reaksiantigen antibodi

8/10/2019 ReaksiAntigen Antibodi

1/46

Dwi Winarni

Departemen Biologi

Fakultas Sains dan Teknologi

Universitas Airlangga


2/46

Antigen adalah bahan yang dapat bereaksi dengan

komponen sistem imun

ditimbulkan oleh bahan yang disebut

imunogen

Semua imunogen adalah antigen tetapi

tidak semua antigen imunogenik


3/46

adalah bagian antigen yang

dapat dikenal dan diikat secara

spesifik oleh imunoglobulin ataureseptor pada limfosit


4/46

Sifat antigenik antigenesitas

ditentukan terutama oleh struktur molekul

Perubahan konformasi mengubahantigenesitas

Interaksi antar molekul membentuk

molekul lebih kompleks mengubahantigenesitas


5/46

SIFAT DETERMINAN ANTIGEN


6/46

imunogen

Imunogenesitas tergantung pada

1. Keasingan (foreigness)

2. Sifat kimia kompleksitas dan ukuran

3. Kondisi sistem imun host4. Banyaknya antigen yang terekspose

5. Rute pemberian/kontak

6. Sensitivitas metode yang digunakan untuk

mengukur respons imun

Adalah bahan yang dapat menginduksi respons imun


7/46

1. Keasingan :

Sistem imun dapat membedakan antara molekulselfdan non self yang biasanya bersifat

imunogenik

albumin murni dari serum kelinci disuntikkanpada binatang lain atau manusia akan

menimbulkan respons imun yang nyata.

Faktor-faktor yang

mempengaruhi imunogenisitas


8/46

2. Sifat kimia

2.1. Ukuran molekulZat dengan molekul kecil seperti asam amino

dan monosakharida tidak bersifat imunogenik.

Umumnya zat mempunyai BM lebih kecil

10.000 bersifat imunogenik lemah atau

tidak imunogenik, namun zat protein

dengan BM lebih besar dari 100.000

kebanyakan merupakan imunogen yang

sangat poten.

Faktor-faktor yang mempengaruhi imunogenisitas


9/46

2.2. Kerumitan struktur kimiawi

Molekul harus memiliki derajat kerumitan tertentu dari

strukturnya agar bersifat imunogenik. Makin rumit atau

kompleks semakin imunogenik.

molekul homopolimer yang terdiri atas unit-unit yang

tersusun oleh satu jenis asam amino walaupun merupakan

molekul berukuran besar bersifat sebagai imunogen lemah

polialanin, polilisin, dan sebagainya ).

Sedangkan molekul kopolimer yang tersusun atas 2 jenis

asam amino, atau lebih, mungkin sangat aktif.

Adanya gugus asam amino aromatik tirosin) akan lebih

imunogenik daripada gugus non-aromatik.

Faktor-faktor yang mempengaruhi imunogenisitas


10/46

Unideterminan

univalenhapten

Unideterminan

multivalen

Poli

sakarida

multideterminan

Univalenprotein

Multideterminan

multivalen

Kimiawi

kompleks


11/46

Kemampuan untuk mengadakan respons imun terhadapantigen tergantung pada konstitusi genetik

polisakharida murni akan bersifat imunogenik bila

disuntikkan ke mencit atau manusia, namun tidakpada marmut.

marmut dg galur berbeda memberikan responsberbeda

injeksi poly-L lisin marmut galur 2 akan

membangkitkan respons imun, sedangkan galur13 tidak.

kemampuan untuk mengadakan respons imunpada marmut galur 2 diatur oleh gen autosomdan diwariskan secara dominan (Biozzi et al,

1972).

3. Kondisi sistem imun host

Konstitusi Genetik


12/46

4. Dosis

Setelah dosis minimal dilampaui, makin

tinggi dosis akan meningkatkan responsimun secara sebanding, tetapi pada dosis

tertentu akan terjadi sebaliknya yaitu

menurunnya respons imun atau bahkan

dapat menghilangkan sama sekali yaitu

suatu keadaan yang disebut toleransi

imunologik.


13/46


14/46

Rute pemberian antigen mempengaruhi baik kekuatan

maupun jenis respons

subkutan (s.c)

intradermal (i.d.) (antara subkutan dengan dermis

intramuscular (i.m.)

intravena(i.v.)

Transfusi langsung ke sirkulasi

per oral administrationke GI tract Intranasal (i.n) atau inhalasi ke saluran napas

intraperitoneal

5. Rute pemberian


15/46

Antigen yang diberikan subkutan umumnya

menghasilkan respons terkuat

kemungkinan karena antigen segera

diproses oleh sel-sel Langerhans di kulit

dan segera dipresentasikan di nodus

limfatikus lokal

sering digunakan untuk tujuan memperoleh

antibodi terhadap antigen tertentu


16/46

Determinan

antigenik

dengan BMrendah dan

baru menjadi

imunogen jika

diikat olehmolekul besar

(carrier)

apten


17/46

AJUVAN (Adjuvants)

adalah bahan yang dapat meningkatkan

respons imun antigen yang dicampurkan

dengannya

Ajuvan tidak berikatan stabil dengan antigen / imuno-

gen, dan hanya diperlukan terutama untuk imunisasi I

Ajuvan dapat meningkatkan imunogenesitas dengan

jalan mengubah antigen protein terlarut menjadi

partikulat (diabsorbsi pada partikel , emulsifikasi

dalam minyak atau disisipkan pada partikel koloid


18/46


19/46


20/46

nteraksi antigen dengan reseptor

Interaksi dengan Ig

Ikatan antara antigen pada antibodi tidakmenimbulkan efek biologik langsung.

Efek biologi signifikan merupakan akibat

dari fungsi sekunder antibodi yaitusebagai efektor.


21/46

Interaksi antar antigen dengan BCR

menyebabkan presentasi fragmen antigen dipermukaan sel


22/46

Interaksi antara antigen dengan TCR

Aktivasi sel T yang terjadi karena interaksi antara

TCR dengan antigen memerlukan co-stimulator


23/46

1. Konsep Lock and Key

2. Terikat dengan ikatan non kovalen

reversibel


24/46


25/46

Afinitas adalah konstanta keseimbangan yang

menggambarkan reaksi antigen-antibodi.

Umumnya, antibodi memiliki afinitas tinggi terhadap

antigen yang sesuai


26/46

B. AviditasAviditas adalah semua kekuatan ikatan antara antigen

dengan banyak determinan antigenik dengan antibodi

multivalen.

Aviditas dipengaruhi oleh valensi antibodi maupunantigen.

Aviditas bukan sekedar penjumlahan afinitas tiap-tiap

ikatan


27/46

III. SPESIFISITAS & REAKSI SILANG

A. Spesifisitaskemampuan antibodycombining site tunggal untuk

dapat bereaksi dengan satu determinan antigenik

atau

kemampuan populasi antibodi tertentu untuk bereaksidengan satu jenis antigen

.

.

Antibodi dapat membedakan1) struktur primer antigen,

2) bentuk isomer antigen, dan

3) struktur sekunder atau tersier antigen


28/46

B. Reaksi Silang (Cross react iv i ty )

kemampuan antibody combining site tunggalbereaksi terhadap lebih dari satu determinanantigenik

ataukemampuan populasi antibodi tertentu bereaksi

dengan lebih dari satu jenis antigen

sebab:1. determinan antigenik umum

2. determinan antigenik antigen yang bereaksi silangberstruktur mirip


29/46


30/46

1. Afinitas

Afinitas >>> kestabilan

interaksi >>>

2. Aviditas

Reaksi antara antigen

multivalen dengan antibodi

multivalen lebih stabil

3. Rasio antigen-antibodi

tertentu berkaitan dengan

ukuran kompleks antibodi

4. Bentuk fisik antigen

- Partikulat aglutinasi(c lumping)

- terlarut presipitasi setelah

terbentuk kompleks dalam

jumlah tertentu

IV. A. Faktor-faktor yang berpengaruh terhadap

pengukuran reaksi antigen-antibodi


31/46


32/46

a.l. untuk :

- Penentuan golongan darah kualitatif

- Identifikasi adanya infeksi bakteri kuantitatif

dengan pengenceran seri (serial di lut io n)

Aglutinin = antibodi yang dapat mengaglutinasi Ag Hemaglutinin jika Ag yang diaglutinasi adalah eritrosit

IgM merupakan aglutinin yang baik

Peningkatan titer antibodi terhadap bakteri tertentumenunjukkan adanya infeksi bakteri


33/46

= pengenceran

maksimum yang masih

menunjukkan aglutinasi


34/46

1. Imunodifusi

2. Imunoelektroforesis

3. RIA/ELISA- kompetitif

- non kompetitif

4. Uji antigen yang berasosiasi dengan sel

- imunofluoresens- Flow cytometry


35/46

IV.C. Precipitation tests

In radial immunodiffusion antibodyis incorporated into the agar gel asit is poured and different dilutionsof the antigen are placed in holespunched into the agar. As the

antigen diffuses into the gel, itreacts with the antibody and whenthe equivalence point is reached aring of precipitation is formed

Radial Immunodiffusion (Mancini)

The diameter of the ring is proportional to the log of the concentration of antigen

since the amount of antibody is constant. Thus, by running different concentrationsof a standard antigen one can generate a standard cure from which one can

quantitate the amount of an antigen in an unknown sample. Thus, this is a

quantitative test. If more than one ring appears in the test, more than one

antigen/antibody reaction has occurred. This could be due to a mixture of antigens

or antibodies. This test is commonly used in the clinical laboratory for the

determination of immunoglobulin levels in patient samples.


36/46

In immunoelectrophoresis, a complex mixture of antigens isplaced in a well punched out of an agar gel and the antigensare electrophoresed so that the antigen are separatedaccording to their charge. After electrophoresis, a trough is cutin the gel and antibodies are added. As the antibodies diffuseinto the agar, precipitin lines are produced in the equivalencezone when an antigen/antibody reaction occurs


37/46

Immunoelectrophoresis is used for the qualitative analysis ofcomplex mixtures of antigens, although a crude measure of quantity

(thickness of the line) can be obtained.

This test is commonly used for the analysis of components in a

patient' serum.Serum is placed in the well and antibody to whole serum in the

trough. By comparisons to normal serum, one can determine

whether there are deficiencies on one or more serum components

or whether there is an overabundance of some serum component

(thickness of the line).

This test can also be used to evaluate purity of isolated serum

proteins.


38/46

IV.C.3. Countercurrent electrophoresis

In this test the antigen and antibody are placed inwells punched out of an agar gel and the antigen

and antibody are electrophoresed into each other

where they form a precipitation line

This test only w orks i f con di t ions can be found where the

ant igen and antibo dy h ave oppos ite charges. This test is

pr imar i ly qual itat ive, al though from the thickn ess of the band

we can get some measure of quanti ty. Its m ajor advantage is

its sp eed.


39/46

IV.D. Radioimmunoassay (RIA)/Enzyme

Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

Radioimmunoassays (RIA) are assays that are basedon the measurement of radioactivity associated with

immune complexes. In any particular test, the label maybe on either the antigen or the antibody. Enzyme LinkedImmunosorbent Assays (ELISA) are those that arebased on the measurement of an enzymatic reactionassociated with immune complexes. In any particularassay, the enzyme may be linked to either the antigenor the antibody.


40/46

IV.D.1. Competitive RIA/ELISA for Ag

Detection


41/46

IV.D.2. Noncompetitive RIA/ELISA for Ag or Ab


42/46

IV.E. Tests for Cell Associated Antigens

IV.E.1. Immunofluorescence

Immunofluorescence is a technique whereby an

antibody labeled with a fluorescent molecule

(fluorescein or rhodamine or one of many otherfluorescent dyes) is used to detect the presence of an

antigen in or on a cell or tissue by the fluorescence

emitted by the bound antibody.


43/46

IV.E.1.a. Direct Immunofluorescence


44/46

IV.E.1.b. Indirect Immunofluorescence


45/46


46/46

reaksiantigen antibodi

Documents