UJI AKTIVITAS NANOHERBAL ANTIDIABETES MELLITUS TIPE2

RESISTEN INSULIN DARI FRAKSI ETIL ASETAT DAUN SALAM

(Eugenia polyantha Wight)

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

guna memperoleh gelar Sarjana Sains

Disusunoleh :

Inna Listri Ani S.

NIM. M0412041

PROGRAM STUDI BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

2016

1

i

1

1

ii

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi ini adalah hasil penelitian saya sendiri

dan tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar

kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, serta tidak terdapat karya atau pendapat

yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali secara tertulis diacu

dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Apabila dikemudian hari dapat ditemukan adanya unsur penjiplakan maka gelar

kesarjanaan yang telah diperoleh dapat ditinjau dan/atau dicabut.

Surakarta, 21 Juli 2016

Inna Listri Ani S.

NIM. M0412041

1

1

iii

Uji Aktivitas Nanoherbal Antidiabetes Mellitus Tipe 2 Resisten Insulin dari

Fraksi Etil Asetat Daun Salam (Eugenia polyantha Wight)

Abstrak

Akhir-akhir ini kecenderungan manusia menggunaanbahan alam semakin

meningkat untuk mengatasi penyakit diabetes mellitus terutama tipe 2 yang telah

resisten insulin, salah satunya adalah penggunaandaunsalam(Eugenia polyantha

Wight).Tetapi pemberian ekstrak maupun fraksi masih memiliki kekurangan

karena biovaibilitas oral yang rendah. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui

efektivitas SNEDDS daun salam yang dibandingkan dengan metformin, fraksi etil

asetat daun salam, dan kombinasi serta mengetahui gambaran histologi pankreas,

hepar, dan ren tikus putih (Rattus norvegicus).

Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap Pola Searah.

Hewan uji dibuat resisten insulin dengan diberi diet tinggi lemak dan fruktosa

selama 80 hari, setelah itu dikelompokkan menjadikontrol normal, kontrol negatif,

kontrol positif, fraksi etil asetat daun salam 183,5 mg/kg BB, SNEDDS 183,5

mg/kg BB, dan kombinasi (SNEDDS 91,75 + metformin 22,5 mg/kg BB) selama

15 hari. Pengukuran kadar glukosa darah menggunakan reagen Glucose GOD FS.

Data yang diperoleh berupa kadar glukosa darah hari ke-0, 80, dan 95 yang

kemudian dianalisis dengan uji Independent T Test, Paired T Test, dan One Way

ANOVA sedangkan gambaran histologi dianalis secra deskriptif.

Hasil uji menunjukkan bahwa SNEDDS fraksi etil asetat daun salam dapat

menurunkan kadar glukosa darah tidak signifikan (P>0,05) namun uji LSD

hasilnya setara dengan pemberian metformin. Daya hipoglikemik pada fraksi etil

asetat daun salam sebesar 41,4%;SNEDDS 15,6%; kombinasi 34,6%; dan

metformin 28,3%.Pada gambaran histologi pankreas, hepar, dan ren perlakuan

SNEDDS menunjukkan kemampuan menurunkan kadar glukosa yang rendah dan

kerusakan histologi lebih besar.

Kata kunci :antidiabetes, diabetes mellitus tipe 2 resisten insulin, daun salam,

SNEDDS, kadar glukosa

1

iv

1

Nanoherbal Activity for Antidiabetes Mellitus Type 2 Insulin Resistance of

Ethyl Acetate Fraction Salam Leaves (Eugenia polyantha Wight)

Abstract

Lately, the usage of natural materials by people was increasing, especially

for treating disease. One of the example is the usage of salam (Eugenia polyantha

Wight) leaves to manage diabetes mellitus type 2 insulin resistant. However, the

application of its extracts nor the fraction still have some drawback due to low

oral bioavaibilitas. The purposes of this research is to know the effectiveness of

the salam leaf SNEDDS compared to metformin, ethyl acetate fraction of salam

leaves, and combinations, and determine histological organ pancreas, liver, and

kidney of rat (Rattus norvegicus).

This study used a complete randomized design in line pattern. Insulin

resistant animal was made by treating it with high fat diet and fructose for 80

days, then grouped into normal control, negative control, positive control, the

ethyl acetate fraction leaves 183.5 mg/kg, SNEDDS 183.5 mg/kg, and

combination (SNEDDS 91.75 mg/kg + metformin 22.5 mg/kg) for 15 days.

Measurement of blood glucose levels using Glucose reagent GOD FS. Data

obtained in the form of blood glucose levels day 0, 80, and 95 were analyzed with

Independent T Test, Paired T Test, One Way ANOVA. Histological section were

analyzed descriptively.

The results showed that the ethyl acetate fraction SNEDDS salam leaf not

significantly decrease blood glucose levels (P>0.05) but in LSD was equivalent

with of metformin. Hypoglycemic on ethyl acetate fraction leaves of 41,4%;

SNEDDS 15,6%; combination 34,6%; and metformin of 28,3%. SNEDDS

treatment showed lower ability to decrease glucose level, besides, it gave more

damage at histological section of pancreas, liver, and kidney.

Keyword: antidiabetic, type 2 diabetes mellitus insulin-resistant, salam

leaf(Eugenia polyantha Wight), SNEDDS, glucose levels

1

1

v

MOTTO

“Seseorang yang optimis akan melihat adanya kesempatan dalam setiap

malapetaka, sedangkan orang pesimis melihatmalapetaka

dalam setiap kesempatan” (Prophet Muhammad SAW)

“Laa yustatho’ul ‘ilmu bi rohatil jasad“

(Ilmu tidaklah bisa diraih dengan badan yang bersantai-santai).

(Abdurrahman bin Abu Hatim dalam Siyar A’lamin Nubala’)

“Jangan jelaskan dirimu kepada siapapun, karna yang mencintaimu tidak perlu itu

dan yang membenci mu tidak percaya itu” (Ali bin Abi Thalib)

Aku sekarang orangnya bisa tahan sudah berapa waktu, bukan kanak lagi tapi dulu

memang ada suatu bahan yang bukan dasar perhitungan kini

(Chairil Anwar, 1949 –Derai-derai Cemara-)

1

1v

1

vi

1

vi

PERSEMBAHAN

Skripsi ini kupersembahkan untuk:

Papa Supriadi, Mama Hardiana, Yuk Ika Safitri

Ani S., dan Ferri Afriansyah Putra S., serta kedua

ponakan tersayang (Nazwa Hafifah Zahra dan

Khalid Abidzar Ghifari)tercinta yang selalu

memberikan dukungan berupa doa, motivasi, dan

materi dalam mengerjakan penelitian serta naskah ini.

Almamater tercinta, Universitas Sebelas Maret.

Seluruh pihak yang tidak dapat disebutkan satu

persatu, terimakasih.

1

vii

1

KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberi limpahan rahmat

dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan

penyusunan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Nanoherbal Antidiabetes

Mellitus Tipe 2 Resisten Insulin Dari Fraksi Etil Asetat Daun Salam (Eugenia

polyantha Wight)”. Penyusunan skripsi ini merupakan syarat utama untuk

memperoleh gelar kesarjanaan Strata 1 (S1) di Program Studi Biologi, Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret Surakarta.

Dalam melakukan penelitian maupun penyusunan skripsi ini, penulis telah

mendapatkan saran, bantuan, dan bimbingan dari berbagai pihak yang sangat

berguna dan bermanfaat secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu,

pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada:

1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc. (Hons)., Ph.D. selaku Dekan Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret Surakarta

yang telah memberikan izin penelitian untuk keperluan skripsi.

2. Dr. Ratna Setyaningsih, M.Si selaku Kepala Program Studi Biologi, Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret,

Surakarta yang telah memberikan izin penelitian untuk keperluan skripsi.

3. Dra. Marti Harini, M.Si. selaku dosen pembimbing I sekaligus dosen

pembimbing akademik yang telah memberikan saran, bimbingan, dukungan

dan masukan dari awal penelitian hingga terselesaikannya penyusunan skripsi

serta telah sabar dan senantiasa memberikan banyak masukan dan bimbingan

selama perkuliahan.

4. Fea Prihapsara, M.Sc.,Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah

memberikan, saran, bimbingan dan masukan dari awal penelitian hingga

terselesaikannya penyusunan skripsi.

5. Dr. Shanti Listyawati, M.Si. selaku dosen penelaah I yang telah memberikan

saran dan masukan serta telah memberi izin dan kemudahan penelitian dan

prasarananya hingga terselesaikannya penyusunan skripsi.

6. Dr. Wiryanto, M.Si. selaku dosen penelaah II yang telah memberikan saran,

nasihat, dan masukan hingga terselesaikannya penyusunan skripsi.

7. Staff laboratorium Program Studi Biologi FMIPA UNS, Mbak Nina dan Mbak

Atik yang telah memberi izin dan kemudahan penelitian beserta saran dan

prasarananya.

8. Kepala dan staff Laboratorium Pusat, Laboratorium MIPA UNS,

Laboratorium Biologi, dan Laboratorim Histologi FK UNS yang telah

memberi izin dan kemudahan penelitian beserta saran dan prasarananya.

9. Papa Supriadi, Mama Hardiana, Yuk Ika Safitri Ani S., Ferri Afriansyah Putra

S., kedua keponakan tersayang (Nazwa Hafifah Zahra dan Khalid Abidzar

1

viii

1

Ghifari) serta seluruh keluarga penulis yang telah mencurahkan kasih sayang

begitu besar, dukungan berupa semangat, motivasi dan materi, serta dukungan

doa yang tiada henti.

10. Kelompok Studi Biodiversitas dan Kepak Sayap SC telah banyak

memberikanpengalaman penting yang berharga tentang kebersamaan,

organisasi, dan mencintai makhluk hidup serta alam.

11. Larva : Krisanty Kharismamurti (Masan), Anindita Prabawati (Oma), Euis

Citra Ayu R. (Uwis), , Fahrur Nuzulul K. (Tante), Hafizhah Amajidah (Emak),

Rekyan Galuh W. (Yanto), Rizma Dera Anggraini P. (Ndut),dan Wisma

Lathifah : Diah Wahyuningsih (Jebe), Andini Setyo A. (Cung), Astri

Fatwasari (Siti). Bersama kalian berbagi canda, kesedihan, dan memberikan

pelajaran yang sangat berharga tentang arti keluarga di tanah perantauan.

12. Rengganis Widoninggar, you’re really bestfriend and forever be my partner in

crime dan teman-teman proyek “Nanoemulsi” yang sangat memberikan

kontribusinya dalam penelitian ini.

13. Keluarga besar Program Studi Biologi khususnya angkatan 2012 “Biogenesis”

atas motivasi, persabatan, suka, duka dan dukungan selama masa perkuliahan

14. Dosen-dosen Program Studi Biologi, FMIPA UNS yang telah mendidik dan

memberikan dorongan baik moral maupun spiritual sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa tidak ada yang sempurna termasuk dalam

melakukan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Oleh karena itu, masukan yang

berupa saran dan kritik yang membangun dari pembaca akan sangat membantu.

Semoga skripsi ini bisa bermanfaat bagi kita semua dan pihak-pihak yang terkait.

Surakarta, Juli 2016

Penulis

1

ix

DAFTAR ISI

PENGESAHAN .................................................................................................... ii

PERNYATAAN .................................................................................................... iii

ABSTRAK ............................................................................................................ iv

MOTTO ................................................................................................................ vi

PERSEMBAHAN ................................................................................................. vii

KATA PENGANTAR ......................................................................................... viii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ................................................................................................ xi

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiii

DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiv

BAB I PENDAHULUAN ..................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ............................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ..................................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ....................................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian .................................................................................... 4

BAB II LANDASAN TEORI ............................................................................... 5

A. Tinjauan Pustaka ....................................................................................... 5

B. Kerangka Berpikir ..................................................................................... 15

C. Hipotesis .................................................................................................... 17

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 18

A. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................... 18

B. Alat dan Bahan .......................................................................................... 18

C. Cara Kerja ................................................................................................. 19

D. Analisis Data ............................................................................................. 25

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 26

A. SNEDDS Daun Salam (Eugenia polyantha Wight) ................................. 26

B. Efek Diet Lemak-Fruktosa Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus .......... 29

C. Uji Resistensi Insulin ................................................................................ 31

1

x

1

D. Efek Sediaan Uji Terhadap Kadar Glukosa Darah Hewan Uji ................. 32

E. Daya Hipoglikemik Sediaan Uji ................................................................ 34

F. Pengamatan Organ Pankreas, Hepar, dan Ren .......................................... 38

BAB V PENUTUP ................................................................................................ 44

A.Kesimpulan ................................................................................................ 44

B. Saran .......................................................................................................... 44

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 45

LAMPIRAN .......................................................................................................... 55

RIWAYAT HIDUP PENULIS…………………………………..……………..74

1

xi

1

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Rasio Surfaktan dan Ko-surfaktan ........................................................ 20

Tabel 2. Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah .......................................... 34

Tabel 3.Total kerusakan sel pada organ pankreas, hepar, dan ren ...................... 38

Tabel 4.Nilai Transmitansi .................................................................................. 55

Tabel 5.Nilai Waktu Emulsifikasi…………………………………………….55

1

1

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Daun Salam……………………………………………..………… 5

Gambar 2.Struktur Metformin……………………………………………..…14

Gambar 3. Bagan Alir Kerangka Pemikiran ....................................................... ..6

Gambar 4. Struktur Tween 80 ............................................................................ 27

Gambar 5. Struktur PEG 400 .............................................................................. 27

Gambar 6.Efek Diet Lemak-FruktosaTerhadap Kadar Glukosa Darah Tikus. .. 29

Gambar 7. Hasil Uji Resistensi Insulindengan Glibenklamid 10 mg/kg BB ..... 31

Gambar 8. Hasil Kadar Glukosa Dari Aktivitas Sediaan Uji ............................. 33

Gambar 9. Persen Daya Hipoglikemik Pada Hari ke-80 dan 95 ........................ 34

Gambar 10. Gambaran histologi pankreas, hepar, ren pada tikus kelompok I .... 40

Gambar 11. Gambaran histologi pankreas, hepar, ren pada tikus kelompok II.. 41

Gambar 12. Gambaran histologipankreas, hepar, ren pada tikus kelompok III.41

Gambar 13. Gambaran histologi pankreas, hepar, ren pada tikus kelompok IV..

............................................................................................................................... 42

Gambar 14. Gambaran histologi pankreas, hepar, ren pada tikus kelompok

V………………………………………………………………………………...42

Gambar 15. Gambaran histologi pankreas, hepar, ren pada tikus kelompok

VI………………………………………………………………………………..43

1

xiii

1

DAFTAR SINGKATAN

Singkatan Kepanjangan

DM Dibetes Mellitus

IDF International Diabetes Federation

WHO World Health Organization

OHO Obar Oral Hipoglikemik

SNEDDS Self-Emulsifying Drug Delivery System

VCO Virgin Coconut Oil

IDDM Insulin-Dependent Diabetes Mellitus

NIDDM Non Insulin-Dependent Diabetes Mellitus

TG Trigliserida

VLDL Very Low Density Lipoprotein

ATP Adenosin Triphospate

IRS Insulin Reseptor Substrate

PI3K Phosphatidylinositol 3-Kinase

PKB Protein Kinase B

PKC Protein Kinase C

GLUT Glucose Transporters

PEG 400 Polietilen Glikol 400

Na-CMC Natrium-Carboxymethyle Cellulose

BNF Buffer Neutral Formalin

HE Hemaktosilin-Eosin

DM RI Diabetes Mellitus Resisten Insulin

GOD Glukosa Oksidase

Anova Analysis of Varian

LSD Last Significant Difference

LDL Low-Density Lipoprotein

HDL High-Density Lipoprotein

MCFA Mediun Chain Fatty Acid

HLB Hidrofilik Lipofilik Balance

AGF Artificial Gastric Fluid

AIF

ROS

Artificial Intestinal Fluid

Reactive Oxyen System