7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

1/26

DISTRIBUSI GENOTIP CYP2E1DISTRIBUSI GENOTIP CYP2E1

PADA PENDERITA KANKERPADA PENDERITA KANKERNASOFARINGNASOFARING

DARI SUKU SUNDA DAN NON SUNDADARI SUKU SUNDA DAN NON SUNDA

DWI ANITA SURYANDARIDWI ANITA SURYANDARIDepartemen Biologi Kedokteran FKUIDepartemen Biologi Kedokteran FKUI

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

2/26

KARSINOMA NASOFARINGKARSINOMA NASOFARING tumor ganas pada sel epitel nasofaring.tumor ganas pada sel epitel nasofaring.

EtiologiEtiologi : infeksi EB ! kekerapan konsumsi makanan: infeksi EB ! kekerapan konsumsi makananmengandung nitrosamin.mengandung nitrosamin."iagnosis"iagnosis : #erdasar u$i serologi!#iopsi! %&R.: #erdasar u$i serologi!#iopsi! %&R.

'erapi'erapi : radiokemoterapi (efektif).: radiokemoterapi (efektif).

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

3/26

INFEKSI EBINFEKSI EB*ampir*ampir +,-+,- pp opulasiopulasi manusia di duniamanusia di dunia terinfeksi EB .terinfeksi EB .EB :EB : (( ospes spesifikospes spesifik ).).

Infeksi pada anak/anakInfeksi pada anak/anak asimptomatik Imunitasasimptomatik Imunitas

Infeksi pada de0asa mudaInfeksi pada de0asa muda mononukleosis (1)mononukleosis (1)

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

4/26

%E'A "IS'RIB2SI KNF%E'A "IS'RIB2SI KNF

CinaSelatan30-0!"00r#

T$ailand3!"00r#

Indone%ia&'(!"00r#

)ropa"!"00r#

AmerikaUtara

"!"00r#

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

5/26

M21'IFAK'ORIA1 KNFM21'IFAK'ORIA1 KNF

FAKT*R+IN,KUN,AN

FAKT*R,)N)TIK

INF)KSI )B.

KARSIN*,)N

GEN VIRUS

,)N /) A1U

NITR*SA1IN

/*+I1*RFIS1),)N CY/2)"

K NF

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

6/26

Studi penda uluan : penderita KNF di IndonesiaStudi penda uluan : penderita KNF di Indonesia(RS&M) pada suku sunda le#i #an3ak(RS&M) pada suku sunda le#i #an3akdaripada suku non Sunda.daripada suku non Sunda.

Masala :Masala :4.4. Bagaimana distri#usi genotip &5%6E4 padaBagaimana distri#usi genotip &5%6E4 pada

penderita KNFpenderita KNF suku Sunda dan non Sunda7suku Sunda dan non Sunda7 6.6. Apaka genotip dan alotip &5%6E4 Apaka genotip dan alotip &5%6E4

#erasosiasi dengan susepti#ilitas indi8idu#erasosiasi dengan susepti#ilitas indi8iduter adap KNF7ter adap KNF7

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

7/26

GEN &5%6E4GEN &5%6E4

+oka%i "042&53-4 terminal' 6 e7on dan 8+oka%i "042&53-4 terminal' 6 e7on dan 8intron 9""'8 k#;intron 9""'8 k#;

/olimor#%tit>%i (??8T-A pada intron ?/olimor#%tit>%i (??8T-A pada intron ?

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

8/26

%E'A RES'RIKSI &5%6E4%E'A RES'RIKSI &5%6E4

8(& p# "2" p#

302 p# (2 p# "2" p#

C

D

Dra I

Dra I Dra I

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

9/26

ISO1ASI "NA AM%1IFIKASI GEN &5%6E4%&R Mi9: (Sampel "NA %&R green

Go 'a; buffer 4< 4!= mM Mg&l 6 ,!6

mM dN'% ,!> pmol?@l primer F!primer R ,!6= unit en im "NA

polimerase Taq; dan dd* 6O sterilsampai 8olume total 6= @l).

Kontrol negatif ( ampuran pereaksi %&Rtanpa sampel "NA)

+>o & 4C

D, o &

6C

6o &C

"enaturas iEkstensi

, siklus

+=o &=C

>o &

6o &6C

Annealing

"enaturasia0al

Ekstensi ak ir

E1EK'ROFORESISGel agarosa 6- (#?8)

- %roduk %&R?RF1%

/ Kontrol negatif/ %enanda #erat "NA

RF? Hae III

/ Kontrol positif

Elektroforesis dengan tegangan

+, selama =, menit.

"i8isualisasikan di #a0ailuminator 2 dan difotodengan Film Polaroid 667ISO 3000 8, ! "0,8 #m $la#%and &'i(e In)(an( Pa#% Film menggunakan kamera

%olaroid.

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

10/26

*asil digesti en im "raI pada sekuen gen &5%6E4*asil digesti en im "raI pada sekuen gen &5%6E4

M 4 5 6 7 8

=,, p# = 6 p#

6,, p#

464 p#

,6 p#

4,, p#

> p#

M DD DD DC DD CC

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

11/26

Se#aran umur kelompok KNF dan KontrolSe#aran umur kelompok KNF dan Kontrol

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

12/26

Perbandingan distribusi gen ti! danPerbandingan distribusi gen ti! dana" ti! gen CYP2E1a" ti! gen CYP2E1 !ada #e" $! # KNF!ada #e" $! # KNFdan K ntr "%dan K ntr "%

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

13/26

tidak ada per#edaan %e@ara #ermaknatidak ada per#edaan %e@ara #ermakna di%tri#>%idi%tri#>%igenotip dan alotip gen CY/2)" antara kelompokgenotip dan alotip gen CY/2)" antara kelompokpenderita KNF dengan kelompok kontrol5penderita KNF dengan kelompok kontrol5

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

14/26

'idak ada per#edaan se ara #ermakna'idak ada per#edaan se ara #ermakna genotip dangenotip danalotip &5%6E4 pada kelompok kontrol suku Sundaalotip &5%6E4 pada kelompok kontrol suku Sundadan non/Sunda.dan non/Sunda.

/er#andingan genotip dan alotip CY/2)" padakelompok kontrol %>k> S>nda dan nonS>nda

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

15/26

/er#andingan genotip dan alotip CY/2)"pada kelompok KNF %>k> SUnda dan

nonS>nda

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

16/26

*'i )quare*'i )quare !&I +=- ! H ,!,= diperole nilai p ,.4 >D!&I +=- ! H ,!,= diperole nilai p ,.4 >D( pJ,!,=)( pJ,!,=) distri#usi alotip antara suku Sunda dengandistri#usi alotip antara suku Sunda dengannon/Sunda pada kelompok penderita KNFnon/Sunda pada kelompok penderita KNF :: tidak adatidak ada

per#edaan se ara #ermakna.per#edaan se ara #ermakna.

Gam#ar 6,. Grafik per#andingan distri#usi alotip genGam#ar 6,. Grafik per#andingan distri#usi alotip gen&5%6E4 antara suku Sunda dan non/Sunda pada&5%6E4 antara suku Sunda dan non/Sunda padakelompok KNF.kelompok KNF.

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

17/26

KESIM%21ANKESIM%21AN

4.4. "" istri#usi genotipistri#usi genotip "":"&:&&"":"&:&& pada kelompokpada kelompokpenderita KNF adalapenderita KNF adala ,-:6D-:>-,-:6D-:>- dandandistri#usi alotipdistri#usi alotip "" : &: & adalaadala -- :4:4 -.-.

6.6. Frekuensi alel & pada suku Sunda enderungFrekuensi alel & pada suku Sunda enderungle#i tinggi daripada non/Sunda dan #er#edale#i tinggi daripada non/Sunda dan #er#eda#ermakna pada p ,!4,.#ermakna pada p ,!4,.

.. Genotip dan alotipGenotip dan alotip &5%6E4 tidak #er u#ungan&5%6E4 tidak #er u#ungandengandengan susepti#ilitas indi8idu ter adap KNFsusepti#ilitas indi8idu ter adap KNF ..

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

18/26

&ANFAAT PENE'ITIAN (&ANFAAT PENE'ITIAN (

"5"5 a%il penelitian ini mer>pakan data a ala%il penelitian ini mer>pakan data a altentang pola di%tri#>%i alel gen CY/2)" padatentang pola di%tri#>%i alel gen CY/2)" padapop>la%i di Indone%ia5 Di$arapkan data inipop>la%i di Indone%ia5 Di$arapkan data ini

dapat dig>nakandapat dig>nakan

%e#agai a@>an%e#agai a@>an

penelitianpenelitian

kegana%an lainn a ang di$>#>ngkankegana%an lainn a ang di$>#>ngkandengan akti ita% enEim CY/2)"5dengan akti ita% enEim CY/2)"5

2525 Dapat diman aatkan %e#agaiDapat diman aatkan %e#agai #a$an#a$an

kon%eling #agi kel>arga penderita KNF agarkon%eling #agi kel>arga penderita KNF agardapat mengam#il tindakan pre enti >nt>kdapat mengam#il tindakan pre enti >nt>kmeminimalkan re%iko terkena KNF5meminimalkan re%iko terkena KNF5

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

19/26

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

20/26

KARSINOGEN "A1AMKARSINOGEN "A1AMMAKANAN L KEGANASANMAKANAN L KEGANASAN

N)+AYAN *N, K*N,(Ho,1972)

TIKUS(Huang, 1978)

IKAN ASIN9NITR*SA1IN;

KARSIN*1A

NAS*FARIN,

KARSIN*1A

KA U1 NASA+IS

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

21/26

NI'ROSAMINNI'ROSAMIN

DapatDapat ter#ent>k pada %aatter#ent>k pada %aatpemana%an proteinpemana%an protein

terdapat dalam makananterdapat dalam makanan ang diaang dia etet kk anan ' di' di a%apa%ap i'i'

Dan padaDan pada a%apa%ap rokokrokok

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

22/26

'er#entukn3a Nitrosamin'er#entukn3a Nitrosamin

NITRAT!NITRIT

NITRIT

S)NYAWAA1IN

A+KI+A1IN9IKAN ASIN;

NITR*SA1IN

NITR*SA1IN

G.I.

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

23/26

FAK'OR GENE'IK %E AM2FAK'OR GENE'IK %E AM2

NITR*SA1IN TUBU

1)TAB*+IS1)*+) CY/

/*+I1*RFIS1),)N CY/2)"

EE xtensive metabolizers xtensive metabolizers

99)1)1 ;;

Poor Poor metabolizersmetabolizers

9/9/ 11 ;;

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

24/26

KARSINOGENESISKARSINOGENESISGAT KI1IA

/R*KARSIN*,)N

GAT KI1IA THkon >ga%i

1eta#olit Reakti 9kar%inogen ak$ir;

B$n gntk g p>li$9%el Normal;

1akromol g Tela$ #H>#a$

1eta#olitantara

Gat kim g die7@re%i

1akromolek>l dlm J9#$n gntk g #HJ;

Ini%ia%i Sel T>mor

Neopla%ma tHdi eren%ia%i

KANK)R

/Hikatan t$d makromol

Replika%i

/romo%i

Kon er%i . pk#

per#aikan

Ik5ko dg,S ! enol

e7@re%i

#ioakti a%i

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

25/26

*asil sekuensing gen &5%6E4*asil sekuensing gen &5%6E4(dari lem#aga Biologi molekuler Ei$kman)(dari lem#aga Biologi molekuler Ei$kman)

7/25/2019 Pp.tss.Cyp2e1

26/26

*asil sekuensing (dari 1BM.Ei$kman)*asil sekuensing (dari 1BM.Ei$kman)