biolistik
TRANSCRIPT
Biolistik
Biolistic?
• Membombardir tanaman dengan logam mikrospik, yaitu sejenis manik-manik yang dilapisi oleh DNA
• Teknik transfer gen yang digunakan untuk memaksa DNA asing masuk ke dalam tanaman. Pemasukkan ini dilakukan dengan menjadikan
• Dengan cara ini, DNA "peluru"semacam akan menembus dinding sel tumbuhan, dan DNA yang akan menjadidisajikan dalam sel tanaman. Debit haruscukup kuat agar manik-manik dapat menembus sel-sel tumbuhan, tetapi tidak begitu kuat untuk memerciki sampel di seluruh ruangan.
• Senjata gen modern saat ini mempercepat penempelan manik-manik logam yang sudah dilapisi oleh DNA dengan pelepasan gas helium dan memberikan tekanan.
• Umumnya, DNA akan melepaskan diri setelah ditembakkan, berpindah ke selinti, dan terintegrasi ke dalam DNA tanaman.
• Biolistic mendapatkan hasil yang sama dengan transfer gen Agrobacterium, tetapi tanpa menggunakan bakteri hidup.
• Akan tetapi, seperti dalam kasus Agrobacterium, jaringan tanaman harus diregenerasi menjadi tanaman subur.
• Bila gen asing yang digunakan dalam percobaan ini bukan berasal dari tanaman. Mereka harus dilengkapi dengan promotor dan terminator yang berfungsi pada tanaman.
• Sebuah promotor yang umum digunakan adalah berasal dari virus mosaik kembang kol (CaMV), virus yang menginfeksi kembang kol, brokoli, dan anggota lain dari keluarga kubis.
• Sebuah Terminator yang umum digunakan adalah “Nos Terminator“, terminator untuk gen hormon tanaman yang ditemukan di Agrobacterium Ti plasmid.
• Potongan Khusus DNA ini dipotong dan disatukan menggunakan Teknik Rekombinan DNA yang dijelaskan pada bab 5.