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NUEVA METODOLOGÍA PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO

SULFUROSO EN VINOS

DEPARTAMENTO NORMAS ANALÍTICAS ESPECIALESSUBGERENCIA DE INVESTIGACIÓN PARA LA FISCALIZACIÓN

BROM. VIVIANA TREBESLIC. FANNY PRÉVIDE

DISERTANTEBROM. VIVIANA TREBES

[email protected]

MÉTODOS ANALÍTICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE ANHÍDRIDO SULFUROSO EN VINOS

1- Método de Ripper, de referencia a nivel nacional.2- Método de Paul-Rankine, de referencia a nivel internacional propuesto por la OIV.3- Métodos con Analizadores automáticos.

En el mercado existen diferentes equipos que cumplen con esta función:

- Autoanalizadores en Flujo Continuo.- Autoanalizadores de Análisis Secuencial .

HISTORIA…

Evolución del Análisis Automático en Enología

- 1970: Analizadores de Flujo Continuo- 1980: Analizadores de Infrarrojo Cercano (NIR) - 1990: Analizadores Secuenciales- A finales de los 90’: Infrarrojo por Transformada de Fourrier (IRTF)

Según la IUPAC, los dispositivos Automáticos son

aquellos que efectúan acciones previamente

programadas en ciertos puntos del proceso sin

intervención humana.

VENTAJAS…

*La velocidad con que se realizan los análisis suele ser

significativamente más alta que cuando se utilizan

dispositivos manuales.

*Un analizador bien diseñado proporciona mayor

precisión durante largos períodos de tiempo de lo que lo

haría un operador usando un instrumento manual.

*Menores costos laborales: sistematizar y estandarizar

determinaciones de rutina; menor volumen de desechos, etc.

INCONVENIENTES…

* Menor versatilidad que los sistemas no

automáticos, aunque algunos sistemas

ofrecen variadas prestaciones.

* La inversión inicial suele ser elevada

Los Métodos Automáticos para el análisis de muestras en

disolución suelen clasificarse según el siguiente esquema

En los Métodos Discontinuos, las muestras se

mantienen como entidades separadas en

recipientes individuales, donde tienen lugar las

diferentes etapas del proceso analítico: dilución,

adición de los reactivos, mezcla, etc. Por último, las

muestras son llevan al detector, donde se obtiene la

señal correspondiente.

AUTOANALIZADOR SECUENCIAL COLORIMÉTRICO

En los Sistemas Continuos, la muestra se incorpora aun flujo de líquido o gas, donde es sometida a unaserie de procesos desde que se inyecta hasta que sehace llegar al detector.

Método de flujo segmentado la muestra esintroducida de forma secuencial.

Método de flujo no segmentado, la muestra que esinyectada directamente en el flujo. De estos sistemas,el más representativo es el denominado ANÁLISIS PORINYECCIÓN EN FLUJO (FIA).

DEFINICIONES

Sulfuroso Libre (SO2L)La combustión del azufre (S) forma el gas SO2, que se transforma en ácidosulfuroso H2SO3 en solución acuosa. Este ácido está asimismo disociado según lossiguientes equilibrios:

H2SO3 HSO3- H+ SO3= + 2H+

Estas tres formas constituyen, por definición, el “SO2 Libre”

Sulfuroso Combinado (SO2c)En solución compleja, como los mostos y vinos, el SO2 reacciona con diversoscompuestos orgánicos con funciones carbonilo para formar el “SO2 combinado”

Sulfuroso Total (SO2T)Es la suma de las dos fracciones anteriores:

SO2T = SO2L + SO2c

LEGISLACIÓN

PARÁMETRO LÍMITE TOLERANCIA

OFICIALIZACIÓN

TÉCNICA

ANALÍTICA

Anhídrido Sulfuroso

Total mg.L-1

130 mg.L-1 en Tintos hasta 4 g/L AR.

180 mg.L-1 en Tintos de más de 4 g/L

AR. 180 mg.L-1 en Blancos y Rosados

hasta 4 g/L AR. 210 mg.L-1 en

Blancos y Rosados de más de 4 g/L

AR. Resolución I.N.V, Nº C-61/2012.

250 mg.L-1 en Dulce Natural.

Resolución I.N.V, Nº C-17/2012.

300 mg.L-1 en Vinos Caseros. Circular

Nº 007 G.F./2003

35 mg.L-1 en más ó

en menos.

Resolución I.N.V. Nº

C-143/94.

Resolución I.N.V. Nº

C-227/91.

DETERMINACIÓN DE SO2 LIBRE Y TOTAL EN VINOS POR SISTEMA FIA

Campo de Aplicación

Este método describe la determinación de SO2 Libre yTotal en Vinos.

El rango de concentración es:

SO2 Libre: 2-200 mg.L-1 SO2SO2 Total: 5-250 mg.L-1 SO2

Con este método pueden analizarse 50 muestras/hora.

EQUIPO AUTOANALIZADOR FIA

• Autoanalizador

• Módulos para Métodos de Análisis de SO2L y

SO2T

• Lámparas. Filtros de Interferencia: M= 420 nm y

R= 720 nm

• Autosampler

• Detector

EQUIPO AUTOANALIZADOR FIA


SULFUROSO EN VINOS

Principio

SO2TotalLa muestra es inyectada en una solución de buffer fosfato a pH 8,4 (carrier). El reactivo DTNB (Ácido Ditionitrobenzoico), es luego adicionado y la corriente de flujo es calentada a 50ºC. El DTNB reacciona con todas las formas de SO2 y produce un fuerte color amarillo que es dializado en un adecuado rango de absorbancia. El color final es medido a 420 nm.


SULFUROSO EN VINOS

Principio

SO2 LibreLa muestra es inyectada en agua (carrier) y luego es acidificada con HCl para liberar SO2 (g) de la muestra. Este SO2 libre difunde a través de una membrana de difusión de gases en una solución de buffer fosfato a pH 8,4. El reactivo DTNB es luego adicionado y reacciona con el SO2 libre. El color de la reacción produce un fuerte color amarillo, el cual es medido a 420 nm.


SULFUROSO EN VINOS

Procedimiento

Muestreo y Preparación de la muestra

- Vinos terminados pueden ser analizados directamente.- Vinos sin filtrar se deben centrifugar. Si las muestras están todavía turbias, se requiere filtrarlas para evitar la obstrucción del inyector de muestras.- Vinos espumantes deben ser sometidos a ultrasonidos durante 5 minutos para evitar falta de repetibilidad, debido a burbujas en la muestra inyectada.


SULFUROSO EN VINOS

Puesta en marcha del sistemaa- Encendido de los módulos, del autosampler y PC.

b- Apertura del Software y carga del método.

c- Encendido de bombas y bombeo de agua destilada para purgar el

sistema.

d- Calibración de filtros.

e- Medir línea de base con agua destilada.

SD (M-R) ˂ 0,1 mUA

f- Parar bombas y conectar todo el sistema a los correspondientes

reactivos intervinientes.

g- Bombear los reactivos y medir línea de base.

SO2L: SD (M-R) ˂ 0,5 mUA

SO2T: SD (M-R) ˂ 0,1 mUA


SULFUROSO EN VINOS

Puesta en marcha del sistema…

h- Crear la correspondiente curva de calibración con solución patrón de disulfito de sodio (Na2O5S2). i- Realizar inyecciones de prueba con uno de los estándares de concentración conocida para cada módulo, de modo de verificar que el sistema está equilibrado. Las mediciones no deberán diferir en más de un 2% en mAU o mg.L-1.j- Crear la lista de muestras requerida. K- Para análisis de rutina, es recomendable incluir un procedimiento de control de calidad para asegurar que los datos son correctos.k- Sistema de Muestra Urgente.


SULFUROSO EN VINOS

Resultados

Curva de Calibración para SO2 Total en el rango de 0-250 mg/L


SULFUROSO EN VINOS

Resultados

Ensayos Interlaboratorio

INV BIPEA INV INV BIPEA INV

z z

29 27 0,4 126 129 -0,29

24 23 0,2 62 68 -0,67

12 15 -0,75 101 112 -1,05

10 15 -1,25 93 100 -0,7

19 20 -0,22 74 76 -0,21

SO2 Libre (mg/l) SO2 Total (mg/l)

dic-13

Método Automático Por Inyección de Flujo (FIA)

Resultados informados por BIPEA

feb-14

nov-13

Vino Rosado

Vino Tinto

Vino Blanco

Vino Blanco Dulce Natural

ene-14

Vino Tinto


SULFUROSO EN VINOS

Plan de Mantenimiento

Mantenimiento DiarioLimpieza al final del día: con solución detergente (SCABA)Mantenimiento SemanalAl inicio o final del día: con solución de hipoclorito al 5%Si el rendimiento de los controles (QC) disminuye, debe ser reemplazada la membrana de diálisis del módulo de SO2TMantenimiento MensualReemplazo de membrana de difusión de gasesMantenimiento SemestralCambio de lámparas. Calibración de filtros. Limpieza del rotor de válvulas. Cambio de todas las mangueras de conexión al sistemaVerificación del sistema.


SULFUROSO EN VINOS

Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por Método Paul-Rankine

Método de Referencia: OIV-MA-AS323-04A (Resolución Oeno 377/2009)

FundamentoLa determinación se basa en la liberación del SO2 libre por

acidificación con ácido fosfórico y se arrastra con una corriente de aire o nitrógeno que se hace borbotear en una solución diluida y neutra de peróxido de hidrógeno. Valoración del ácido sulfúrico

formado con solución valorada de NaOH.El arrastre en frío (10ºC) garantiza la extracción únicamente del SO2L.

En caliente (100ºC aprox.) se extrae el SO2T.


SULFUROSO EN VINOS

Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por Método Paul-Rankine

Equipo Rankine para la determinación de SO2


SULFUROSO EN VINOS

Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por

Método Paul-Rankine

Reactivos

- Ácido Fosfórico al 85%

- Solución de Peróxido de Hidrógeno de 3 Volúmenes

- Reactivo Indicador: - Rojo de Metilo

- Azul de Metileno

- Etanol 50% (v/v)

- Solución de hidróxido de Sodio 0,01 M


SULFUROSO EN VINOS

Determinación de SO2 Libre y Total en Vinos por

Método Paul-Rankine

Bibliografía

Reference method

PAUL F., Mitt. Klosterneuburg, Rebe u. Wein, 1958, ser. A, 821.

MUCHAS GRACIAS

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