Peralatan Lab Klinik Lanjut.

1. Jelaskan prinsip dari spektrofotometer!

2. Di dalam hukum Lambert-Beer, jumlah relatif panjang gelombang cahaya

yang terabsorbsi ketika melewati sampel tergantung pada apa saja? Sebut &

jelaskan!

3. Jelaskan proses spektrofotometer dalam bentuk gambar!

4. Jelaskan kegunaan dari spektrofotometer!

5. Jelaskan tentang harga absorban konsentrasi analit!

6. Di dalam spektrofotometer, jelaskan bagaimana hubungan antara

spektrometer & fotometer!

7. Gambar blok diagram fotometer?

8. Fungsi masing-masing blok?

9. Jelaskan prinsip kerja dari Auto Analyzer Spectrofotometry!

10. Sebut dan jelsakan bagian-bagian Auto Analyzer Spectrofotometry!

11. Jelaskan secara singkat cara kerja spektrofotometri serapan atom!

12. Sebut dan jelaskan komponen-komponen spektrofotometri serapan atom!

13. Apa saja gangguan yang terdapat dalam spektrofotometri serapan atom?

14. Sebuah sampel cairan biasanya berubah menjadi gas atom melalui tiga

langkah, sebutkan langkah tersebut dan jelaskan!

15. Jelaskan perbedaan antara Spectrofotometri dengan spectrofotometri serapan

atom!

Jawaban:

1. Prinsip dari spektrofotometri adalah “berdasarkan adanya interaksi antara

materi dengan cahaya yang memiliki panjang gelombang tertentu”.

2. a. Jarak yang ditempuh sinar ketika melewati sampel (ukuran kuvet – b)

b. jumlah senyawa kimia dalam sampel yang mengabsorbsi sinar (konsentrasi

analit – c)

c. kemampuan sampel mengabsorbsi sinar (molar absorptivity)

3.

4. Spektrofotometri adalah salah satu metode dalam kimia analisis yang

digunakan untuk menentukan komposisi suatu sampel baik secara kuantitatif

dan kualitatif yang didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya.

Konsentrasi rendah absorban rendah

Konsentrasi tinggi absorban tinggi

5. a. jika konsentrasi rendah maka harga absorban rendah, namun sinar yang

diteruskan tinggi (banyak)

b. jika konsentrasi tinggi maka harga absorban tinggi, namun sinar yang

diteruskan rendah (sedikit).

Monochomator Filter CuvetteSample

DetectorAmplifierADCMicrocontroller

Display

6. a. Spektrometer adalah perangkat yang menghasilkan, biasanya menyebar dan

cahaya tindakan.

b. Fotometer adalah yang menunjukkan detektor fotolistrik yang mengukur

intensitas cahaya.

7.

8. Lampu halogen sebagai sumber cahaya merupakan cahaya Polychromatic

yang mempunyai panjang gelombang 400-800 nm memancarkan cahayanya

yang masuk ke Monochomator. Monochomator disini merupakan alat untuk

menguraikan spektrum warna dari cahaya. Di dalam Monochomator ini,

cahaya Polychromatic diuraikan menjadi Monochromatic. Selanjutnya dari

Monochromator, cahaya masuk ke Filter. Filter ini berfungsi memilih atau

melewatkan hanya 1 spectrum cahaya saja sesuai dengan unsur yang akan di

ukur. Karena setiap atom hanya akan menyerap spectrum yang sesuai dengan

energi atom itu sendiri. Cahaya yang keluar dari Filter (I0) menyinari cuvette,

sehingga molekul di dalam cuvette akan mengabsorbsi sebuah eneri cahaya

(foton) dengan jarak gelombang tertentu dan menghasilkan It. Cuvette disini

merupakan tempat menaruh sample yang akan diperiksa.

Cahaya yang keluar dari cuvette (It) ditangkap oleh detektor. Detektor disini

merupakan sensor untuk merubah energi cahaya menjadi bentuk energi

(sinyal-sinyal) listrik yang selanjutnya dikuatkan oleh Amplifier lalu di

converter oleh ADC, dimana ADC disini berfungsi mengubah data analog

menjadi data digital. Kemudian dari ADC diolah oleh Microcontroller dan

ditampilkan ke display.

9. Prinsip kerjanya adalah:

a. Tabung reaksi berisi sample cairan serum yang akan diperiksa.

b. Sample cairan reagen dimasukkan ke dalam tabung reaksi untuk

dicampur.

c. Tabung sample cairan serum dan cairan reagen diaduk dengan

mengunakan system stearing unit.

d. Tabung sample cairan serum yang sudah dicampur dengan reagen

dipanaskan dengan alat water bath proses ini dinamakan dengan proses

inkubasi.

e. Tabung sample yang sudah diinkubasi diukur dengan cara penyinaran

dengan menggunakan lampu exiter.

f. Cahaya lampu diarahkan ke bagian tabung sample serum, sehingga

terjadi proses penyerapan cahaya dan cahaya yang diteruskan.

g. Cahaya yang diteruskan disensor oleh photodetector kemudian

photodetector mengeluarkan arus listrik. Arus listrik diperkuat dan

masuk ke CPU untuk diolah dan hasilnya dapat dicatat dan diprint.

h. Cairan serum yang sudah diukur akan dihisap oleh botol discharge

kemudian dibuang ke bagian limbah khusus.

10. Bagian-bagiannya adalah sebagai berikut:

a. Unit komputer, terdapat data pasien, data pemeriksaan dan data operator.

b. Tabung water treatment, digunakan untuk filter air sebagai proses

pencucian dan inkubasi.

c. Meter, digunakan sebagai indikator air yang dihasilkan dari tabung water

treatment dengan satuan mikrosiemens.

d. Printer, digunakan sebagai alat pencatat hasil pemeriksaan serum.

e. Tempat sample, berisi serum pasien yang akan diperiksa sebanyak 52

buah. Tempat sample kalibrator dan sample control, berisi cairan

kalibrator dan sample yang digunakan sebagai standart pengaturan.

Tempat ini mempunyai 57 buah tempat.

f. Tempat reagen, terdapat 2 bagian reagen yaitu R1 dan R2. masing –

masing tempat reagen, baik R1 maupun R2 mempunyai penempatan 45

buah.

g. Hardware, terdapat beberapa bagian yaitu :

Power supply, berfungsi mengubah tegangan AC menjadi DC untuk

didistribusikan ke modul – modul control lainnya.

PCB unit, digunakan sebagai tempat komponen elektronika.

Cooling unit

Pipetting unit, terdapat 3 buah fungsi yaitu, pipetting penghisap untuk

penghisap cairan serum, penghisap cairan reagen R1 dan R2.

h. Botol cairan detergent dan cairan aquades, digunakan sebagai pencucian

dan pembilasan tempat sample cairan reaksi.

i. Filter cooling unit, berfungsi sebagai penghisap udara yang ada pada

pendingin di bagian auto analyzer spektrofotometer.

11. Cara kerja Spektroskopi Serapan Atom ini adalah berdasarkan atas penguapan

larutan sampel, kemudian logam yang terkandung di dalamnya diubah

menjadi atom bebas. Atom tersebut mengapsorbsi radiasi dari sumber cahaya

yang dipancarkan dari lampu katoda (Hollow Cathode Lamp) yang

mengandung unsur yang akan ditentukan. Banyaknya penyerapan radiasi

kemudian diukur pada panjang gelombang tertentu menurut jenis logamnya

(Darmono,1995).

12. Komponen pada Spektroskopi Serapan Atom:

a. Sumber sinar

Sumber radiasi SSA adalah Hallow Cathode Lamp (HCL).

b. Sumber atomisasi

Sumber atomisasi dibagi menjadi dua yaitu sistem nyala dan sistem

tanpa nyala. Dengan kedua jenis nyala ini, kondisi analisis yang sesuai

untuk kebanyakan analit dapat ditentukan dengan menggunakan

metode-metode emisi, absorbsi dan juga fluorosensi.

c. Monokromator

Monokromator merupakan alat yang berfungsi untuk memisahkan

radiasi yang tidak diperlukan dari spektrum radiasi lain yang dihasilkan

oleh Hallow Cathode Lamp

d. Detektor

Detektor merupakan alat yang mengubah energi cahaya menjadi energi

listrik, yang memberikan suatu isyarat listrik berhubungan dengan daya

radiasi yang diserap oleh permukaan yang peka.

e. Sistem pengolah

Sistem pengolah berfungsi untuk mengolah kuat arus dari detektor

menjadi besaran daya serap atom transmisi yang selanjutnya diubah

menjadi data dalam sistem pembacaan.

f. Sistem pembacaan

Sistem pembacaan merupakan bagian yang menampilkan suatu angka

atau gambar yang dapat dibaca oleh mata.

13. Berbagai faktor dapat mempengaruhi pancaran nyala suatu unsur tertentu dan

menyebabkan gangguan pada penetapan konsentrasi unsur.

Gangguan akibat pembentukan senyawa refraktori

Gangguan ionisasi

Gangguan fisik alat

14. Sebuah sampel cairan biasanya berubah menjadi gas atom melalui tiga

langkah:

Desolvation (pengeringan) – larutan pelarut menguap, dan sampel

kering tetap

Penguapan – sampel padat berubah menjadi gas

Atomisasi – senyawa berbentuk gas berubah menjadi atom bebas.

15. Spektrofotometri adalah salah satu metode dalam kimia analisis yang

digunakan untuk menentukan komposisi suatu sampel baik secara kuantitatif

dan kualitatif yang didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya.

Spektrometri Serapan Atom (SSA) adalah suatu alat yang digunakan pada

metode analisis untuk penentuan unsur-unsur logam dan metalloid yang

pengukurannya berdasarkan penyerapan cahaya dengan panjang gelombang

tertentu oleh atom logam dalam keadaan bebas (Skoog et al., 2000).