UJI FARMAKODINAMIK OBAT-OBAT HIPOLIPIDEMIK TERHADAP MENCIT (Mus muscullus) Hendriani Paramita1, Rais al Qadri1, Rezky Aprhodyta1, Veronica Toban1, Wahyuni1, Yetmilka

Florensia1, Abdillah Amir2

1. Mahasiswa Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin2. Asisten Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi I Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin

ABSTRAKTelah dilakukan praktikum tentang pengaruh pemberian obat-obat hipolidemik pada hewan

coba mencit (Mus musculus). Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui efek dari obat hipolidemik khususnya golongan asam fibrat dan penghambat HMG-CoA reduktase. Kadar kolesterol darah hewan coba diukur terlebih dahulu sebelum diberiperlakuan. Induksi kolesterol dilakukan menggunakan pakan yang mengandung lemak kambing. Hewan coba diberikan obat hipolidemik satu kali setiap sore harinya dan diberikan lagi pakan malam harinya selama 5 hari perlakuan berturut-turut. Obat yang digunakan dalam paktikum ini adalah gemfibrozil yang merupakan obat golongan asam fibrat, simvastatin yang merupakan obat golongan penghambat HMG-CoA reduktase, dan propiltiourasil (PTU) sebagai kontrol negatif.Kata kunci : Kolesterol, lipid, hipolidemik, gemfibrozil, simvastatin, PTU

PENDAHULUANHiperlipidemik adalah peningkatan

salah satu atau lebih kolesterol, kolesterol ester, fosfolipid, atau trigliserida. Hiperlipoprotein adalah meningkatnya konsentrasi makro molekul lipoprotein yang membawa lipid dalam plasma. Hiperlipidemik yaitu keadaan dimana kadar lipoprotein darahmeningkat akibat predisposisi genetik (keturunan) atau hiperlipidemik primer atau yang berhubungan pula dengan diet indidviual. Pembagian Lipoprotein beserta komposisinya:1. VLDL (Very Low Density

Lipoprotein)Lipoprotein density sangat rendah. VLDL disekresi oleh hatiuntuk mengangkut trigliserida ke jaringan perifer. Lipoprotein ini terdiri dari 60% trigliserida (endogen) dan 10-15% kolesterol, 10% protein dan 20% fosfolipid.

2. KilomikronKilomikron membawa trigliserida dari makanan ke jaringanlemak dan otot rangka juga membawa kolestrol makan ke hati.Lipoprotein dengan berat molekul terbesar ini lebih dari 85% komponenya terdiri dari trigliserida dan kurang 5% (4%) kolestrolester, 2% protein dan 9% fosfolipida.

3. LDL (Low Density Lipoprotein)Lipoprotein densitas rendah. LDL merupakan lipoprotein pengangkut kolestrol terbesar pada manusia (70% total). LDL mengandung trigliserida 5% dan kolestrol 70%, 13% protein dan 12% fosfolipida.

4. IDL (Intermediate Density Lipoprotein)Lipoprotein densitas sedang. IDL adalah Zat perantara yangterjadi sewaktu LDL di katabolisme menjadi LDL, tidak terdapatdalam kadar yang besar kecuali bila terjadi hambatan koversi lebih lanjut.

IDL ini kurang mengandung trigliserida (30%), lebih banyakkolestrol (20%) dan relatif lebih banyak mengandung apoprotein A dan B.

5. HDL (High Density Lipoprotein)Lipoprotein densitas tinggi. HDL mengangkut kelebihan (danasam lemak) yang tidak dapat digunakan oleh jaringan perifer. HDLmengandung 25% kolestrol dan 5% trigliserida, 50% protein, dan20% fosfolipida

Kolesterol dapat disintesis melalui dua jalur utama, yaitu:a. Jalur eksogen

Trigliserida dan kolesterol yang berasal dari makanan dalam usus dikemas sebagai kilomikron. Kilomikron ini akan diangkut dalam saluran limfa lalu ke dalam darah melalui duktus torasikus. Di dalam jaringan lemak trigliserida dalam kilomikron mengalami hidrolisis oleh lipoprotein lipase yang terdapat pada permukaan sel endotel. Akibat hidrolisis ini maka akan terbentuk asam lemak kilomikron remnan. Asam lemak bebas akan menembus endotel dan masuk ke dalam jaringan lemak atau sel otot untuk diubah menjadi trigliserida kembali(cadangan) atau dioksidasi (energi). Kilomikron remnan adalah ukurantrigliserida mengecil tetap jumlah ester kolesterol tetap. Kilomikronremnan ini akan dibersihkan oleh hati dari sirkulasi dengan mekanismeendositosis oleh lisosom. Hasil metabolisme ini berupa kolestrol bebasyang akan digunakan untuk sintetis berbagai struktur (membran plasma, myelin, hormone, steroid dsb) disimpan dalam hati sebagaikolestrol ester lagi atau diekskresi kedalam empedu (sebagaikolesterol atau asam empedu) atau diubah jadi lipoprotein

yangdikeluarkan kedalam plasma. Kolesterol juga dapat disintesis dariasetat dibawah pengaruh enzim HMG-CoA reduktase yang menjadiaktif jika terdapat kekurangan kolesterol.a. Jalur endogen

Trigliserida dan kolesterol yang disintesis oleh hati diangkut secara endogen dalam bentuk VLDL kaya trigliserida dan mengalami hidrolisis dalam sirkulasi oleh lipoprotein lipase yang juga menghidrolisis kilomikron menjadi partikel lipoprotein yang lebih kecil yaitu IDL dan LDL, LDL merupakan lipoprotein yang mengandung kolesterol paling banyak (60-70%), LDL mengalami katabolisme melalui reseptor seperti diatas dan jalur non reseptor. Jalur katabolisme reseptor dapat ditekan oleh produksi kolesterol endogen.

Obat-obat hipolipidemik atau obat yang digunakan untuk menurunkan kadar lipid plasma antara lain:a.  Asam Fibrat

Sebagai hipolipidemik obat ini diduga bekerja dengan cara berikatan dengan reseptor peroxisome proliferator–activated receptors (PPAR), yang mengatur transkripsi gen. Akibat interaksiobat ini dengan PPAR isotipe α (PPAR α), maka terjadilah peningkatan oksidasi asam lemak, sintesis LPL dan penurunan ekspresi Apo C-III. Peningkatan kadar LPL meningkatkan klirens lipoprotein yang kaya trigliserida, penurunan produksi Apo C-III hati akan menurunkan VLDL. HDL meningkat secara moderat karena peningkatan ekspresi Apo A-I dan Apo A-II. Contoh: Klofibrat, Gemfibrozil, Fenofibratb.  Resin

Resin menurunkan kadar kolesterol dengan cara mengikat asam empedu dalam saluran cerna, mengganggu sirkulasi enterohepatik sehingga ekskresi steroid yang bersifat asam dalam tinja meningkat.Contoh: Kolestipol, Kolestiraminc. Penghambat HMG-CoA Reduktase

Statin saat ini merupakan hipolipidemik yang paling efektif dan aman. Obat ini terutama efektif untuk menurunkan kolesterol. Pada dosis tinggi statin juga dapat menurunkan trigliserida yang disebabkan oleh peninggian VLDL.Contoh: Simvastatin, Lovastatin, Fluvastatin, Atrovastatin, Pravastatind.  Derivat Asam Nikotinat

Asam nikotinat merupakan hipolipidemik yang paling efektif dalam meningkatkan HDL (30-40 %). Obat ini menurunkan sebaik fibrat (35-45 %) dan menurunkan LDL (20-30 %). Kadar Lp(a) menurunkan hingga 40%. Obat-obat lain yang juga menurunkan Lp(a) adalah estrogen dan neomisin.

Contoh: Niasine.  Probukol

Probukol menurunkan kadar kolesterol serum dengan menurunkan kadar LDL. Obat ini tidak menurunkan kadar tligliserida serum pada kebanyakan pasien. Kadar HDL menurunkan lebih banyak dari pada kadar LDL sehingg menimbulkan rasio LDL.f.    Lain-lain1. Penghambat Absorbsi kolesterol Intestinal

Obat ini menurunkan LDL dan kolesterol total, walaupun asupan makanan tidak mengandung kolesterol karena menghambat reabsorbsi kolesterol yang diekskresi dalam empedu.2. Neomisin sulfat

Neomisin sulfat yang diberikan per oral dapat menurunkan kadar kolesterol dengan cara mirip resin yaitu membentuk kompleks tidak larut dalam asam empedu.3. Beta sitosterol

Mekanisme kerjanya diduga menghambat absorbsi kolesterol eksogen dan diindikasikan hanya untuk pasien Hiperkolesterolemia poligenik yang amat sensitif dengan penambahan kolesterol dari luar (makanan).4. Dekstrotiroksin

Mekanisme kerjanya dalam menurunkan kadar lipid dalam darah diduga karena efek tiromimetiknya (kemampuan menurunkan kadar lipid yang lebih besar daripada peningkatan kecepatan metabolismenya).

METODE KERJAAlat dan Bahan

Alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah alat pengukur kadar kolesterol darah, erlenmeyer, erlenmeyer, spoit, timbangan, dan kanula.

Bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah lemak kambing, gemfibrozil, PTU, dan simvastatin.Penyiapan hewan uji

Mencit yang digunakan sebanyak 9 ekor, yang kemudian dibagi menjadi 3 kelompok perlakuan. Tiga mencit pertama diberikan PTUsebagai kontrol negatif, 3 mencit berikutnya diberikan gemfibrozil dan 3 mencit terkhir diberikan simvastatin.Perlakuan hewan uji

Pada awalnya mencit diukur kadar kolesterol darahnya sebelum diberikan pakan induksi kolesterol dan PTU untuk memicu hiperlipidemia. Sehari setelah itu, ditimbang bobot badan mencit kemudian diberikan obat gemfibrozil dan simvastatin pada sore hari, dan diberikan lagi pakan penginduksi kolesterol pada malam hari. Perlakuan ini dilakukan selama 5 hari secara berturut-turut.Pengamatan

Pengamatan dilakukan dengan cara melihat perubahan berat badan mencit dan membandingkan kadar kolesterol darah sebelum dan sesudah pemberian obat gemfibrozil bersama pakan dan simvastatin bersama pakan dibandingkan dengan kontrol negatif PTU bersama pakan.

HASIL DAN PEMBAHASANPemberian pakan yang dicampurkan

dengan lemak kambing atau pakan tinggi kolesterol yang disebut induksi eksogen bertujuan untuk menciptakan kondisi hiperlipidemia pada mencit. Pemberian

Propiltiourasil (PTU) yang adalah zat antitiroid juga akan meningkatkan konsentrasi kolesteroldarah secara endogen dengan cara merusak kelenjar tiroid. Propil tiourasil akanmenimbulkan kondisi hipotiroid yangdihubungkan dengan peningkatan konsentrasiLDL plasma akibat penurunan katabolismeLDL. Penyebabnya yaitu pada hipotiroidterjadi penurunan sintesis dan ekspresi reseptor LDL di hati, sehingga LDL banyak beredar di plasma dan menjadi penyebabhiperkolesterolemia. Hasil yang diperoleh dari praktikum ini adalah sebagai berikut.

PerlakuanKadar

kolesterol awal

BB awal BB 1 BB 2 BB 3Kadar

kolesterol akhir

PTU181 mg/dl218 mg/dl148 mg/dl

29 g21 g21 g

26 g21 g27 g

24 g17,3 g24,5 g

25 g21 g22 g

150 mg/dl189 mg/dl132 mg/dl

PTU + Gemfibrozil

164 mg/dl182 mg/dl254 mg/dl

19 g19 g19 g

21 g24 g17 g

17 g20 g17 g

22 g-

10,5 g

153 mg/dl195 mg/dl139 mg/dl

PTU + Simvastatin

261 mg/dl245 mg/dl188 mg/dl

20 g23 g13 g

21,5 g24,5 g17 g

19 g20 g15 g

16 g17 g13 g

198 mg/dlLOW

144 mg/dlTabel 1. Data Kadar Kolesterol Darah dan Bobot Badan Mencit (Mus musculus)

Gemfibrozil yang merupakan obat hipolipidemik golongan asam fibrat diyakini meningkatkan aktivitas peroxisome proliferator-activated receptor-alpha (PPAR-α), suatu reseptor yang terlibat dalam metabolisme karbohidrat dan lemak, yang akan meningkatkan aktivitas lipoprotein lipase. Gemfibrozil menyebabkan penurunan trigliserol plasma dengan memacu aktivitas lipase lipoprotein tersebut, sehingga menghidrolisis triasilgliserol pada kilomikron dan VLDL serta mempercepat pengeluaran partikel-partikel ini dari plasma.

Simvastatin merupakan obat yang menurunkan kadar kolesterol (hipolidemik) dan merupakan hasil sintesa dari hasil fermentasi Aspergillus terreus. Secara invivo simvastatin akan dihidrolisa menjadi metabolit aktif. Mekanisme kerja dari metabolit aktif tersebut adalah dengan cara menghambat kerja 3-

Hidroksi-3-metilglutaril koenzim A reduktase (HMG Co-A reduktase), dimana enzim ini mengkatalisa perubahan HMG Co-A menjadi asam mevalonat yang merupakan langkah awal dari sintesa kolesterol.

Namun hasil yang diperoleh tidak sesuai dengan literatur, seperti yang terdapat pada Tabel 1, mencit yang diberi PTU sebagai kontrol negatif mengalami penurunan kadar kolesterol dan bobot badan, sedangkan mencit yang diberikan Gemfibrozil dan Simvastatin ada yang mengalami kenaikan bobot badan dan kadar kolesterol darah. Hal ini mungkin disebabkan akibat perlakuan yang tidak teratur, atau kesalahan dalam pemberian obat pada mencit.

Dilakukan pula anaisis data menggunakan ANOVA Single Factor pada data yang diperoleh, dan hasilnya adalah sebagai berikut.

Anova: Single Factor

SUMMARY

Groups

Count

Sum

Average

Variance

PTU 6

435

72.5

5288.3

6 4 81. 905

87.3

21667

8.082

6

37

4.5

62.416

67

3641.442

PTU + Gemfibrozil 6

396

665148.8

6

440

73.333

33

8043.867

6

45

6.5

76.083

33

10030.84

PTU + Simvastatin 6

53

5.5

89.25

12202.18

6

32

9.5

54.916

67

8749.642

  6

390 65

6316.4

ANOVASource of Variation SS df MS F

P-value

F crit

Between Groups

5183.984 8

647.99

8

0.0851

64

0.9994

73

2.1521

33Within Groups

342397

.745

7608.839

Total

347581

.753        

Tabel 2. Hasil Analisis Data ANOVA Single Factor

Dapat dilihat dari hasil analisis data menggunakan ANOVA Single Factor bahwa data yang diperoleh tidak signifikan karena F critical lebih besar daripada F dan P-value lebih besar dari 0,05.

KESIMPULANBerdasarkan praktikum yang telah

dilakukan, Simvastatin dan Gemfibrozil memiliki efek hipolipidemik yang kurang baik bila dibandingkan dengan kontrol negatif PTU. Hasil analisis data menggunakan ANOVA

Single Factor menunjukkan bahwa data tidak signifikan sebab F crit > F dan P > 0,05.

DAFTAR PUSTAKA1. Murray, R. K., Granner D. K., Rodwell V.

W. 2006. Harper’s Illustrated Biochemistry, 27th Edition. New York: McGraw-Hill.

2. Ganiswarna, Sulistila G dkk. 1995. Farmakologi dan Terapi Edisi 4. Percetakan Gaya Baru. Jakarta.

3. Agoes, Azwar. 1995. Farmakologi Ulasan Bergambar Edisi 2. Jakarta.