ii

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah, segala pujibagi Allah SWT.Tuhan semestaalam yang telah

memberikanrahmat, karunia, danhidayahnyakepada kami sehingga kami dapat mengerjakan

laporanpraktikum Mikrobiologi Dasar yang berjudul Uji Resistensi Bakteri dengan baik dan

lancar.

Tidak lupa kami juga mengucapkan terimakasih pada Dosen pembimbing matakuliah

Mikrobiologi Dasar yang telah membantu dan membimbing kami dalam penyelesaian laporan

ini dan pihak-pihak lain yang tidak dapat kami sebutkan satu persatu.

Kesempurnaan hanyalah milik Allah SWT sedangkan kekurangan milik kami. Maka

apabila ada kesalahan baik dalam penulisan, kata-kata, dan isi kami selaku selaku penyusun

mohon maaf dan dijadikan maklum.

Sekian dari kami.Semoga dengan adanya laporan ini dapat memberikan manfaat bagi

pembaca dan menambah wawasan. Amin.

Surabaya, 19 April 2014

Penyusun

iii

DAFTAR ISI

Kata Pengantar ii

Daftarisi iii

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latarbelakang 1

1.2 Rumusanmasalah 2

1.3 Tujuan 2

1.4 Manfaat 2

BAB II KAJIAN PUSTAKA 3

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 JenisPenelitian 6

3.2 AlatdanBahan

3.2.1 Alat 6

3.2.2 Bahan 6

3.3 LangkahKerja 6

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 8

BAB V PENUTUP

5.1 Simpulan 15

5.2 Saran 15

DAFTAR PUSTAKA 16

LAMPIRAN 17

iv

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mikroorganisme telah menjadi bagian dari lingkungan manusia. Mikroorganisme

tersebar luas baik pada lingkungan bersuhu tinggi dan rendah, pada sebagian

besar makanan dan minuman, maupun ada di dalam dan permukaan tubuh manusia

(Chambers,2004). Mikroorganisme ada yang menguntungkan dan ada yang

merugikan (mikroorganisme patoge), mikroorganisme yang bersifat patogen

dapat menyebabkan berbagai macam penyakit dan sangat merugikan, baik bagi

manusia, hewan, maupun tumbuhan. Usaha manusia dalam mengatasi berbagai

macam penyakit yang disebabkan oleh mikroorganisme patogen salah satunya

adalah dengan mengembangkan senyawa antibiotik.

Antibiotik merupakan suatu substansi kimia yang diperoleh atau dibentuk oleh

berbagai spesies mikroorganisme, yang dalam konsentrasi rendah mampu menghambat

pertumbuhan mikroorganisme lain. Sensitifitas bakteri terhadap antibiotika adalah suatu

istilah yang digunakan untuk menggambarkan kerentanan bakteri pada antibiotik. Uji

kerentanan antibiotik biasanya dilakukan untuk menentukan antibiotik yang mampu

mengobati infeksi yang disebabkan oleh bakteri. Pengujian untuk sensitifitas antibiotik

sering dilakukan dengan menggunakan metode Kirby-Bauer yaitu paper dish yang

mengandung antibiotik ditempatkan kepiringan media agar dimana bakteri tumbuh. Jika

sensitif terhadap antibiotik maka akan terbentuk lingkaran (berbentuk cincin) yang jelas

atau disebut dengan zona inhibisi yang terlihat disekitar paper dish yang menunjukkan

bakteri tidak dapat tumbuh disekitar antibiotik yang sensitif bagi bakteri tersebut.

(Syahrurrahman, 1994).

Salah satu antibiotik yang dapat digunakan dalam uji resistensi bakteri adalah

antibiotik Chloramphenicol. Chloramphenicol adalah bakteriostatik antimicrobial.

Chloramphenicol efektif terhadap berbagai bakteri gram-positif dan gram negatif,

termasuk sebagai organisme anaerobik. Chloramphenicol adalah inhibitor sintesis

protein, yang menghambat aktivitas transferase peptida dari ribosom bakteri, mengikat

A2A52 dan residu A2451 di 235 rRNA dari sub unit ribosom 50S, mencegah

pembentukan ikatan peptide. (Jawet, 1998).

v

Berdasarkan latar belakang tersebut maka dilakukanlah praktikum uji resistensi

bakteri untuk mengetahui resistensi bakteri biakan dari sampel jus jambu biji busuk

terhadap antibiotik Chloramphenicol.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang tersebut, dapat diperoleh beberapa rumusan

masalah diantaranya :

1. Bagaimana cara menguji tingkat resistensi suatu bakteri terhadap antibiotik tertentu ?

2. Bagaimana efektivitas antibiotik Chlorampenicol terhadap biakan murni bakteri

sampel jus jambu busuk ?

1.3 Tujuan

Adapaun tujuan dilakukannya praktikum uju resistensi bakteri diantaranya :

1. Mengetahui cara menguji tingkat resistensi suatu bakteri terhadap antibiotik tertentu.

2. Mengetahui efektivitas antibiotik Chlorampenicol terhadap biakan murni bakteri

sampel jus jambu busuk.

1.4 Manfaat

Manfaat yang diperoleh dari praktikum uji resistensi bakteri ini adalah :

1. Dapat memberikan pengetahuan cara menguji resistensi suatu bakteri.

2. Dapat memberikan pengetahuan mengenai sifat antibiotik yang memiliki efektivitas

berbeda-beda terhadap suatu jenis bakteri.

Dapat memberikan pengetahuan bahwa konsentrasi antibiotik mempengaruhi besar

kecilnya zona hambat yang dihasilkan.

vi

BAB II

KAJIAN TEORI

Istilah antibiotk untuk pertama kali digunakan oleh Waksman (1945) sebagai nama dari

suatu golongan substansi yang berasal dari bahan biologis yang kerjanya antagonistik terhadap

mikroorganisme. Istilah antibiotik berarti melawan hidup dengan kata lain maksud dari

antibiotik adalah zat yang dihasilkan oleh mikroorganisme hidup, yang dapat menghambat

mikroorganisme lain, bahkan dapat memusnakannya (Irianto, 2006).

Pengertian dari antibiotika pada awalnya merujuk pada senyawa yang dihasilkan oleh

jamur atau mikroorganisme yang dapat membunuh bakteri penyebab penyakit pada hewan &

manusia. Saat ini beberapa jenis antibiotika merupakan senyawa sintetis (tidak dihasilkan dari

mikroorganisme) tetapi juga dapat membunuh atau menghambat pertumbuhan bakteri. Secara

teknis, zat yang dapat membunuh bakteri baik berupa senyawa sintetis atau alami disebut

dengan zat antimikroba, akan tetapi banyak orang yang menyebutnya dengan antibiotika.

Antibiotika mempunyai manfaat yang sangat banyak, penggunaan antibiotika secara berlebihan

juga dapat memicu terjadinya resistensi antibiotika (Wasitaningrum, 2009).

Antibiotika atau dikenal juga sebagai obat anti bakteri adalah obat yang digunakan untuk

mengobati penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri. Alexander Fleming pada tahun 1927

menemukan antibiotika yang pertama yaitu penicillin. Setelah mulai digunakan secara umum

pada tahun 1940, maka antibiotika bisa dibilang merubah dunia pengobatan serta mengurangi

angka kesakitan & kematian yang disebabkan oleh penyakit infeksi secara dramatis (Vorber,

2010).

Antibiotik adalah suatu substansi zat-zat kimia yang diperoleh dari atau dibentuk dan

dihasilkan oleh mikroorganisme, dan zat-zat itu dalam jumlah yang sedikit pun mempunyai daya

penghambat kegiatan mikroorganisme lain. Antibiotik tersebar di alam, dan memegang peranan

penting dalam mengatur populasi mikroba dalam tanah, air, limbah, dan kompos. Antibiotik

berbeda dalam susunan kimia dan cara kerjanya. Antibiotik yang kini banyak digunakan

kebanyakan dari genus Bacillus, Penicilium, dan Streptomisin. Antibiotik yang pertama dikenal

adalah penicillin, suatu zat yang dihasilkan oleh jamur Penicilium. Penicilin ditemukan oleh

Alexander Fleming pada tahun 1929, namun baru tahun 1943 antibiotik ini banyak digunakan

sebagai pembunuh bakteri. Salama perang dunia II dan sesudahnya bermacam-macam

antibiotik ditemukan, dan sekarang jumlahnya ratusan. Tetapi ada juga antibiotik yang tidak

dihasilkan golongan jamur, melainkan golongan bakteri, misal Tirotrisin oleh bakteri Bacillus

breurs, Basitrasin oleh Bacillus subtilis, Polimiksin oleh Bacillus polimyxa (Waluyo, 2005).

vii

Produksi antibiotik dilakukan dalam skala besar pada tangki fermentasi dengan ukuran

besar sebagai contoh penicillin chfysogentum ditumbuhkan dalam 100.000 liter farmentor

selama kurang lebih 200 jam. Mula-mula suspensi spora R. chrysogenum ditumbuhkan dalam

media yang bernutrisi kultur dan dimana disimpan pada temperatur 240C dan selanjutnya

ditransfer ketangki monokulum. Tangki monokulum digojlok teratur untuk fermentasi yang

disimpan hingga sampai 2 hari (Pratiwi, 2008).

Resistensi antibiotik adalah kemampuan dari bakteri atau mikroorganisme lain untuk

menahan efek antibiotik. Resistensi antibiotik terjadi ketika bakteri dapat merubah diri

sedemikian rupa hingga dapat mengurangi efektivitas dari suatu obat, bahan kimia ataupun zat

lain yang sebelumnya dimaksudkan untuk menyembuhkan atau mencegah penyakit infeksi.

Akibatnya bakteri tersebut dapat bertahan hidup dan bereproduksi sehingga makin

membahayakan. Bakteri tersebut dapat membentuk ketahanan khusus terhadap suatu jenis

antibiotika tertentu, sehingga membahayakan orang yang terkena penyakit tersebut.

Kesalahpahaman yang sering terjadi di masyarakat adanya anggapan bahwa yang resisten

terhadap obat tertentu adalah tubuh orang, padahal sebenarnya bakteri yang ada di dalam

tubuh tersebutlah yang menjadi resisten terhadap pengobatan, bukan tubuhnya (Aryulina,

2006).

Istilah resistensi itu menunjukan bahwa suatu mikroorganisme, sudah tidak peka

terhadap suatu zat atau sediaan antimikroba atau antibiotik, sehingga akan membawa masalah

dalam terapi dan bahkan akan menggagalkan terapi dengan suatu antibiotik terhadap agen

penyebab infeksi. Resistensi adalah ketahanan suatu mikroorganisme terhadap antimikroba

atau antibiotik tertentu (Zaraswati, 2008).

Resistensi sel bakteri ialah suatu sifat tidak terganggunya kehidupan sel bakteri oleh

antimikroba. Secara umum resistensi dibagi dalam 3 kelompok:

1. Resistensi genetik

2. Resistensi non genetik

3. Resistensi silang

Penyebab mikroorganisme resistensi terhadap antibiotik:

1. Pemakaian antibiotik yang tidak tepat.

2. Pengobatan yang tidak tuntas atau penghentian antibiotik sebelum bakteri benar-benar

mati.

3. Pemakaian dosis obat antibiotik dibawah dosis terapi.

4. Bakteri bersifat resisten karena mutasi.

Resistensi bakteri terhadap obat terdiri atas beberapa jenis, yaitu:

viii

1) Resistensi primer yang merupakan resistensi alamiah terhadap kuman, contohnya bakteri

Staphylococcus yang mengandung enzim penisilinase dapat mengubah penisilin menjadi

asam penisilinoat yang tidak mampu membunuh kuman itu;

2) Resistensi sekunder, yaitu karena adanya muatan-muatan yang berkembang biak menjadi

spesies yang resisten;

3) Resisten episomal atau plasmid yang dapat terjadi karena bakteri mentransfer DNA kepada

bakteri lain melalui kontak antarsel bakteri sejenis dan antarbkateri yang berlainan jenis;

serta

4) Resistensi silang, yaitu resistensi bakteri terhadap suatu antibiotic dengan semua

derivatnya. Sebagai contoh, penisilin dengan ampisilin, rifampisin dengan rifamisin, dan

berbagai jenis sulfonamide. Untuk menghindari resistensi silang, digunakna dosis antibiotik

yang relatif lebih tinggi daripada dosis efektif minimum dalam waktu singkat (Syamsuni,

2005).

Sebab lainnya yang menyebabkan mikroorganisme resistensi terhadap suatu obat ialah:

(Zaraswati. 2004)

1. Meningkatkannya destruksi obat. Ini merupakan mekanisme utama resistensi terhadap

penicillin, aminoglikosida, dan kloramfenikol,

2. Berkurangnya perubahan obat menjadi bentuk aktif

Mekanisme resistensi dapat terjadi secara genetik dan nongenetik. Secara genetik

resistensi dapat terjadi dengan cara konjugasi dan transduksi antar strain yang sama,

sedangkan secara non genetik resistensi dapat terjadi melakukan pemberian antibiotik yang

berlebih, pemberian dosis rendah secara terus menerus atau tidak beraturan (Soeharsono,

2005).

Bakteri yang resistensi dapat mengancam kehidupan manusia atau hewan karena dapat

meningkatkan morbiditas penyakit dan mortalitas akibat kegagalan pengobatan selain itu biaya

pengobatan juga meningkat karena harus menggunakan antibakteri dosis tinggi atau lebih dari

satu macam antibakteri, atau menggunakan antibakteri baru yang harganya mahal (Zaraswati,

2008).

Resistensi tersebut dapat berupa, Resistensi alamiah, resistensi karena adanya mutasi

spontan (resistensi kromosomal) dan resistensi karena adanya faktor R pada sitoplasma

(resistensi ekstrakromosomal) atau resistensi karena terjadinya pemindahan gen yang

resistensi atau faktor R atau plasmid R atau plasmid (resistensi silang) atau dapat dikatakan

bahwa suatu mikroorgananisme dapat resistensi terhadap obat-obat antimikroba, kerena

mekanisme genetik atau non genetik (Zaraswati, 2008).

ix

Resistensi kromosomal merupakan mutasi spontan dari elemen genetik dengan

frekuensi 1:107 sampai 1012 kromosom yang telah termutasi ini dapat dipindahkan sehingga

terjadi populasi yang resistensi, pada mutasi spontan terjadi seleksi oleh antibiotika, dimana

mikroorganisme yang peka akan musna dan mikroorganisme yang resistensi tetap hidup dan

berkembangbiak. Resistensi kromosomal ini dapat dibagi menjadi 2 yaitu: (Zaraswati, 2008).

1. Resistensi kromosomal primer

2. Resistensi kromosomal sekunder

Antibiotik menghentikan atau mengganggu sejumlah proses seluler sehari-hari yang

mengandalkan bakteri untuk pertumbuhan dan kelangsungan hidup, seperti:

1. melumpuhkan produksi dinding sel bakteri yang melindungi sel dari lingkungan

eksternal

2. mengganggu sintesis protein dengan mengikat mesin yang membangun protein, asam

amino dengan asam amino

3. mendatangkan malapetaka dengan proses metabolisme, seperti sintesis asam folat,

sebuah vitamin B yang dibutuhkan bakteri untuk berkembang

4. memblokir sintesis DNA dan RNA (Aryulina, 2006).

Pada data terdapat antibiotik yang tidak bisa menghambat pertumbuhan bakteri

dikarenakan antibiotik yang digunakan tidak spesifik terhadap bakteri yang ditanam didalam

media, ataupun terjadi resistensi bakteri terhadap antibiotik tersebut dengan berbagai

mekanisme.

Mekanisme kerja antibiotik antara lain:

1. Menghambat sintesis dinding sel bakteri sehingga menghambat perkembang biakan

dan menimbulkan lisis. Contoh: penisilin dan sefalosforin.

2. Mengganggu keutuhan membran sel, mempengaruhi permeabilitas sehingga

menimbulkan kebocoran dan kehilangan cairan intraseluler. Contoh : nistatin.

3. Menghambat sintesis protein sel bakteri. Contoh: tetrasiklin, kloramfenikol, eritromisin.

4. Menghambat metabolisme sel bakteri. Contoh: sulfonamide.

5. Menghambat sintesis asam nukleat. Contoh: rifampisin dan golongan kuinolon

(Rostinawati, 2009).

Kloramfenikol adalah zat kimia yang mula-mula dihasilkan oleh biakan Streptomyces

venezuelae tetapi sekarang sudah dapat dihasilkan secara sintetik. Kloramfenikol bersifat

bakteriostatik, pertumbuhan mikroorganisme dapat berlangsung lagi setelah penghentian obat

(Mulyaningsih, 2004).

x

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 WAKTU DAN TEMPAT PENELITIAN

Praktikum mengenai Uji Resistensi ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi

gedung C9 FMIPA UNESA pada hari kamis, tanggal 16 April 2013.

3.2 ALAT DAN BAHAN

Alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum ini antara lain:

A. Alat

1. Pembakar spiritus,

2. Pinset,

3. Cawan Petri,

4. Inkubator,

5. Spuit berukuran 1 ml dan 5 ml,

6. Penggaris,

7. Tabung reaksi,

B. Bahan

1. Media tauge cair,

2. Media tauge agar,

3. Antibiotik chloramfenikol 500 mg,

4. Aquades Steril,

5. Alkohol 70% dalam botol semprot,

6. Paper disc yang terbuat dari kertas saring.

3.3 METODE

Uji resistensi dilakukan dengan tiga langkah utama, yaitu 1) persiapan alat dan

bahan, sesuai yang tertera pada petunjuk praktikum, 2) pembuatan larutan antimikrobia

dari antibiotik chloramfenikol 500 mg, dan 3) pengujian kekuatan antibiotik antimikrobia

dengan menggunakan metode Kirby-Bauer.

Sebelum melakukan uji resistensi, yang dilakukan terlebih dahulu adalah

meremajakan bakteri/sub-culture bakteri yang akan digunakan pada media tauge cair.

xi

Setelah bakteri diremajakan, kemudian bakteri di inkubasi pada suhu 28-30oC selama 24

jam. Setelah 24 jam inkubasi bakteri dan seluruh alat dan bahan telah siap, Praktikan

melarutkan antibiotik dengan berbagai konsentrasi, yaitu konsentrasi 50 mg/ml, 25 mg/ml,

dan 5 mg/ml. Pembuatan larutan antibiotik dengan konsentrasi 50 mg/ml diperoleh

dengan cara mengisi cawan petri yang telah steril dengan akuades steril sebanyak 10 ml

ditambah dengan 500 mg serbuk antibiotik. Pembuatan larutan antibiotik dengan

konsentrasi 25 mg/ml dibuat dengan cara mengambil 5 ml dari antibiotik yang memiliki

konsentrasi 50 mg/ml dengan menggunakan spuit berukuran 5 ml menambahkan 5 ml

akuades steril; dan pembuatan larutan antibiotik dengan konsentrasi 5 mg/ml diperoleh

dari pengambilan antibiotik konsentrasi 25 mg/ml sebanyak 5 ml dengan menggunakan

spuit berukuran 5 ml dan ditambahkan dengan 8 ml akuades steril.

Berikutnya dilakukan uji resistensi pada antibiotik yang telah diencerkan dengan

konsentrasi 50 mg/ml, 25 mg/ml, dan 5 mg/ml dengan menggunakan uji difusi obat

dengan metode Kirby-Bauer. Metode ini diawali dengan menginokulasikan 1 ml kultur

bakteri dari medium tauge cair pada cawan petri berisi medium TA (tauge agar) dengan

menggunakan spuit berukuran 1 ml. Paper disc disiapkan dengan membuat plot lingkaran

pada kertas saring dengan diameter 0,5 cm dan direndam dalam larutan antibiotik

dengan berbagai konsentrasi yang berbeda. Setiap konsentrasi dari larutan antibiotik

diberi sebanyak 2 paper disc dan direndam selama 2 menit, kemudian dikeringanginkan

sejenak. Paper disc kemudian ditempelkan secara tersebar pada masing-masing cawan

petri dengan jarak yang berjauhan dari paper disc lain dan tidak di bagian tepi dasar

cawan dengan teknik aseptis. Proses inokulasi bakteri pada cawan petri dilakukan secara

duplo. Cawan petri yang telah ditanami bakteri dan paper disc yang direndam pada

larutan antibiotik dengan konsentrasi yang berbeda ini kemudian diinkubasi pada

inkubator selama 24 jam. Setelah cawan petri ini diinkubasi selama 24 jam, praktikan

mengamati terbentuknya zona inhibisi atau daerah hambatan. Apabila terbentuk zona

hambatan, maka bakteri yang diujikan bersifat sensitif terhadap antibiotik. Sebaliknya,

apabila tidak terbentuk zona inhibisi, maka bakteri bersifat resisten. Langkah akhir,

apabila dijumpai zona inhibisi, yang perlu dilakukan adalah mengukur diameter

terbentuknya zona hambat pada masing-masing paper disc yang terdapat di masing-

masing cawan petri.

xii

BAB IV

PEMBAHASAN

4.1 Hasil

Tabel 4.1 Pengamatan Uji Resistensi Pada Cawan Petri

Identifikasi Uji Resistensi Cawan A Uji Resistensi Cawan B

Gambar

Mikroorganisme Bakteri jus buah jambu biji busuk Bakteri jus buah jambu biji busuk

Morfologi Karakteristik optik: Opaque

Bentuk: punctiform

Elevasi: raised

Bentuk tepian: entire

Karakteristik optik: Opaque

Bentuk: punctiform

Elevasi: raised

Bentuk tepian: entire

Bentuk sel Coccus (bulat) Coccus (bulat)

Susunan sel Monococcus Monococcus

Gram (+) atau

(-)

Negatif (-) Negatif (-)

Diameter zona

hambatan

Resisten Resisten

xiii

4.2 Pembahasan

Percobaan ini dilakukan agar mahasiswa dapat melakukan uji sensitifitas mikrobia terhadap antibiotik tertentu

menggunakan metode Kirby-Bauer, dan menentukan apakah bakteri sampel sensitif atau resisten terhadap antibiotk

yang diujikan.

Pada percobaan ini, konsentrasi antibiotik ditentukan menggunakan metode Kirby-Bauer, yaitu pengukuran

sensitifitas antibiotik menggunakan paper disk yang berisi agen antimikrobia yang akan berdifiusi ke dalam media

agar yang berisi bakteri. Metode Kirby-Bauer merupakan cara untuk menentukan sensitifitas antibiotik pada bakteri.

Daerah / zona bening di sekitar paper disk merupakan daerah hambatan bakteri oleh antibiotik yang terbentuk di

permukaan agar. Sensitifitas bakteri terhadap antibiotik ditentukan oleh diameter zona hambatan yang terbentuk.

Semakin besar diameter zona hambat, maka pertumbuhan bakteri semakin terhambat.

Dalam percobaan uji rsistensi ini, antibiotik yag digunakan adalah kloramfeniol (Chloramphenicol) 500 mg, yang

tidak didapatkan zona hambat / zona bening. Hal tersebut menunjukkan bahwa bakteri sampel resisten terhadap

antibiotik kloramfenikol 500 mg, ditunjukkan dengan tidak terbentuknya zona hambat / zona bening pada media

agar. Aktivitas antibakteri bkerja dengan menghambat sintesis protein dengan jalan menghambat sintesis protein

dengan jalan mengikat ribosom subunit 50S yang merupakan langkah penting dalam pembentukan ikatan peptida.

Kloramfenikol efektif terhadap bakteri aerob gram positif dan beberapa bakteri aerob gram negatif.

Kloramfenikol merupakan antibiotik yang mempunyai aktifitas bakteriostatik, yaitu menghambat pertumbuhan

tanpa membunuh bakteri, dan pada dosis tinggi bersifat bakterisid, yang membunuh bakteri. Mekanisme Kerja

Kloramfenikol adalah sebagai berikut.

1. Bekerja menghambat sintesis protein bakteri

2. Obat dengan mudah masuk ke dalam sel melalui proses difusi terfasilitasi

3. Obat mengikat secara reversible unit ribosom 50S, sehingga mencegah ikatan asam amino yang

mengandung ujung aminoasil t-RNA dengan salah satu tempat berikatannya di ribosom

4. Pembentukan ikatan peptida dihambat selama obat berikatan dengan ribosom

5. Kloramfenikol juga dapat menghambat sistesis protein mitokondria sel mamalia karena ribosom

mitokondria mirip dengan ribosom bakteri

Hasil percobaan menunjukkan, bakteri uji resisten terhadap kloramfenikol. Kloramfenikol merupakan antibiotik

yang sensitif terhadap beberapa bakteri gram negatif, sedangkan pada bakteri sampel jus jambu busuk termasuk

dalam beberapa bakteri gram negatif yang resisten terhadap kloramfenikol, sehingga tidak terbentuk zona bening

pada media agar.

xiv

BAB V

PENUTUP

5.1 KESIMPULAN

Berdasarkan hasil praktikum yang telah dilakukan, maka dapat dsimpulkan bahwa:

1. Cara menguji tingkat reistensi suatu bakteri uji terhadap antibiotik tertentu dapat

dilakukan dengan menggunakan uji difusi obat metode Kirby-Bauer dengan

menggunakan paper disc yang dicelupkan pada larutan antibiotik dengan

konsentrasi tertentu dan diletakkan pada cawan petri yang berisi medium tauge

agar dan bakteri.

2. Efektivitas suatu antibiotik terhadap bakteri uji dapat diketahui dengan cara

mengukur diameter zona hambat yang terbentuk di sekitar paper disc yang tidak

ditumbuhi oleh mikrobia. Bakteri sampel jus jambu biji busuk resisten terhadap

antibiotik Chloramfenikol.

5.2 SARAN

Berdasarkan hasil praktikum yang telah dilakukan, saran yang diberikan pada

praktikan berikutnya yaitu:

1. Diharapkan praktikan lebih bekerja secara hati-hati dan lebih aseptis dalam

melakukan praktikum uji resistensi untuk menghindari terjadinya kontaminasi

bakteri.

2. Diharapakan saat meletakkan paper disc yang telah direndam dengan larutan

antibiotik dengan konsentrasi yang berbeda harus dilakukan secara hati-hati dan

terdapat jarak antara paper disc lain yang berbeda konsentrasi. Hal ini bertujuan

agar zona hambat yang terbentuk dapat terlihat jelas dan tidak menumpuk di

daerah paper disc lain sehingga memudahkan praktikan dalam pengukuran

diameternya.

xv

DAFTAR PUSTAKA

Aryulina, Diah, dkk. 2006. Biologi 3. Jakarta: Penerbit Erlangga.

Cahyano, B. 2005. Teknik Budi Daya dan Analisis Usaha Tani. Yogyakarta: Kanisius.

Chambers, H. F. 2004. Farmakologi Dasar dan Klinik. 8th ed. Jakarta: Salemba Medika

Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme. Bandung: CV. Yrama Widya.

Jawet E. 1998. Prinsip kerja obat antimikroba. In : Katzung B, eds. Farmakologi dasar dan

klinik. Jakarta : EGC.

Mulyaningsih, S. 2004. Mikrobiologi Dasar. Yogyakarta: FMIPA UII.

Pratiwi,T.Sylvia. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Erlangga.

Rostinawati, Tina. 2009. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Bunga Rosella Terhadap E. Coli,

S.Aureus Dengan Metode Difusi Agar. Bandung: UNPAD.

Syahrurrahman, A.,dkk.,1994, Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran, Fakultas Kedokteran UI,

Jakarta.

Syamsuni, H., Drs. 2005. Farmasetika Dasar dan Hitungan Farmasi. Jakarta: Penerbit EGC.

Vorber, auf die eingeschr, Hpber- prfg, Staatl, zugel, Fernlehrgang. 2010. Bahaya

Resisitensi Antibiotika. Berlin.

Waluyo, Lud. 2005. Mikrobiologi Umum. Jakarta: Erlangga.

Wasitaningrum, I. D. A. 2009. Uji Resistensi Bakteri Staphylococcus Aureus dan Escherichia

Coli Dari Isolat Susu Sapi Segar Terhadap Beberapa Antibiotik. Skripsi. Tidak

dipublikasikan. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Zaraswati Dwyana 2004. Mikrobiologi Dasar. Universitas Makassar: Hasanuddin.