pengembangan formulasi
TRANSCRIPT
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
1/8
Pengembangan formulasi, evaluasi in vitro dan in vivo sistem transdermal membran terkendali dari
glibenclamide
Abstrak
TUJUAN : Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan suatu membran yang dikendalikan
oleh sistem trans dermal dari glibenclamide dan mengevaluasi berbagai uji in vitro dan dalam
parameter in vivo
METODE :
Membran dari sistem transdermal dibuat menggunakan obat yang mengandung karbopol gel sebagai
reservoir dan etil selulosa , Eudragit RS - 100 , Eudragit RL - 100 dan Ethylene vinyl acetate ( EVA ) ( 2 % ,
9 % dan 19 % vinil asetat konten ) sebagai controlling membran . Kemungkinan adanya interaksi antara
obat dan polimer dipelajari dengan spektroskopi IR ,DSC dan analisis HPTLC .
Berbagai formulasi yang dibuat dilakukan studi fisikokimia. Pada studi pelepasan obat in vitro dan studi
permeasi dilakukan melalui kulit tikus . Glukosa darah dilakukan terhadap tikus normal dan tikusdiabetes . Berbagai parameter biokimia dan studi histopatologiknya dilakukan setelah mengobati tikus
diabetes selama 6 minggu . Tes iritasi kulit , tes toleransi glukosa oral dan evaluasi farmakokinetik juga
dilakukan pada tikus .
HASIL:
Hasil penelitian menunjukkan tidak ada interaksi antara obat dan polimer. Variasi dalam profil pelepasan
obat / permeasi antara formulasi yang mengandung tingkat pengendalian yang berbeda membran
dimana juga diamati. Studi mikroskopis elektron scanning membran EVA menunjukkan tidak ada
perubahan dalam morfologi permukaan setelah dilakukan studi in vitro sistem permeasi. Sistem
transdermal menghasilkan perbaikan yang lebih baik sehubungan dengan aktivitas hipoglikemik, tes
toleransi glukosa, semua uji biokimia,parameter histopatologik dan farmakokinetik dibandingkan
dengan pemberian oral.
KESIMPULAN:
Penelitian ini menunjukkan bahwa membran dikendalikan sistem transdermal glibenclamide
menunjukkan hasil yang lebih baik dalam pengendalian hiperglikemia dan lebih efektif dalam
menangani komplikasi diabetes mellitus dibandingkan dengan pemberian atau administrasi obat oral
pada tikus.
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
2/8
Pendahuluan
Diabetes mellitus adalah gangguan metabolisme kronis yang ditandai dengan kadar glukosa
darah tinggi konsentrasi - hiperglikemia yang disebabkan oleh defisiensi insulin , sering
dikombinasikan dengan resistensi insulin ( 1 ) . Glibenklamid , obat yang penting kelassulfonilurea , saat ini tersedia untuk mengobati hiperglikemia pada ( Non - Insulin dependent
Diabetes Mellitus ( NIDDM ) , tetapi telah dikaitkan dengan hipoglikemia berat dan kadang-
kadang fatal dan gangguan lambung seperti mual , muntah , mulas ,
anoreksia dan nafsu makan meningkat setelah terapi oral ( 2 ) . Karena obat ini biasanyadimaksudkan untuk diambil untuk jangka waktu yang lama , kepatuhan pasien juga sangat
penting
( 3 ) . Kami sudah melaporkan kelayakan applica -
tion pengiriman transdermal untuk glibenclamide . glib -enclamide ( berat molekul : 494 dan pKa : 5.3 ) menunjukkan
koefisien partisi menguntungkan ( log oktanol / penyangga : 0,32 0.0.07 ;
log isopropylmyristate / penyangga : 0.50 0.05 ) dan degradasi kulit diabaikan ( 4 , 5 ) . Dalamstudi lain, kami melaporkan perumusan dan evaluasi jenis matriks patch transdermal dari
glibenclamide ( 6 ) . Hal ini sangat diterima bahwa membran dikendalikan sistem transdermal
memiliki keuntungan yang berbeda yang laju pelepasan thedrug , yang diatur oleh perembesanmelalui membran tingkat pengendalian, tetap relatif konstan selama loading obat di waduk
dipertahankan pada tingkat tinggi ( 7 ) . Oleh karena itu dalam penelitian ini , kami telah
dirumuskanmembran dimoderasi sistem transdermal dari glibenclamide menggunakan karbopol gel sebagai
waduk obat dan
berbagai tingkat polimer mengendalikan membran disiapkan oleh etil selulosa , Eudragit RL -
100 , Eudragit RS - 100 , etilena vinil asetat ( mengandung 2 % , 9 % dan 19 % vinil asetat ) dan
dievaluasi sehubungan dengan berbagai in vitroparameter ( karakteristik fisik seperti ketebalan , kandungan obat , kadar air / serapan ,
pemindaian mikroskop elektron , kerataan , in- vitro kinetika pelepasan / perembesan , dll) danefek farmakologis , biokimia dan histopatologi in vivo pada model tikus
BAHAN DAN METODE
Etil selulosa ( EC , dengan kandungan etoksi dari 47,5-53,5 % berat dan viskositas 14 cps dalam
5 % b / b , 80:20 toluena : larutan etanol pada 25 C ) dibeli dari SD Fine Chemicals Ltd , India
. Eudragit RL - 100 ( ERL ) dan Eudragit RS - 100 ( ERS ) diperoleh dari Rohm Pharma ,
Jerman . Carbopol 934P NF dibeli from B.F. Goodrich , Jerman . Di- n - Butylphthalate dibeli dari Ranbaxy Laboratories , India .
Etilena vinil asetat ( EVA )
membran dengan 2 % vinil asetat ( VA ) konten ( EVA2 % , 3M COTRAN 9726 ) , 9 % VAkonten ( EVA9 % , 3M COTRAN 9702 ) dan 19 % VA konten ( EVA19 % , 3M COTRAN 9715
) , lapisan backing ( poliester Film laminasi , 3M Scotchpak Backing 1006 ) dan melepaskan
kapal ( film poliester fluropolymer dilapisi ; 3M Scotchpak 1022 Rilis Liner ) adalah sampelhadiah dari 3M Pharmaceuticals , Amerika Serikat. Sodium deoxycholate , anthrone ,
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
3/8
tiourea , streptozotocin , bovine serum albumin yang dibeli dari Sigma Chemical Company ,
USA .
Poliisobutilena dibeli dari Aldrich , USA .Glibenclamide adalah hadiah dari BAL Pharma , Modi Mundi Pharma dan Wallace
Pharmaceuticals , India .
Semua bahan-bahan kimia lain yang digunakan adalah analitis / reagenkelas .
PENGEMBANGAN SISTEM MEMBRAN DIKENDALIKAN TRANSDERMAL
Sistem transdermal yang dibuat oleh encapsulating reservoir obat dalam kompartemen dangkal
dibentuk dari obat kedap dukungan laminasi dan membran tingkat pengendalian. EC, ERL dan ERS
tingkat mengendalikan membran dibuat dengan melarutkan 250, 300 dan 300 mg polimer masing-
masing dalam 5 ml kloroform. Di-n-Butyl phthalate (30% b / b polimer) digunakan sebagai plasticizer.
Solusi polimer dituangkan pada permukaan merkuri (25 cm2) dan
dikeringkan pada kamar temperature.After 24 jam, film dipotong menjadi 12 daerah cm2. Tingkat EVAmengendalikan membran adalah sampel hadiah dari 3M Pharmaceuticals, Amerika Serikat.
Reservoir (0,5% karbopol gel) obat disiapkan sesuai rumus yang diberikan dalam Tabel 1
Carbopol direndam dalam 5 ml air dan dinetralkan
menggunakan trietanolamin (q.s.) untuk membentuk gel. Obat dalam 5 ml
etanol ditambahkan perlahan-lahan untuk Carbopol gel dengan pengadukan konstan.
Tabel 1: Reservoir dari glibenclamide membran dikendalikan sistem transdermal. Daerah sistem
transdermal adalah 12 cm2
Kuantitas akurat ditimbang dari gel (1 g) mengandung
Obat (12 mg glibenklamid) ditempatkan pada selembar
lapisan backing (3M Scotchpak Backing 1006) meliputi 3cm x 4cm daerah. Tingkat mengendalikan
membran ditempatkan di atas gel dan tepi 3 cm x 4 cm daerah yang panas disegel untuk mendapatkan
perangkat bukti kebocoran. Untuk memastikan kontak intim patch pada kulit, tekanan sensitif perekat,
polyisobutylene (PIB), diterapkan ke kontrol tingkat
membran ling (3 ml, 10% b / v dalam petroleum eter). Sebuah kapal release (3M Scotchpak 1022 Rilis
Liner) ditempatkan di atas dilapisi membran tingkat mengendalikan perekat.
STUDI OBAT-POLIMER INTERAKSI
infra-merah (IR) spektroskopi (menggunakan IR-Spectrophotometer, FTIR-8300, Shimadzu,
Jepang, dengan metode pelet KBr), termogram (DSC) (Perkin Elmer, USA, pada tingkat
pemindaian dari 10 C / menit antara 50 dan 300 C), dan kinerja tinggi kromatografi lapis tipis(HPTLC) analisis (menggunakan sistem CAMAG III-HPTLC, Swiss) dilakukan pada zat murni
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
4/8
dan campuran fisik mereka untuk mencari kemungkinan interaksi antara glibenclamide dan
karbopol (6).
IN VITRO EVALUASI SISTEM TRANSDERMALUntuk penentuan kandungan obat, seluruh isi sistem transdermal (n = 3) dibawa ke dalam labu
volumetrik 100 ml dan dilarutkan dalam metanol. Larutan disaring melalui membran 0,45
(Nulge Nunc, Inggris) sebelum obatanalisis. Viskositas obat yang mengandung karbopol gel ditentukan dengan menggunakanviskometer Brookefield listrik Sinkronisasi (Brookefield Engineering Ltd, USA). The TD bar
spindle dari LV-4 pada 12 - gigi dipekerjakan. The in vitro pelepasan obat dan dalam studi
permeasi kulit vitro dilakukan dengan menggunakan tipe keranjang USP alat disolusi(menggunakan 900 ml
fosfat pH 7,4 penyangga sebagai medium disolusi) dan sel tipe difusi vertikal (menggunakan
kulit tikus berbulu sebagai membran
barrier), masing-masing (6). Morfologi tingkat EVA mengendalikan membran sebelum dansesudah in vitro permeasi kulit percobaan dianalisis dengan pemindaian mikroskop elektron
(JEOL JSM-840A-, Jepang).
DALAM STUDI VIVO
Hewan-hewan yang digunakan untuk in vivo percobaan yang dewasa
Tikus albino Swiss ( berusia 6-8 minggu ) dari kedua jenis kelamin , berat badan -
ing 25-30 g , dari Departemen biologi penyinaran ,
Kasturba Medical College , Manipal . Hewan-hewan itu tinggal di kandang polypropylene , 4 per kandang
, dengan akses gratis ke standar laboratorium diet ( Lipton Pakan , Mumbai , India ) dan air . Mereka
disimpan pada 25 1 C dan 45-55 % kelembaban relatif dengan / siklus gelap 12 jam cahaya.
The in vivo protokol eksperimental telah disetujui oleh Komite Etik Kelembagaan Hewan, KasturbaMedical College , Manipal .
Aktivitas hipoglikemik IN MICE NORMAL
Rambut di bagian belakang tikus itu dihapus
dengan rambut clipper listrik pada hari sebelumnya
percobaan . Menyusul cepat semalam , tikus
dibagi menjadi 3 kelompok ( n = 6 ) . Tikus-tikus tersebut diperlakukan sebagai
berikut :
Kelompok I ( Kontrol ) - 0,2 ml dari 0,5 % b / v natrium karboksimetil selulosa ( CMC ) ; po
Kelompok II - glibenklamid ( 5 mg / kg ; p.o. ) .
Para dosis oral diberikan menggunakan stainless steel bulat berujung
jarum melekat pada 1 ml jarum suntik dan dosis 5 mg / kg dipilih dengan melakukan serangkaian
percobaan dengan dosis bertingkat berkisar antara 1 sampai 10 mg / kg .
Kelompok III - Diterapkan dengan 2,5 cm2 sistem transdermal
disiapkan dengan tingkat mengendalikan membran EVA19 % ,
mengandung 2,5 mg obat di 0,5 % karbopol gel .
Pada interval waktu antara 2-24 jam setelah pengobatan ( akut
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
5/8
studi ) , darah diambil dari sinus orbital ; darah
kadar glukosa ditentukan menggunakan Accutrend Alpha
Glucometer ( Roche Diagnostics , Jerman ) . dalam
studi jangka panjang , perawatan di atas diberikan / diterapkan fo sekali sehari
r 6 minggu . Kadar glukosa darah ditentukan sekali dalam setiap 2 minggu di atas malam tikus berpuasa ,
2 jam setelah terapi obat seperti yang dijelaskan sebelumnya .
PELANTIKAN DIABETES MELLITUS DAN hipoglikemik
KEGIATAN DI MICE DIABETIC
Tikus semalam berpuasa dibuat diabetes dengan injeksi intraperitoneal tunggal streptozotocin ( 150
mg / kg ; ip ) dilarutkan dalam buffer sitrat ( 3 mM , pH 4,5 )
( 6 ) . Tujuh hari kemudian , tikus dengan kadar glukosa darah
antara 300-400 mg / dL adalah selected.The akut dan
aktivitas hipoglikemik jangka panjang patch transdermal dievaluasi dalam semalam berpuasa tikus
diabetes seperti yang dijelaskan dalam di atas .
PENGARUH GLUKOSA TOLERANSI
Setelah puasa semalam , mencit dibagi menjadi 3
kelompok ( n = 6 ) . Kelompok kontrol diberikan dengan 0,2 ml CMC . Lainnya 2 kelompok diberikan
dengan glibenclamide ( 5 mg / kg ; po ) atau diterapkan dengan sistem transdermal seperti yang
dijelaskan dalam percobaan sebelumnya .
Dua jam kemudian , glukosa diberikan secara oral ( 2 g / kg ) untuk semua 3 kelompok . Sampel darah
diambil sesaat sebelum dan pada 0,5 , 1,0 dan 2,0 jam setelah makan glukosa dan kadar glukosa wa
s ditentukan . Persentase perubahan glukosa darah diperkirakan dibandingkan dengan kelompok kontrol
. Selama periode pengujian, makanan tidak disediakan , tapi air diberikan ad libitum
EVALUASI DAN biokimia histopatologis
Pada akhir pengobatan jangka panjang dalam diabetes
tikus , profil lipid ( high-density lipoprotein - kolesterol , trigliserida dan kolesterol total ) , alanin tran -
saminase ( ALT ) , transaminase aspertate ( AST ) , urea
dan kadar kreatinin diperkirakan dalam serum menggunakan Auto - analyzer ( Hitachi 911 , Jepang ) .
Kemudian hewan
dikorbankan dan bagian dari hati diproses untuk
estimasi glikogen dan protein total ( 6 ) . Potongan hati , pankreas dan perut menjadi sasaran studi
histopatologi menggunakan haematoxylene dan eosin ( H & E ) pewarnaan .
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
6/8
PEMBAHASAN DAN KESIMPULAN
Dalam penelitian ini, membran dimoderasi sistem transdermal yang mengandung glibenclamide disusun
menggunakan tingkat yang berbeda mengendalikan membran. Hal ini diinginkan untuk
mengembangkan sistem transdermal yang memungkinkan seseorang untuk memberikan pelepasan
obat yang optimal melalui pilihan yang paling tepat membran tingkat pengendalian dan akhirnya untuk
menghasilkan overal diinginkan
l konstan / pelepasan obat terkontrol. Etanol (50% b / b) didirikan pada reservoir sistem transdermal
karena secara signifikan meningkatkan tingkat perembesan glibenclamide dalam penelitian sebelumnya
(4, 5).
Parameter farmakokinetik yang diperoleh dengan sistem glibenclamide transdermal berbedasecara signifikan (p
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
7/8
35 etanol , yang didirikan pada reservoir obat
untuk meningkatkan laju permeasi obat . Selain itu, media langsung mungkin juga bertanggung
jawab atas pelepasan ledakan awal karena mereka permeabel terhadap media berair ( 9 )Jumlah kumulatif obat dirilis pada akhir dari 24 jam itu tergantung pada hidrofilisitas dari polimer (ERL>
ERS> EC). Film ERL cenderung membengkak lebih dari ERS film dalam media berair karena konsentrasi
yang lebih tinggi dari kelompok kuaterner hidrofilik. Selain itu, membran ERL lebih permeabel untukmedia berair dari dua membran yang lain (10). Di sisi lain, sistem dengan membran EVA dipamerkan
tingkat pelepasan obat konstan upto 24 jam sebagai integritas membran ini tidak terpengaruh oleh
salah satu kadar etanol dari reservoir obat atau kontak langsung dengan media berair. Studi laju
pelepasan mengungkapkan bahwa, sebagai isi vinil asetat dalam kopolimer meningkat, persentase
kumulatif pelepasan obat juga meningkat, yaitu, membran menunjukkan resistensi yang lebih rendah
terhadap perembesan molekul obat. Pengamatan ini sesuai dengan temuan sebelumnya (11).
Dalam studi permeasi kulit in vitro juga , sistem dengan ERL , ERS dan EC membran tidak
memberikan pelepasan obat konstan dan menunjukkan perembesan tinggi obat pada jam-jam
awal . Ini lagi karena kandungan etanol ( 50 % ) dari reservoir obat , yang mungkin sebagianterlarut polimer yang
membran dan sehingga mengganggu integritas membran ( 9 ) .
The ERL , ERS dan EC membranmenunjukkan hilangnya struktur seragam setelah fabrikasi ke
sistem final. Hal ini dikonfirmasi dengan memeriksa
film setelah 24h fabrikasi sistem akhir di manaetanol yang mengandung gel berada dalam kontak langsung dengan membran atau setelah in
vitro permeasi kulit percobaan . Hal ini juga didukung oleh penurunan tingkat kerataan ini
mengendalikan membran setelah menyiapkan perangkat transdermal akhir . Film-film sebelum
fabrikasi ke dalam sistem akhir dipamerkan 100 % kerataan menunjukkan tidak ada penyempitan. Setelah 24 jam fabrikasi , mereka menunjukkan penurunan nilai kerataan ( 80 % , 80 %
dan 90 % dari kerataan untuk ERL , ERS dan EC membran , masing-masing)Pengamatan ini menunjukkan bahwa film yang dihasilkan dengan
ERL , ERS dan EC kehilangan struktur terpisahkan mereka setelah
datang ke dalam kontak
dengan waduk obat Oleh karena itu dianggap kita
e mereka membran , yang
mempertahankan integritas mereka ketika
mereka datang dalam kontak dengan
reservoir obat . Membran dibuat dengan etil -
ene vinil asetat kopolimer ( EVA ) secara luas digunakan untuk
mengendalikan laju pelepasan obat dari berbagai transdermal
sistem pengiriman obat ( 11 , 12 ) . Membran ini melakukan
tidak kehilangan struktur terpisahkan ketika dibuat menjadi
sistem akhir dan juga setelah
in vitro
permeasi kulit
studi . Hal ini bisa disebabkan oleh
-
8/10/2019 Pengembangan formulasi
8/8
kemampuan film ini
untuk melawan efek ethano
l dalam reservoir obat . ini adalah
juga didukung oleh SEM st
udies dari th
film e EVA
sebelum fabrikasi ke dalam sistem akhir dan setelah
in vitro
percobaan permeasi kulit , di mana film main-
dipertahankan seragam dan permukaan halus , 100 % kerataan dan
integritas struktur
setelah percobaan permeasi . Oleh karena itu tingkat EVA mengontrol membran yang
cocok untuk sistem transdermal waduk di
penelitian ini .
Jumlah kumulatif obat meresap di akhir
dari 24 jam meningkat sebagai vinil asetat konten ( VA )
dalam tingkat EVA mengendalikan membran meningkat .
Pengamatan ini sesuai dengan sebelumnya
laporan dimana permeasi obat meningkat sebagai
isi vinil asetat dalam kopolimer EVA adalah
meningkat ( 11,13,14 ) . Hal ini juga
diakui bahwa adalah mungkin untuk mengubah permea yang
bility EVA kopolimer
membran dengan memvariasikan konten vinil asetat . itu
perubahan permeabilitas telah dikaitkan dengan
perubahan dalam suhu transisi kaca dan kristalinitas polimer . Sebagai isi vinil asetat
meningkat , kristalinitas polimer menurun
cepat dan ini bisa menjadi
alasan untuk tingkat perembesan tinggi diamati dengan membran EVA dengan 19 %
VA konten dibandingkan dengan EVA membran yang mengandung 9 % dan 2 % VA dalam penelitian ini (
15 ) .
Jumlah kumulatif glibenclamide meresap
per sentimeter persegi perangkat transdermal dengan
ERL , ERS dan EC tingkat mengendalikan membran
melalui kulit mouse ketika diplot terhadap waktu,
profil permeasi obat tampaknya mengikuti dicampur
order / jelas orde nol
kinetika seperti yang diamati dengan
sistem matriks ( Gambar 3 ) . Jumlah tinggi obat adalah
dirilis di jam awal karena peningkatan permeabilitas membran dengan etanol . Namun, kemudian
obat dirilis tergantung pada konsentrasi
dan dengan demikian mengubah sistem menuju pola urutan pertama .