i

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN

KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTALNYA

SKRIPSI

Oleh:

RISA WIDIANI BATUBARA K100070122

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2011

ii

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN

KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTALNYA

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai

derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

RISA WIDIANI BATUBARA K100070122

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2011

iii

iv

PERSEMBAHAN

Sebuah persembahan untuk:

Allah SWT yang telah memberikanku hidup

Para Rosul-Nya yang telah memberi teladan bagiku

Ayah dan Mama tercinta sebagai bentuk baktiku

Adik tersayang Nina dan Putri

Saudara, sahabat dan teman

Almamater UMS

v

MOTTO

“Sebuah perjalanan tak biasa akan menjadikanmu sebagai orang yang luar biasa. ”

(Penulis)

“Don’t dream it, but do it.” (Richard O’brien)

“Be thankful for the past, for it has built the present. Be hopeful for tomorrow, for it holds the dream.

Embrace the present, for it doesn’t last. Always be grateful, for despite what happens, life is beautiful.

And God is listening.” (Clio Freya)

vi

DEKLARASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya

yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan

Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat

yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis

diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, Juni 2011

Peneliti,

(Risa Widiani Batubara)

vii

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.

Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah

sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang

berjudul: “UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT

BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI-FRAKSINYA

DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK DAN

FLAVONOID TOTALNYA” sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat

Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Surakarta.

Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai

pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Bapak Drs. Muhammad Da’i, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai dosen penguji usulan

skripsi yang telah banyak memberikan koreksi dan saran.

2. Bapak Drs. Muhtadi, M.Si selaku pembimbing akademik dan pembimbing

utama yang telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan

dukungan selama penulis menempuh studi, penelitian maupun penyusunan

skripsi ini.

3. Ibu Rosita Melannisa, M.Sc., Apt selaku pembimbing pendamping yang

telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan selama

penelitian maupun penyusunan skripsi ini.

viii

4. Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt dan Ibu Ika Trisharyanti D. K., M.Farm.,

Apt selaku dosen penguji skripsi yang telah memberikan banyak koreksi dan

saran.

5. Bapak dan Ibu Dosen serta staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta.

6. Keluarga penulis, Bapak Ir. Yanharbi Batubara, Ibu Sri Rahayu Ningsih,

saudari-saudariku Nina Fitria Ningsih dan Yuni Yanti Putri, yang selalu

memberiku cinta dan dukungan terbaik mereka.

7. Special person, Mahfur, you always influenced me, inspired me, and help me

in any way that possibly can.

8. Sahabat-sahabat dan saudaraku di Solo: Ririn, Santi, Arif, Asdi, Astrina,

Alm. Fian Dio, Kiki, Rio, Doni, Alm. Fitri, Pena, Putri Tara, Kembar Aya

dan Dijah, Mbak Nung, Rangga, Ratih, Ratih Ardelia, Mbak Ana, Susi,

Mitha, Adit, Ardhi, Arina, Upa, Lalu Ari, Rifka, Lanjar, Atina, Indri, Ratih,

Didiek, Yudhist, Endah, Ayu, Devi, Nindi, Era, Nurul, Tessa, Tholib, Fairus,

Khusnul, Mbak Noor, MPC, Sains ’07, Kost Ardelia, dan Wisma Serasi III

dan All BEMers, untuk suka duka yang telah dilalui bersama akan menjadi

kenangan yang tak terganti.

Segenap pihak yang telah banyak membantu dan memberi dukungan yang

tidak dapat disebutkan satu persatu.

Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang

membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.

Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.

Surakarta, Juni 2011

Peneliti

ix

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL........................................................................................ i

HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................... iii

PERSEMBAHAN............................................................................................ iv

MOTTO ........................................................................................................... v

DEKLARASI ................................................................................................... vi

KATA PENGANTAR ..................................................................................... vii

DAFTAR ISI.................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL............................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN.................................................................................... xv

INTISARI......................................................................................................... xvi

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang .......................................................................................... 1

B. Perumusan Masalah .................................................................................. 3

C. Tujuan Penelitian....................................................................................... 3

D. Tinjuan Pustaka......................................................................................... 4

1. Tanaman Durian ................................................................................. 4

a. Klasifikasi Tanaman .................................................................. 4

b. Morfologi Tanaman ................................................................... 4

c. Kandungan Kimia ...................................................................... 5

d. Manfaat Tanaman ...................................................................... 6

x

2. Radikal Bebas..................................................................................... 6

3. Antioksidan ........................................................................................ 8

4. DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil).................................................... 9

5. Ekstraksi ............................................................................................. 10

6. Fraksinasi............................................................................................ 11

E. Landasan Teori ......................................................................................... 12

F. Hipotesis ................................................................................................... 13

BAB II METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian ......................................................................................... 14

B. Variabel Penelitian.................................................................................... 14

C. Alat Dan Bahan......................................................................................... 15

1. Alat Yang Digunakan......................................................................... 15

2. Bahan Yang Digunakan ..................................................................... 15

D. Jalannya Penelitian ................................................................................... 15

1. Determinasi Tanaman ........................................................................ 15

2. Pengumpulan Bahan .......................................................................... 15

3. Pengeringan dan Penyerbukan ........................................................... 16

4. Optimasi Penyari................................................................................ 16

5. Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian................................... 16

6. Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian.................................... 17

7. Pembuatan Larutan Stok Uji .............................................................. 18

a. Pembuatan Larutan Stok DPPH 0,4 mM ............................... 18

b. Pembuatan Larutan Stok Vitamin E 0,1% ............................. 18

xi

c. Pembuatan Larutan Stok Asam Galat 0,1%........................... 18

d. Pembuatan Larutan Stok Rutin 0,1% ..................................... 18

e. Pembuatan Larutan Stok 0,1% Ekstrak Etanol dan Fraksi-

Fraksi Kulit Buah Durian........................................................ 19

8. Analisis Kualitatif dengan KLT ........................................................ 19

a. Aktivitas Antioksidan............................................................. 19

b. Senyawa Fenolik .................................................................... 19

c. Senyawa Flavonoid ................................................................ 20

9. Penentuan Aktivitas Antioksidan ..................................................... 20

a. Penentuan Waktu Inkubasi..................................................... 20

b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λmaks) DPPH.... 20

c. Pembacaan Serapan DPPH .................................................... 21

10. Penetapan Kadar Fenolik dalam Sampel ........................................... 21

a. Penentuan Operating Time (OT)............................................ 21

b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal (λmaks) ................ 22

c. Penetapan Kurva Baku Asam Galat ....................................... 22

d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel............................... 22

11. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Dalam Sampel ............. 23

a. Penentuan Operating Time (OT)............................................ 23

b. Menentukan Panjang Gelombang Maksimal (λmaks) .............. 23

c. Penetapan Kurva Baku Rutin ................................................. 23

d. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Dalam Sampel.. 24

E. Analisis Data............................................................................................. 24

xii

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Ekstraksi dan Fraksinasi ........................................................................... 27

B. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Dalam dan Kulit

Luar Durian Serta Fraksi-Fraksinya Dengan Metode DPPH.................... 31

C. Penetapan Kadar Fenolik Total................................................................. 34

D. Penetapan Kadar Flavonoid Total............................................................. 36

E. Korelasi Kandungan Fenolik dan Flavonoid Total dengan Aktivitas

Antioksidan ............................................................................................... 38

BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan .......................................................................................... 44

B. Saran..................................................................................................... 45

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 46

LAMPIRAN..................................................................................................... 51

xiii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Optimasi Penyari Simplisia Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian . 28

Tabel 2. Hasil Penyarian Simplisia Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian.... 28

Tabel 3. Hasil Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Dalam dan Kulit Luar

Durian............................................................................................ 29

xiv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Foto buah dan kulit durian (Durio zibethinus Murr)..................... 5

Gambar 2. Resonansi Pada Struktur DPPH .................................................... 10

Gambar 3. Reaksi Radikal Bebas DPPH dengan Antioksidan ....................... 10

Gambar 4. Profil bioautografi optimasi penyari sampel setelah disemprot

DPPH............................................................................................. 28

Gambar 5. Profil KLT semua sampel kulit durian setelah disemprot DPPH.. 30

Gambar 6. Hasil Totolan Sampel setelah disemprot DPPH............................ 31

Gambar 7. Hasil % Aktivitas Antiradikal Orientasi Sampel dengan kadar

100 µg/mL .................................................................................... 31

Gambar 8. Hasil IC50 pada sampel dan vitamin E .......................................... 33

Gambar 9. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik Sampel Kulit Durian .................. 34

Gambar 10. Kadar GAE dalam Sampel ............................................................ 36

Gambar 11. Uji Kualitatif Senyawa Flavonoid Sampel Kulit Durian ............. 36

Gambar 12. Contoh reaksi kompleks antara senyawa flavonol (flavonoid)

dengan AlCl3 ................................................................................. 37

Gambar 13. Kadar RE dalam Sampel .............................................................. 38

Gambar 14. Nilai IC50, Kadar Fenolik dan Kadar Flavonoid dalam sampel

Kulit Durian .................................................................................. 39

Gambar 15. Kurva Korelasi IC50 dan Kadar Fenolik Total Sampel Kulit

Durian............................................................................................ 40

Gambar 14. Kurva Korelasi IC50 dan Kadar Flavonoid Total Sampel Kulit

Durian............................................................................................ 41

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman Buah Durian (Durio zibethinus

Murr)......................................................................................... 52

Lampiran 2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH ................. 53

Lampiran 3. Hasil Penentuan % Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol

Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian serta fraksi-fraksinya dan

Vitamin E.................................................................................. 54

Lampiran 4. Hasil Penentuan Operating Time Asam Galat.......................... 61

Lampiran 5. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat......... 62

Lampiran 6. Kurva Baku Asam Galat........................................................... 63

Lampiran 7. Kadar Fenolik Total dalam Sampel.......................................... 64

Lampiran 8. Contoh Perhitungan Kadar Fenolik Total................................. 69

Lampiran 9. Hasil Penentuan Operating Time Rutin.................................... 70

Lampiran 10. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Rutin................... 71

Lampiran 11. Kurva Baku Rutin..................................................................... 72

Lampiran 12. Kadar Flavonoid Total dalam Sampel...................................... 73

Lampiran 13. Contoh Perhitungan Kadar Flavonoid Total............................. 78

Lampiran 14. Uji T Satu Sampel Antara IC50 Ekstrak Etanol Kulit Durian

dan Fraksi-Fraksinya dengan IC50 Vitamin E ......................... 79

xvi

INTISARI

Antioksidan merupakan substansi yang diperlukan tubuh untuk menetralisir radikal bebas dan mencegah munculnya berbagai penyakit degeneratif. Durian (Durio zibethinus Murr) merupakan salah satu tanaman dengan potensi sebagai antioksidan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antioksidan kulit buah durian lokal dan bagaimana korelasi dengan kadar fenolik dan flavonoid totalnya. Aktivitas antioksidan dapat ditentukan dengan menggunakan metode DPPH sedangkan penentuan kadar fenolik dan flavonoid total dilakukan dengan menggunakan metode kolorimetri.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit dalam serta fraksi kloroform dan etil asetat sebagai fraksi aktifnya memiliki aktivitas antioksidan tinggi dengan nilai IC50 secara berturut-turut adalah 61,57; 32,49; dan 17,13 µg/mL, kadar fenoliknya (GAE) 71,75; 113,93; dan 150,03 mg/g sampel dan kadar flavonoidnya (RE) 64,82; 211,15; dan 212,67 mg/g sampel. Kulit luar juga memiliki aktivitas antioksidan tinggi dengan nilai IC50 28,83; 32,81; dan 14,91 µg/mL, kadar fenoliknya (GAE) 79,49; 109,93; dan 200,26 mg/g sampel dan kadar flavonoidnya (RE) 135,76; 197,43; dan 339,02 mg/g sampel. Vitamin E sebagai pembanding memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dibanding semua sampel (IC50 = 6,81 µg/mL). Korelasi kadar fenolik total dengan aktivitas antioksidan sampel kulit dalam dan kulit luar durian memberikan hasil yang positif yaitu 98,2% dan 80,4% sedangkan korelasi kadar flavonoid total dengan aktivitas antioksidannya juga memberikan hasil yang positif yaitu 88,9% dan 75,8%. Fraksi heksana dan metanol:air dari masing-masing bagian kulit durian menunjukkan potensi yang rendah pada uji kualitatif sehingga tidak dilanjutkan ke uji kuantitatifnya. Kata kunci: antioksidan, durian, DPPH, fenolik, flavonoid.