uji antiinflamasi ekstrak etanol batang tanaman …
TRANSCRIPT
UJI ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL BATANG
TANAMAN PEPAYA JEPANG (Cnidoscolus aconitifolius (Mill)
I.M.Johnst.) PADA MENCIT PUTIH JANTAN GALUR SWISS
WEBSTER
SKRIPSI
diajukan sebagai salah satu syarat menyelesaikan Program Sarjana (S1)
pada Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Al-Ghifari
Oleh :
MUHAMMAD AKBAR ARIQSYAH
D1A151136
JURUSAN FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS AL-GHIFARI
BANDUNG
2019
ii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan kekuatan dan
petunjuk sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “UJI
ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL BATANG TANAMAN PEPAYA JEPANG
(Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) PADA MENCIT PUTIH JANTAN
GALUR SWISS WEBSTER ” dapat diselesaikan dengan tepat waktu.
Maksud dan tujuan penulisan skripsi ini adalah untuk memenuhi salah satu
syarat untuk menyelesaikan pendidikan dan memperoleh gelar Sarjana Pada
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Al-
Ghifari Bandung.
Dalam menyelesaikan penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari bimbingan
pengarahan dan bantuan serta dorongan dari berbagai pihak. Ucapan terima ksih
penulis sampaikan kepada :
1. Bapak. Dr. H Didin Muhafidin S .I. P, M.Si. selaku Rektor Universitas Al-
Ghifari Bandung.
2. Bapak Ardian Baitariza, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Al-Ghifari Bandung.
3. Ibu Ginayanti Hadisoebroto, M.Si, Apt selaku Ketua Jurusan Farmasi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Al-Ghifari
Bandung.
iv
4. Ibu Endah Kartikawati,M.Sc dan Ibu Dytha Andri Deswati, M.Si, Apt.
selaku dosen pembimbing, atas segala bimbingan, dukungan motivasi dan
nasehat serta bantuan pemikirannya terhadap penyelesaian skripsi ini.
5. Seluruh staf pengajar, karyawan dan staff Laboratorium Jurusan Farmasi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Al-Ghifari
Bandung.
6. Kedua orang tua tercinta Ibunda dan Ayahanda yang senantiasa
memberikan doa, kasih sayang, serta dukungan moril maupun material.
7. Rekan-rekan khususnya Farmasi angkatan 2015 yang selalu memberikan
semangat, bantuan dan sarannya hingga terselesaikannya skripsi ini.
Semoga bantuan dan dukungannya yang telah diberikan kepada penulis
mendapat pahala dari Allah SWT. Dengan keterbatasan pengetahuan dan
kemampuan, penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam menyelesaikan
skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang
membangun demi kebaikan di masa mendatang yang lebih baik.
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat dijadikan bahan
pertimbangan dalam melakukan penelitian lebih lanjut dalam rangka
pengembangan ilmu pengetahuan dan wawasan.
Bandung, Agustus 2019
Penulis
i
ABSTRAK
Di Indonesia banyak jenis tanaman tumbuh yang dapat digunakan sebagai bahan
obat. Tanaman obat banyak digunakan masyarakat terutama dalam upaya
preventif, promotif dan rehabilitatif. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
efek antiinflamasi dari ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang (Cnidoscolus
aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) yang ditinjau dari penurunan volume edema
telapak kaki mencit yang diinduksi karagenin. Penelitian ini menggunakan metode
edema buatan pada telapak kaki mencit dengan induksi karagenin 1%, dilakukan
pada 25 mencit putih jantan galur Swiss Webster yang dibagi menjadi 5 kelompok.
Kontrol negatif diberikan CMC-Na, Natrium dikofenak sebagai kontrol positif
dan ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang dengan dosis 100 mg/kgBB,
200 mg/kgBB, 400 mg/kgBB secara oral 60 menit sebelum diinduksi karagenin.
Pengukuran volume edema dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit setelah
induksi karagenin. Dari hasil pengujian ekstrak etanol batang tanaman Pepaya
Jepang menunjukkan bahwa persen inhibisi edema maksimal yaitu pada menit ke-
360 dari semua variasi dosis tersebut. Dosis terbaik yang memiliki persentase
inhibisi edema terbesar yaitu dosis 400 mg/kgBB sebesar 82,912% pada menit ke-
360 (p <0,05).
Kata kunci : Batang, Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconifolius), antiinflamasi,
edema
ii
ABSTRACT
In Indonesian, there are many population of plants that can be used as medicinal
ingredients. Medicinal plants are widely used by the community, especially in
preventive, promotive and rehabilitative efforts. This study aims to determine the
anti-inflammatory effect of the ethanol extract of Pepaya Jepang (Cnidoscolus
aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) in terms of the decrease in volume of mice foot
edema induced by caragenine. This study used the method of artificial edema on
the foot of mice with 1% carragenine induction, carried out on 25 male white mice
Swiss Webster lines which were divided into 5 groups. Negative control was given
CMC-Na, diclofenac sodium as a positive control and ethanol extract of Pepaya
Jepang stem with a dose of 100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB, 400 mg/kgBB orally 60
minutes before caragenine induction. The edema volume measurement was carried
out every 30 minutes dor 360 minutes after caragenine was induced. From the
results of test the ethanol extract of Pepaya Jepang stems showed that the maximum
percent inhibition edema is at the 360 minute of all variations of the dose. The best
dose which has the largest percentage of edema inhibition is the dose of 400
mg/kgBB of 82.912% at 360 minutes (p <0.05).
Keywords: Stem, Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.),
anti-inflammatory, edema
iii
DAFTAR ISI
ABSTRAK .............................................................................................................. i
ABSTRACT ............................................................................................................ ii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vi
DAFTAR TABEL ............................................................................................... vii
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... viii
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ................................................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ............................................................................................ 3
1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................................. 3
1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................................... 4
1.4.1 Manfaat Bagi Pendidikan ....................................................................... 4
1.4.2 Manfaat Bagi Masyarakat ....................................................................... 4
1.5 Waktu dan Tempat Penelitian .......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 5
2.1 Tanaman Pepaya Jepang .................................................................................. 5
2.1.1 Klasifikasi Tanaman Pepaya Jepang ...................................................... 5
2.1.2 Morfologi Pepaya Jepang ....................................................................... 6
2.1.3 Kandungan dan Kegunaan Pepaya Jepang ............................................. 7
2.2 Taksonomi dan Morfologi Mencit (Mus musculus L.) .................................... 7
2.3 Simplisia .......................................................................................................... 8
2.4 Ekstrak ............................................................................................................. 9
2.5 Ekstraksi ......................................................................................................... 10
2.5.1 Pelarut Etanol ........................................................................................ 10
2.5.2 Metode Ekstraksi .................................................................................. 11
2.6 Inflamasi ........................................................................................................ 13
2.6.1 Inflamasi Akut ...................................................................................... 14
2.6.2 Inflamasi Kronik ................................................................................... 15
2.6.3 Mekanisme Inflamasi ............................................................................ 15
iv
2.6.4 Tanda-tanda Inflamasi .......................................................................... 15
2.7 Obat-obat Antiinflamasi ................................................................................. 17
2.7.1 Antiinflamasi Steroid ............................................................................ 17
2.7.2 Antiinflamasi Non Steroid (AINS) ....................................................... 17
2.7.3 Natrium Diklofenak .............................................................................. 18
2.8 Metode Pengujian Antiinflamasi ................................................................... 19
2.8.1 Pengujian Inflamasi Akut ..................................................................... 19
2.8.2 Pengujian Inflamasi Kronik .................................................................. 20
2.9 Karagenin ....................................................................................................... 21
2.10 Pletismometer ................................................................................................ 22
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ......................................................... 23
3.1 Alat Penelitian ................................................................................................ 23
3.2 Bahan Penelitian ............................................................................................ 23
3.2.1 Bahan tanaman ..................................................................................... 23
3.2.2 Bahan kimia .......................................................................................... 23
3.2.2 Hewan uji .............................................................................................. 23
3.3 Pengumpulan Bahan Tanaman ...................................................................... 24
3.4 Determinasi Tanaman .................................................................................... 24
3.5 Pembuatan Simplisia ...................................................................................... 24
3.6 Penetapan Kadar Simplisia ............................................................................ 24
3.7 Ekstraksi Batang Pepaya Jepang .................................................................... 25
3.8 Skrining Fitokimia ......................................................................................... 25
3.9 Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Batang tanaman Pepaya Jepang ....... 27
3.9.1 Penyiapan Hewan Uji ........................................................................... 27
3.9.2 Perhitungan Dosis ................................................................................. 27
3.9.3 Pembuatan Suspensi Na-CMC 1% ....................................................... 28
3.9.4 Pembuatan Suspensi Karagenin 1% ..................................................... 28
3.9.5 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Dan Natrium Diklofenak............ 28
3.9.6 Pengujian Efek Antiinflamasi ............................................................... 28
3.10 Analisis Data ................................................................................................. 30
v
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 31
4.1 Pengumpulan bahan tanaman......................................................................... 31
4.2 Determinasi tanaman ..................................................................................... 31
4.3 Hasil Pengolahan Simplisia ........................................................................... 31
4.4 Hasil Penetapan Kadar Air ............................................................................. 32
4.5 Ekstraksi Batang tanaman Pepaya Jepang ..................................................... 32
4.6 Hasil Skrining Fitokimia ................................................................................ 32
4.7 Hasil Uji Efek Antiinflamasi ......................................................................... 33
4.7.1. Volume Rata-rata Edema...................................................................... 33
4.7.2. Rata-rata persen Edema ........................................................................ 36
4.7.3. Rata-rata persen inhibisi edema ............................................................ 38
BAB V SIMPULAN DAN SARAN .................................................................... 42
5.1. SIMPULAN ................................................................................................... 42
5.2. SARAN .......................................................................................................... 42
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 43
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Pepaya Jepang (Cnidoscolus Aconitifolius (Mill.) I.M.Johnst.) .......... 6
Gambar 2.2 Mencit (Mus musculus L.) .................................................................. 7
Gambar 2.3 Struktur Kimia Natrium Diklofenak ................................................. 19
Gambar 4.1 Grafik Rata-Rata Volume Edema ..................................................... 34
Gambar 4.2 Grafik Persen Rata-Rata Edema ........................................................ 36
Gambar 4.3 Grafik Rata-Rata Persen Inhibisi Edema .......................................... 39
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 4. 1 Hasil Skrining Fitokimia Pada Ekstrak Batang Tanaman Pepaya Jepang 33
Tabel 4. 2 Rata-Rata Volume Edema Telapak Kaki Mencit ..................................... 34
Tabel 4. 3 Data Persen Rata-Rata Edema .................................................................. 36
Tabel 4. 4 Data Rata-Rata Persen Inhibisi Edema ..................................................... 38
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran I Surat Determinasi Tanaman .............................................................. 47
Lampiran II Bagan Kerja ..................................................................................... 48
Lampiran III Perhitungan Dosis ........................................................................... 48
Lampiran IV Tabel Profil Berat Badan Mencit.................................................... 50
Lampiran V Tabel jumlah obat yang diberikan kepada mencit ........................... 51
Lampiran VII Data uji efek antiinflamasi ............................................................ 53
Lampiran VIII Hasil analisis data ......................................................................... 55
Lampiran IX Dokumentasi .................................................................................... 60
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Banyak jenis tanaman yang dapat tumbuh di Indonesia yang sebagian besar
dapat digunakan sebagai sumber bahan obat alam dan telah banyak digunakan
oleh masyarakat secara turun temurun untuk keperluan pengobatan guna
mengatasi masalah kesehatan. Obat tradisional tersebut perlu diteliti dan
dikembangkan sehingga dapat bermanfaat secara optimal untuk peningkatan
kesehatan masyarakat (Tjokronegoro dan Baziad, 1992).
Penggunaan bahan alam, baik sebagai obat maupun tujuan lain cenderung
meningkat, terlebih dengan adanya isu back to nature. Obat tradisional dan
tanaman obat banyak digunakan masyarakat terutama dalam upaya preventif,
promotif dan rehabilitatif. Sementara ini banyak orang beranggapan bahwa
penggunaan tanaman obat atau obat tradisional relatif lebih aman dibandingkan
obat sintesis. Agar penggunaannya optimal, perlu diketahui informasi yang
memadai tentang tanaman obat. Informasi yang memadai akan membantu
masyarakat lebih cermat untuk memilih dan menggunakan suatu produk obat
tradisional atau tumbuhan obat dalam upaya kesehatan (Tjokronegoro dan
Baziad, 1992).
Inflamasi merupakan suatu respon protektif normal terhadap luka jaringan
yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang merusak, atau zat-zat
2
mikrobiologik. Inflamasi adalah usaha tubuh untuk menginaktifasi atau merusak
organisme yang menyerang, menghilangkan dan mengatur derajat perbaikan
jaringan (Mycek dkk, 2001). Tujuannya adalah untuk memperbaiki kerusakan atau
setidaknya untuk membatasinya dan juga untuk menghilangkan penyebabnya,
misalnya, bakteri atau benda asing (Silbernagl dan Lang, 2000).
Kerusakan sel akibat dari inflamasi terjadi pada membran sel, menyebabkan
leukosit melepaskan enzim lisosom dan jalur siklooksigenase (COX) dalam
metabolisme arakhidonat menghasilkan prostaglandin yang memiliki berbagai efek
pada pembuluh darah, ujung saraf, dan pada sel yang terlibat dalam peradangan.
Inflamasi ini ditandai dengan perubahan makroskopik lokal yaitu dengan adanya
rubor, tumor, kalor, dolor dan functiolesia (Sander, 2010).
Inflamasi biasanya diobati dengan menggunakan obat antiinflamasi golongan
steroid (AIS) dan obat antiinflamasi golongan nonsteroid (AINS). Obat
antiinflamasi kimia banyak digunakan masyarakat karena mempunyai efek yang
cepat dalam menghilangkan inflamasi tetapi juga mempunyai resiko efek samping
yang berbahaya, antara lain gangguan pada saluran cerna, darah, pernafasan, proses
metabolik, hipersensitivitas. (Pramitaningastuti, 2017).
Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) adalah semak
yang dibudidayakan untuk makanan sejak zaman dahulu karena manfaat kesehatan.
Berbagai klaim telah dibuat untuk khasiat obat sebagai pengobatan untuk berbagai
penyakit (Adaramoye, 2010). Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconitifolius (Mill)
I.M.Johnst.) mengandung tanin, saponin, alkaloid, flavonoid, glikosida sianogen,
3
fitat, vitamin A, vitamin B3, vitamin B6, vitamin B12, vitamin C dan vitamin E
(Olaniyan, 2017).
Flavonoid merupakan senyawa yang memiliki aktivitas farmakologi sebagai
antiinflamasi. Penelitian tentang flavanoid pada batang tanaman Pepaya Jepang
(Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) belum pernah dilakukan Sehingga
peneliti ingin melakukan uji antiinflamasi ekstrak etanol batang tanaman Pepaya
Jepang (Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) pada mencit putih jantan
galur Swiss webster.
1.2 Rumusan Masalah
1. Apakah ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang (Cnidoscolus
aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) memiliki efek antiinflamasi terhadap mencit
putih jantan galur Swiss webster?
2. Berapakah dosis terbaik ektrak etanol 96% batang tanaman Pepaya Jepang
(Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) yang memiliki efek
antiinflamasi terhadap mencit putih jantan galur Swiss webster ?
1.3 Tujuan Penelitian
1. Menguji efek antiinflamasi dari ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang
(Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) terhadap mencit putih jantan
galur Swiss Webster.
4
2. Untuk mengetahui dosis terbaik dari ekstrak etanol batang tanaman Pepaya
Jepang (Cnidoscolus aconitifolius (Mill) I.M.Johnst.) terhadap mencit putih
jantan galur Swiss Webster.
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Bagi Pendidikan
Melalui penelitian ini diharapkan dapat menambah wawasan lebih luas bagi
sivitas akademika serta menambah referensi bagi pendidikan kedokteran dan ilmu
kesehatan mengenai efek antiinflamasi ekstrak etanol batang tanaman Pepaya
Jepang (Cnidoscolus aconitifolius (Mill.) I.M.Johnst.) pada mencit putih jantan
Galur Swiss Webster yang diinduksi oleh karagenin.
1.4.2 Manfaat Bagi Masyarakat
Melalui penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi pada
masyarakat bahwa ekstrak batang daun Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconitifolius
(Mill.) I.M.Johnst.). memiliki efek antiinflamasi.
1.5 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan pada bulan Maret sampai dengan Mei 2019 di
Laboratorium Farmakologi, Bahan Alam, Jurusan Farmasi, Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Al-Ghifari Bandung.
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tanaman Pepaya Jepang
Cnidoscolus aconitifolius (Mill.) I.M.Johnst. umumnya dikenal sebagai Chaya
atau bayam pohon, merupakan semak abadi berdaun besar yang tumbuh cepat yang
berasal dari Semenanjung Yucatἀn, Meksiko, Amerika Tengah. Pepaya Jepang
terdiri dari beberapa subspecies dan varietas. Ada yang tumbuh liar dengan duri
halus (Pepaya Jepang brava), adapula yang dibudidayakan dan tidak berduri
(Pepaya Jepang mansa). Pepaya Jepang juga dikenal dengan sebutan tree spinach.
Pepaya Jepang mengandung senyawa beracun glikosida sianogenik dalam jumlah
yang bervariasi. Glikosida sianogenik dapat diproses dengan cepat oleh enzim
dalam tubuh dengan mengubahnya menjadi hidrogen sianida (HCN). Pepaya
Jepang menjadi salah satu makanan yang berbahaya apabila disantap dengan
keadaan mentah. Oleh sebab itu, Pepaya Jepang harus dimasak sekitar 5-15 menit
sebelum dimakan (Syubaikah, 2016).
2.1.1 Klasifikasi Tanaman Pepaya Jepang
Menurut Cronquist (1981), klasifikasi Pepaya Jepang (Cnidoscolus
aconitifolius (Mill.) I.M.Johnst.) adalah sebagai berikut :
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
6
Class : Magnoliopsida
Ordo : Malpighiales
Famili : Euphorbiaceae
Genus : Cnidoscolus
Spesies : Cnidoscolus aconitifolius (Mill.) I.M.Johnst.
2.1.2 Morfologi Tanaman Pepaya Jepang
Gambar 2.1 Tanaman Pepaya Jepang (Cnidoscolus Aconitifolius (Mill.)
I.M.Johnst.)
(Sumber : Jagad Tani)
Pepaya Jepang merupakan tanaman pohon kecil yang bisa tumbuh hingga
ketinggian 6 meter, namun biasanya ditebang dan dipelihara dengan ketinggian 2
meter untuk memudahkan pemanenan daunnya sebagai sayuran. Tanaman ini
adalah semak hijau berdaun lobus melengkung, getah susu, dan bunga putih kecil
pada cymes bercabang dikotomis. Daunnya besar dan lebar atau kadang-kadang
sukulen, panjangnya hingga 32 cm dan lebar 30 cm, pada batang yang panjangnya
mencapai 28 cm. (Ross-Ibarra, J. & Molina-Cruz, A., 2002).
7
2.1.3 Kandungan dan Kegunaan Tanaman Pepaya Jepang
Kandungan kimia yang terdapat dalam Tanaman Pepaya Jepang adalah
flavonoid, saponin, alkaloid, phlorotannin, tanin, oksalat, sianogen glikosida,
steroid antrakuinon, fenol, fosfor, magnesium, seng, besi, serta kandungan nutrisi
berupa serat, protein, dan kandungan rendah lemak (Lwuji, 2015; Hernandez,
2017). Pepaya Jepang digunakan untuk menyembuhkan alkoholisme, penderita
diabetes, insomnia, gangguan kulit, penyakit kelamin, asam urat, sengatan
kalajengking dan untuk meningkatkan fungsi otak dan memori (Grubben dkk,
2004). Pepaya Jepang ini digunakan dalam pengobatan tradisional di meksiko dan
telah terbukti memiliki efek antidiabetik, antimutagenik, antioksidan,
hipoglikemik, antiinflamasi, antiprotozoal, dan antibakteri (Hernandez, 2017).
2.2 Taksonomi dan Morfologi Mencit (Mus musculus L.)
Gambar 2.2 Mencit (Mus musculus L.)
(Sumber : Roemah Mencit Medan)
Taksonomi mencit adalah sebagai berikut :
Kingdom : Animalia
Filum : Chordata
8
Class : Mamalia
Ordo : Rodentia
Famili : Muridae
Genus : Mus
Spesies : Mus musculus L.
Mencit secara biologis memiliki ciri umum, yaitu berupa rambut berwarna
putih atau keabu-abuan dengan warna perut sedikit lebih pucat. Mencit merupakan
hewan nokturnal yang sering melakukan aktivitasnya pada malam hari. Perilaku
mencit dipengaruhi oleh beberapa faktor, diantaranya faktor internal seperti seks,
perbedaan umur, hormon, kehamilan, dan penyakit, faktor eksternal seperti
makanan, minuman, dan lingkungan disekitarnya. Mencit dapat bertahan hidup
selama 1-2 tahun dan dapat juga mencapai umur 3 tahun. Lama mengandung 19-
21 hari sedangkan umur untuk siap dikawinkan 8 minggu. Perkawinan mencit
terjadi pada saat mencit betina mengalami estrus. Satu induk dapat menghasilkan
6-15 ekor anak (Mangkoewidjojo dan Smith, 1988).
2.3 Simplisia
Simplisia adalah bahan alam yang digunakan sebagai bahan obat dan belum
mengalami pengolahan apapun juga, dan kecuali dinyatakan lain, berupa bahan
yang telah dikeringkan. Simplisia dibedakan menjadi simplisia nabati, simplisia
hewani dan simplisia pelikan (mineral). Simplisia nabati adalah simplisia yang
berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan. Eksudat
tumbuhan ialah isi sel yang secara spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang
9
dengan cara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa
kimia murni (Depkes RI, 2000).
2.4 Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa
aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai,
kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang
tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan
(Depkes RI, 2000).
Faktor yang berpengaruh pada mutu ekstrak adalah :
1. Faktor biologi
Mutu ekstrak dipengaruhi dari bahan asal (tumbuhan obat), dipandang secara
khusus dari segi biologi yaitu identitas jenis, lokasi tumbuhan asal, periode
pemanenan, penyimpanan bahan, umur tumbuhan dan bagian yang digunakan.
2. Faktor kimia
Mutu ekstrak dipengaruhi dari bahan asal (tumbuhan obat), dipandang secara
khusus dari kandungan kimia, yaitu :
a. Faktor internal, seperti jenis senyawa aktif dalam bahan, komposisi kualitatif
senyawa aktif, kadar total rata-rata senyawa aktif.
b. Faktor eksternal, seperti metode ekstraksi perbandingan ukuran alat ekstraksi,
pelarut yang digunakan dalam ekstraksi, kandungan logam berat, ukuran
kekerasan, dan kekeringan bahan (Depkes RI, 2000).
10
2.5 Ekstraksi
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair (Depkes
RI, 2000).
Kelarutan dan stabilitas senyawa pada simplisia terhadap pemanasan,
udara, cahaya, logam berat dan derajat keasaman dipengaruhi olah struktur kimia
yang berbeda-beda (Depkes RI, 2000).
Simplisia yang lunak seperti rimpang, akar dan daun mudah diserap oleh
pelarut, sehingga pada proses ekstraksi tidak perlu diserbuk sampai halus.
Sedangkan simplisia yang keras seperti biji, kulit kayu, dan kulit akar susah
diserap oleh pelarut, karena itu perlu diserbuk sampai halus. Selain sifat fisik dan
senyawa aktif dari simplisia, senyawa-senyawa yang terdapat dalam simplisia
seperti protein, karbohidrat, lemak dan gula juga harus diperhatikan (Depkes RI,
2000).
2.5.1 Pelarut Etanol
Etanol telah banyak diteliti sebagai pelarut pada proses ekstraksi. Etanol
diketahui tidak beracun. Penggunaan etanol sebagai pelarut ekstraksi dapat
menghindari masalah toksisitas makanan untuk bahan pakan ternak dan telah
dikenal sebagai pelarut yang baik untuk ekstraksi polifenol dan aman untuk
dikonsumsi manusia (Baümler dkk, 2017; Do dkk, 2014).
Polaritas pelarut menentukan perbedaan jenis, komposisi, dan aktivitas
antioksidan fitokimia. Etanol efektif untuk mengekstrak sterol, flavonoid, fenolik,
dan alkaloid. Penelitian sebelumnya menginformasikan bahwa etanol dapat
11
melarutkan senyawa polar, seperti gula, asam amino, senyawa glikosida, senyawa
fenolik dengan berat molekul rendah hingga menengah dan polaritas sedang,
aglycon flavonoid, antosianin, terpenoid, saponin, tanin, xantoxilin, totarol,
quacinoid , lakton, flavon, fenon, dan polifenol (Widyawati dkk, 2014).
2.5.2 Metode Ekstraksi
Dengan menggunakan metode penyarian atau pelarut dalam ekstraksi dapat
dibedakan menjadi 2 macam, yaitu cara dingin dan cara panas.
2.5.2.1 Cara Dingin
1. Maserasi
Maserasi ialah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut
dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan
(kamar). Secara teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian
konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan
yang kontinyu (terus-menerus). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan
penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama, dan
seterusnya. Cara ini dapat menarik zat-zat berkhasiat yang tahan pemanasan
maupun yang tidak tahan pemanasan (Depkes RI, 2000).
2. Perkolasi
Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna
(exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan.
Proses ini terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap
perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai
12
diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan. Ekstraksi ini
membutuhkan pelarut yang lebih banyak (Depkes RI, 2000).
2.5.2.2 Cara Panas
1. Refluks
Refluks merupakan ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya,
selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan
adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu
pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna
(Depkes RI, 2000).
2. Soxhletasi
Soxhletasi ialah ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang selalu baru yang
umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinyu
dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendinginan balik (Depkes
RI, 2000).
3. Digesti
Digesti merupakan maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinyu) pada
temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum
dilakukan pada temperatur 40-50oC (Depkes RI, 2000).
4. Infus
Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air
mendidih, temperatur terukur 96oC-98oC selama waktu tertentu (15-20 menit).
13
Infus pada umumnya digunakan untuk menarik atau mengekstraksi zat aktif yang
larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Hasil dari ekstrak ini akan menghasilkan
zat aktif yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh kuman dan kapang, sehingga
ekstrak yang diperoleh dengan infus tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam
(Depkes RI, 2000).
2.6 Inflamasi
Inflamasi adalah suatu reaksi kompleks terhadap agen/bahan yang merugikan,
yang berupa respons vaskular, migrasi, dan aktivasi leukosit, serta reaksi sistemik.
Fungsi respon inflamasi untuk menghancurkan, mengencerkan, atau membatasi
agen yang merugikan, dan memicu terjadinya serangkaian proses yang mencoba
untuk memulihkan dan mengganti jaringan yang rusak. Pada dasarnya inflamasi
merupakan suatu respons protektif untuk menyingkirkan agen penyebab cedera dan
konsekuensi dari cedera tersebut, seperti sel dan jaringan nekrotik. Untuk
memunculkan reaksi inflamasi, sebuah jaringan harus hidup dan tentunya harus
memiliki mikrosirkulasi fungsional (Kumar dkk, 2009; Anderson dkk 2006).
Inflamasi dibagi menjadi pola akut dan kronik. Inflamasi akut memiliki awitan
cepat (detik atau menit) dan berlangsung relatif singkat, dalam beberapa menit, jam,
atau hari, karakteristik utamanya adalah eksudasi cairan dan protein plasma
(edema) dan imigrasi leukosit terutama neutrofil. Inflamasi kronik berlangsung
lebih lama, secara histologi ditandai dengan adanya limfosit dan makrofag,
proliferasi pembuluh darah, fibrosis, dan nekrosis jaringan (Kumar dkk, 2009).
14
Saat proses inflamasi berlangsung, terjadi biosintesis prostaglandin. Ketika
terjadi kerusakan pada sel, fosfolipid pada membran sel akan di ubah menjadi asam
arakidonat oleh enzim fosfolipase. Asam arakidonat selanjutnya akan di ubah
menjadi hidroperoksid dengan bantuan enzim lipoksigenase dan menjadi
endoperoksid dengan bantuan enzim siklooksigenase. Hidroperoksid yang
terbentuk akan diubah menjadi leukotrien, sementara endoperoksid akan diubah
menjadi prostaglandin, tromboksan, dan prostasiklin yang berperan pada saat
proses inflamasi berlangsung (Gan dkk, 2012).
2.6.1 Inflamasi Akut
Pada inflamasi akut proses berlangsung singkat beberapa menit hingga
beberapa hari, dengan gambaran utama eksudasi cairan dan protein plasma serta
emigrasi sel leukosit terutama neutrofil ( Pringgoutomo et al, 2000).
Menurut Kumar dkk (2009), terdapat tiga komponen pada respon inflamasi
akut, yaitu :
1. Perubahan diameter pembuluh darah yang dapat menyebabkan peningkatan
aliran darah.
2. Perubahan struktur mikrovaskular yang memungkinkan pengeluaran protein
plasma dan leukosit dari sirkulasi.
3. Emigrasi leukosit dari mikrosirkulasi, akumulasi di fokus cedera, dan aktivasi
leukosit untuk menyingkirkan agen penyebab.
15
2.6.2 Inflamasi Kronik
Inflamasi kronik terjadi bila penyembuhan pada radang akut tidak sempurna,
bila penyebab jejas menetap atau bila penyebab ringan dan timbul berulang-ulang.
Dapat pula diakibatkan oleh reaksi imunologik. Radang berlangsung lama (
berminggu-minggu, berbulan-bulan). Radang kronik ditandai dengan lebih banyak
ditemukan sel limfosit, sel plasma, dan makrofag, dan biasanya disertai pula dengan
pembentukan jaringan granulasi, yang menghasilkan fibrosis. Contoh inflamasi
kronik adalah inflamasi akibat tuberkolosis (Pringgoutomo dkk, 2000).
2.6.3 Mekanisme Inflamasi
Proses inflamasi dimulai dari stimulus yang akan mengakibatkan kerusakan
sel, sebagai reaksi terhadap kerusakan sel maka sel tersebut akan mengaktifkan
enzim fosfolipase untuk mengubah fosfolipid menjadi asam arakidonat. Setelah
asam arakidonat tersebut bebas maka akan diaktifkan oleh beberapa enzim,
diantaranya siklooksigenase dan lipooksigenase. Enzim tersebut merubah asam
arakidonat ke dalam bentuk yang tidak stabil (hidroperoksid dan endoperoksid)
yang selanjutnya dimetabolisme menjadi prostaglandin, prostasiklin, tromboksan
dan leukotrin. Bagian prostaglandin dan leukotrin bertanggungjawab terhadap
gejala peradangan dan nyeri (Katzung, 2006).
2.6.4 Tanda-tanda Inflamasi
1. Rubor (Kemerahan)
Merupakan hal pertama yang terlihat di daerah yang mengalami inflamasi.
Arteriol mengalami dilatasi sehingga memungkinkan lebih banyak darah
16
mengalir ke dalam mikrosirkulasi lokal. Kapiler-kapiler yang mulanya
kosong, mulai meregang dan terisi penuh dengan darah. Hal ini disebut
dengan hiperemia atau kongesti, yang menyebabkan kemerahan lokal pada
tempat inflamasi akut (Anderson dkk, 2006).
2. Kalor (Panas)
Terjadi bersamaan dengan kemerahan pada saat inflamasi akut. Area yang
mengalami inflamasi menjadi lebih hangat dari sekelilingnya karena lebih
banyak darah yang dialirkan dari dalam tubuh ke permukaan daerah yang
mengalami inflamasi daripada daerah yang normal (Suralkar, 2008).
3. Dolor (Nyeri)
Perubahan pH atau konsentrasi ion-ion tertentu pada area inflamasi dapat
merangsang ujung-ujung saraf. Selain itu, ketika terjadi proses inflamasi
maka akan menyebabkan pembengkakan jarigan pada area tersebut yang
menyebabkan peningkatan tekanan lokal yang dapat menimbulkan nyeri
(Anderson dkk, 2006).
4. Tumor (Pembengkakan)
Pembengkakan lokal dihasilkan oleh cairan dan sel-sel yang berpindah
dari aliran darah ke jaringan interstisial. Campuan cairan dan sel-sel yang
tertimbun di area inflamasi disebut eksudat. Pada awal reaksi inflamasi,
sebagian besar eksudat adalah cairan. Kemudian sel darah putih dan leukosit
meninggalkan aliran darah dan tertimbun sebagai bagian dari eksudat
(Suralkar, 2008).
5. Fungsio Laesa (Perubahan Fungsi)
17
Perubahan fungsi merupakan hal lazim dalam reaksi inflamasi. Bagian
yang bengkak, nyeri, disertai sirkulasi abnormal dan lingkungan kimiawi
lokal yang abnormal, seharusnya memiliki fungsi yang abnormal. Tetapi, cara
bagaimana fungsi jaringan yang meradang itu terganggu tidak dipahami
secara terperinci (Suralkar, 2008).
2.7 Obat-obat Antiinflamasi
Berdasarkan mekanisme kerjanya obat-obatan antiinflamasi terbagi menjadi 2
golongan, yaitu antiinflamasi steroid dan antiinflamasi non-steroid. Kedua jenis
antiinflamasi tersebut memiliki khasiat yang sama akan tetapi memiliki efek
samping yang berbeda.
2.7.1 Antiinflamasi Steroid
Efek antiradang Antiinflamasi Steroid berhubungan dengan kemampuannya
untuk merangsang biosintesis protein lipomodulin yang dapat menghambat kerja
enzimatik fosfolipase sehingga mencegah pelepasan mediator nyeri yaitu asam
arakidonat dan metabolitnya, seperti prostaglandin, leukotrin, tromboksan, dan
prostasiklin. Obat ini dapat memblok jalur siklooksigenase dan lipoksigenase
sedangkan Antiinflamasi Non Steroid (AINS) hanya memblok siklooksigenase.
Oleh karena itu efeknya lebih baik dibanding AINS, namun efek sampingnya lebih
berbahaya pada dosis tinggi dan penggunaan lama (Tjay & Rahardja, 2007).
2.7.2 Antiinflamasi Non Steroid (AINS)
AINS merupakan obat yang secara luas telah digunakan sebagai terapi
penyakit yang berkaitan dengan proses inflamasi. Selain memiliki efek
18
antiinflamasi, sebagian besar AINS juga memiliki efek antipiretik dan analgesik.
Mekanisme kerja golongan obat ini dengan menghambat enzim siklooksigenase
sehingga konversi asam arakidonat menjadi PGG2/PGH (Endoperoksid) terganggu.
Setiap obat menghambat siklooksigenase dengan kekuatan dan selektivitas yang
berbeda. ( Wilmana dan Sulistia, 2007).
2.7.3 Natrium Diklofenak
Natrium diklofenak adalah derivat sederhana dari asam fenilasetat yang
menyerupai flurbiprofen dan melofenamat, obat ini adalah penghambat
cyclooxygenase yang relatif nonselektif dan kuat serta mengurangi aktifitas asam
arakidonat obat ini mempunyai waktu paruh 1-2 jam. Obat ini dilaporkan dapat
mengurangi sistesis prostaglandin dan leukotrien (Katzung, 2002). Walaupun
waktu paruhnya singkat, diklofenak diakumulasikan di cairan sinovia yang
menjelaskan efek terapi di sendi jauh lebih panjang dari waktu paruh obat tersebut
(Wilmana, 1995).
Efek samping yang lazim terjadi ialah mual, gastritis, eritema kulit, dan sakit
kepala, perdarahan lambung, pemakaian obat ini harus hati-hati pada pasien tukak
lambung. Peningkatan aktivitas enzim aminotransferase hati dalam plasma terjadi
pada sekitar 15% pasien dan umumnya kembali ke normal (Goodman & Gilman,
2003., Wilmana dan Sulistia, 2007).
Dosis orang dewasa 100-150 mg sehari terbagi dua atau 3 dosis (Wilmana
dan Sulistia, 2007). Atau 25-50 mg 3dd (Tjay & Rahardja, 2007). Natrium
19
diklofenak adalah golongan antiinflamasi non streroid yang mempunyai stuktur
kimia seperti Gambar 2.3.
2.8 Metode Pengujian Antiinflamasi
2.8.1 Pengujian Inflamasi Akut
Terdapat beberapa metode yang digunakan untuk uji inflamasi model akut
diantaranya :
1. Induksi asam asetat
Metode ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas inhibisi obat terhadap
peningkatan permeabilitas vaskular yang diinduksi oleh asam asetat secara
intraperitoneal. Kemudian sejumlah pewarna (Evan’s Blue 10%) disuntikkan
secara intravena. Aktivitas inhibisi obat uji terhadap peningkatan
permeabilitas vaskular ditunjukkan oleh kemampuan obat uji dalam
mengurangi konsentrasi pewarna yang menempel dalam ruang abdomen
dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang visible, lalu
dibandingkan dengan kelompok kontrol ( Suralkar, 2008).
Gambar 2.3 Struktur Kimia Natrium Diklofenak (Takahashi et al, 2001)
20
2. Induksi xilena pada edema daun telinga
Hewan uji diinduksi xilena dengan mikropipet pada kedua permukaan
daun telinga kanannya. Telinga kiri digunakan sebagai kontrol. Terdapat dua
parameter yang diukur dalam metode ini, yaitu ketebalan dan bobot dari daun
telinga mencit. Ketebalan daun telinga mencit yang telah diinduksi diukur
dengan menggunakan jangka sorong digital, lalu dibandingkan dengan
telinga kiri. Jika menggunakan parameter bobot daun telinga, maka daun
telinga mencit dipotong dan ditimbang. Kemudian beratnya dibandingkan
dengan telinga kirinya (Suralkar, 2008).
3. Induksi karagenin
Volume telapak kaki kiri mencit di ukur dengan pletismometer. Kemudian
mencit diberikan larutan uji setelah 1 jam, mencit tersebut diinduksi oleh 0,1
mL injeksi karagenin 1% secara subplantar. Selanjutnya, dilakukan
pengukuran volume edema pada jam ke-1, 2, 3, 4, dan 5 setelah induksi
(Suralkar, 2008).
4. Induksi asam arakhidonat pada edema daun telinga
Metode yang digunakan hampir sama dengan metode induksi xilena,
hanya saja penginduksi yang digunakan adalah asam arakidonat yang
diberikan secara topical pada kedua permukaan daun telinga kanan hewan uji
(Suralkar, 2008).
2.8.2 Pengujian Inflamasi Kronik
Model ini di desain untuk menemukan suatu obat yang dapat memodulasi
21
proses penyakit, termasuk di dalamnya implantasi pellet dan sponge serta
granuloma pouches yang terdeposit pada jaringan granulasi, adjuvant induced
arthritis merupakan model inflamasi kronik ( Baheti dkk, 2011).
2.9 Karagenin
Iritan yang digunakan untuk pengujian efek antiinflamasi beragam jenisnya,
satu diantaranya adalah karagenin. Karagenin merupakan polisakarida yang
diekstraksi dari rumput laut famili Eucheuma, Chondrus, dan Gigartina. Bentuknya
berupa serbuk berwarna putih hingga kuning kecoklatan, ada yang berbentuk
butiran kasar hingga serbuk halus, tidak berbau, serta memberi rasa berlendir di
lidah. Berdasarkan kandungan sulfat dan potensi pembentukan gelnya, karagenin
dapat dibagi menjadi tiga jenis yaitu lamda karagenin, iota karagenin, dan kappa
karagenin. Karagenin memiliki sifat larut dalam air bersuhu 80oC (Rowe dkk,
2006).
Uji aktivitas antiinflamasi dengan metode induksi karagenin merupakan salah
satu metode pengujian aktivitas antiinflamasi yang sederhana, mudah dilakukan
dan sering dipakai. Penggunaan karagenin sebagai penginduksi radang memiliki
beberapa keuntungan antara lain tidak meninggalkan bekas, tidak menimbulkan
kerusakan jaringan dan memberikan respon yang lebih peka terhadap obat
antiinflamasi (Fitriyani dkk, 2011., Vogel, 2002 dalam Taufiq dkk, 2008 ).
Karagenin sebagai senyawa iritan menginduksi terjadinya cedera sel melalui
pelepasan mediator yang mengawali proses inflamasi. Pada saat terjadi pelepasan
22
mediator inflamasi terjadi udem maksimal dan bertahan beberapa jam. Inflamasi
yang diinduksi oleh karagenin ditandai dengan peningkatan rasa sakit,
pembengkakan, dan sintesis prostaglandin hingga 4-5 kali. Udem yang disebabkan
induksi karagenin bertahan selama 6 jam dan berangsur-angsur berkurang dalam
waktu 24 jam (Taufiq dkk, 2008., Utami dkk, 2011 ).
2.10 Pletismometer
Pletismometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur volume kaki
hewan uji. Pletismometer terdiri atas tabung yang lebih besar, yang digunakan
untuk memasukan kaki hewan coba, dan yang lebih kecil, dimana terdapat
transduser. Sebelum melakukan pengukuran dengan pletismometer, kaki hewan
coba diberikan batas pada bagian sendi tibiotarsal terlebih dahulu agar setiap
pengukuran dilakukan pada batas yang sama. Selanjutnya bagian telapak kaki
belakang dicelupkan hingga batas tersebut dan menyebabkan tingkat cairan di
kedua tabung berubah. Nilai volume telapak kaki berdasarkan waktu, dan di ambil
rata-rata volume telapak kaki (Patil, 2010).
Terdapat dua jenis pletismometer, yaitu pletismometer digital dan
pletismometer air raksa. Pletismometer digital memiliki beberapa keuntungan
dibandingkan dengan pletismometer air raksa, yaitu kepekaan jauh lebih tinggi dan
dapat mengurangi beban kerja peneliti (Patil, 2010).
23
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Alat Penelitian
Alat-alat yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas
(Pyrex), rotary evaporator, neraca analitik (Ohaus), Pletismometer, spuit injeksi
(Terumo), vaccumbuchner, beaker glass, gelas ukur, tabung reaksi, batang
pengaduk, neraca analitik ketelitian, vortex mixer dan arloji.
3.2 Bahan Penelitian
3.2.1 Bahan tanaman
Batang tanaman Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconitifolius) didapatkan
dari Daerah Pasteur Kota Bandung.
3.2.2 Bahan kimia
Bahan kimia yang digunakan pada penelitian ini adalah etanol 96%
(teknis), Natrium diklofenak (teknis), karagenin, Natrium klorida, aquadest,
Na-CMC, ammonia encer, asam sulfat pekat, asam klorida, reagen Mayer,
FeCl3.
3.2.2 Hewan uji
Hewan uji yang digunakan pada penelitian ini adalah mencit putih
jantan galur Swiss webster berjenis kelamin jantan dengan berat badan 20-
25 g dalam kondisi sehat (aktif dan tidak cacat).
24
3.3 Pengumpulan Bahan Tanaman
Pengumpulan bahan tanaman batang tanaman Pepaya Jepang dilakukan di
Daerah Pasteur Kota Bandung.
3.4 Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman dilakukan di Herbarium Jatinangor Laboratorium
Tumbuhan Departemen Biologi, FMIPA, Universitas Padjajaran Jatinagor.
3.5 Pembuatan Simplisia
Simplisia dipilih dari batang tanaman Pepaya Jepang segar, kemudian dicuci
dengan air bersih yang mengalir. Pengeringan dilakukan dengan cara diangin-
anginkan, tidak secara langsung di bawah sinar matahari di tutup dengan kain
berwarna hitam selama waktu tertentu sampai sebagian kandungan air dalam
simplisia menguap (Farmakope herbal, 2010).
3.6 Penetapan Kadar Simplisia
Siapkan alat pengukur kadar air (moisture balance), alat pengukur kadar air
dipastikan ada pada posisi nol dan jarum berada pada posisi netral, anak timbangan
2 g diletakkan dan masukkan serbuk massa cetakan sampai stabil 2 g dengan posisi
jarum ada di tengah. Lampu dinyalakan dan suhu diatur maksimal 100oC. Setelah
suhu mencapai 100oC, nyalakan stopwatch dan hitung waktunya selama 15 menit
dan suhu tetap dijaga agar stabil. Setelah 15 menit, lampu dimatikan dan tombol
25
pengukur diputar ke sebelah kiri sampai jarum menunjukan ke posisi semula.
Kemudian angka kadar air dibaca (Indri dkk, 2014).
3.7 Ekstraksi Batang Tanaman Pepaya Jepang
Ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang diperoleh dari 300 g batang
tanaman Pepaya Jepang kering yang sudah dirajang dengan ukuran 1 cm,
selanjutnya dimaserasi dengan pelarut etanol 96% sampai terendam selama 3x24
jam dan sesekali diaduk. Maserat kemudian disaring sehingga dihasilkan filtrat,
kemudian dipekatkan dengan menggunakan vaporator. Hasil dari evaporasi
kemudian diuapkan di waterbath hingga diperoleh ekstrak yang kental. Dihitung
rendemen dari ekstrak kental batang tanaman Pepaya Jepang.
Penentuan rendemen dihitung dengan rumus :
3.8 Skrining Fitokimia
Penentuan golongan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam
ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang dengan menyiapkan sampel uji terdiri
dari campuran antara ekstrak kental batang tanaman Pepaya Jepang dengan 2 mL
etanol 96%.
Rendemen =Berat Ekstrak Kental
Berat Simplisia𝑥100
26
1. Alkaloid
Penentuan senyawa alkaloid dimulai dengan penambahan larutan Asam
klorida 2N sebanyak 5 mL kedalam sampel uji, kemudian dipanaskan di atas api
bunsen. Setelah itu ditambahkan Reagen Mayer kedalam campuran tadi.
Keberadaan senyawa alkaloid ditandai dengan adanya endapan putih yang
terbentuk (Samudra, 2012).
2. Fenolik
Ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu dikocok dengan sedikit eter.
Lapisan eter dikeringkan pada plat tetes, ditambahkan larutan FeCl3. Terbentuk
warna ungu biru menandakan adanya senyawa fenol (Depkes RI, 1979).
3. Flavonoid
Terdapat tiga metode yang digunakan untuk uji flavonoid. Yang pertama
dengan uji beberapa tetes FeCl3 1% yang ditambahkan pada larutan ekstrak, warna
hijau menandakan adanya flavonoid, kedua beberapa tetes larutan asam asetat 10%
yang ditambahkan ke larutan ekstrak endapan kuning adanya flavonoid, ketiga
beberapa tetes ekstrak dalam methanol ditambah sedikit serbuk Mg dan 1 mL HCl
pekat warna merah adanya flavonoid (Harbone, 2007).
4. Tanin
Pengujian terhadap sampel ekstrak yang direaksikan dengan larutan feri
klorida 5% (FeCl3) sebanyak 3 tetes, amati perubahan warna menjadi biru
kehijauan, hijau-biru atau adanya endapan (Mojab, 2003).
5. Saponin
Saponin diuji dengan tes buih dengan mereaksikan sampel uji dengan 20 mL
aquades, kemudian dilakukan pengocokan dengan kuat selama 15-20 menit. Amati
27
buih yang terbentuk, bila buih masih bertahan pada waktu 10 menit dan saat
diteteskan asam klorida 2N 1 tetes busa masih tetap ada, maka ekstrak tersebut
mengandung saponin (Mutiatikum, 2010).
6. Terpenoid
Sebanyak 100 mg ekstrak dilarutkan dengan 2 mL kloroform lalu dikocok
setelah itu ditambahkan 2 mL asam sulfat p.a. Pembentukan cincin berwarna hijau
menunjukkan adanya steroid dan pada lapisan atas membentuk warna merah pekat
menunjukkan adanya terpenoid (Joshi dkk, 2013).
3.9 Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Batang Tanaman Pepaya Jepang
3.9.1 Penyiapan Hewan Uji
Mencit diadaptasikan selama 7 hari dalam kandang untuk proses aklimatisasi
serta dijaga agar kebutuhan makan dan minum tetap terpenuhi. Tahap selanjutnya
mencit dipuasakan selama 12-18 jam sebelum perlakuan, tetapi pemberian air
minum tetap dilakukan. (Parveen, 2007).
3.9.2 Perhitungan Dosis
Pada penelitian kali ini digunakan 3 variasi dosis, yaitu 100, 200, dan 400 mg.
Dosis dikaitkan dengan faktor konversi untuk mencit, yaitu 0,0026.
a. Dosis 100 mg/kgBB = 20 g
1000 g x 100 mg = 2 mg/20g mencit
b. Dosis 200 mg = 20 g
1000 g x 200 mg = 4 mg/20gBB mencit
c. Dosis 400 mg = 20 g
1000 g x 400 mg = 8 mg/20gBB mencit
d. Dosis Natrium diklofenak (50 mg) = 50 x 0,0026 = 0,13 mg/20 g BB mencit
28
3.9.3 Pembuatan Suspensi Na-CMC 1%
Sebanyak 1 g CMC ditaburkan kedalam mortir yang berisi air suling panas
sebanyak 20 mL didiamkan selama 15 menit hingga diperoleh massa transparan,
digerus hingga berbentuk gel dan diencerkan dengan sedikit air, kemudian dituang
kedalam labu tentukur 100 mL, ditambah air suling sampai tanda batas.
3.9.4 Pembuatan Suspensi Karagenin 1%
Karagenin ditimbang sebanyak 0,1 gram dan disuspensikan kedalam NaCl
0,9 % hingga volume 10 mL (Fitriyani dkk, 2011).
3.9.5 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Dan Natrium Diklofenak
Dibuat suspensi dari hasil pengenceran ekstrak 200 mg/50 mL; 400 mg/50
mL; 400 mg/25 mL; 50 mg/200 mL untuk natrium diklofenak. Masing-masing
ekstrak etanol dan natrium diklofenak ditaburkan diatas 2 mL suspensi Na-CMC 1
% dan digerus hingga homogen. Masing-masing suspensi dimasukkan ke dalam
labu ukur dan digenapkan dengan Na-CMC 1% hingga tanda batas.
3.9.6 Pengujian Efek Antiinflamasi
1. Mencit dikelompokkan secara acak yaitu : kelompok kontrol negatif,
kelompok kontrol positif, kelompok ekstrak batang tanaman Pepaya Jepang
100 mg; 200 mg; dan 400 mg.
2. Volume kaki setiap mencit diukur dan dinyatakan sebagai volume kaki dasar.
3. Kelompok kontrol :
a. Kelompok I kontrol negatif diberi sediaan suspensi Na-CMC 1%
29
b. Kelompok II kontrol positif diberi natrium diklofenak 0,13 mg/20 g BB
mencit
c. Kelompok III suspensi ekstrak etanol batang Pepaya Jepang dengan dosis
2 mg/20 g BB mencit
d. Kelompok IV suspensi ekstrak etanol batang Pepaya Jepang dengan dosis
4 mg/20 g BB mencit
e. Kelompok V suspensi ekstrak etanol batang Pepaya Jepang dengan dosis
8 mg/20 g BB mencit
4. Setelah satu jam diinjeksikan sediaan uji secara i.p, telapak kaki mencit
dibersihkan dengan alcohol swab lalu disuntikkan dengan larutan
karagenin 2 % sebanyak 0,1 mL secara intrakutan.
5. Satu jam setelah penyuntikkan karagenin, volume kaki mencit diukur
dengan menggunakan pletismometer setiap 30 menit selama 6 jam
setelah diinduksi dengan karagenin.
6. Ukur volume edema telapak kaki masing-masing mencit setiap
kelompok.
7. Hitung persentase edema dan persentase inhibisi pembentukan edema
dengan menggunakan rumus.
% edema=𝑉𝑡−𝑉𝑜
𝑉𝑜𝑥 100%
% 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 𝑒𝑑𝑒𝑚𝑎 =𝑎 − 𝑏
𝑎𝑥100%
30
Semakin besar hasil persentase inhibisi edema, maka semakin baik efek
antiinflamasi dari suatu bahan uji.
Keterangan :
Vt = Volume telapak kaki pada waktu t
Vo = Volume telapak kaki yang diperoleh sebelum melakukan perlakuan apapun
a = % Edema pada kelompok hewan kontrol
b = % Edema pada kelompok hewan yang mendapat bahan uji atau obat pembanding
3.10 Analisis Data
Data yang diperoleh diolah dan di analisis dengan microsoft excel dan aplikasi
Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) versi 22.0. Uji statistik yang
digunakan yaitu One Way ANOVA karena penelitian termasuk ke dalam analitik
komparatif lebih dari dua kelompok kemudian dilanjutkan dengan uji Duncan
dengan taraf signifikasi 5%.
31
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Pengumpulan bahan tanaman
Pengumpulan bahan tanaman batang tanaman Pepaya Jepang dilakukan di
Daerah Pasteur Kota Bandung.
4.2 Determinasi tanaman
Determinasi ini dilakukan di Herbarium Jatinangor Laboratorium
Taksonomi Tumbuhan Departemen Biologi FMIPA UNPAD menunjukan bahwa
tanaman yang digunakan dalam penelitian benar batang tanaman Pepaya Jepang.
4.3 Hasil Pengolahan Simplisia
Pengumpulan bahan tumbuhan batang Pepaya Jepang yang didapatkan dari
Daerah Pasteur Kota Bandung. batang tanaman Pepaya Jepang segar yang telah
terkumpul sebanyak 4 kg kemudian dicuci dengan air bersih yang mengalir dan
dirajang, pengeringan dilakukan dengan cara dijemur di bawah sinar matahari
dan ditutupi kain hitam hingga kering selama kurang lebih 14 hari. Bobot
simplisia batang tanaman Pepaya Jepang kering sebanyak 450 g.
32
4.4 Hasil Penetapan Kadar Air
Penentuan kadar air dilakukan dengan menggunakan alat moisture balance
dengan berat simplisia sebanyak 2 g. Diperoleh hasil kadar air simplisia daun adalah
sebesar 4,6% hal ini telah memenuhi syarat kadar air yang telah ditetapkan bahwa
kadar air untuk simplisia batang (< 5%) (Agoes, 2007).
4.5 Ekstraksi Batang Tanaman Pepaya Jepang
Ekstrak cair yang telah diperoleh kemudian dipekatkan hingga diperoleh
ekstrak kental, ekstrak kental yang diperoleh kemudian dihitung rendemen
ekstraknya. Dari 300 g simplisia kering dihasilkan 16,7 g ekstrak kental dengan
rendemen 0,57%.
4.6 Hasil Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia bertujuan untuk menentukan golongan metabolit sekunder
yang mempunyai aktivitas biologis yang ada di dalam tumbuhan batang tanaman
Pepaya Jepang secara kualitatif. Hasil skrining fitokimia dari batang tanaman
Pepaya Jepang dapat dilihat pada tabel 4.1.
33
Tabel 4. 1 Hasil Skrining Fitokimia Pada Ekstrak Batang tanaman Pepaya Jepang
Metabolit Sekunder Pustaka Hasil
Alkaloid Endapan coklat, endapan
putih
Positif
Fenolik Warna hijau Positif
Flavonoid Warna bening
Warna hijau kecoklatan
Positif
Saponin Terdapat busa setinggi ±1 –
10 cm
Positif
Tannin Warna hijau kehitaman Positif
Steroida/Triterpenoid Warna biru kehijauan Positif
Keterangan :
Positif: Teridentifikasi adanya metabolit sekunder
Negatif: Tidak teridentifikasi adanya metabolit sekunder
Berdasarkan hasil skrining fitokimia pada ekstrak etanol batang tanaman
Pepaya Jepang mengandung beberapa metabolit sekunder yaitu fenolik, flavonoid,
alkaloid, tanin, saponin, dan steroid/terpenoid.
4.7 Hasil Uji Efek Antiinflamasi
4.7.1. Volume Rata-rata Edema
Dalam penelitian antiinflamasi ini metode yang digunakan adalah
pembentukan edema buatan pada telapak kaki mencit dengan menggunakan
karagenin sebagai penginduksi edema. Metode ini dipilih karena merupakan
salah satu metode pengujian aktivitas antiinflamasi yang sederhana, mudah
dilakukan dan sering dipakai. Penggunaan karagenin sebagai penginduksi
edema memiliki beberapa keuntungan antara lain tidak meninggalkan
bekas, tidak menimbulkan kerusakan jaringan dan memberikan respon yang
lebih peka terhadap obat antiinflamasi (Fitriyani et al, 2011., Taufiq et al,
2008). Data volume edema telapak kaki mencit merupakan data yang
34
diambil pada menit ke-0, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330,
360 setelah dilakukan injeksi karagenin sub-palantar kaki kanan belakang
mencit. Data rata-rata volume edema telapak kaki mencit dapat dilihat pada
tabel 4.2 dan grafik nya bisa dilihat pada gambar 4
Tabel 4. 2 Rata-Rata Volume Edema Telapak Kaki Mencit
Berdasarkan data rata-rata volume edema telapak kaki mencit, dapat terlihat
bahwa rata-rata volume edema kelompok kontrol negatif terus mengalami kenaikan
Waktu KN KP Dosis 100 mg Dosis 200 mg Dosis 400 mg
0 menit 0,0088 0,0104 0,0098 0,0096 0,0098
60 menit 0,015 0,0154 0,0154 0,0146 0,0146
90 menit 0,0152 0,0158 0,016 0,0152 0,0154
120 menit 0,016 0,0168 0,0166 0,016 0,0164
150 menit 0,0164 0,0176 0,017 0,0166 0,0174
180 menit 0,0168 0,018 0,0176 0,0176 0,016
210 menit 0,0176 0,0174 0,0176 0,0184 0,0148
240 menit 0,0176 0,0164 0,0174 0,0172 0,0142
270 menit 0,0176 0,0154 0,0168 0,016 0,013
300 menit 0,0176 0,0146 0,0162 0,0146 0,0122
330 menit 0,0172 0,0136 0,0156 0,0134 0,0118
360 menit 0,0164 0,0122 0,014 0,012 0,0112
0
0.005
0.01
0.015
0.02
Vo
lum
e ed
ema
(mm
)
Waktu (menit)
Rata-rata volume edema
KN
KP
Dosis 100 mg
Dosis 200 mg
Dosis 400 mg
Gambar 4.1 Grafik Rata-Rata Volume Edema
35
volume edema hingga menit ke-300, hal ini disebabkan karena induksi karagenen
yang dapat bertahan selama 6 jam. Pada kelompok kontrol positif kenaikan edema
berlangsung pada menit ke-0 sampai menit ke-180 kemudian mulai berangsur-
angsur hilang pada menit ke-210. Pada kelompok uji dosis 100 mg dan dosis 200
mg kenaikan edema berlangsung pada menit ke-0 sampai menit ke-210, pada menit
ke-240 edema mulai berangsur-angsur hilang. Pada kelompok uji dosis 400 mg
edema mulai berangsur-angsur hilang pada menit ke-180. Hal ini berarti kelompok
kontrol positif dan kelompok uji memberikan efek dalam penurunan edema.
Data rata-rata volume edema dianalisis menggunakan analisis non parametrik
Kruskal Wallis karena asumsi kenormalan data tidak terpenuhi untuk menguji
apakah ada perbedaan yang signifikan antara kelompok variable independen
dengan variable dependennya. Jika terdapat perbedaan yang signifikan dilanjutkan
dengan uji Mann-Whitney untuk mengetahui kelompok mana yang memiliki
perbedaan.
Berdasarkan hasil uji statistik Kruskal Wallis rata-rata volume edema,
didapatkan nilai p=0,083 (p>0,05), artinya tidak ada perbedaan rata-rata secara
signifikan antar kelompok perlakuan atau H0 diterima dan H1 ditolak. Data
dikuatkan lagi menggunakan uji statistik Mann-Whitney dengan hipotesis ada
perbedaan rata-rata volume edema tiap kelompok perlakuan. Hasil nya terdapat
perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok uji
dosis 400 mg, nilai yang didapat p=0,010 (p<0,05)
36
4.7.2. Rata-rata persen Edema
Tabel 4.3 Data Persen Rata-Rata Edema
Gambar 4. 1 Grafik Persen Rata-Rata Edema
0
20
40
60
80
100
120
0menit
60menit
90menit
120menit
150menit
180menit
210menit
240menit
270menit
300menit
330menit
360menit
PEr
sen
Inh
ibis
i (%
)
Waktu
Rata-rata persen edema
KN
KP
Dosis100mgDosis200mg
Waktu KN KP Dosis 100 mg Dosis 200 mg Dosis 400 mg
0 menit 0 0 0 0 0
60 menit 70,558 48 57,334 52,224 49,112
90 menit 72,78 51,82 63,556 58,446 57,334
120 menit 81,946 61,456 69,778 66,89 67,556
150 menit 86,39 69,274 73,778 73,112 77,556
180 menit 90,834 72,91 80 83,556 63,334
210 menit 100 67,274 79,556 91,778 51,112
240 menit 100 60 77,556 79,334 45,112
270 menit 100 50,362 71,334 66,668 32,888
300 menit 100 38,726 65,334 52,446 24,666
330 menit 97,778 26,908 59,334 39,778 20,666
360 menit 82,224 13,454 42,888 25,11 14,444
37
Berdasarkan data pada tabel diatas dapat dilihat bahwa kelompok kontrol negatif
memiliki persen edema yang lebih besar jika dibandingkan dengan kelompok uji
dan kelompok kontrol positif. Pada kelompok kontrol negatif, persen edema terus
meningkat hingga mencapai persen maksimal edema yaitu 100%, hal ini
disebabkan karena rata-rata volume edemanya yang besar. Pada kelompok kontrol
positif persen edema mencapai nilai tertinggi pada menit ke-180 yaitu sebesar
72.91% dan mulai mengalami penurunan hingga menit ke-330. Pada kelompok uji
dosis 100 mg persen edema mencapai nilai tertinggi pada menit ke-180 yaitu
sebesar 80% dan mulai mengalami penurunan hingga menit ke-330. Pada kelompok
uji dosis 200 mg persen edema mencapai nilai tertinggi pada menit ke-210 yaitu
sebesar 91.778% dan mulai mengalami penurunan hingga menit ke-330. Dan pada
kelompok uji dosis 400 mg persen edema mencapai nilai tertinggi pada menit ke-
150 yaitu sebesar 77.556% dan mulai mengalami penurunan hingga menit ke-330.
Dari data tersebut terlihat bahwa semakin besar volume rata-rata edema maka
persentase nya juga besar.
Data persen rata-rata volume edema dianalisis menggunakan analisis non
parametrik Kruskal Wallis karena asumsi kenormalan data tidak terpenuhi untuk
menguji apakah ada perbedaan yang signifikan antara kelompok variable
independen dengan variable dependennya. Jika terdapat perbedaan yang signifikan
dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk mengetahui kelompok mana yang
memiliki perbedaan.
38
Berdasarkan hasil uji statistik Kruskal Wallis persen rata-rata volume edema,
didapatkan nilai p=0,000 (p<0,05), artinya terdapat perbedaan persen rata-rata
secara signifikan antar kelompok perlakuan atau H0 ditolak dan H1 diterima.
Kemudian dilanjutkan menggunakan uji statistik Mann-Whitney untuk mengetahui
variabel mana yang berbeda. Hasil nya terdapat perbedaan secara signifikan antara
kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol positif, nilai yang didapat
p=0,001 (p<0,05). Terdapat perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol
negatif dengan kelompok uji dosis 100 mg, nilai yang didapat p=0,003 (p<0,05).
Terdapat perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan
kelompok uji dosis 200 mg, nilai yang didapat p=0,007 (p<0,05). Terdapat
perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok uji
dosis 400 mg, nilai yang didapat p=0,001 (p<0,05).
4.7.3. Rata-rata persen inhibisi edema
Tabel 4.4 Data Rata-Rata Persen Inhibisi Edema
Waktu KN KP Dosis 100 mg Dosis 200 mg Dosis 400 mg
0 menit 0 0 0 0 0
60 menit 0 31,768 18,856 25,474 30,328
90 menit 0 28,572 12,906 19,332 21,7
120 menit 0 24,85 15,144 17,642 17,294
150 menit 0 19,878 14,464 15,25 10,222
180 menit 0 19,762 12,214 7,714 30,262
210 menit 0 32,726 20,444 8,222 44,888
240 menit 0 40 22,444 20,666 54,888
270 menit 0 49,638 28,666 33,332 65,112
300 menit 0 61,274 34,666 47,554 75,334
330 menit 0 72,092 38,916 58,834 78,834
360 menit 0 84,474 46,466 69,786 82,912
39
Gambar 4.3 Grafik Rata-Rata Persen Inhibisi Edema
Berdasarkan data diatas dapat dilihat bahwa pada seluruh kelompok zat uji
terdapat inhibisi pembentukan edema pada setiap 30 menit. Pada kelompok kontrol
positif, efek inhibisi maksimal terjadi pada menit ke-360 sebesar 84.474. Pada
kelompok uji 100 mg/kgBB, efek inhibisi maksimal terjadi pada menit ke-360
sebesar 46.466%. Pada kelompok uji 200 mg/kgBB, efek inhibisi maksimal terjadi
pada menit ke-360 sebesar 69.786% dan pada kelompok zat uji 400 mg/kgBB efek
inhibisi maksimal terjadi pada jam ke-360 sebesar 82.912%. Semakin meningkat
konsentrasi dosis maka semakin tinggi juga persen inhibisi edemanya. Menurut
Mansjoer (1997), suatu bahan dikatakan memiliki efek antiinflamasi jika pada
hewan uji coba yang diinduksi karagenin 1% mengalami pengurangan
pembengkakan hingga 50% atau lebih.
Pada penelitian ini digunakan dosis bertingkat dengan tujuan untuk
mengetahui dosis ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang yang dapat
menunjukkan efek antiinflamasi yang optimal. Pemberian ekstrak etanol batang
020406080
100
Per
sen
Inh
ibis
i Ed
ema
(%)
Waktu
Rata-rata persen inhibisi edema
KN
KP
Dosis 100 mg
Dosis 200 mg
Dosis 400 mg
40
tanaman Pepaya Jepang dengan dosis sebesar 400 mg/kgBB merupakan dosis yang
berpotensi tinggi dalam menghambat edema, hal ini terlihat dari persentase
penghambatan terbesar. Hal ini dapat diartikan bahwa dosis 400 mg/kg BB
merupakan dosis yang paling efektif jika dibandingkan dengan dosis lainnya.
Sesuai dengan penelitian Onasawanwo dkk (2011), dimana pada kelompok dosis
100 mg dan 200 mg dapat menghambat radang sebanding dengan indomethacin
10mg/kgBB yang menunjukkan kelompok dosis 400 mg merupakan dosis terbaik
yang memiliki kemampuan menghambat radang.
Batang tanaman Pepaya Jepang memiliki kandungan flavonoid. Flavonoid
telah terbukti bersifat antiinflamasi secara in vitro maupun in vivo. Mekanisme
flavonoid dalam menghambat terjadinya inflamasi melalui 2 cara, yaitu :
1. Menghambat pelepasan asam arakidonat dan sekresi enzim lisosom dari sel
netrofil dan sel endothelial
2. Menghambat fase proliferasi dan fase eksudasi dari proses inflamasi
Senyawa flavonoid dengan konsentrasi tinggi dapat menghambat pelepasan
asam arakidonat dan sekresi enzim lisosom dari membrane dengan jalan memblok
jalur siklooksigenase, jalur lipoksigenase, dan fosfolipase A2, sementara pada
konsentrasi rendah hanya memblok jalur lipoksigenase. Terhambatnya pelepasan
asam arakidonat dari sel inflamasi akan menyebabkan kurang tersedianya substrat
arakidonat bagi jalur siklooksigenase dan jalur lipoksigenase, yang pada akhirnya
akan menekan jumlah prostaglandin, prostasiklin, endoperoksida, tromboksan
disatu sisi dan asam hidroperoksida, asam hidroksieikosatetraienoat, leukotrin
disisi lainnya (Sabir, 2003).
41
Data persen rata-rata volume edema dianalisis menggunakan analisis non
parametrik Kruskal Wallis karena asumsi kenormalan data tidak terpenuhi untuk
menguji apakah ada perbedaan yang signifikan antara kelompok variable
independen dengan variable dependennya. Jika terdapat perbedaan yang signifikan
dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk mengetahui kelompok mana yang
memiliki perbedaan.
Berdasarkan hasil uji statistik Kruskal Wallis persen rata-rata volume edema,
didapatkan nilai p=0,000 (p<0,05), artinya terdapat perbedaan persen rata-rata
secara signifikan antar kelompok perlakuan atau H0 ditolak dan H1 diterima.
Kemudian dilanjutkan menggunakan uji statistik Mann-Whitney untuk mengetahui
variabel mana yang berbeda. Hasil nya terdapat perbedaan secara signifikan antara
kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol positif, nilai yang didapat
p=0,000 (p<0,05). Terdapat perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol
negatif dengan kelompok uji dosis 100 mg/kgBB, nilai yang didapat p=0,000
(p<0,05). Terdapat perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol negatif
dengan kelompok uji dosis 200 mg/kgBB, nilai yang didapat p=0,000 (p<0,05).
Terdapat perbedaan secara signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan
kelompok uji dosis 400 mg/kgBB, nilai yang didapat p=0,000 (p<0,05).
42
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1. SIMPULAN
Dari penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa :
1. Ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang (Cnidoscolus aconitifolius)
dengan variasi konsentrasi dosis 100mg/kgBB, 200 mg/kgBB, dan 400
mg/kgBB dapat menghambat edema pada telapak kaki mencit yang telah
diinduksi oleh karagenin 1%.
2. Dosis 400 mg/kgBB memiliki daya hambat paling tinggi diantara dosis yang
lainnya sebesar 82.912% pada menit ke-360.
5.2. SARAN
Pada penelitian selanjutnya diharapkan dapat melakukan uji efek antiinflamasi
ekstrak etanol batang tanaman Pepaya Jepang menggunakan mencit dan
pletismometer digital untuk mengetahui penurunan volume edema secara
signifikan.
43
DAFTAR PUSTAKA
Adaramoye, O.A., dan Aluko, A., 2010., Pharmacology and Cell Metabolism :
Methanolic Extract of Cnidoscolus aconitifolius Attenuates Renal
Dysfunction Induced by Chronic Ethanol Administration in Wistar Rats., Vol. 46 No. 1., University of Ibadan, Nigeria.
Agoes. G., 2007., Teknologi Bahan Alam., ITB Press Bandung.
Anderson, P.S., Carty, M.W., 2006., Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses
Penyakit., 6 ed., Vol. 1., Jakarta:EGC.
Baheti, J.R, et al., 2011., Anti- Inflammatory Herbs : A Review. Deccan J.
Natural Products 2(1)., International Standard Serial Number : 0976-1381.
Cronquist, Arthur., 1981., An Integrated System of Classification of Flowering
Plants., Colombia University Press., New York.
Departemen Kesehatan RI., 1979., Farmakope Indonesia., Edisi 3., Jakarta,
Departemen Kesehatan Indonesia.
Departemen Kesehatan RI., 2000., Parameter Standard Umum Ekstrak
Tumbuhan Obat., Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan
Makanan.
Fitriyani, A., Winarti, L., Muslichah, S., dan Nuri., 2011., Uji Antiinflamasi
Ekstrak Metanol Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz dan Pav )
Pada Mencit Putih., Fakultas Farmasi Universitas Jember, Majalah Obat
Tradisional, 16(1), 34 – 42.
Gan, G.S., Setiabudy, R., Nafrialdi., 2012., Farmakologi dan Terapi., 5 ed.
Jakarta: Balai Penerbit FKUI.
Goodman, dan Gilman., 2003., Dasar Farmakologi Terapi., Volume 1, 1009-
1012., Buku Kedokteran., ITB Farmasi., Bandung.
Grubben, G.J.H., 2004., Plant Resources of Tripical Africa 2 Vegetables.,
Belanda: Prota Foundation.
Harbone, J., 2007., Metode Fitokimia : Penuntun Cara Modern Edisi III., ITB.,
Bandung.
Joshi, A., Bhobe, M., dan Saatarkar, A., 2013., Phytochemical investigation of the
roots of Grewia microcos Linn., J. Chem., Pharm. Res., 5, pp 80-87.
Katzung, B.G., 2006., Farmakologi Dasar dan Klinik Edisi 6., Jakarta : EGC.
44
Kumar V., Abbas AK, Nelson F., 2009., Robbins & Cotran., Dasar Patologis
Penyakit., 7 ed., Jakarta : EGC.
Mansjoer, S., 1997., Efek Antiradang Minyak Atsiri Temu Putih (Curcuma
zedoaria Rosc., Zingiberaceae) terhadap Edema Buatan Pada Mencit
Putih Betina Galur Wistar: The Antiinflammatory effect of the essential
oil of ¨Temu Putih¨., Maj Farm Indones: 8(1):34-41.
Mutiatikum D, Alegantina S, Astuti Y., 2010., Standardisasi Simplisia Dari Buah
Miana (Plectranthus Seutellaroides (L) R.Bth) yang Berasal dari Tiga
Tempat Tumbuh Menado., Kupang dan Papua., Buletin Penelitian
Kesehatan, Vol. 30, No. 1; 1-16.
Mojab, F., Kamalinejad M, Ghaderi N, dan Vahidipour HR., 2003., Phytovhemical
Screening of Some Species of Iranian Plants. Iranian Journal of
Pharmaceutical Researh., 77-82.
Mycek, M.J., Harvey, R.A., dan Champe, P.C., 2001., Farmakologi Ulasan
Bergambar 2nd ed., H. Hartanto, ed., Jakarta., Widya Medika.
Olaniyan, M.F., Ozuaruoke, D.F., Afolabi, T., 2017., Journal of Advances in
Medicine and Medical Research : Cholesterol Lowering Effect of
Cnidoscolous acontifolius Leave Extract in Egg Yolk Induced
Hypercholesterolemia in Rabbit., 23(1) : 1-6., Nigeria.
Patil, P.R., Tapas, B., Venkatesh, M., Sudha, P., Rajeshwari, P., Vijayanath, V.,
Improvised Plethysmometer For The Detection Of Anti- Inflammatory
Activity Of Drugs. J Pharm Biomed Sci JPBMS. 2010;4(04).
Parveen, Z., Deng, Y., Saeed, M., dan Yu, Y. H., 2007., Antiinflamatory and
Analgesic Activities of Thesium chinense Turez Extracts and Its Mayor
Flavonoids, Kaempferol and kaempferol 3-O-Glucoside., Yakugaku
Zasshi, 127 (8), Hal. 1275-1279.
Pramtianingastuti, A.S., dan Anggraeny, E.N., 2017., Uji Efektivitas
Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona squamosa L.)
Terhadap Edema Kaki Mencit Putih Jantan Galur Wistar., Vol. 13 No.
1., STIF Yayasan Pharmasi, Semarang.
Pringgoutomo, Sudarto., Himawan, Sutisna., dan Tjarta, Achmad (Ed). 2000.
Patologi I Umum Edisi ke-1. Jakarta: Sagung Seto.
Rowe, R.C., Paul, J.S dan Sian, C.O., (Ed). 2006. Handbook of Pharmaceutical
Excipients Fifth Edition., London : Pharmaceutical Press.
Sabir, Ardo., 2003., Pemanfaatan Flavonoid di Bidang Kedokteran Gigi.,
Dental Journal., Vol.36:81-87., FKG Unair, Makassar.
45
Samudra, A., 2012., Karakteristik Ekstrak Etanol Daun Salam (Syzygium
polyanthum Wight) dari Tiga Tempat Tumbuh Di Indonesia., UIN
Syarif Hidayatullah.
Sander, M, A., 2010., Atlas Berwarna Patologi Anatomi., Rajawali Pers, Jakarta.
Silbernagl S., dan Lang F., 2000., Color Atlas of Pathophysiology., New York :
Thieme.
Suralkar, A.A., In-Vivo Animal Models For Evaluation Of Antiinflammatory
Activity., 2008;6(2).
Syubaikah., 2016., Tanaman Pepaya Jepang? https://www.voici-
monsecret.blogspot.com/2016/01/tanaman-pepaya-jepang.html Diakses
pada 23 Agustus 2019
Taufiq, H., Lukman, et al. 2008. Efek Antiinflamasi Ekstrak Patikan kebo
(Euphorbia hirta L.) Pada Mencit Putih Jantan., Pharmacon., Vol. 9, No.
1, 1-5.
Tjay, T.H., dan Kirana R., 2007., Obat-obat Penting : Khasiat, Penggunaan dan
Efek-efek Sampignya, edisi keenam., PT Elexmedia Komputindo
Kelompok Gramedia, Jakarta.
Tjokronegoro, A., dan Baziad, A., 1992., Etik Penelitian Obat Tradisional., hal
27., Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia., Jakarta.
Utami, et al., 2011., Efek Antiinflamasi Ekstrak Daun Sembukan (Paederia
scandens) Pada Mencit Wistar., Majalah Obat Tradisional, 16(2), 95 –
100.
Vogel, H.G., 2002., Drug Discovery and Evaluation, Pharmacological Assays., 2nd Ed., 670-723., Springer, Berlin.
Vogel, P., Kasper, M.I., Garavaglia, J., Terezinha Z.V., Souza, D.D., Morelo, D.S.,
2015., Polyphenols benefits of olive leaf (Olea europaea L) to human
health., 31(3)., Nutr Hosp.
Widyawati, P.S., Budianta, T.D.W., Kusuma, F.A., Wijaya, E.L., Difference Of
Solvent Polarity To Phytochemical Content And Antioxidant Activity Of
Pluchea Indicia Less Leaves Extracts. Int J Pharmacogn Phytochem Res.,
2014; 6(4): 850–855.
Wilmana, P.F., 1995., Analgesik – Antipiretik Analgesik Anti-Inflamasi
Nonsteroid dan Obat Pirai., dalam: Farmakologi dan Terapi., Sulistia G.
Ganiswarna (Ed.), edisi 4., Gaya Baru., Jakarta., 207-218.
46
Wilmana dan Sulistia, G., 2007., Analgesik – Antipiretik Analgesik
Antiinflamasi Nonsteroid Dan Obat Gangguan Sendi Lainnya Dalam
Buku Farmakologi Dan Terapi Edisi 5. Departemen Farmakologi Dan
Terapetik Fakultas kedokteran UI.
47
Lampiran I
Surat Determinasi Tanaman
48
Lampiran II
Bagan Kerja
Mencit ditimbang dan ukur volume awal kaki pertama
mencit
Batang tanaman Pepaya
Jepang
Maserasi
Rotary evaporator
ekstrak Skrining fitokimia
Uji Antiinflamasi
Kelompol I
Kelompok II Kelompok III Kelompok IV Kelompok V
Kontrol
Negatif
Kontrol
Positif
Diberi ekstrak
Dosis
50mg/kgBB
Diberi ekstrak
Dosis
100mg/kgBB
Diberi ekstrak
Dosis
200mg/kgBB
Setelah 0,5jam Suntik subplantar dengan suspensi
karagenin 2 %
Ukur volume kaki mencit tiap 30 menit selama 6 jam
Analisis data
Uji kadar air
Kerangka Penelitian
49
Lampiran III
Perhitungan Dosis
Kontrol negatif Na-CMC → 1
100 𝑥 20 𝑔 = 0,2 𝑚𝐿
Contoh perhitungan pemberian suspensi untuk mencit dengan berat badan 23,2 g
23,2 𝑔
20 𝑔 𝑥 0,2 𝑚𝐿 = 0,23 𝑚𝐿
Kontrol positif Natrium Diklofenak, Dosis 50 mg → 50 x 0,0026 = 0,13 mg/20 g
BB mencit
Pengenceran → 0,13 𝑚𝑔
50 𝑚𝑔 𝑥 200 𝑚𝐿 = 0,52 𝑚𝐿
Contoh perhitungan pemberian suspensi untuk mencit dengan berat badan 22,4 g
22,4 𝑔
20 𝑔 𝑥 0,52 𝑚𝐿 = 0,58 𝑚𝐿
Dosis ekstrak 100mg/kgBB → 20 𝑔
1000 𝑔 𝑥 100 𝑚𝑔 = 2 𝑚𝑔
Pengenceran 200 mg/50 mL → 2 𝑚𝑔
200 𝑚𝑔 𝑥 50 𝑚𝐿 = 0,5 𝑚𝐿
Contoh perhitungan pemberian suspensi untuk mencit dengan berat badan 21,2 g
21,2 𝑔
20 𝑔 𝑥 0,5 𝑚𝐿 = 0,53 𝑚𝐿
Dosis ekstrak 200mg/kgBB → 20 𝑔
1000 𝑔 𝑥 200 𝑚𝑔 = 4 𝑚𝑔
Pengenceran 400 mg/50 mL → 4 𝑚𝑔
400 𝑚𝑔 𝑥 50 𝑚𝐿 = 0,5 𝑚𝐿
Contoh perhitungan pemberian suspensi untuk mencit dengan berat badan 22,9 g
22,9 𝑔
20 𝑔 𝑥 0,5 𝑚𝐿 = 0,57 𝑚𝐿
Dosis ekstrak 400mg/kgBB → 20 𝑔
1000 𝑔 𝑥 400 𝑚𝑔 = 8 𝑚𝑔
Pengenceran 400 mg/25 mL → 8 𝑚𝑔
400 𝑚𝑔 𝑥 25 𝑚𝐿 = 0,5 𝑚𝐿
Contoh perhitungan pemberian suspensi untuk mencit dengan berat badan 23,3 g
23,3 𝑔
20 𝑔 𝑥 0,5 𝑚𝐿 = 0,58 𝑚𝐿
50
Lampiran IV
Tabel Profil Berat Badan Mencit
Kelompok Nomor Berat Badan (g)
1 1
2
3
4
5
23,5
20
20,2
20,4
20,9
2 1
2
3
4
5
23,2
21,1
23
21,2
21,5
3 1
2
3
4
5
21,3
21
21,8
20,8
21
4 1
2
3
4
5
21,7
20,3
22,4
21,8
21
5 1
2
3
4
5
20,3
20
20,1
20,4
20,7
51
Lampiran V
Tabel jumlah obat yang diberikan kepada mencit
Kelompok Nomor Berat
Badan (g)
Dosis (mg) Jumlah Obat (mL)
1 1
2
3
4
5
23,5
20
20,2
20,4
20,9
0,24
0,2
0,2
0,2
0,21
2 1
2
3
4
5
23,2
21,1
23
21,2
21,5
0,13
0,13
0,13
0,13
0,13
0,58
0,53
0,58
0,53
0,22
3 1
2
3
4
5
21,3
21
21,8
20,8
21
2
2
2
2
2
0,53
0,53
0,55
0,52
0,53
4 1
2
3
4
5
21,7
20,3
22,4
21,8
21
4
4
4
4
4
0,54
0,51
0,56
0,55
0,53
5 1
2
3
4
5
20,3
20
20,1
20,4
20,7
8
8
8
8
8
0,51
0,5
0,5
0,51
0,52
52
Lampiran VI
Perhitungan Uji Efek Antiinflamasi
Contoh perhitungan persentase rata-rata edema
Rumus :
Contoh perhitungan persen rata-rata edema menit ke 60 :
% edema = 0,015−0,009
0,009𝑥 100% = 66.67 %
Contoh perhitungan persentase inhibisi edema
Rumus :
Contoh perhitungan persen inhibisi edema menit ke 60 :
% edema = 66,67−50
66,67𝑥 100% = 25 %
% edema = 𝑉𝑡−𝑉𝑜
𝑉𝑜𝑥 100%
% inhibisi edema =a − b
ax 100%
53
Lampiran VII
Data uji efek antiinflamasi
Rata-rata volume edema
Waktu KN KP
Dosis 100
mg
Dosis 200
mg
Dosis 400
mg
0 menit 0.0088 0.0104 0.0098 0.0096 0.0098
60 menit 0.015 0.0154 0.0154 0.0146 0.0146
90 menit 0.0152 0.0158 0.016 0.0152 0.0154
120 menit 0.016 0.0168 0.0166 0.016 0.0164
150 menit 0.0164 0.0176 0.017 0.0166 0.0174
180 menit 0.0168 0.018 0.0176 0.0176 0.016
210 menit 0.0176 0.0174 0.0176 0.0184 0.0148
240 menit 0.0176 0.0164 0.0174 0.0172 0.0142
270 menit 0.0176 0.0154 0.0168 0.016 0.013
300 menit 0.0176 0.0146 0.0162 0.0146 0.0122
330 menit 0.0172 0.0136 0.0156 0.0134 0.0118
360 menit 0.0164 0.0122 0.014 0.012 0.0112
Persentase rata-rata edema
Waktu KN KP
Dosis 100
mg
Dosis 200
mg
Dosis 400
mg
0 menit 0 0 0 0 0
60 menit 70.558 48 57.334 52.224 49.112
90 menit 72.78 51.82 63.556 58.446 57.334
120
menit 81.946 61.456 69.778 66.89 67.556
150
menit 86.39 69.274 73.778 73.112 77.556
180
menit 90.834 72.91 80 83.556 63.334
210
menit 100 67.274 79.556 91.778 51.112
240
menit 100 60 77.556 79.334 45.112
270
menit 100 50.362 71.334 66.668 32.888
300
menit 100 38.726 65.334 52.446 24.666
330
menit 97.778 26.908 59.334 39.778 20.666
360
menit 82.224 13.454 42.888 25.11 14.444
54
Persentase Inhibisi Edema
Waktu KN KP
Dosis 100
mg
Dosis 200
mg Dosis 400 mg
0 menit 0 0 0 0 0
60
menit 0 31.768 18.856 25.474 30.328
90
menit 0 28.572 12.906 19.332 21.7
120
menit 0 24.85 15.144 17.642 17.294
150
menit 0 19.878 14.464 15.25 10.222
180
menit 0 19.762 12.214 7.714 30.262
210
menit 0 32.726 20.444 8.222 44.888
240
menit 0 40 22.444 20.666 54.888
270
menit 0 49.638 28.666 33.332 65.112
300
menit 0 61.274 34.666 47.554 75.334
330
menit 0 72.092 38.916 58.834 78.834
360
menit 0 84.474 46.466 69.786 82.912
55
Lampiran VIII
Hasil analisis data
Kelompok Rata-rata volume edema
Tests of Normality
Kelompok Rata-
rata volume
edema
Kolmogorov-
Smirnova Shapiro-Wilk
Statis
tic df Sig.
Statis
tic df Sig.
Volume Rata-
rata Edema
KN .247 60 .000 .715 60 .000
KP .167 60 .000 .953 60 .021
Dosis 100 mg .220 60 .000 .790 60 .000
Dosis 200 mg .151 60 .002 .932 60 .002
Dosis 400 mg .150 60 .002 .957 60 .035
a. Lilliefors Significance Correction
Test of Homogeneity of Variances
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
Volume Rata-rata
Edema
Based on Mean .840 4 295 .501
Based on Median .941 4 295 .441
Based on Median and
with adjusted df
.941 4 273.556 .441
Based on trimmed mean .994 4 295 .411
Test Statisticsa,b
Volume Rata-rata
Kruskal-Wallis H 8.250
df 4
Asymp. Sig. .083
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable: Rata-rata Volume
Edema
56
Persen rata-rata volume edema
Tests of Normality
Rata-rata % Edema
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Persentase Edema KN .259 12 .025 .662 12 .000
KP .190 12 .200* .912 12 .226
Dosis 100 mg .255 12 .030 .754 12 .003
Dosis 200 mg .171 12 .200* .941 12 .517
Dosis 400 mg .136 12 .200* .973 12 .940
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
Persentase Edema Based on Mean .202 4 55 .936
Based on Median .208 4 55 .933
Based on Median and with
adjusted df
.208 4 47.814 .933
Based on trimmed mean .240 4 55 .915
Test Statisticsa,b
Persentase Edema
Kruskal-Wallis H 21.056
df 4
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
Test Statisticsa
KN & Dosis 100 mg Persentase Edema
Mann-Whitney U 20.500
Wilcoxon W 98.500
Z -2.980
Asymp. Sig. (2-tailed) .003
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .002b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Edema
57
Test Statisticsa
KN & Dosis 200 mg Persentase Edema
Mann-Whitney U 25.500
Wilcoxon W 103.500
Z -2.691
Asymp. Sig. (2-tailed) .007
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .006b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Edema
b. Not corrected for ties.
Test Statisticsa
Persentase Edema
Mann-Whitney U 13.500
Wilcoxon W 91.500
Z -3.386
Asymp. Sig. (2-tailed) .001
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Edema
b. Not corrected for ties.
Test Statisticsa
Persentase Edema
Mann-Whitney U 13.500
Wilcoxon W 91.500
Z -3.386
Asymp. Sig. (2-tailed) .001
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Edema
58
Persen Inhibisi Edema
Tests of Normality
Rata-rata % Inhibisi
Edema
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Persentase Inhibisi
Edema
KN . 12 . . 12 .
KP .182 12 .200* .955 12 .717
Dosis 100 mg .156 12 .200* .962 12 .816
Dosis 200 mg .199 12 .200* .911 12 .218
Dosis 400 mg .167 12 .200* .938 12 .469
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
Test of Homogeneity of Variances
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
Persentase Inhibisi Edema Based on Mean 9.330 4 55 .000
Based on Median 6.401 4 55 .000
Based on Median and
with adjusted df
6.401 4 37.843 .000
Based on trimmed mean 9.037 4 55 .000
Test Statisticsa,b
Persentase
Inhibsi Edema
Kruskal-Wallis H 27.984
df 4
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable: Rata-rata %
Inhibisi Edema
Test Statisticsa
KN & KP
Persentase
Inhibsi Edema
Mann-Whitney U 6.000
Wilcoxon W 84.000
Z -4.153
59
Asymp. Sig. (2-tailed) .000
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Inhibisi
Edema
b. Not corrected for ties.
Test Statisticsa
KN & Dosis 100 mg
Persentase
Inhibsi Edema
Mann-Whitney U 6.000
Wilcoxon W 84.000
Z -4.153
Asymp. Sig. (2-tailed) .000
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Inhibisi
Edema
b. Not corrected for ties.
Test Statisticsa
KN & Dosis 200 mg
Persentase
Inhibsi Edema
Mann-Whitney U 6.000
Wilcoxon W 84.000
Z -4.153
Asymp. Sig. (2-tailed) .000
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Inhibisi
Edema
b. Not corrected for ties.
Test Statisticsa
KN & Dosis 400 mg
Persentase
Inhibsi Edema
Mann-Whitney U 6.000
Wilcoxon W 84.000
Z -4.153
Asymp. Sig. (2-tailed) .000
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000b
a. Grouping Variable: Rata-rata % Inhibisi
Edema
b. Not corrected for ties.
60
Lampiran IX
Dokumentasi
Pengujian Kadar
Air Proses Evaporasi
Ekstrak Kental
Etanol Batang
tanaman Pepaya
Jepang
Uji Fenolik
Uji
Steroid/Terpenoid
Uji Tanin
61
Uji Flavonoid
Uji Alkaloid
Uji Saponin
Pengukuran Volume
Edema
Kaki Mencit Setelah
Diinduksi Karagenin