teknik khusus untuk tulang

3
Teknik khusus untuk tulang Bahan –bahan yang mengandung tulang, atau tulang itu sendiri atau bahan carceous basanya di fiksasi dan keusian di identifikasindengan cara merendamnya dalam alkohol 70 yang di asamkan. ( dibuat dengan memncampurkan 99 bagian alkohol 70% +1 bagian nitrat pekat). Jika perlu larutan dapat di ganti sesering mungkin sampai jaringan tulang mengalami dekalsifikasi secara sempurna. Setelah di kalsifikasi jaringan kemudian di mordant dengan cara merendamnya selama 2 jam dalam larutan kalium alum 2% (aquoeus) selanjutnya di cuci dengan air mengalir beberapa jam kemusian mendehidrasinya. Penanaman dan penyayatan denga cara celloisin akan memberi ahsil yan lebih baik di bandng dengan parafin. Untuk jaringan bunga karang carcereous, bahan ini di fiksasi dangen larutan bouin kemusian didekalsifikasi dengan larutan berikut ini 1 ml HNO+1 g phloroglucin +100 ml alkohol 70 % setelah di dekalsifikasi jaringan ini tidak boleh di peroses secara langsung seperti di jelakan di atas untuk jaringan tulang harus di pndahkan kedalam berbagai jenislarutan. Untuk penanaman dan peyayatan lebih baik menggunakan metode parafin Teknik khusus untuk jaringan ikat Dalam rangka mendeferensiasi jaringan ikat atau bahan serabut kolagen otot atau serabut sraf, seringkli di butuhkan metde khusus yangtepat di mana metode tersebut adalah sebagai berikut: 1. Triple satain dari mallory Fiksasi jaringan dengan larutan zengker, tanam dan dayat dengan metode parafin dan celloidin. Hidrasi sayatan dengan metode umum, warnai dengan larutan asam fuchsin 0.2 % (aqueus) selama 5-15 menit. Pindahkan sayatan secara langsung kedalam larutan berikut ini selama 20 menit (0,5 g anilin biri yang larut dalam air + 2 g orange G + 100 ml asam fosfotungstat aquaeous) Dari larutan pewarna tersebut pindahkan sayatan ke dalam alkohol 95 % (2 kali ganti, masing masing 30 detik) dehidrasi sayatan parafin dalam alkohol absolut, jernihkan dengan xilol dan tutup. Dengan sayatan di buat dengan metode celloidin, dari 95 % sayatan di jernihkan dengan minyak organum (oil of organum ) dan kemusian di tutup.

Upload: fatimah-dian

Post on 28-Sep-2015

235 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

Mikroteknik pembuatan Sayatan Tulang

TRANSCRIPT

Teknik khusus untuk tulangBahan bahan yang mengandung tulang, atau tulang itu sendiri atau bahan carceous basanya di fiksasi dan keusian di identifikasindengan cara merendamnya dalam alkohol 70 yang di asamkan. ( dibuat dengan memncampurkan 99 bagian alkohol 70% +1 bagian nitrat pekat). Jika perlu larutan dapat di ganti sesering mungkin sampai jaringan tulang mengalami dekalsifikasi secara sempurna. Setelah di kalsifikasi jaringan kemudian di mordant dengan cara merendamnya selama 2 jam dalam larutan kalium alum 2% (aquoeus) selanjutnya di cuci dengan air mengalir beberapa jam kemusian mendehidrasinya. Penanaman dan penyayatan denga cara celloisin akan memberi ahsil yan lebih baik di bandng dengan parafin. Untuk jaringan bunga karang carcereous, bahan ini di fiksasi dangen larutan bouin kemusian didekalsifikasi dengan larutan berikut ini 1 ml HNO+1 g phloroglucin +100 ml alkohol 70 % setelah di dekalsifikasi jaringan ini tidak boleh di peroses secara langsung seperti di jelakan di atas untuk jaringan tulang harus di pndahkan kedalam berbagai jenislarutan. Untuk penanaman dan peyayatan lebih baik menggunakan metode parafin Teknik khusus untuk jaringan ikatDalam rangka mendeferensiasi jaringan ikat atau bahan serabut kolagen otot atau serabut sraf, seringkli di butuhkan metde khusus yangtepat di mana metode tersebut adalah sebagai berikut:1. Triple satain dari malloryFiksasi jaringan dengan larutan zengker, tanam dan dayat dengan metode parafin dan celloidin. Hidrasi sayatan dengan metode umum, warnai dengan larutan asam fuchsin 0.2 % (aqueus) selama 5-15 menit. Pindahkan sayatan secara langsung kedalam larutan berikut ini selama 20 menit (0,5 g anilin biri yang larut dalam air + 2 g orange G + 100 ml asam fosfotungstat aquaeous)Dari larutan pewarna tersebut pindahkan sayatan ke dalam alkohol 95 % (2 kali ganti, masing masing 30 detik) dehidrasi sayatan parafin dalam alkohol absolut, jernihkan dengan xilol dan tutup. Dengan sayatan di buat dengan metode celloidin, dari 95 % sayatan di jernihkan dengan minyak organum (oil of organum ) dan kemusian di tutup.Dengan tehnik pewarnaan ini, kolagen, serabut retikuler, mukus dan amoloid akan berwarna biru, inti dan sitoplasma sel otot akson dan neuroglia akan berwarna merah sementara eritrosit seludang meilin serabut elastin akan berwarna kuning.2. Pewarnaan jaringan ikat dengan malloryLarutan pewarna yang dibutuhkan sendiri dari 2 macam yaitu larutan azokarmin dan larutan anilin biru Orange GLarutan azokarminAzokarmin B 0,1 gAsam asetat glasial 5,0 mlAquades 100 mlLarutan ini dibuat dengan cara melarutka azokarmin terlebih dahulu dalam aquades, sudah laru kemusian asam asetat glasial di tambahkan dengan hati-hatiLarutan anilin biru orange G (larutan stok)Anilin biru (larutan air) 0,2 grOrange G (kristal) 0,4 grAsam asetat glasial 1,0 mlAquades 100 mlLarutan orange G dengan air( temperatur kamar ) tambahkan 0,5 ml asam asetat galsial dan aduk dengan baik.Setelah beberapa menit tambahkan lagi asam asetat glasial yang masih tersisa. Larutan tidak boleh kelihatan keruh setelah enambahan asam asetat yang kedua, jika kelihatan keruh maka pewarna tidak akan memberi hasil yang baik san sebaiknya jagan di gunakan. Tambahkan anilin biru dan aduk dengan baik lalu saring dan simpan. Jangan lupa menuliska larutan stok pada labelnya.

Teknik khusus untuk mengamati glikogen hatiGlikogen hati akan larut dalam larutan yang digunakan selama prosesing dengan teknik biasa. Jika glikogen ini ingin diamati maka metode yang paling tepat digunakan adalah metode carnoy-celloidin-carmine, dengan tahap tahap prosesing sebagai berikut :1. Fiksasi secara simultan dalam larutan carnoy satu potong jaringan hati normal, dan satu potong lagi jaringan hati yang akan diuji.2. Pindahkan kedalam campuran alkohol absolut eter ahnydrous (1 : 1), biarkan didalam larutan tersebut selama 24 jam.3. Infiltrasi dan tanam dengan celloidin dengan prosedur reuler.4. Sayat.5. Hidrasi sayatan dan warnai dengan pewarna asam hematoxilin ehrlich.6. Cuci dengan air seperti biasa tetapi diferensiasi dengan alkohol asam.7. Warnai dengan pewarna carmine best selama 5 menit. Carmine best dibut dengan cara :Bests carmine (larutan stok) 2 bagianAir amonia (concentrated)3 bagianMetil alkohol (c.p)3 bagian8. Diferensiasi dalam : Alkohol absolut 80 bagianMetil alkohol 40 bagianAquades 100 bagian9. Dehidrasi dalam alkohol 80 dan 90 %10. Jernihkan dengan minyak organium.11. Tutup dengan teknik umum.Larutan stok carmine best dibuat dengan cara sebagai berikut :Carmine (certified)2gKalium karnonat 1gKalium klorida 5gAkuades 60mlDidihkan secara perlahan dalam penangas air selama beberapa menit, kemudian dinginkan dan saring. Tambahkan 20 ml air amonia kuat, dan kemudian simpan dalam botol berwarna coklat bertutup ditempat yang dingin.