Nilai klinis dari Treponema pallidum Real-Time PCR untuk Diagnosis Sifilis [bawah-menunjuk segitiga terbuka kecil]

AbstrakDiagnosis sifilis dapat menjadi rumit ketika itu didasarkan pada manifestasi klinis yang beragam, gelap-bidang mikroskopi, dan serologi. Dalam penelitian ini, karena itu, kami memeriksa nilai klinis tambahan dari Treponema pallidum real-time PCR TaqMan untuk mendeteksi sifilis primer dan sekunder. Nilai tambahan dari T. pallidum real-time PCR untuk diagnosis sifilis primer dievaluasi dengan penggunaan tiga algoritma yang berbeda: (i) perbandingan head-to-head dari hasil mikroskop medan-gelap dan T. pallidum real-time PCR hasil, (ii) perbandingan diagnosis klinis dibuat di klinik infeksi menular seksual (IMS) (termasuk dengan mikroskop medan gelap) dan T. pallidum real-time hasil PCR, dan (iii) perbandingan klinis diagnosis dilakukan di kantor dokter umum itu (tanpa mikroskop medan-gelap) dan T. pallidum real-time hasil PCR. Algoritma keempat digunakan untuk menentukan kinerja T. pallidum real-time PCR mengenai deteksi sifilis sekunder. Dari Desember 2006 sampai April 2008, 716 pasien dengan dugaan kasus sifilis primer dan 133 pasien dengan dugaan kasus sifilis sekunder dilibatkan dalam penelitian. Sebuah nilai kappa 0,601 ditemukan untuk perjanjian antara gelap-bidang mikroskop dan T. pallidum real-time PCR. Perjanjian baik yang ditemukan antara T. pallidum real-time PCR dan kedua diagnosis dari dokter umum (kappa = 0,745) dan diagnosis klinik IMS (kappa = 0,769). Sensitivitas terhadap diagnosis klinik IMS adalah 72,8%, spesifisitas 95,5% itu, nilai prediksi positif adalah 89,2%, dan nilai prediktif negatif adalah 95,0%. T. pallidum real-time PCR adalah tes cepat, efisien, dan dapat diandalkan untuk diagnosis sifilis primer di klinik rawat jalan IMS dan pengaturan dokter umum, tetapi tidak memiliki nilai diagnostik tambahan untuk diagnosis sifilis sekunder.

Bagian lainPara agen etiologi sifilis, Treponema pallidum subsp. pallidum, menyebabkan multistage infeksi menular seksual (IMS). Selama dekade terakhir, telah terjadi peningkatan insiden sifilis dilaporkan di negara industri, menekankan kebutuhan untuk diagnostik yang handal untuk sifilis. Waktu generasi lambat dan ketidakmampuan untuk bertahan hidup dan berkembang biak di luar tubuh mamalia membuat T. pallidum tidak cocok untuk dalam kultur in vitro (11). Diagnosis handal dan cepat sifilis dan pengobatan dini dapat meningkatkan kesehatan masyarakat. Sampai saat ini, diagnosis laboratorium sifilis didasarkan pada gelap-bidang mikroskop dan / atau serologi sifilis. Gelap-bidang mikroskop ini terutama digunakan untuk diagnosis sifilis primer. Untuk interpretasi yang optimal dari hasil tes, gelap-bidang mikroskop membutuhkan teknisi laboratorium melakukan mikroskop untuk memiliki banyak pengalaman dan keahlian. Di banyak rangkaian di mana pasien dengan (ano) ulserasi genital terlihat, seperti kantor dokter umum (GP), gelap-bidang mikroskop tidak tersedia dan diagnosis pasti sifilis semata-mata tergantung pada gambaran klinis dalam kombinasi dengan sifilis serologi. Dalam kasus sifilis primer, hasil negatif palsu serologis spesifik mungkin terjadi karena periode jendela. Akibatnya, kunjungan tindak lanjut dengan uji serologis berulang akan diperlukan untuk jangka waktu 3 bulan. Ini mungkin, namun, mengakibatkan penundaan pengobatan, perkembangan penyakit menyebabkan yang mengakibatkan komplikasi kesehatan yang serius dan transmisi lanjutan. Di sisi lain, hasil positif palsu serologis dapat terjadi karena masih adanya antibodi dari infeksi di masa lalu.Sebuah PCR cepat dan handal oleh karena itu nilai potensi besar untuk diagnosis sifilis primer, khususnya dalam pengaturan di mana tidak mungkin untuk melakukan gelap-bidang mikroskop (3). Keuntungan dari real-time PCR adalah kemampuan untuk mendeteksi patogen secara langsung, waktu penyelesaian yang singkat, dan kemudahan kinerja. Sebelumnya, kami telah mengembangkan real-time PCR yang menargetkan gen POLA dan yang dilakukan dengan swab dari ulserasi (ano) kelamin (s) (10).Dalam penelitian ini, kami meneliti nilai klinis dari T. pallidum real-time PCR berkaitan dengan lesi sifilis primer dan sekunder. Sensitivitas, spesifisitas, nilai duga positif (PPV), dan nilai prediksi negatif (NPV) dari T. pallidum real-time PCR ditentukan dalam pengaturan klinis dari sebuah klinik, sangat besar rendah ambang IMS rawat jalan di Amsterdam, Belanda.

Bagian lain

BAHAN DAN METODEStudi populasi. Klinik IMS rawat jalan dari Dinas Kesehatan Amsterdam di Amsterdam, Belanda, adalah klinik rendah ambang melayani sekitar 27.000 pelanggan per tahun. Klien dapat mengunjungi klinik IMS anonim, gratis, dan tanpa rujukan oleh seorang dokter. Semua berisiko tinggi klien secara rutin diskrining untuk Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, dan Neisseria gonorrhoeae. Diagnostik untuk IMS lain, seperti (ano) genital herpes simplex virus (HSV) infeksi, didasarkan juga pada gejala klinis. Sejumlah besar klien membuat beberapa kunjungan per tahun; beberapa klien didiagnosa dengan satu atau lebih IMS pada suatu waktu.Klien dilibatkan secara berurutan dalam studi memiliki dugaan kasus sifilis primer jika mereka disajikan dengan ulkus (ano) kelamin atau dimasukkan sebagai memiliki dugaan kasus sifilis sekunder jika mereka disajikan dengan manifestasi kulit kemungkinan berhubungan dengan sifilis sekunder, seperti makula atau papular ruam, lesi kondiloma latum, roseolas, patch lendir, atau alopecia.Pemeriksaan diagnostik. (I) gelap-bidang mikroskop.Gelap-bidang mikroskop dilakukan untuk semua klien yang disajikan dengan ulkus (ano) kelamin. Sebuah mikroskop dilengkapi dengan kondensor gelap-bidang yang mencerminkan dan tujuan 40 yang digunakan. Tergantung pada kualitas sampel ulkus dikumpulkan (tidak ada sel epitel, sedikit eritrosit), minimal dua slide dan maksimum empat slide disiapkan untuk diperiksa. Seorang dokter kulit yang terlatih atau penduduk terlatih dalam dermatologi memeriksa gelap medan-slide, dan hasil bagi mereka ditemukan positif untuk T. pallidum dikonfirmasi oleh pemeriksa lain.(Ii) Sifilis serologi.Sera semua klien diuji di Laboratorium Kesehatan Masyarakat Dinas Kesehatan Amsterdam. The serologi sifilis termasuk T. pallidum kuantitatif aglutinasi partikel (TPPA) tes (Serodia-TP.PA; Fujirebio Europe BV) sebagai tes skrining primer dan baik kuantitatif cepat plasma reagin (RPR) uji flokulasi (RPR-Nosticon II; bioMerieux , Boxtel, Belanda) dan antibodi treponema fluoresen (FTA) tes (Trepo-Spot JIKA; bioMerieux) sebagai tes konfirmasi. Tes FTA dan RPR dilakukan dengan uji TPPA-positif sera. Untuk menyingkirkan hasil positif palsu, titer uji TPPA dari