jurnal translate ayam kuning telur antibodi
Post on 08-Feb-2018
235 Views
Preview:
TRANSCRIPT
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
1/34
Ayam Kuning Telur Antibodi (IgY-teknologi): Sebuah Tinjauan Kemajuan di bidang
Produksi dan Penggunaan dalam Penelitian dan Manusia dan Kedokteran Hewan
Rdiger Schade,1 Esteban Gutierrez Calzado,2 Rodolfo Sarmiento,3 Pablo Anibal Chacana,4Joanna Porankiewicz-Asplund5 and Horacio Raul Terzolo41Institute of Pharmacology and Toxicology, Medical Faculty (Charit) of Humboldt University, Berlin,Germany; 2LABEX, Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales, Santiago de Cuba,Cuba;3Laboratorio Provincial de Criminalstica, Santiago de Cuba, Cuba; 4Instituto Nacional de Tecnologa
Agropecuaria (INTA), Balcarce, Argentina; 5AgriSera AB, Vnns, Sweden
Ringkasan - Produksi antibodi (Abs) pada ayam dan ekstraksi Abs tertentu dari telur yolk
(IgY Abs) semakin menarik minat masyarakat ilmiah, seperti yang ditunjukkan oleh
pertumbuhan yang signifikan dari literatur IgY. Ulasan ini menawarkan informasi rinci dan
komprehensif tentang IgY-teknologi, termasuk: a) kemungkinan menjaga hen sesuai dengan
prinsip Tiga Rs; b) wawasan baru ke dalam mekanisme transfer IgY dari darah ke kuning
sebagai dasar biologis untuk teknologi ; c ) karakteristik komparatif IgY dan IgG Abs Abs; d)efektivitas tinggi teknik, dalam pandangan jumlah yang luar biasa dari IgY Ab dihasilkan
oleh satu ayam dalam satu tahun (antara 20g dan 40g IgY total); kemungkinan baru untuk
aplikasi dalam bidang kedokteran manusia dan hewan, termasuk strategi untuk pengobatan
infeksi Helicobacter pylori atau penyakit usus fatal pada anak-anak, terutama di negara-
negara miskin, untuk mengurangi penggunaan antibioti , dan di Asia dan Amerika Selatan,
untuk memproduksi Abs terhadap ular, laba-laba dan racun kalajengking; e) protokol
imunisasi, serta prosedur yang paling umum digunakan IgY - ekstraksi; f) perbandingan
antara khasiat IgY dan IgG Abs Abs (kelinci, domba, tikus) di beberapa tes imunologi; dan g)
penggunaan IgY Abs di berbagai bidang penelitian, juga mempertimbangkan perkembangan
terakhir di Amerika Selatan (terutama Argentina dan Kuba) dan di Asia.
Key words: chicken antibody, IgY production, IgY prophylaxis, IgY-technology, IgY therapy, refinementalternative, replacement alternative.Address for correspondence: R. Schade, Institute of Pharmacology and Toxicology, Medical Faculty(Charit) of Humboldt University, Dorotheenstrasse 94, 10117 Berlin, Germany.E-mail:ruediger.schade@charite.de
Pengantar
Pada tahun 1893 , Klemperer ( 1 ) pertama kali dijelaskan percobaan di mana ia
menunjukkan bahwa imunisasi ayam menyebabkan transfer antibodi spesifik (Abs) ke dalam
kuning telur ( lihat Tabel 1 ). Untuk waktu yang lama ada tidak ada aplikasi ilmiah untuk
pengetahuan ini , tetapi ketika kesejahteraan hewan menjadi masalah serius etis kepedulian
terhadap komunitas ilmiah, hasil dari Klemperer memperoleh bunga. Secara khusus, ini
pembangunan yang digagas oleh karya Russell & Burch dan publikasi pada tahun 1959 dari
The Principles Teknik Humane Eksperimental ( 2 ). Dalam berikutnya 20 tahun, semakin
banyak peneliti yang diakui pentingnya hasil Klemperer itu. Karena tahun 1980-an, antibodi
kuning telur ( IgY Abs ) telah ditemukan aplikasi yang lebih luas, mungkin karena
ketersediaan reagen sekunder komersial seperti IgY - pemurnian kit , IgY - standar dan
berlabel Abs ( seperti alkali fosfatase , fluorescein isothiocyanate dan peroksidase )
khususnya terhadap IgY . Sejak tahun 1996 , IgYtechnology ( diperkenalkan oleh Dr ClausStaak pada tahun 1995 ) telah menjadi istilah yang diterima secara internasional untuk
mailto:ruediger.schade@charite.demailto:ruediger.schade@charite.demailto:ruediger.schade@charite.demailto:ruediger.schade@charite.de -
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
2/34
menggambarkan produksi dan penggunaan IgY Ab ( 3 ) . di 1996 , Pusat Eropa untuk
Validasi Metode Alternatif (ECVAM) lokakarya direkomendasikan penggunaan IgY bukan
mamalia IgG, di untuk meminimalkan rasa sakit yang disebabkan oleh invasif Ab sampel ( 4
). Workshop ini juga memberikan informasi aspek praktis tentang membesarkan ayam
petelur, imunisasi ayam, penggunaan adjuvant, dan metode ekstraksi IgY . Pada tahun 1999,IgY teknologi disetujui sebagai metode alternatif untuk mendukung kesejahteraan hewan
oleh Kantor Hewan Pemerintah Swiss ( Kantor VETERINAIRE fEDERAL ; 5 ) . Sementara
itu , berbagai publikasi telah melaporkan pada banyak aspek IgY teknologi ( misalnya,
memelihara ayam , IgY -transfer, IgY - pemurnian , dan penggunaan IgY dalam diagnosis ,
Terapi dan profilaksis )
hewan Keeping
Kondisi untuk menjaga ayam berbeda sesuai dengan apa yang mungkin, misalnya, di
bawah komersial kondisi atau di laboratorium. Namun, mereka harus memungkinkan hewan
untuk mempertahankan setidaknya minimum perilaku spesies khas. Saat ini, ada banyak
rekomendasi untuk menjaga ayam ( 6-10 ) , dan menjaga mereka di tanah atau di kandang
tergantung pada ketersediaan ruang atau pada kebutuhan untuk telur individual catatan.
Kedua kondisi pemeliharaan ini memiliki kelebihan dan kekurangan, tentang kebersihan,
identifikasi telur, gangguan perilaku (misalnya, bulu memilih) dan perawatan hewan (untuk
review, lihat 8) . Ada hubungan timbal balik yang ditandai antara sifat pemeliharaan kondisi (
ayam berjalan bebas > menjaga pada tanah > keeping di kandang ) dan kemungkinan
memantau keadaan kebersihan ayam. Dalam kondisi laboratorium standar, penggunaan dari
unit kandang yang dirancang khusus untuk menjaga ayam direkomendasikan ( 11 ). Di Eropa,
Unit biasanya terdiri dari empat kandang yang terpisah , masing-masing satu dilengkapidengan sarang peletakan dan bertengger. untuk menghindari bulu picking, ayam dapat
diberikan jerami bundel, dan mereka dipasok dengan gandum gandum dan shell - grit selain
makanan standar mereka, di Untuk memperkaya lingkungan. Erhard et al. ( 12 )
dibandingkan rata-rata IgY titer dan rata-rata konsentrasi IgY ayam yang diimunisasi
disimpan di kandang atau di tanah . Hasil ini Penelitian jelas menunjukkan bahwa kedua titer
Ab dan IgY konsentrasi lebih tinggi pada ayam disimpan di kandang. Saat ini , ada diskusi
tentang keuntungan menggunakan ayam disimpan di bawah patogen tertentu kondisi bebas (
ayam SPF ) dibandingkan dengan konvensional terus ayam . Hommel & Behn ( 13 )
menunjukkan bahwa skema imunisasi identik dilakukan dalam dua kelompok ayam LeghornPutih , salah satu disimpan di bawah kondisi SPF dan yang lainnya di bawah kondisi
konvensional , mengakibatkan sebanding Ab titer pada kedua kelompok . perbedaan
signifikan ditemukan dalam konsentrasi total protein kuning telur dan rasio IgY spesifik
terhadap total IgY . di ini, tidak ada cukup data untuk meyakinkan menunjukkan superioritas
satu syarat menjaga , sejauh titer Ab atau IgY - konsentrasi tertentu prihatin ( 14 ) .
The Humoral Immune System of Birds
Prinsip diversifikasi Ab-kekhususan Dalam kerajaan hewan, berbagai mekanisme
memiliki telah dikembangkan untuk melindungi organisme dari menyerang mikroorganisme,zat asing dan ganas sel. Sistem pertahanan tersebut meliputi dua bagian pada vertebrata: satu
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
3/34
adalah bawaan (non-adaptif), tetapi non-spesifik, sedangkan sistem lainnya diperoleh
(adaptif) dan spesifik. Sistem kekebalan tubuh yang diperoleh dibagi menjadi cabang selular
(T dan B limfosit ) dan cabang humoral . itu sistem kekebalan tubuh ayam terdiri dari
primary organ ( bursa Fabricius dan timus ) dan sekunder organ ( limpa , kelenjar Harderian ,
getah bening node , sumsum tulang , dan jaringan limfoid dari pencernaan yang saluran ) .Tulang sumsum adalah sumber thymus dan bursal sel induk . The bursa dari Fabricius adalah
situs diferensiasi sel induk ke - sel B , sedangkan timus adalah situs diferensiasi dari sel induk
menjadi sel-T ( 15-17 ) . itu limpa adalah organ untuk proliferasi sel plasma dan dimana B -
sel memori terletak ( 17 ) . Tiga kelas imunoglobulin , analog dengan imunoglobulin mamalia
IgA , IgM dan IgG , ditemukan pada burung . Secara historis , IgY , yang molekul rendah
berat kelas Ig hadir dalam serum unggas dan telur kuning juga disebut IgG , karena fungsi
dan konsentrasi dibandingkan dengan IgG mamalia, termasuk keterlibatannya dalam
kekebalan sekunder tanggapan. Namun, hal itu telah menjadi jelas bahwa ini adalah tidak
pantas , terutama karena fundamental perbedaan struktural antara IgG dan IgY molekul ,
yang akan dibahas di bawah . Ayam IgA dan IgM menyerupai mamalia IgA dan IgM berat
molekul ( MW ) , struktur dan mobilitas elektroforesis ( 15 ) . Urutan DNA gen coding IgY
lebih mirip dengan gen untuk mamalia IgE dibandingkan dengan IgG ( 18 ). Hasil lain
menunjukkan kesamaan dengan mamalia IgA ( 19 ) . Dengan demikian , dapat mendalilkan
bahwa IgY adalah nenek moyang filogenetik mamalia IgE , IgA dan IgG , sebuah teori yang
didukung oleh fakta bahwa IgY , di Berbeda dengan IgG , dapat memediasi reaksi anafilaksis
( 15 ) . Secara teoritis , ada 106-108 Abspecificities berbeda pada mamalia ( 17 ) . Karena
tidak layak bahwa setiap Ab - spesies dikodekan oleh satu gen , lainnya mekanisme telah
berevolusi untuk menyediakan keragaman Ab ini, tapi mekanisme yang terlibat berbeda
dalam mamalia ( misalnya , mouse ) dan burung ( untuk Misalnya , ayam ) . Tiga mekanismedasar menghasilkan keragaman Abs ( 20 , 21 ) : penataan ulang gen spesifik rekombinasi ;
konversi gen - non - timbal balik rekombinasi homolog , dimana modifikasi dalam gen
akseptor disalin dari homolog a urutan donor ( modifikasi templated ) ; dan mutasi somatik -
tunggal ( atau ganda ) nukleotida substitusi yang tidak berasal dari yang sudah ada
sebelumnya urutan ( modifikasi untemplated ).Pada mamalia , keragaman Ab terutama
dihasilkan oleh penataan berbagai segmen gen untuk menghasilkanbagian hypervariable
antibodi, dan Selain itu, dengan mutasi somatik . Dengan cara ini, produksi jutaan Ab
kekhususan mungkin ( Gambar 1 ). Pada ayam, keragaman Ab terutama dicapai dengan
konversi gen, oleh VJ fleksibel bergabung, dan juga oleh somatik mutasi titik , seperti pada
mamalia ( 22-25 ). Berbeda dengan mamalia, pada ayam ada hanya satu fungsional VH atau
VL gen , tetapi di samping ada sekitar 25 disebut pseudo- V gen , yang tidak memiliki
transkripsi biasa regulasi dan urutan sinyal - pengakuan. dari ini gen pseudo- V , 10 sampai
lebih dari 120 pasang basa yang ditransfer ke gen V fungsional . proses ini dimulai sekitar
15-17 hari setelah belum dewasa B-sel bermigrasi ke bursa Fabricius ke menjadi sel- B yang
kompeten matang.
Struktur molekul IgY ayam
Struktur umum dari molekul IgY, terdiri dari dua ringan dan dua rantai berat ,
sebanding dengan imunoglobulin mamalia . itu rantai berat ditandai dengan huruf Yunani Y
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
4/34
atau , dan berisi satu domain variabel dan empat konstanta domain , berbeda dengan tiga
domain konstan dari rantai berat IgG . The MW IgY ditemukan dengan spektrometri massa
menjadi 167.250 Da ( yang dari IgG adalah sekitar 160.000 Da ; 26 ) . Poliakrilamida gel
elektroforesis memberikan hasil yang agak berbeda ( 27 ). Rantai cahaya terdiri dari satu
variabel dan satu konstan domain ( MW , 18.660 Da ) , rantai berat memiliki UM sebesar65.105 Da , dan Fab fragmen memiliki MW 45.359 Da . Ada beberapa homologi antara C3
dan C4 domain dan C2 dan C3 domain dari mamalia IgG, sedangkan domain adalah C2
diyakini mewakili daerah sendi IgG dan apalagi dikembangkan di IgY (28). The kurang
berkembang daerah sendi dari IgY dapat mengakibatkan fleksibilitas berkurang dari bagian
Fab, yang, pada gilirannya, mungkin Alasan beberapa perbedaan antara IgY dan IgG tentang
pengakuan antigen epitop (lihat juga 18, 29, 30).
Adapun IgG, Fc bagian dari IgY adalah situs yang paling fungsi efektor biologis. Ini
berisi dua karbohidrat rantai samping, dalam berbeda dengan hanya satu di IgG (lihat Gambar
2).
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
5/34
Transfer ke IgY kuning telur
Menurut Rose et al. (31), jumlah kecil IgA dan IgM akan ditransfer ke putih telur dari sel
plasma saluran telur. Losch et al. (32, 33) dikonfirmasi hasil ini. Berbeda dengan temuan ini,
Yamamoto et al. (34) menunjukkan substansial jumlah IgM dan IgA dalam kuning telur dan
IgY putih telur. Data terbaru menunjukkan bahwa IgY secara eksklusif ditransfer ke kuning
telur oleh reseptor-dimediasi proses (35, 36). Jumlah IgY ditransfer adalah berhubungan
dengan konsentrasi serum IgY , dan Tampaknya semua populasi IgY ditransfer ( 36 ) .
Mohammed et al . ( 35 ) dan Morrison et al. ( 36 ) menunjukkan bahwa Fc bagian
utuh dan engsel wilayah yang keduanya penting untuk mencapai transfer IgY dari serum kekuning telur . Karbohidrat Fc terkait rantai samping tidak minat khusus dalam hal ini konteks.
Rupanya , dua daerah yang khusus dari pentingnya , pada antarmuka antara C2 dan C3 ,
residu 251-254 ( Leu - Tyr - Ile - Ser [ LYIS ] ) , dan pada posisi 429-432 dalam C3 ( His-
Glu - Ala Leu [ MENYEMBUHKAN ] ) . Semua imunoglobulin diangkut ke kuning
memiliki MENYEMBUHKAN urutan . Mereka menemukan bahwa murine IgG2b , dengan
HEGL urutan ( His- Glu - Gly- Leu ) , dan IgA ayam , dengan urutan HDGI ( His- Asp - Gly
- Ile ) , tidak diangkut ke kuning telur . Sebaliknya, IgA manusia memiliki urutan HEAL .
Bagian transovarial dari IgY berlangsung sekitar lima hari ( 35 ) . Waktu paruh dari
beredar IgY dari ayam dewasa adalah sekitar 36-65 jam ( 37 ) . Ini jauh lebih pendek dariparuh IgG domba , yaitu sekitar 15 hari ( 38 ) . Menurut berbagai penulis , serum spesifik
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
6/34
Abs diangkut ke kuning telur dengan penundaan sekitar 5-6 hari ( 37 ) atau 3-4 hari ( 38 ) .
yang tepat " Lag " kurva mungkin tergantung pada jumlah telur menjalani pemrosesan akhir
mereka , selama yang IgY ditransfer ke kuning telur bersama-sama dengan protein yang
dipilih lainnya ( 37 ) . Jumlah IgY ditransfer tampaknya terlepas dari ukuran telur ( 39 ,40 ) .
Tergantung pada tes yang digunakan dan kepekaan mereka, total konsentrasi IgY
diperkirakan 100 - 200mg per telur . Ada kontroversi mengenai IgY kuning dan konsentrasi
IgY serum. Beberapa penulis melaporkan tidak ada perbedaan antara mereka , sedangkan
yang lain terdeteksi konsentrasi IgY lebih tinggi dalam kuning telur ( misalnya , 1,23 kali
lebih kuning daripada dalam serum ; 38 ) . kuning telur Konsentrasi IgY bervariasi secara
signifikan antara individu-individu ( misalnya , 3-7mg/ml , 41 ) dan genetik garis atau
keturunan ( misalnya , Single Comb Putih Leghorn 2,2 0,4 mg / ml , SLU - 1329 2,0 0,5
mg / ml , Rhode Island Red 1,7 0,5 mg / ml ; 42 , 43 ). Menurut temuan kami , IgY
memiliki signifikan biorhythm , tampaknya dalam kisaran septadian ( Gambar 3 , 44 ) .
Parameter fisika ayam IgY
Titik isoelektrik ( pI ) dari IgY adalah di kisaran 5,7 7,6 , sedangkan untuk IgG
terletak di antara 6,1 dan 8,5 ( 45 , 26 ) . The bagian paling hidrofobik dari Ab molekul
adalah fragmen Fc . Karena fragmen Fc dari IgY lebih besar dibandingkan dengan IgG , yang
IgY molekul yang lebih hidrofobik dibandingkan IgG . Sudah menunjukkan bahwa properti
ini mungkin berguna untuk mencapai adsorpsi stabil IgY ke partikel lateks ( 45 ) .
Selanjutnya , itu bisa menunjukkan bahwa , istimewa pada pH 8 , Fc bagian dari IgY tegas
terikat pada partikel lateks ( 46 ) , maka IgY dilapisi terhadap lateks mikrosfer
mempertahankan spesifik mengikat aktivitas .
Suhu dan stabilitas pH IgY
Penggunaan oral IgY Abs sebagai komponen fungsional makanan membuat perlu
untuk menyelidiki stabilitas IgY dalam kaitannya dengan pH, serta molekul ketahanan
terhadap pembelahan proteolitik dalam kondisi bertemu selama perjalanan melalui perut dan
usus kecil. Stabilitas panas juga penting, karena suhu 70-90 C diperlukan untuk produksi
telur bubuk.
Menurut Shimizu et al. (28), IgY lebih sensitif dari kelinci IgG denaturasi asam, dan
lebih cepat kehilangan aktivitasnya antara pH 3 dan pH 4. Hasil yang sama disajikan oleh Lee
et al. (47), Hatta et al. (48) dan Losch et al. (33). penambahan dari 50% sorbitol bisa hampir
sepenuhnya menekan acid-induced inaktivasi IgY pada pH 3 (47).
Schmidt et al. (49) dan Hatta et al. (50), yang diteliti pembelahan peptikum dari IgY,
menemukan bahwa ada kerugian tinggi IgY spesifik aktivitas selama perjalanan melalui perut
dan karena kegiatan protease pankreas, tripsin dan chymotrypsin. Penambahan basa (natrium
bikarbonat) atau protein yang kaya (putih telur, telur kuning) solusi sangat meningkatkan
resistensi IgY terhadap inaktivasi asam atau proteolitik. menurut Shimizu et al. (28) dan
Reilly et al. (51), IgY kurang tahan dari IgG sapi untuk pepsin pencernaan, tetapi lebih tahan
terhadap aktivitas tripsin dan chymotrypsin (lihat juga, 48).
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
7/34
Jaradat & Marquardt (52) menunjukkan panas stabilitas IgY hingga 60 C, yang
dapat ditingkatkan 70 C dengan penambahan gula, seperti 30% sukrosa, trehalosa atau
laktosa, atau kuning telur. Menurut ke Shimizu et al. (28) dan Hatta et al. (48), IgY adalah
stabil pada suhu berkisar antara 60 C dan 70 C. Losch et al. (33) mampu menunjukkan itu,
setelah memasak telur dalam air mendidih (100 C) untuk 6 menit, konsentrasi IgY tidak
menurun. Sekarang mungkin untuk merancang formulasi khusus IgY untuk menghindari
IgY-kerugian yang disebabkan oleh pH rendah, yang memastikan rilis Ab hanya pada situs
yang diinginkan tindakan (53).
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
8/34
Imunisasi dari Chicken
Catatan Umum
Pengembangan antibodi dan produksi sebagai akibat dari imunisasi tidak sangat dapat
diprediksi . Setidaknya empat variabel mempengaruhi respon imun dari diimunisasi ayam :
antigen ( dosis , MW ) , yang jenis adjuvant yang digunakan , rute aplikasi , dan ayam itu
sendiri ( seperti kondisi penyimpanan , usia , berkembang biak , berpengaruh pada kapasitas
bertelur ) . rekomendasi pada imunisasi ayam diberikan dalam Tabel 2 .
dosis antigen
Antigen dosis yang digunakan untuk imunisasi dapat secara signifikan mempengaruhi
respon imun yang dihasilkan dan Ab titer . Behn et al . ( 54 ) mencapai hasil yang lebih baik
ketika menyuntikkan 0,1 mg IgG mouse, bukan 1.0mg . Schwarzkof et al . penyelidikan rinci
dilakukan pada pengaruh terhadap titer Ab yang dihasilkan struktur antigen ( MW rendah
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
9/34
atau tinggi ) dan konsentrasi , dan penggunaan adjuvant ( 55 ) . hasil yang baik dicapai
dengan konsentrasi antigen mulai antara 10g dan 1 mg , dan ini juga melaporkan oleh
peneliti lain ( 56 ) .
Penelitian serupa telah dilakukan oleh Larssonet al . ( 57 ) , yang diimunisasi
kelompok tiga ayam dengan 100g , 10g , 1g atau 0.1g serum bovinealbumin ( BSA )
atau insulin manusia , dengan awal imunisasi diikuti oleh tiga suntikan penguat diberikan
dengan interval dua minggu . Tidak ada yang signifikan perbedaan antara penggunaan 100g,
10g atau 1g BSA sejauh plasma atau kuning Ab titer yang bersangkutan . Anehnya ,
respons yang diterima juga diamati pada satu ayam ketika hanya 0.1g BSA per injeksi
digunakan . Imunisasi dengan insulin manusia tidak menimbulkan perbedaan yang signifikan
ntara ayam diimunisasi dengan baik 100g atau 10g antigen , dan tidak ada respon adalah
terdeteksi ketika 1g diberikan .
Rodolfo Sarmiento ( hasil yang tidak dipublikasikan ) ditemukan bahwa injeksi 5mg
atau albumin manusia 2,5 mg mengakibatkan penindasan perkembangan titer Ab , berbeda
dengan tanggapan yang baik yang menimbulkan albumin saat itu diadministrasikan pada
konsentrasi 1mg atau 0.5mg ( Gambar 4 ) .
Untuk setiap antigen , dosis optimal yang diperlukan untuk imunisasi yang berhasil
harus diuji secara eksperimental. Sebagai aturan praktis , antigen yang lebih kecil seperti
sebagai peptida ( MW bawah 10kDa ) harus dibarengi dengan operator ( misalnya , albumin
serum bovine atau lubang kunci lympet haemocyanin ) .
Penggunaan adjuvant
Produksi Abs poliklonal difasilitasi oleh penggunaan modulator yang merangsang sel
- B ( yaitu adjuvant ) . Meskipun stimulasi ini adalah independen antigen dan karena itu non -
spesifik, meningkatkan besarnya respon imun . Namun, imunisasi ayam tanpa menggunakan
adjuvant apapun juga menghasilkan titer Ab diterima ( 58 ) . Ada banyak adjuvant , yang
berbeda dalam karakteristik kimia mereka, keberhasilan mereka dalam merangsang sistem
kekebalan tubuh , dan sekunder efek samping pada ayam diinokulasi (untuk review, lihat 59).
Menurut pengalaman kami , Adjuvant lengkap Freund ( FCA ) tetap adjuvant yang paling
efektif , tetapi, sayangnya, ini keuntungan terkait dengan potensi yang merusak jaringan nya.
Adjuvant lengkap Freund ( FIA ) kurang efisiensis dari FCA, namun hasil lebih rendah efeksamping bila dicampur dengan hati-hati untuk menghasilkan koloid yang tepat emulsi. Satu
sering dikutip referensi menunjukkan bahwa ayam menunjukkan ketahanan yang lebih tinggi
untuk jaringan potensi merusak daripada kelinci (60), tetapi ada Data yang bertentangan
dengan temuan ini (59, 61). Penelitian di masa depan harus fokus pada pencarian adjuvant
baru, yang menunjukkan kemanjuran tinggi yang sama sebagai FCA, tetapi tidak
menyebabkan efek samping yang serius dalam burung (61-63).
Mode aplikasi antigen
Rute yang paling umum untuk injeksi antigen dalam ayam adalah intramuskular (i.m.)
rute. Luas Studi oleh Schwarzkopf et al. (55) dibandingkan imunisasi menurut i.m. yang atau
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
10/34
subkutan yang (s.c.) rute. Hal ini dapat menunjukkan bahwa s.c. antigen injeksi memicu Ab
titer lebih tinggi daripada injeksi melalui i.m. yang rute. intravena The rute (iv) hanya boleh
digunakan tanpa adjuvant (58). Menurut pengalaman kami, kombinasi dari i.m. suntikan
antigen dengan i.v. akhir injeksi, sering secara signifikan meningkatkan Ab titer (Gambar 4).
Namun, i.v. injection (tanpa adjuvant) harus dilakukan sangat lambat (sekitar 500l lebih dari15 menit) untuk menghindari anafilaksis reaksi. Antigen inokulasi melalui intraperitoneal
(i.p.) rute yang digunakan oleh Klemperer pada tahun 1893 (1), tapi hari ini agak tidak biasa
(lihat 33).
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
11/34
Juga, dalam penyelidikan baru-baru ini ( 64 ) , itu menunjukkan bahwa imunisasi oral
mungkin.Pada hari 1 , 14 dan 33 dari imunisasi protokol , dua ayam per kelompok diberikan
secara oral 100g IgG manusia , bersama-sama dengan berbagai adjuvant ( Toksin kolera B -
subunit , dimetil dioctadecyl amonium bromida atau Softigen ) dilakukan pada poli ( D , L
- laktida - co - glycolide ) mikrosfer . Signifikan titer Ab diprovokasi dengan menggunakanSoftigen dan Toksin kolera B - subunit , tetapi ini titer yang jauh lebih rendah
dibandingkan di i.m. diinokulasi ayam . Klipper et al . ( 65 , 66 ) menunjukkan titer Ab
signifikan terhadap antigen protein ( misalnya , BSA ) dalam serum dan empedu Ayam 2 -
minggu-tua setelah berulang pemberian oral . Scwarzkopf et al . ( 55 ) telah menerbitkan
hasil dari sebuah penelitian komprehensif yang dibandingkan dengan titer Ab spesifik setelah
suntikan yang sama antigen melalui i.m. , s.c. atau i.v. rute , mengingat baik secara terpisah
atau dikombinasikan , dan dengan atau tanpa penambahan berbagai adjuvant .
Interval antara imunisasi
Keberhasilan imunisasi tergantung pada beberapa variabel , termasuk interval antara
pertama dan kedua dan selanjutnya imunisasi . Banyak protokol imunisasi yang tersedia,
dengan rekomendasi termasuk inokulasi pada hari 0 , 14 dan 28 ( 67 , 68 ) atau seminggu
sekali selama 7 berturut-turut minggu ( 69 ) . Beberapa penulis mengimunisasi ayam pada
interval 10 hari ( 70-72 ) , tetapi secara umum rekomendasi menyatakan bahwa interval
antara suntikan antigen pertama dan kedua harus minimal 4 minggu . Hal ini mencerminkan
imunologi memori , yang harus diberi waktu untuk mengembangkan ( 17 ) . Messerschmid et
al . ( 73 ) juga mendukung konsep ini , dan ayam diimunisasi pada hari ke 0 , minggu 10 dan
15 minggu , dan mencapai titer yang sangat tinggi di kisaran 1:160,000 . Hlinak et al . ( 74 )
dan Schwarzkopf et al . ( 55 ) melaporkan hasil yang sama , dan merekomendasikanpenerapan dorongan terlambat. Pichler ( 75 ) menunjukkan secara signifikan lebih tinggi Ab
titer dengan memperpanjang interval dorongan dari 14 sampai 42 hari . Ada bukti bahwa
aplikasi imunisasi sering dalam jangka waktu yang singkat hasil waktu dalam depresi ,
daripada aktivasi ,dari respon imun ( 69 ) .
Pengaruh imunisasi pada peletakan telur kapasitas
Menurut pengamatan kami sendiri dan pengalaman beberapa kelompok penelitian
lain, peletakan yang kinerja ayam biasanya hanya sedikit dipengaruhi oleh injeksi antigen
sederhana ( 8 , 76 , 77 ) , tetapi meletakkan kapasitas dapat menurunkan , tergantung padajenis antigen disuntikkan . Sebagai contoh, Schade et al. (77 ) dan Schniering et al . ( 77 , 78 )
ayam diimunisasi dengan solusi yang mengandung antigen ( somatik , secretoric - excretoric )
dari parasit usus ( Ascaris suum ) . Peletakan ayam disuntik berkurang atau benar-benar
berhenti sampai 3 minggu , mungkin karena zat beracun yang berasal dari parasit usus .
Selain itu, pengaruh FCA dan FIA pada meletakkan kapasitas telah diteliti oleh beberapa
kelompok penelitian . Ditemukan bahwa penggunaan FCA menyebabkan depresi yang
signifikan dalam frekuensi bertelur di SPF Rhode Island ayam merah ( 79 ) , tetapi hanya
memiliki efek yang kecil dan sementara ( 76 ) , atau bahkan gagal untuk mempengaruhi
secara signifikan , bertelur di Putih Leghorn ayam ( 8 ) . Perbedaan antara hasil ini mungkindisebabkan oleh perbedaan dalam kondisi eksperimental .
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
12/34
Pengembangan titer IgY Ab
Setelah imunisasi mamalia , seperti kelinci , sistim imun primer respon , diikuti oleh
respon sekunder yang ditimbulkan setelah menyuntikkan dosis kedua dari antigen yang sama
. Kedua fase memiliki karakteristik yang berbeda . Selama respon utama , terutama IgM Abs
adalah disintesis , dan hanya ada rendah dan sementara peningkatan titer Ab , sementara ,
selama sekunder respon , terutama IgG Abs ditemukan pada stabil , tinggi titer berlangsung
selama beberapa minggu .
Sebuah pola respons yang sama telah diamati pada ayam , meskipun ada beberapa
perbedaan . The IgY Abs muncul dalam serum ayam sekitar 4 hari setelah inokulasi antigen ,
mencapai titer maksimum pada hari 6 sampai 8 , dan penurunan setelahnya. The Ab titer
dapat meningkat tajam oleh imunisasi penguat . Tampaknya ada dua jalur yang berbeda
dalam kekebalan sekunder respon . Menurut hasil Patterson et al . ( 37 ) , beberapa ayam
merespon dengan Ab kinetika mirip dengan mamalia , sedangkan yang lain menanggapi
protokol imunisasi yang sama dengan peningkatan titer Ab setelah imunisasi pertama , tapi
gagal untuk membuat perubahan yang signifikan setelah kedua .
Yang paling sering diamati Ab titer kinetika pada ayam setelah imunisasi pertama
menunjukkan a peningkatan sementara di IgY pada tahap pertama , dan tahap kedua (
imunisasi penguat ) ditandai oleh peningkatan awal dalam titer Ab dalam waktu kurang lebih
10 hari , diikuti oleh dataran tinggi selama 10 hari lebih lanjut dan penurunan sesudahnya (
Gambar 3 ) . Perkembangan titer Ab mungkin merupakan konsekuensi dari relatif singkat
paruh IgY dibandingkan dengan IgG . di Sebaliknya, beberapa penulis telah menunjukkan
bahwa dengan titer Ab tetap tinggi dan stabil untuk beberapa minggu ( 7 , 13 , 48 , 54 ) .Sejauh ini, alasan untuk ini dua perbedaan dalam kinetika produksi Ab tetap tidak jelas .
Perbandingan Sifat Ayam IgY Antibodi dan Mamalia IgG Antibodi
Pengembangan titer Ab Tu et al . ( 68 ) dibandingkan Ab pengembangan titer pada
kelinci dan ayam diimunisasi pada minggu ke 0 , 2 , 4 dan 6 dengan bovine laktoferin .
Menggunakan ELISA , mereka bisa menunjukkan bahwa titer Ab setinggi 1,68 108 pada
kedua spesies pada minggu kedelapan setelah imunisasi awal . The Ab titer tetap lebih stabil
dalam ayam , untuk jangka waktu 16 minggu setelah imunisasi awal.
Clark et al . ( 80 ) menemukan bahwa , setelah imunisasi dengan ochratoxin A , titer
Ab dalam serum kelinci adalah sepuluh kali lipat lebih tinggi dibandingkan dalam serum
ayam . Pada ayam , titer Ab meningkat dalam 100 hari dan tetap stabil hingga 166 hari .
Woolley & Landon ( 38 ) mengamati hasil yang sama setelah mengimunisasi domba dan
ayam dengan interleukin manusia 6 ( IL - 6 ) . Selain itu, mereka mengamati bahwa enam
ayam mengembangkan respon imun " klasik " , ditandai dengan respons yang kuat untuk
kedua imunisasi . Sebaliknya , empat ayam lainnya mengembangkan respon kekebalan yang
kuat setelah yang pertama vaksinasi dan kemudian gagal untuk menanggapi kedua dosis .
Bollen et al . ( 81 , 82 ) juga membandingkan Ab titer pembangunan di kelinci dan ayam ,
dan menunjukkan titer yang lebih tinggi pada kelinci ( dengan faktor 1,5 sampai 2 ) ,
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
13/34
meskipun produktivitas Ab lebih tinggi pada ayam ( dengan faktor 5 sampai 10 ) . A Ab titer
stabil bisa dicapai pada kedua spesies untuk jangka waktu 50 minggu .
Hatta et al . ( 48 ) dibandingkan pengembangan titer Ab pada kelinci dan ayam
diimunisasi terhadap manusia rotavirus ( Wa regangan, serotipe 1 , dan Mo regangan ,
serotipe 3 ) . Kelinci menghasilkan netralisasi antiWa titer 1:27,000 dan titer anti - Mo dari
1:4000 , berbeda dengan ayam , yang menghasilkan anti - Wa titer 1:13,000 dan titer anti -
Mo dari 1:15.000 . Netralisasi titer tetap terus-menerus tinggi pada ayam selama 50 minggu .
Selain itu , produktivitas Ab keseluruhan adalah 15 kali (anti - Wa) dan 120 kali (anti - Mo)
lebih efektif dalam ayam dari pada kelinci .
Reddy et al . ( 83 ) diproduksi Abs pada ayam ( serum Abs ) dan tikus terhadap
reovirus burung (strain S1133 ). The ELISA Ab titer yang dihasilkan oleh ayam ( 1:131,072 )
adalah 15 kali lebih tinggi setelah ketiga imunisasi dari yang diperoleh pada tikus ( 1:8192 ) .
Ab aviditas
Ada sejumlah laporan dalam literatur yang menunjukkan bahwa , pada prinsipnya ,
tidak ada yang signifikan perbedaan antara avidities ( 81 , 38 ) dan afinitas ( 84 ) dari IgY dan
IgG kelinci .
Sensitivitas dan spesifisitas Ab
Ohnishi et al . ( 70 ) mengembangkan ELISA untuk deteksi faktor pertumbuhan
hepatosit atau faktor pencar ( HGF atau SF ) dalam serum manusia dan urin dan
dibandingkan Abs tertentu dari ayam dan kelinci . Batas deteksi dalam kelinci Ab assayadalah 2pg/ml , berbeda dengan 20pg/ml di ayam assay . Mengikat non - spesifik lebih
rendah pada assay ayam Ab daripada di kelinci Ab assay . itu batas deteksi untuk HGF
tersedia secara komersial sistem uji hanya 100pg/ml .
Di Lonardo et al . ( 85 ) diproduksi Abs terhadap E7 onkoprotein HPV tipe 16 (
HPV16 ) pada kelinci dan ayam . Pemetaan epitop dengan delapan HPV16E7 peptida
mengungkapkan bahwa Abs ayam bereaksi dengan semua delapan peptida , sedangkan Abs
kelinci diakui hanya dua epitop . Dalam tes imunohistokimia , ayam Abs yang sangat efektif ,
berbeda dengan kelinci Abs , yang gagal memberikan hasil dengan teknik ini . Dalam studi
ini , Abs ayam yang jelas lebih unggul untuk kelinci Abs dalam hal pengakuan epitop dankeberhasilan dalam studi imunohistokimia .
Kami juga telah membandingkan sensitivitas dan kekhususan ayam dan kelinci Abs
diarahkan terhadap beberapa cholecystokinin ( CCK ) derivatif ( 86 , 87 ) . Secara umum,
kelinci Abs memberikan sinyal yang baik dengan derivatif CCK lagi ( delapan asam amino )
,sedangkan ayam Abs juga diakui CCK pendek molekul ( 4-5 asam amino ) . The Abs kedua
spesies yang berguna dalam membangun sangat sensitif radioimmunoassay ( RIA ) untuk
kuantifikasi CCK - 8 (ayam IC50 Ab : 0,8 logfMol / mengeram ; IC50 kelinci Ab : 0,5
logfMol / mengeram ) . Anehnya , sensitivitas dari dua RIAs yang sebanding , sedangkan
pengenceran kerja yang berbeda dengan faktor 100 (kelinci Ab 1:100.000, ayam Ab 1:1000) .
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
14/34
Straumann - Kunz et al . ( 88 ) dibandingkan tikus monoclonal Abs ( mAbs )
diarahkan terhadap Klamidia dengan Abs ayam yang sesuai, dan menemukan bahwa , bila
menggunakan Abs ayam tes imunohistokimia , latar belakang adalah lebih rendah
dibandingkan dengan mAbs tikus .
Bauwens et al . ( 89 ) membandingkan sensitifitas ayam dan kelinci RIA untuk
kuantifikasi 1,2,5 - dihydroxyvitamin D dalam serum darah atau plasma . Batas deteksi untuk
RIA ayam 5pg/tube , dan bahwa untuk RIA kelinci adalah 2pg/tube .
Clark et al . ( 80 ) membandingkan batas deteksi kelinci dan ayam ELISA untuk
mengukur ochratoxin (a sangat beracun , metabolit sekunder jamur ) . Dengan uji kelinci ,
batas deteksi 3g/kg dapat dicapai , berbeda dengan 50g/kg dalam assay ayam . Dengan
mengoptimalkan ayam yang sama ELISA untuk mendeteksi mikotoksin lain ( Zearalenon ) ,
Pichler et al . ( 75 , 90 ) memperoleh batas deteksi 17g/kg . Clark et al . ( 80 ) diamati
tergantung pH - kekhususan ( spesifisitas rendah pada pH 6 ,spesifisitas yang lebih tinggi
pada pH 8 ) dan sensitivitas (maksimum pada pH 7 ) dengan ayam Abs . Maha et al . ( 91 )
membandingkan sensitivitas dari dua ayam Abs , empat tikus mAbs dan seekor kambing
komersial Ab , dengan spesifisitas terhadap troponin I. Dibandingkan dengan empat tikus
mAbs , kepekaan ayam Abs secara signifikan lebih tinggi . Ayam Abs yang tidak sensitif
seperti kambing sangat sensitif Ab diperoleh setelah screening Ab luas .
Cipolla et al . ( 92 ) diproduksi Abs terhadap Campylobacter janin dalam ayam dan
kelinci . kedua jenis Ab dievaluasi dengan menggunakan imunofluoresensi langsung di dua
laboratorium . Ini dapat dibuktikan bahwa baik Abs memiliki khasiat yang sebanding
mengenai spesifisitas dan sensitivitas , meskipun penggunaan ayam Ab menyebabkan sinyallatar belakang yang lebih rendah dari itu untuk kelinci Ab .
Menariknya , IgY spesifik agglutinates Salmonella dengan cara yang sama sebagai
antiserum kelinci . Terzolo et al . ( 93 ) menunjukkan bahwa anti - S . enteritidis IgY dapat
digunakan untuk secara khusus mengaglutinasi bakteri ( antigen somatik serta antigen
flagellar ) , dan bahwa reaksi ini sangat spesifik dan sebanding dengan standar kelinci
antiserum . Oleh karena itu, bisa ada kemungkinan di masa depan untuk mengganti kelinci
dengan ayam untuk produksi serum diagnostik untuk identifikasi Serovars Salmonella
menurut Kauffman - Skema Putih.
Al - Haddad et al . ( 94 ) menggunakan imunohistokimia untuk menunjukkan
kemanjuran ayam Ab diarahkan terhadap penanda tumor , psoriasin ( S100A7 ) . Ayam Ab
adalah sangat spesifik dan memiliki kinerja yang sangat baik dalam jaringan parafin-
embedded . Sebaliknya , anti - S100 kelinci komersial Ab kurang spesifik .
Knecht et al . ( 95 ) membandingkan khasiat dari ayam dan kelinci Abs ditujukan
terhadap peptida sesuai dengan dua sekuens asam amino dari tikus dan dihydroorotate
dehidrogenase manusia.
Para penulis menyimpulkan bahwa burung Ab bisa dianggap sebagai alternatif yang
unggul untuk mamalia Ab .
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
15/34
Pelosi et al . ( 71 ) berhasil digunakan ayam tertentu Abs untuk studi epidemiologi
mengenai kejadian Abs terhadap virus Norwalk-like ( genogroup 1 dan 2 ) pada populasi dari
Verona , Italia .
Hlinak et al . ( 96 ) yang dihasilkan ayam anti - Bordetella bronchiseptica Abs , dan
dibandingkan mereka khasiat dengan kedua ELISA dan dengan imunohistokimia . Hal ini
dapat menunjukkan bahwa ada tidak ada perbedaan dalam kekhususan atau sensitivitas .
Krief et al . ( 97 ) diimunisasi ayam dan tikus dengan - ketoalcohol (a menengah
kunci dalam sintesis asam chrysanthemic ) dan menemukan bahwa ayam yang dihasilkan Ab
diakui sangat khusus seluruh struktur hapten tersebut , termasuk side - chain . Mereka
menyimpulkan bahwa ayam Abs jelas mengenali antigen dengan cara yang berbeda dari tikus
Abs, dan bahwa ayam adalah berharga menggantikan mamalia untuk produksi Ab.
Baru-baru ini, Rodolfo Sarmiento (tidak dipublikasikan hasil) mengamati reaktivitas
silang rendah untuk albumin anti-manusia IgY Ab dengan sampel serum darah dari spesiesmamalia lainnya, dibandingkan dengan kambing mirip Ab.
Gerl et al. (98) membandingkan kekhususan dari dua ayam Abs, dua mAbs mouse
dan dua kelinci Abs dengan propeptide amino-terminal prokolagen sapi Jenis III (PIIINP),
yang merupakan penanda untuk proses fibrosis. Hal ini dapat menunjukkan bahwa hanya
ayam Abs mampu mengenali PIIINP di kedua tikus dan serum manusia.
Danielpour & Roberts (99) mengembangkan ELISA untuk kuantifikasi mengubah
faktor pertumbuhan 3 (TGF-3) dengan menggunakan mAb tikus ditujukan terhadap TGF-
sebagai capture Ab dan ayam Ab sebagai deteksi Ab. Pewarnaan ini dilakukan denganmenggunakan kambing AP-linked anti-ayam Ab. Assay ini dikonfirmasikan bahwa mereka
sangat spesifik dan sangat sensitif, dengan batas deteksi 2PG.
IgY Ekstraksi
Pemilihan metode pemurnian IgY yang cocok dipengaruhi oleh skala pemurnian (
laboratorium atau industri) , efektivitas biaya , teknologi , dan dampak terhadap lingkungan (
pengelolaan limbah ) . Berbagai metode ekstraksi IgY yang terakhir di detail oleh De
Meulenaer & Huyghebaert ( 100 , lihat juga 101-108 ) . Secara umum, metode ini dapat
dibagi menjadi tiga kelompok utama :
1. metode hujan: melibatkan amonium atau natrium sulfat (misalnya , 101 , 102 , 104 , 109),
polietilenglikol ( PEG , 110-112 , 113 ) , asam kaprilat ( 114 ) dan caragenean ( 115 ) .
2. metode kromatografi : kromatografi afinitas ( 68 , 116-119 ) , kromatografi pertukaran ion
( 120 ) , kromatografi interaksi hidrofobik ( 121 ) , kromatografi interaksi thiophylic ( 122 ) ,
dan kromatografi gel filtrasi ( 120 ) .
3. Ultrafiltrasi ( 123 ) . Kemurnian persiapan IgY dapat ditingkatkan oleh kombinasi ;
misalnya , PEG curah hujan dapat dikombinasikan dengan kromatografi afinitas .
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
16/34
Dalam beberapa kasus , tergantung pada aplikasi akhir , ekstrak air IgY cukup untuk
mencapai hasil yang baik ( 124 , 125 ) . Untuk mendapatkan ekstrak tersebut , kuning telur
yang dihomogenkan dengan penyangga atau air pada rasio 1:9 , dan beku selama kurang
lebih 24 jam , diikuti oleh pencairan lambat pada 4 C ( 120 ) . pencairan lambat merupakan
faktor penting untuk pemisahan yang tepat bagian berair dan lipid , diikuti oleh filtrasigravitasi sederhana . Dalam beberapa tahun terakhir, Polson itu PEG presipitasi Metode
(110, 111) telah menjadi yang paling umum prosedur yang digunakan dan paling efektif (100,
108). Ini Oleh karena itu metode ini disajikan secara rinci pada Gambar 5. A prosedur
sederhana dan sering digunakan adalah air metode dilusi, dijelaskan oleh Akita & Nakai
(101, 103), ditunjukkan pada Gambar 6. Saran Masalah-menembak dan protokol untuk
metode pemurnian IgY lainnya dapat dapat ditemukan di manual IgY (120).
IgY pemurnian dengan cara protein A (Staphylococcus aureus) atau G (spesies
Streptococcus, strain C dan G) kolom afinitas tidak mungkin, karena ini protein tidak
memiliki tempat pengikatan IgY (lihat Tabel 3).
Sebuah kelompok Argentina disaring beberapa Grampositive bakteri (Bacillus,
Corynebacterium, Listeria, Staphylococcus dan Streptococcus) untuk IgY sifat mengikat.
Beberapa bakteri unclassified, dipilih secara acak dari tanah isolat, juga termasuk dalam
penelitian ini. Di antara tanah isolat, satu regangan atipikal ditemukan, yang dimiliki oleh
Liquefaciens Serratia kelompok (126) dan yang memiliki kuat non-imunologi IgY-mengikat.
Saat ini, beberapa penelitian sedang berlangsung untuk mengembangkan baru prosedur
pemurnian kromatografi IgY, berdasarkan pada protein dimurnikan dari S. liquefaciens.
Pelestarian IgY Solusi
Sebuah suhu 4 C dapat direkomendasikan untuk penyimpanan antibodi IgY selama
periode bulan beberapa tahun, dengan penambahan 0,02% NaN3, 0,03% w / v thimerosal
atau gentamisin 50g/ml sebagai inhibitor pertumbuhan bakteri. Pembekuan pada -70 C
dapat menyebabkan kerugian hingga 50% dari aktivitas IgY (120), sehingga penyimpanan
pada -20 C adalah lebih baik. Dua poin penting yang harus dipertimbangkan ketika
menyimpan solusi IgY dengan natrium azida: a) natrium azida dapat menghambat
horseradish peroxidase ( HRP ) aktivitas , terutama ketika antibodi primer digunakan dalam
pengenceran lebih rendah dari 1:1000 ; b ) solusi IgY disimpan dengan natrium azida harus
didialisis sebelum label IgY antibodi dengan, misalnya , HRP . Agar menghindari efekberulang pencairan / pembekuan IgY , 10-50 % ( v / v ) gliserol dapat ditambahkan .
Menurut pengamatan kami , IgY solusi menunjukkan sedikit kecenderungan ke arah
self- agregasi , tapi ini tampaknya tidak mempengaruhi keseluruhan IgY Kegiatan Ab .
Seperti juga ditemukan dengan mamalia IgG antibodi , aktivitas yang sangat murni IgY
menurun lebih cepat dibandingkan sebagian dimurnikan IgY ( memiliki pengamatan , dan A.
Hlinak , komunikasi pribadi ) .
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
17/34
Produksi Chicken mAbs
Matsuda et al . ( 127 ) dan Nishinaka et al . ( 128 ) berhasil diproduksi mAbs ayam
dengan menggunakan ayam Garis sel - B , MuH1 . Kelompok penelitian ini mampu
menghasilkan mAbs ayam dengan spesifisitas untuk terminal N dari protein prion manusia.
Produksi ayam mAbs memiliki keuntungan dari menggabungkan sifat produksi mAb dan
penggunaan Ab kekhususan karakteristik Abs burung . Oleh karena itu , masa depan kerja
penelitian pada teknologi IgY harus difokuskan pada pengembangan mAbs ayam .
Keuntungan dari Penggunaan IgY
kesejahteraan hewan
Tujuan yang paling penting dari kesejahteraan hewan adalah pengurangan manipulasi
menyakitkan . teknologi IgY memenuhi persyaratan ini, karena ayam Abs dapat dengan
mudah sampel dengan metode non-invasif berbasis pada Tindakan sederhana dari koleksi
telur, bukan stres pendarahan hewan untuk mendapatkan serum. Hal ini sepenuhnya di Sesuaidengan Tiga Rs, pengurangan, perbaikan dan prinsip penggantian Russell & Burch (2).
Teknologi IgY juga menawarkan keuntungan luar biasa dari sudut pandang ekonomis.
Biaya untuk menjaga ayam biasanya lebih rendah daripada menjaga kelinci.
Selain itu, Ab produksi ayam sekitar sesuai dengan yang dari mamalia besar, seperti
domba atau kambing. Dengan demikian, jumlah yang luar biasa Ab dapat diproduksi dari
hanya satu ayam - sekitar 17-35g dari total IgY / ayam / tahun, yang 1-10% dapat diharapkan
untuk menjadi antigen-spesifik (Tabel 3). Sejumlah besar ini tersedia Abs membuka pintu
untuk bidang baru aplikasi untuk teknologi IgY, seperti dalam imunoterapi danimmunoprophylaxis untuk beberapa infeksi virus dan bakteri di hewan dan kedokteran
manusia. Keuntungan dari penggunaan Abs ayam telah diakui oleh banyak penulis (misalnya,
3, 15, 33, 44, 72, 129-133).
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
18/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
19/34
Kurangnya reaktivitas silang dengan rheumatoid faktor
Protein C-reaktif (CRP) milik disebut "Kelompok protein fase akut", yang dapat
meningkat lebih dari seratus kali lipat sebagai respon untuk proses peradangan. Sebuah
ELISA dilakukan untuk memantau konsentrasi serum CRP dalam, Sebagai contoh, pasien
arthritis. Namun, hasil mungkin tidak akurat karena adanya arthritis faktor (RF), yang juga
imunoglobulin yang mampu mengikat imunoglobulin dari lainnya spesies mamalia. Sebuah
keuntungan besar menggunakan IgY dalam ELISA berbasis serum adalah
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
20/34
ketidakmampuannya untuk cross-bereaksi dengan RF, karena tidak adanya sesuai Situs
mengikat Fc berada (131, 134, 135).
Kurangnya reaktivitas silang dengan manusia antibodi anti tikus (HAMA)
Jadi yang disebut manusia Abs anti-tikus (Hamas) dapat diinduksi pada pasien yangmenerima terapi tikus mAbs. Akibatnya, ada campur tangan Hamas dalam tes imunologi
berdasarkan pada mouse mAbs (131). Perkembangan Abs manusia lainnya terhadap spesies
mamalia lain, seperti sapi, kuda dan domba, juga telah dilaporkan (136). Ini menghasilkan
tingkat signifikan gangguan analitis dalam diagnosis klinis, dan banyak usaha telah dilakukan
untuk mengatasinya. Misalnya, hanya fragmen Fab digunakan dalam beberapa tes, untuk
menghindari mengikat ke situs yang terletak di fragmen Fc. Pendekatan lain adalah
penggunaan klinis dari "manusiawi" Abs, yang berarti penggantian asli Fragmen Fc dengan
Fc fragmen manusia yang sesuai (136). Abs ayam tertentu dapat digunakan sebagai alternatif
di tes. Namun, menurut Kricka (136), klinis (manusia) penggunaan IgY Abs adalah dibuat
ragu oleh kurangnya monoklonal IgY Abs. Namun, penggunaan klinis sebenarnya poliklonal
IgY Ab untuk mencegah infeksi Pseudomonas aeruginosa pada pasien dengan fibrosis kistik
(137) adalah contoh yang berbeda dengan pendapat ini.
Kurangnya aktivasi sistem komplemen
IgY mampu mengaktifkan sistem pelengkap burung, namun, sebaliknya, tidak dapat
memulai komplemen cascade pada mamalia (138, 139). Menurut untuk Carlander et al. (138),
skala gangguan oleh aktivasi komplemen Ab-diinduksi dengan ELISA kit telah diremehkan.
Gangguan tersebut adalah masalah yang signifikan, terutama ketika segar, serum murni
digunakan. Penggantian mamalia Abs oleh ayam Abs dapat membantu untuk menghindari
seperti gangguan. Selain itu, pengenceran dan penyimpanan sampel serum menyebabkan
inaktivasi progresif sistem komplemen.
Sebuah bidang baru untuk aplikasi IgY dalam percobaan xenotransplantation.
Xenoreactive alami Abs adalah alasan untuk penolakan hiperakut (HAR) dari
xenotransplantant (misalnya, sebuah pigto- sistem manusia). Epitop sel, -1 ,3-galaktosa
(Gal), yang ditemukan di sebagian besar mamalia, tapi tidak di primata yang lebih tinggi
atau dalam jenis burung, bertanggung jawab untuk fenomena ini. Dengan demikian, adalah
mungkin untuk menghasilkan anti-Gal Abs pada ayam (140). Karena IgY Abs kekurangansitus mengikat untuk faktor pelengkap manusia dan juga tidak dapat mengikat reseptor Fc-
dari Abs mamalia, tidak melengkapi-dimediasi atau Ab-dependent lisis sel yang diperantarai
sel dapat terjadi di hadapan mereka. Dalam model in vitro, yaitu, kultur sel endotel aorta
babi, Fryer et al. (140) menunjukkan bahwa penggunaan ayam anti-Gal Ab benar-benar
mencegah kedua jenis litik proses. Morfologi dan aktivitas biologis sel-sel endotel babi tidak
terpengaruh oleh pengikatan ayam Ab (140, lihat juga 141-143). Meskipun hasil yang
menarik yang diperoleh dari dalam vitro, jika IgY terhadap anti-Gal-epitop adalah untuk
digunakan dalam vivo, kinetika Abs host, seperti serta interaksinya dengan anti-Gal Abs,
harus dievaluasi. Untuk mempelajari seperti respon in vivo, Walsh et al. (143) disuntikkan
tikusdengan IgY (200ml 1mg/ml setiap 24 jam, empat suntikan iv) dan menemukan
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
21/34
peningkatan yang kuat dalam anti- IgY Abs setelah hewan telah menerima ketiga dosis.
Dengan demikian, ada diskusi tentang apakah anti-Gal-epitop IgY dapat digunakan dengan
sukses dalam Studi xenotransplantation selama periode singkat 3 atau 4 hari berturut-turut.
Kurangnya hetero-agglutinins (Coombs serum, klasifikasi golongan darah)
Coombs serum adalah antiserum terhadap manusia imunoglobulin, dan digunakan
untuk mendeteksi Abs manusia lengkap. Hal ini biasanya diproduksi di mamalia, dan
mungkin mengandung hetero-aglutinin, yang dapat mengganggu deteksi yang sesuai sistem.
Gangguan ini biasanya dihindari oleh adsorpsi Abs mengganggu. Sebuah kelompok Kuba
(69) telah menunjukkan bahwa penggunaan IgY Abs adalah sebuah alternatif, sejak persiapan
IgY dengan spesifisitas terhadap manusia IgG Abs tidak mengandung hetero-agglutinins.
Para penulis meneliti 58 serum manusia sampel dengan tes Coombs langsung dan tidak
langsung, dan dibandingkan sendiri Coombs ayam reagen mereka dengan salah satu
komersial asal mamalia. Hasil yang identik. Para penulis yang sama juga telah berhasil
digunakan IgY Abs untuk klasifikasi golongan darah manusia (58).
Jarak filogenetik
Jarak filogenetik adalah alasan untuk sering perbedaan dijelaskan antara kekhususan
Ab mamalia dan ayam, bahkan ketika identik diimunisasi. Selain perbedaan antara mamalia
dan burung kekebalan tubuh sistem itu sendiri, perbedaan filogenetik pembangunan di dua
kelas hewan memberikan kontribusi ini untuk kekhususan Ab berbeda. Beberapa penulis
telah melaporkan bahwa ayam sering menghasilkan Abs terhadap filogenetik sangat kekal
mamalia protein atau peptida lebih efisien daripada kelinci (144, Gambar 7). Akibatnya,
sebuah dilestarikan antigen bisa tetap "bertopeng" untuk kelinci sistem kekebalan tubuh, dan
dengan demikian menyebabkan hanya lemah atau "Diam" respon. Selain itu, jika ayam dan
kelinci yang diimunisasi dengan mamalia yang sama antigen, sangat sering ayam merespon
dengan Ab-kekhususan yang jarang dapat dicapai pada kelinci, seperti misalnya, dalam kasus
PIIINP (98), paratiroid protein hormon yang berhubungan dengan (145), mengubah faktor
pertumbuhan 3 (TGF-3, 99), dan YKL-40 glikoprotein, juga dikenal sebagai tulang rawan
gp-39 (146). Indikasi lain dari jarak filogenetik antara burung dan mamalia adalah
pengamatan bahwa IgY Abs diproduksi terhadap manusia kehamilan terkait protein cross-
reaktif dengan murine kehamilan- protein yang terkait (147, 148). Dengan demikian, seperti
Abs juga dapat digunakan untuk mendeteksi murine kehamilan terkait protein.
Aplikasi dari IgY di Biomedical Penelitian dan Manusia dan Kedokteran Hewan
Aplikasi umum
Beberapa publikasi telah menggambarkan sukses penggunaan IgY Abs dalam
berbagai bidang penelitian (149-162; untuk review, lihat 163). IgY berbasis immunoassays
yang digunakan untuk mengukur konsentrasi protein atau peptida melalui ELISA, RIA atau
tes lainnya dalam kimia klinis dan dasar penelitian. Namun, ada baru-baru ini telah
perdebatan antara pengguna IgY apakah IgY berbasis immunoprecipitates dalam
beberapakasus yang agak menyebar dan tidak berbeda seperti yang IgG berbasis. ini masalah
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
22/34
bisa diselesaikan dengan menggunakan buffer dengan tinggi konsentrasi garam (NaCl 1,5 M
dengan 5% PEG 6000; 150). IgY Abs digunakan dengan sukses dalam imunohistokimia
untuk mendeteksi antigen dari virus, bakteri, tumbuhan dan hewan asal, dan juga untuk
menilai kejadian parasit usus pada hewan domestik (78, 164) dan kontaminasi makanan
dengan racun atau obat-obatan (75, 90). Selama dekade terakhir, IgY Abs semakin telahdigunakan dalam terapi atau profilaksis penyakit dan juga dalam konteks baru socalled
"Makanan fungsional". Penelitian terbaru telah membandingkan sifat IgY spesifik dan IgG
Abs berasal dari hewan identik diimunisasi. Hasil sebagian besar mengkonfirmasi bahwa IgY
Abs dapat digunakan dalam cara yang sama seperti IgG Abs, tetapi juga menawarkan
keunggulan dalam hal kekhususan, reaktivitas silang dan / atau sensitivitas.
IgY untuk digunakan therapeutical atau profilaksis pada kedokteran hewan
Bubuk telur utuh atau kuning telah digunakan sebagai alternatif murah untuk
pengobatan IgY dari penyakit enterik dalam kedokteran hewan. Yang paling contoh yang
terkenal dari sukses terapi / profilaksis penggunaan IgY adalah pengobatan betis dan babi
dengan Abs spesifik terhadap Escherichia coli (K88, K99, 987P), rotavirus dan coronavirus
(165-177; untuk review, lihat 178). Studi menggunakan kedua model hewan dan uji lapangan
pada peternakan telah dilakukan. Kelompok-kelompok dari Erhard (179), Losch (180-182),
Yolken (183) dan Kuroki (171, 172) memiliki melakukan sebagian besar studi tentang praktis
penggunaan IgY. Studi ini menegaskan bahwa pengobatan diare pada anak sapi dan babi
dengan telur spesifik kuning Abs telah mencapai profilaksis signifikan dan manfaat
terapeutik. Peneliti lain telah dikonfirmasi hasil ini (169). Kuroki et al. (171) dilindungi tikus
dari diare rotavirus murine oleh administrasi larutan IgY 2l per tikus yang mengandung titer
netralisasi antara 1:10,240 dan 1:2560 per tikus. Krejci et al. (184) yang digunakan untuk IgYmelindungi anjing terhadap parvovirus anjing, tapi percayalah bahwa hasil perlindungan dari
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
23/34
interaksi antara IgY dan komponen permukaan virus. Sunwoo et al. (185) mampu
menunjukkan in vitro a Pertumbuhan ditandai efek IgY spesifik menghambat pada E. coli
0157: H7, dan menunjukkan bahwa penghambatan pertumbuhan sebenarnya disebabkan oleh
pengikatan spesifik IgY terhadap antigen permukaan bakteri, yang menyebabkan perubahan
signifikan dalam struktur permukaan bakteri. Efek lain dari IgY mengikat ke permukaanbakteri antigen adalah penurunan ditandai bakteri lampiran pada mukosa usus (174, 186).
Dengan demikian, administrasi IgY terapi dapat mengurangi penggunaan klinis antibiotik,
sehingga bisa menurunkan risiko bahwa bakteri akan mengembangkan resistensi antibiotik.
Pendekatan lain adalah pengobatan profilaksis hewan terhadap parasit usus. Karena
serius masalah yang disebabkan oleh kontaminasi daging dengan obat-obatan atau bovine
spongiform encephalomalasia (BSE), konsumen semakin khawatir bahwa makanan harus
diproduksi di bawah ketat dikontrol kondisi biologis. Ini juga termasuk produksi daging
kualitas tinggi, seperti misalnya, dalam rusa pertanian atau dalam peternakan hewan liar
lainnya. Dalam pertanian intensif, hewan memiliki kontak sangat dekat satu sama lain dandengan demikian memiliki risiko lebih tinggi kontaminasi melalui feses mereka sendiri.
Pemeliharaan intensif juga meningkatkan kejadian infeksi dengan parasit usus (misalnya,
Strongylides), yang menyebabkan masalah besar bagi petani. Dalam rangka untuk
menghindari pengobatan antibiotik profilaksis, seharusnya mungkin untuk memproduksi IgY
Abs melawan Strongylides antigen dan untuk menggunakannya dalam tes diagnostik (untuk
Misalnya, ELISA) dan untuk perawatan anti-parasit.
IgY juga telah digunakan untuk mengobati beberapa ikan khas pertanian penyakit
(misalnya, dalam salmon dan trout), khususnya di Skandinavia dan Jepang. Beberapa peneliti
dari Jepang (187) memiliki pengalaman yang luas di bidang ini. Misalnya, mereka telahberhasil diperlakukan Edwardsiella tarda terinfeksi Jepang belut dengan spesifik anti-E. tarda
IgY, dan mampu menunjukkan efek protektif ketika ekstrak IgY yang diberikan langsung ke
dalam air akuarium.
Baru-baru ini, penyelidikan telah mulai pada penggunaan Teknologi IgY untuk
mengendalikan penyakit foulbrood Amerika (188), penyakit dari tahap larva dan kepompong
dari lebah madu (Apis mellifera), yang disebabkan oleh bakteri sporulated, Paenibacillus
larva. Itu Penyakit menyebabkan kerugian besar di Argentina, dengan kejadian hingga 30%.
Kesulitan terbesar dalam pencegahan dan pengendalian adalah dengan larva P. spora, yang
tahan terhadap sebagian besar desinfektan dan antibiotik yang digunakan saat ini. Selain itu,
penggunaan antibiotik sembarangan adalah serius kendala bagi produksi dan ekspor madu,
karena residu mereka dapat menghasilkan resistensi bakteri yang mempengaruhi populasi
manusia.
Dengan demikian, penggunaan IgY Abs dengan spesifisitas terhadap antigen bakteri
bisa menjadi alternatif penting, atau setidaknya pengobatan tambahan, di lain strategi, seperti
pemilihan genetik lebah dengan tindakan pencegahan kebersihan yang ketat (misalnya,
menghapus larva yang terinfeksi dari sarang lebah) atau penggunaan bakteriosin dari bakteri
jamur dan laktat.
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
24/34
Aplikasi lain dari teknologi IgY dalam pengembangan ELISA IgY berbasis untuk
mengukur suatu 29kDa protein kehamilan terkait yang ditunjuk Faktor awal kehamilan ( EPF
, 189 , 190 ) . faktor ini terjadi pada induk babi sedini 72 jam setelah inseminasi . Dari sudut
pandang ekonomis , penting untuk mengetahui sesegera mungkin apakah atau tidak
pembuahan berhasil , jadi sebuah EPFELISA akan menjadi alat yang baik untuk perbedaanawal antara induk babi hamil dan tidak hamil .
IgY untuk terapi atau profilaksis padaobat manusia
Kemampuan kepatuhan banyak virus dan bakteri patogen merupakan prasyarat utama
untuk sukses kolonisasi organisme yang lebih tinggi , terutama dengan terhadap pernapasan
host dan usus mukosa , dan telah menunjukkan bahwa IgY spesifik Abs terhadap antigen
Salmonella dapat menghambat adhesi bakteri ini ke sel epitel in vitro ( 186 ) .
Carlander et al . ( 191 ) , Casswall ( 192 ) dan Sarker et al . ( 193 ) menyelidiki aksi
hyperimmune kolostrum sapi ( HBC ) terhadap rotavirus manusia diisolasi dari anak-anakyang terinfeksi . The oral IgY Abs menghasilkan perlindungan yang signifikan efek ( 193 ) .
Sebuah rotavirus anti - manusia ( strain Wa , RV5 , RV3 , ST3 ) IgY Ab juga efektif ,
meskipun pada tingkat yang lebih rendah dibandingkan dengan HBC . Menurut pendapat lain
, penggunaan IgY persiapan dengan tinggi Ab titer atau meningkatkan jumlah Abs diberikan
dapat meningkatkan Hasil ( 183 ) .
Perlindungan terapeutik melalui IgY anti -Helicobacter pylori Abs juga telah diteliti
,meskipun hasilnya tidak meyakinkan , mungkin karena kondisi dasar yang tidak
menguntungkan ( 192 , lihat juga 194 ) . Menurut bukti terbaru , produksi anti - H . pylori
Abs dengan menggunakan seluruh bakteri lisat sel untuk imunisasi menyebabkan reaktivitas
silang dengan bakteri lain , termasuk manusia normal flora bakteri , dan ini bisa menurunkan
efisiensi IgY sebagai reagen profilaksis ( 195 ) . Shin et al . ( 195 ) mampu mengidentifikasi
imunodominan yang protein H. pylori . antibodi dengan spesifisitas terhadap protein ini lebih
efektif sebagai reagen profilaksis .
Carlander et al. (196, 197) mempelajari manfaat IgY sebagai alat profilaksis terhadap
penyakit menular pada pasien dengan cystic fibrosis (CF), yang paling penyakit genetik fatal
yang umum dari populasi Kaukasia di Eropa dan Amerika Serikat. CF disebabkan oleh
mutasi gen untuk protein saluran klorida, yang menghasilkan sekresi yang abnormal lendirtebal. Hal ini menyebabkan infeksi sekunder di saluran pernapasan, disebabkan oleh beberapa
bakteri spesies, salah satunya, Pseudomonas aeruginosa, menginfeksi hampir semua pasien
CF. Para peneliti merawat pasien CF secara oral dengan IgY berair anti-P. solusi aeruginosa
(70ml, 0.7mg/ml IgY), diberikan sebagai obat kumur di malam hari. Tingkat tinggi dari Abs
ayam tertentu dapat ditunjukkan dalam air liur melalui ELISA selama kurang lebih 8 jam
setelah perawatan. Kemudian, konsentrasi IgY secara bertahap menurun, dan benar-benar
tidak terdeteksi dalam air liur 16 jam setelah perawatan. Selain itu, hal itu menunjukkan
bahwa 2 menit mulut bilas memberikan aktivitas ELISA lebih tinggi dari 1 menit bilas.
Perawatan ini IgY lisan berhasil dalam mengurangi infeksi P. aeruginosa kronis di CF pasien,
dan dengan demikian mengakibatkan penurunan antibiotik resep.
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
25/34
Perlindungan lokal yang efektif terhadap pembentukan plak terkait dengan karies gigi
dicapai dengan anti-Streptococcus mutans IgY (198-202). Ini pasif perlindungan jelas
ditunjukkan dengan kedua SPF tikus dan relawan setelah penggunaan baik IgY murni atau
bubuk whole-telur. Aktif imunisasi terhadap S. mutans glucan-binding protein B (GBP-B,) di
bawah kondisi percobaan, menginduksi perlindungan yang baik terhadap gigi eksperimentalkaries. Perlindungan ini hasil dari terus menerus sekresi saliva Abs terhadap GBP-B, yang
mencegah akumulasi S. mutans pada gigi bio-film. Perlindungan pasif dicapai oleh IgY
adalah didasarkan pada prinsip yang sama. Bahkan, administrasiIgY anti-S. mutans GBP-B
melalui diet dan air dari tikus yang telah terinfeksi minum, menyebabkan penurunan yang
signifikan dalam S. mutans agregasi pada gigi bio-film. Dalam semua percobaan ini,
langsung korelasi ditemukan antara diberikan IgY dosis dan penurunan kejadian karies gigi
(201, 202). Selain itu, penurunan mutans S. tingkat infeksi tidak membutuhkan terus menerus
IgY administrasi (201). Hatta et al. (200) dievaluasi efektivitas lisan IgY anti-S. mutans
bilasan di sukarelawan manusia. IgY ini menghambat S. mutans kepatuhan terhadap cakram
hydroxyapatite berlapis air liur oleh 59%, sedangkan IgY kontrol dari non-diimunisasi ayam
hanya memberikan penghambatan 8%. Semua hasil ini sangat mendukung kemanjuran
pengobatan lisan dengan anti-S. mutans IgY sebagai alternatif baru untuk mengurangi plak
gigi pada manusia. Baru-baru ini, mirip studi tentang pencegahan karies juga mulai di
Argentina (by S. Prez Lozano et al., Universidad Nacional de Buenos Aires).
Bidang lain yang mungkin untuk aplikasi oral IgY spesifik bisa dengan
Cryptosporidium parvums infeksi. Okhuysen et al. (203) diamati efek perlindungan yang
signifikan pada sukarelawan secara lisan diobati dengan bovine hyperimmune anti-
Cryptosporidium kolostrum. The oral sesuai IgY Abs bisa menghasilkan efek yang sama, dan
ini telah dibuktikan pada tikus Model (204, 205).
LeClaire et al. (206) menghasilkan IgY Abs terhadap sangat beracun staphylococcal
enterotoksin B (SEB), untuk menguji penggunaan terapi mereka mungkin. SEB dianggap
menjadi potensi agen senjata biologis, sehingga ada kebutuhan yang meningkat untuk
mengembangkan vaksin dan pendekatan terapi untuk keracunan dengan SEB. Para penulis
menunjukkan bahwa profilaksis tersebut dan penerapan terapi anti-SEB IgY tikus benar-
benar dilindungi dan monyet rhesus terhadap SEB aerosol tantangan mematikan.
Worledge et al. (207) menunjukkan signifikan efek protektif setelah aplikasi oral
tertentu IgY terhadap tumor necrosis factor (TNF) dalam model eksperimental kolitis pada
tikus. TNF adalah terlibat dalam patogenesis inflamasi penyakit usus. Penggunaan oral Abs
tersebut dianggap untuk memiliki lebih sedikit efek samping sistemik daripada infus
intravena dari murine manusiawi anti- TNF mAb (Infliximab, Centocor, Malvern,
Pennsylvania, USA).
Efek protektif anti-racun terhadap IgY ular dan kalajengking racun telah ditunjukkan
dalam model tikus (208). Almeida et al. (209) dicapai hasil yang sama, memproduksi IgY
terhadap racun dari Ular Brasil dari Bothrops dan Crotalus genera. Investigasi serupa sedang
dilakukan di Bangalore (Vittal Mallya Research Institute of Bangalore, India[http://www.spiegel.de/spiegel/ 0,1518,231565,00. Html]). Penggunaan anti-racun IgY
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
26/34
adalah menguntungkan, karena, karena karakteristik IgY Abs dibahas di atas, sedikit
imunologi efek samping dapat diharapkan (210, 211). itu kelompok penelitian C. Gomez et
al. (Universidad Nacional de La Plata, La Plata, Argentina, tidak diterbitkan hasil) telah
berhasil memproduksi spesifik IgY Abs terhadap toksin botulinum tipe A, yang memiliki
telah digunakan untuk immunoneutralisation dalam mouse Model.
Kesimpulan dan Prospek Masa Depan
Saat ini, tidak ada keraguan bahwa Abs ayam dapat diproduksi dan digunakan,
dengan sedikit modifikasi, di cara yang sama dengan penggunaan Abs mamalia. Hal ini dapat
juga dikatakan bahwa, tergantung pada keadaan, penggunaan IgY Abs sering memiliki
keuntungan yang signifikan atas penggunaan Abs mamalia. Namun, dari sudut pandang yang
realistis pandang, harus disimpulkan bahwa IgY Abs tidak akan dapat sepenuhnya
menggantikan penggunaan IgG Abs dalam sistem diagnostik dalam waktu dekat. Ayam
memiliki potensi untuk menjadi digunakan untuk melengkapi spektrum hewan yang
digunakan untuk Produksi Ab. Namun, prasyarat adalah untuk membuat Teknologi IgY lebih
populer dan untuk meyakinkan komunitas ilmiah keuntungan yang signifikan. Produksi
mAbs ayam akan menggabungkan keuntungan dari monoklonal Abs dengan keunggulan
ayam Abs. Hal ini diharapkan bahwa studi tentang penggunaan terapeutik atau profilaksis
IgY Abs akan ditingkatkan di masa depan. Secara khusus, karena hambatan peningkatan
mikroorganisme terhadap antibiotik, penelitian tentang semua aspek terkait dengan
pengembangan IgY spesifik terhadap mikroorganisme patogen harus diintensifkan. IgYs
dapat digunakan baik dalam kedokteran hewan dan pada obat manusia. Di Amerika Selatan,
misalnya, ada kepentingan besar dalam mengembangkan bubuk telur sebagai aditif untuk
pengganti susu. Formulasi tersebut diperlukan untuk melindungi anak-anak dari infeksi ususfatal, terutama di negara secara finansial lemah. Teknologi IgY adalah cepat berkembang
lapangan dan kami telah mencoba untuk menutupi sebagian besar aspek dalam rewiew ini.
Kami yakin bahwa, sekali diterima dan secara luas digunakan, teknologi akan menawarkan
alternatif dan solusi untuk ilmu pengetahuan, kedokteran dan masyarakat secara keseluruhan.
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
27/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
28/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
29/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
30/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
31/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
32/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
33/34
-
7/22/2019 Jurnal Translate Ayam Kuning Telur Antibodi
34/34
top related