KLONING GEN

Kloning merupakan proses pemasukan DNA asing ke dalam suatu sel bakteri, DNA yang dimasukkan akan mengalami replikasi diri. Sehingga gen asing tersebut tetap memiliki sifat yang sama dengan sel asalnya. Adapun tahapan umum kloning gen : Penyiapan sampel DNA kromosom murni Pemotongan molekul DNA Analisis ukuran fragment DNA hasil pemotongan Penggabungan molekul DNA dengan vektor DNA rekombinan (restriksi) Pengenalan (inersia) DNA ke sel host Identifikasi sel yang megandung DNA rekombinan

Kloning gen mempunyai manfaat sebagai berikut: Membantu pasangan yang susah mendapatkan keturunan dengan menggunakan cara ART (Assisted Reproductive Technology). Dapat digunakan untuk identikasi perjalanan penyakit Terapi stem cell (memperbaiki kerusakan jaringan atau organ tubuh) Membantu identifikasi penemuan korban hilang dengan menyamakan dengan gen keluarga korban.

Langkah pemotongan dan penyambungan suatu gen hingga menghasilkan DNA rekombinan : Penyiapan sampel DNA Pemotongan vektor DNA dengan menggunakan enzim restriksi (dapat berupa enzim endonuklease maupun eksonuklease). Penyisipan gen yang diinginkan ke dalam vektor Penyambungan DNA dengan menggunakan enzim ligase

Enzim yang pada teknik rekayasa genetik adalah sebagai berikut : Enzim nuklease : enzim restriksi (enzim pemotong ikatan fosfodiester) Enzim ligase : enzim penggabungan molekul DNA) Enzim polimerasi : enzim yang digunakan dalam proses perbanyakan untaian DNA Enzim modifikasi : penggantian atau penambahan gugus kimia.

Kloning DNA juga dilakukan dengan DNA plasmid. Plasmid merupakan DNA sirkuler (lingkaran tertutup) yang dapat bereplikasi di luar kromosom. Agar dapat digunakan sebagai vektor, plasmid harus memiliki sifat sebagai berikut: Ukurannya kecil