percobaan ini berdasar kepada reaksi antara nitroprussida dan asam aceto-acetat atau aceton yang

menyusun suatu zat berwarna ungu. Teristimewa terhadap asam aceto-acetatlah reaksi ini peka

seakali(positif sampai 1 : 400.000); terhadap aceton kepekaan 1 : 20.000, sedangkan asam beta-

hidroxibutirat tidak dapat dinyatakan dengan reaksi ini.

Disini dilakukan 2 kali pengujian, yang pertama yaitu pada urin normal yang tidak mengandung

zat keton. Sedangkan yang kedua dilakukan pada urin patologis yang mengandung zat keton.

b) Bahan-Bahan :

Urin sendiri

Urin patologis

Kristal amonium sulfat

Natrium nitroprusida 5% (segar)

Amonium hidroksida pekat

c) Alat-Alat :

Tabung reaksi

Sendok untuk mengambil zat bubuk

Pipet

Buret

Penjepit tabung reaksi

d) Cara Kerja :

1) Siapkan urin normal dan urin patologis.

2) Masukan urin normal dan urin patologis masing-masing ke dalam tabung reaksi yang

berbeda, kira-kira sekitar 3 ml. Gunakan pipet yang berbeda untuk mengambil masing-

masing urin tersebut.

3) Beri tanda pada masing-masing tabung agar tabung tidak tertukar.

4) Ambil kristal amonium sulfat dengan menggunakan sendok, kemudian masukan kedalam

masing-masing tabung reaksi yang berisi urin-urin tadi.

5) Kemudian kocok dengan kuat kedua tabung reaksi yang berisi campuran urin tadi.

6) Tambahkan kembali kristal amonium sulfat, lalu kocok kembali dengan kuat sampai

larutan urin di kedua tabung tersebut jenuh.

7) Setelah larutan dikedua tabung dirasa cukup jenuh, tambahkan larutan natrium nitroprusida

sekitar 2-3 tetes dengan menggunakan pipet kedalam masing-masing tabung.

8) Kemudian kocok kembali kedua tabung tersebut agar natrium nitroprusida tercampur

dengan urin.

9) Setelah tercampur, tambahkan amonium hidroksida pekat ke dalam masing-masing tabung

tadi dengan menggunakan buret.

10) Kemudian kocok kedua tabung tersebut hingga kedua larutan tercampu, dan diamkan

selama 30 menit.

11) Setelah 30 menit lihat hasilnya, ada atau tidak cincin ungu pada kedua tabung.

e) Hasil Pengujian :

URIN NORMAL

Pada urin normal dari hasil pemeriksaan tidak ditemukan cincin ungu. Ini dapat disimpulkan

bahwa pada urin orang tersebut tidak terdapat badan keton yang mengindikasi bahwa orang

tersebut tidak mengalami diabetes melitus.

Gambar urin normal:

URIN PATOLOGIS

Dari hasil pemeriksaan di urin patologis, ternyata ditemukan cincin ungu. Ini menandakan bahwa

pada urin orang tersebut mengandung badan keton yang mengindikasikan adanya diabetes

melitus.

Gambar urin patologis: