SAR Struktur Induk• Nilai pIC50 dari pyrrolidine-2-yl-asetat asam (R) -8a dan (S) -8a digunakan sebagai

pembanding

• Asam amino induk (9-12, 13a, 14a) ini semuanya akan dilakukan pengujian baik

dalam bentuk rasematnya yang terdiri dari campuran diastereomeric (1:1) atau

diasteromer murni dan bisa juga dalam bentuk tidak murni.

• Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 2, di antara asam amino induk yang diganti

pada posisi 2 dengan gugus alkil (9-12, Tabel 2, entri 3-6), tidak memberikan

peningkatan potensi dan selektivitas yang bermakana terhadap protein GAT

dibandingkan dengan standar homoprolin (R)-8a dan (S)-8a (Tabel 2, entri 1 dan 2)

No significant effect

• Potensi dari rac- (l) -9 / rac- (u) -9 (dr 55:45) pada protein mGAT1-mGAT4 yang

menunjukkan gugus metil dalam rantai samping pyrrolidine-2-yl-asam asetat

menunjukkan aktivitas yang sama dengan (R) -8a dan (S) -8a, tetapi aktivitas

terhadap mGAT1 agak rendah.

• Peningkatan lipofilisitas dari senyawa induk terjadi dengan menambahkan etil

[rac- (l) -10 / rac- (u) -10, dr = 54:46] atau dua kelompok metil vicinal [(RS) -11]

atau 1,3-propandiyl bagian [(RS) -12] mengakibatkan hilangnya aktivitas dan

selektivitas terhadap protein GAT

• Dengan mensubtitusi 2-hidroksi pada pyrrolidine-2-yl-asetat rac- (l) -13a dan rac- (u) -13a, rac- (l) -13a, meskipun masih dalam bentuk campuran rasematnya menunjukkan potensi penghambatan yang lebih baik terhadap protein mGAT2 ( pIC50 = 3,77), mGAT3 (pIC50 = 4,44), dan mGAT4 (pIC50 = 4,85) dibandingkan dengan kedua homoprolines enansiomer murni (R) -8a dan (S) -8a.

Berdasarkan hasil ini, dapat disimpulkan bahwa penambahan sterik kelompok lipofilik

pada posisi 2 struktur inti pyrrolidine-2-yl-asetat acids tidak ditoleransi oleh protein GAT.

Lebih penting lagi, dapat disimpulkan bahwa kehadiran kelompok hidrofilik seperti

hidroksi atau bagian amino pada posisi 2 untuk gugus karboksil dari homoproline dengan

orientasi stereokimia yang tepat ditoleransi dengan baik atau bahkan meningkatkan

potensi dan menimbulkan selektifitas yang menjanjikan untuk mGAT3 dan mGAT4

protein.

2.2.2. SAR dari turunan N-tersubstitusi

Pengujian aktivitas penghambatannya terhadap hGAT-1 dan transport GABA mGAT1-4

terhadap empat tikus uji. Uji uptake [3H] GABA untuk hGAT-1 sama dengan pengujian

untuk mGAT1 namun yang membedakannya terlatak pada penyiapan membran sel

HEK293 yang mengekspresikan hGAT-1.

N-tersubstitusi 2-hidroksi asam pirolidin-2-ylacetic [rac- (l) -13b, rac- (u) -13b, rac- (l) -13c

dan rac- (u) -13c] merupakan inhibitor poten dan selektif dan memiliki afinitas terhadap

mGAT1 dan hGAT-1, (u) diastereoisomer -configured menunjukkan afinitas dan aktivitas

sedikit lebih tinggi dibandingkan (l) -configured. Hebatnya, N-alkilasi dengan kelompok

yang dikenal untuk meningkatkan selektivitas terhadap mGAT1 menimbulkan pergeseran

selektivitas senyawa induk (rac) - (l) -13a (pIC50 mGAT4 / pIC50 mGAT1> 71) mendukung

mGAT4 selektivits mendukung mGAT1 untuk senyawa yang diganti (misalnya, rac- (l) -13c,

Tabel 3, entri 5). Atas hasil mengkonfirmasi kemampuan umum 2 - {[tris (4-metoksifenil)]

metoksi} etil untuk meningkatkan potensi penghambatan terhadap mGAT4, senyawa rac-

N-tersubstitusi (l) -13d dan rac- (u) - 13d menunjukkan nilai pIC50 yang tinggi untuk

penghambatan mGAT4 dari senyawa induk rac- (l) -13a dan rac- (u) -13a.

3. Kesimpulan Evaluasi farmakologi aktivitas senyawa induk terhadap protein penyerapan GABA tikus

mGAT1, mGAT2, mGAT3 dan mGAT4 menunjukkan bahwa kelompok lipofilik seperti

etil, metil vicinal atau sterik seperti kelompok 1,3-propandiyl pada posisi 2 pyrrolidine-

asam 2-yl-asetat tidak ditoleransi dengan baik. Asam amino rac- (l) -13a dan rac- (l) -

14a yang dihasilkan dari penambahan gugus hidrofilik, yaitu, kelompok hidroksi atau

amino, menunjukkan peningkatan profil selektivitas dan potensinya terhadap mGAT3

dan mGAT4 pada uji penyerapan GABA dibandingkan dengan asam amino inti yang

tidak tersubstitusi, homoprolines (R) -8a dan (S) -8a.

• Asam 2 hydroxypyrrolidine-2-yl-asetat derivati rac- (u) -13c merupakan GAT1

inhibitor yang paling ampuh dengan nilai pIC50 5.67 dan 6.14 terhadap mGAT1

dan hGAT-1

• N-alkilasi (u) -configured diastereomer rac- (u) -13b dan rac- (u) -13c

menunjukkan potensi dan selektifitas yang tinggi terhadap mGAT1. N-

tersubstitusi asam 2-aminopyrrolidine-2-yl-asetat tidak menunjukkan potensi

dan selektivitas yang menjanjikan.

• Secara keseluruhan, hubungan antara struktur dan aktivitas terhadap inhibitor

GAT telah menghasilkan beberapa pengambangan obat pada studi ini. Seperti

subtitusi gugus hidroksi atau gugus amino pada posisi 2 asam pyrrolidine-2-yl-

asetat mewakili struktur inti novel dan menjanjikan untuk pengembangan

inhibitor GAT baru yang mungkin menunjukkan sifat fisikokimia yang berubah.