pengembangan formulasi

Upload: rotuaserevina

Post on 02-Jun-2018

232 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    1/8

    Pengembangan formulasi, evaluasi in vitro dan in vivo sistem transdermal membran terkendali dari

    glibenclamide

    Abstrak

    TUJUAN : Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan suatu membran yang dikendalikan

    oleh sistem trans dermal dari glibenclamide dan mengevaluasi berbagai uji in vitro dan dalam

    parameter in vivo

    METODE :

    Membran dari sistem transdermal dibuat menggunakan obat yang mengandung karbopol gel sebagai

    reservoir dan etil selulosa , Eudragit RS - 100 , Eudragit RL - 100 dan Ethylene vinyl acetate ( EVA ) ( 2 % ,

    9 % dan 19 % vinil asetat konten ) sebagai controlling membran . Kemungkinan adanya interaksi antara

    obat dan polimer dipelajari dengan spektroskopi IR ,DSC dan analisis HPTLC .

    Berbagai formulasi yang dibuat dilakukan studi fisikokimia. Pada studi pelepasan obat in vitro dan studi

    permeasi dilakukan melalui kulit tikus . Glukosa darah dilakukan terhadap tikus normal dan tikusdiabetes . Berbagai parameter biokimia dan studi histopatologiknya dilakukan setelah mengobati tikus

    diabetes selama 6 minggu . Tes iritasi kulit , tes toleransi glukosa oral dan evaluasi farmakokinetik juga

    dilakukan pada tikus .

    HASIL:

    Hasil penelitian menunjukkan tidak ada interaksi antara obat dan polimer. Variasi dalam profil pelepasan

    obat / permeasi antara formulasi yang mengandung tingkat pengendalian yang berbeda membran

    dimana juga diamati. Studi mikroskopis elektron scanning membran EVA menunjukkan tidak ada

    perubahan dalam morfologi permukaan setelah dilakukan studi in vitro sistem permeasi. Sistem

    transdermal menghasilkan perbaikan yang lebih baik sehubungan dengan aktivitas hipoglikemik, tes

    toleransi glukosa, semua uji biokimia,parameter histopatologik dan farmakokinetik dibandingkan

    dengan pemberian oral.

    KESIMPULAN:

    Penelitian ini menunjukkan bahwa membran dikendalikan sistem transdermal glibenclamide

    menunjukkan hasil yang lebih baik dalam pengendalian hiperglikemia dan lebih efektif dalam

    menangani komplikasi diabetes mellitus dibandingkan dengan pemberian atau administrasi obat oral

    pada tikus.

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    2/8

    Pendahuluan

    Diabetes mellitus adalah gangguan metabolisme kronis yang ditandai dengan kadar glukosa

    darah tinggi konsentrasi - hiperglikemia yang disebabkan oleh defisiensi insulin , sering

    dikombinasikan dengan resistensi insulin ( 1 ) . Glibenklamid , obat yang penting kelassulfonilurea , saat ini tersedia untuk mengobati hiperglikemia pada ( Non - Insulin dependent

    Diabetes Mellitus ( NIDDM ) , tetapi telah dikaitkan dengan hipoglikemia berat dan kadang-

    kadang fatal dan gangguan lambung seperti mual , muntah , mulas ,

    anoreksia dan nafsu makan meningkat setelah terapi oral ( 2 ) . Karena obat ini biasanyadimaksudkan untuk diambil untuk jangka waktu yang lama , kepatuhan pasien juga sangat

    penting

    ( 3 ) . Kami sudah melaporkan kelayakan applica -

    tion pengiriman transdermal untuk glibenclamide . glib -enclamide ( berat molekul : 494 dan pKa : 5.3 ) menunjukkan

    koefisien partisi menguntungkan ( log oktanol / penyangga : 0,32 0.0.07 ;

    log isopropylmyristate / penyangga : 0.50 0.05 ) dan degradasi kulit diabaikan ( 4 , 5 ) . Dalamstudi lain, kami melaporkan perumusan dan evaluasi jenis matriks patch transdermal dari

    glibenclamide ( 6 ) . Hal ini sangat diterima bahwa membran dikendalikan sistem transdermal

    memiliki keuntungan yang berbeda yang laju pelepasan thedrug , yang diatur oleh perembesanmelalui membran tingkat pengendalian, tetap relatif konstan selama loading obat di waduk

    dipertahankan pada tingkat tinggi ( 7 ) . Oleh karena itu dalam penelitian ini , kami telah

    dirumuskanmembran dimoderasi sistem transdermal dari glibenclamide menggunakan karbopol gel sebagai

    waduk obat dan

    berbagai tingkat polimer mengendalikan membran disiapkan oleh etil selulosa , Eudragit RL -

    100 , Eudragit RS - 100 , etilena vinil asetat ( mengandung 2 % , 9 % dan 19 % vinil asetat ) dan

    dievaluasi sehubungan dengan berbagai in vitroparameter ( karakteristik fisik seperti ketebalan , kandungan obat , kadar air / serapan ,

    pemindaian mikroskop elektron , kerataan , in- vitro kinetika pelepasan / perembesan , dll) danefek farmakologis , biokimia dan histopatologi in vivo pada model tikus

    BAHAN DAN METODE

    Etil selulosa ( EC , dengan kandungan etoksi dari 47,5-53,5 % berat dan viskositas 14 cps dalam

    5 % b / b , 80:20 toluena : larutan etanol pada 25 C ) dibeli dari SD Fine Chemicals Ltd , India

    . Eudragit RL - 100 ( ERL ) dan Eudragit RS - 100 ( ERS ) diperoleh dari Rohm Pharma ,

    Jerman . Carbopol 934P NF dibeli from B.F. Goodrich , Jerman . Di- n - Butylphthalate dibeli dari Ranbaxy Laboratories , India .

    Etilena vinil asetat ( EVA )

    membran dengan 2 % vinil asetat ( VA ) konten ( EVA2 % , 3M COTRAN 9726 ) , 9 % VAkonten ( EVA9 % , 3M COTRAN 9702 ) dan 19 % VA konten ( EVA19 % , 3M COTRAN 9715

    ) , lapisan backing ( poliester Film laminasi , 3M Scotchpak Backing 1006 ) dan melepaskan

    kapal ( film poliester fluropolymer dilapisi ; 3M Scotchpak 1022 Rilis Liner ) adalah sampelhadiah dari 3M Pharmaceuticals , Amerika Serikat. Sodium deoxycholate , anthrone ,

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    3/8

    tiourea , streptozotocin , bovine serum albumin yang dibeli dari Sigma Chemical Company ,

    USA .

    Poliisobutilena dibeli dari Aldrich , USA .Glibenclamide adalah hadiah dari BAL Pharma , Modi Mundi Pharma dan Wallace

    Pharmaceuticals , India .

    Semua bahan-bahan kimia lain yang digunakan adalah analitis / reagenkelas .

    PENGEMBANGAN SISTEM MEMBRAN DIKENDALIKAN TRANSDERMAL

    Sistem transdermal yang dibuat oleh encapsulating reservoir obat dalam kompartemen dangkal

    dibentuk dari obat kedap dukungan laminasi dan membran tingkat pengendalian. EC, ERL dan ERS

    tingkat mengendalikan membran dibuat dengan melarutkan 250, 300 dan 300 mg polimer masing-

    masing dalam 5 ml kloroform. Di-n-Butyl phthalate (30% b / b polimer) digunakan sebagai plasticizer.

    Solusi polimer dituangkan pada permukaan merkuri (25 cm2) dan

    dikeringkan pada kamar temperature.After 24 jam, film dipotong menjadi 12 daerah cm2. Tingkat EVAmengendalikan membran adalah sampel hadiah dari 3M Pharmaceuticals, Amerika Serikat.

    Reservoir (0,5% karbopol gel) obat disiapkan sesuai rumus yang diberikan dalam Tabel 1

    Carbopol direndam dalam 5 ml air dan dinetralkan

    menggunakan trietanolamin (q.s.) untuk membentuk gel. Obat dalam 5 ml

    etanol ditambahkan perlahan-lahan untuk Carbopol gel dengan pengadukan konstan.

    Tabel 1: Reservoir dari glibenclamide membran dikendalikan sistem transdermal. Daerah sistem

    transdermal adalah 12 cm2

    Kuantitas akurat ditimbang dari gel (1 g) mengandung

    Obat (12 mg glibenklamid) ditempatkan pada selembar

    lapisan backing (3M Scotchpak Backing 1006) meliputi 3cm x 4cm daerah. Tingkat mengendalikan

    membran ditempatkan di atas gel dan tepi 3 cm x 4 cm daerah yang panas disegel untuk mendapatkan

    perangkat bukti kebocoran. Untuk memastikan kontak intim patch pada kulit, tekanan sensitif perekat,

    polyisobutylene (PIB), diterapkan ke kontrol tingkat

    membran ling (3 ml, 10% b / v dalam petroleum eter). Sebuah kapal release (3M Scotchpak 1022 Rilis

    Liner) ditempatkan di atas dilapisi membran tingkat mengendalikan perekat.

    STUDI OBAT-POLIMER INTERAKSI

    infra-merah (IR) spektroskopi (menggunakan IR-Spectrophotometer, FTIR-8300, Shimadzu,

    Jepang, dengan metode pelet KBr), termogram (DSC) (Perkin Elmer, USA, pada tingkat

    pemindaian dari 10 C / menit antara 50 dan 300 C), dan kinerja tinggi kromatografi lapis tipis(HPTLC) analisis (menggunakan sistem CAMAG III-HPTLC, Swiss) dilakukan pada zat murni

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    4/8

    dan campuran fisik mereka untuk mencari kemungkinan interaksi antara glibenclamide dan

    karbopol (6).

    IN VITRO EVALUASI SISTEM TRANSDERMALUntuk penentuan kandungan obat, seluruh isi sistem transdermal (n = 3) dibawa ke dalam labu

    volumetrik 100 ml dan dilarutkan dalam metanol. Larutan disaring melalui membran 0,45

    (Nulge Nunc, Inggris) sebelum obatanalisis. Viskositas obat yang mengandung karbopol gel ditentukan dengan menggunakanviskometer Brookefield listrik Sinkronisasi (Brookefield Engineering Ltd, USA). The TD bar

    spindle dari LV-4 pada 12 - gigi dipekerjakan. The in vitro pelepasan obat dan dalam studi

    permeasi kulit vitro dilakukan dengan menggunakan tipe keranjang USP alat disolusi(menggunakan 900 ml

    fosfat pH 7,4 penyangga sebagai medium disolusi) dan sel tipe difusi vertikal (menggunakan

    kulit tikus berbulu sebagai membran

    barrier), masing-masing (6). Morfologi tingkat EVA mengendalikan membran sebelum dansesudah in vitro permeasi kulit percobaan dianalisis dengan pemindaian mikroskop elektron

    (JEOL JSM-840A-, Jepang).

    DALAM STUDI VIVO

    Hewan-hewan yang digunakan untuk in vivo percobaan yang dewasa

    Tikus albino Swiss ( berusia 6-8 minggu ) dari kedua jenis kelamin , berat badan -

    ing 25-30 g , dari Departemen biologi penyinaran ,

    Kasturba Medical College , Manipal . Hewan-hewan itu tinggal di kandang polypropylene , 4 per kandang

    , dengan akses gratis ke standar laboratorium diet ( Lipton Pakan , Mumbai , India ) dan air . Mereka

    disimpan pada 25 1 C dan 45-55 % kelembaban relatif dengan / siklus gelap 12 jam cahaya.

    The in vivo protokol eksperimental telah disetujui oleh Komite Etik Kelembagaan Hewan, KasturbaMedical College , Manipal .

    Aktivitas hipoglikemik IN MICE NORMAL

    Rambut di bagian belakang tikus itu dihapus

    dengan rambut clipper listrik pada hari sebelumnya

    percobaan . Menyusul cepat semalam , tikus

    dibagi menjadi 3 kelompok ( n = 6 ) . Tikus-tikus tersebut diperlakukan sebagai

    berikut :

    Kelompok I ( Kontrol ) - 0,2 ml dari 0,5 % b / v natrium karboksimetil selulosa ( CMC ) ; po

    Kelompok II - glibenklamid ( 5 mg / kg ; p.o. ) .

    Para dosis oral diberikan menggunakan stainless steel bulat berujung

    jarum melekat pada 1 ml jarum suntik dan dosis 5 mg / kg dipilih dengan melakukan serangkaian

    percobaan dengan dosis bertingkat berkisar antara 1 sampai 10 mg / kg .

    Kelompok III - Diterapkan dengan 2,5 cm2 sistem transdermal

    disiapkan dengan tingkat mengendalikan membran EVA19 % ,

    mengandung 2,5 mg obat di 0,5 % karbopol gel .

    Pada interval waktu antara 2-24 jam setelah pengobatan ( akut

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    5/8

    studi ) , darah diambil dari sinus orbital ; darah

    kadar glukosa ditentukan menggunakan Accutrend Alpha

    Glucometer ( Roche Diagnostics , Jerman ) . dalam

    studi jangka panjang , perawatan di atas diberikan / diterapkan fo sekali sehari

    r 6 minggu . Kadar glukosa darah ditentukan sekali dalam setiap 2 minggu di atas malam tikus berpuasa ,

    2 jam setelah terapi obat seperti yang dijelaskan sebelumnya .

    PELANTIKAN DIABETES MELLITUS DAN hipoglikemik

    KEGIATAN DI MICE DIABETIC

    Tikus semalam berpuasa dibuat diabetes dengan injeksi intraperitoneal tunggal streptozotocin ( 150

    mg / kg ; ip ) dilarutkan dalam buffer sitrat ( 3 mM , pH 4,5 )

    ( 6 ) . Tujuh hari kemudian , tikus dengan kadar glukosa darah

    antara 300-400 mg / dL adalah selected.The akut dan

    aktivitas hipoglikemik jangka panjang patch transdermal dievaluasi dalam semalam berpuasa tikus

    diabetes seperti yang dijelaskan dalam di atas .

    PENGARUH GLUKOSA TOLERANSI

    Setelah puasa semalam , mencit dibagi menjadi 3

    kelompok ( n = 6 ) . Kelompok kontrol diberikan dengan 0,2 ml CMC . Lainnya 2 kelompok diberikan

    dengan glibenclamide ( 5 mg / kg ; po ) atau diterapkan dengan sistem transdermal seperti yang

    dijelaskan dalam percobaan sebelumnya .

    Dua jam kemudian , glukosa diberikan secara oral ( 2 g / kg ) untuk semua 3 kelompok . Sampel darah

    diambil sesaat sebelum dan pada 0,5 , 1,0 dan 2,0 jam setelah makan glukosa dan kadar glukosa wa

    s ditentukan . Persentase perubahan glukosa darah diperkirakan dibandingkan dengan kelompok kontrol

    . Selama periode pengujian, makanan tidak disediakan , tapi air diberikan ad libitum

    EVALUASI DAN biokimia histopatologis

    Pada akhir pengobatan jangka panjang dalam diabetes

    tikus , profil lipid ( high-density lipoprotein - kolesterol , trigliserida dan kolesterol total ) , alanin tran -

    saminase ( ALT ) , transaminase aspertate ( AST ) , urea

    dan kadar kreatinin diperkirakan dalam serum menggunakan Auto - analyzer ( Hitachi 911 , Jepang ) .

    Kemudian hewan

    dikorbankan dan bagian dari hati diproses untuk

    estimasi glikogen dan protein total ( 6 ) . Potongan hati , pankreas dan perut menjadi sasaran studi

    histopatologi menggunakan haematoxylene dan eosin ( H & E ) pewarnaan .

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    6/8

    PEMBAHASAN DAN KESIMPULAN

    Dalam penelitian ini, membran dimoderasi sistem transdermal yang mengandung glibenclamide disusun

    menggunakan tingkat yang berbeda mengendalikan membran. Hal ini diinginkan untuk

    mengembangkan sistem transdermal yang memungkinkan seseorang untuk memberikan pelepasan

    obat yang optimal melalui pilihan yang paling tepat membran tingkat pengendalian dan akhirnya untuk

    menghasilkan overal diinginkan

    l konstan / pelepasan obat terkontrol. Etanol (50% b / b) didirikan pada reservoir sistem transdermal

    karena secara signifikan meningkatkan tingkat perembesan glibenclamide dalam penelitian sebelumnya

    (4, 5).

    Parameter farmakokinetik yang diperoleh dengan sistem glibenclamide transdermal berbedasecara signifikan (p

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    7/8

    35 etanol , yang didirikan pada reservoir obat

    untuk meningkatkan laju permeasi obat . Selain itu, media langsung mungkin juga bertanggung

    jawab atas pelepasan ledakan awal karena mereka permeabel terhadap media berair ( 9 )Jumlah kumulatif obat dirilis pada akhir dari 24 jam itu tergantung pada hidrofilisitas dari polimer (ERL>

    ERS> EC). Film ERL cenderung membengkak lebih dari ERS film dalam media berair karena konsentrasi

    yang lebih tinggi dari kelompok kuaterner hidrofilik. Selain itu, membran ERL lebih permeabel untukmedia berair dari dua membran yang lain (10). Di sisi lain, sistem dengan membran EVA dipamerkan

    tingkat pelepasan obat konstan upto 24 jam sebagai integritas membran ini tidak terpengaruh oleh

    salah satu kadar etanol dari reservoir obat atau kontak langsung dengan media berair. Studi laju

    pelepasan mengungkapkan bahwa, sebagai isi vinil asetat dalam kopolimer meningkat, persentase

    kumulatif pelepasan obat juga meningkat, yaitu, membran menunjukkan resistensi yang lebih rendah

    terhadap perembesan molekul obat. Pengamatan ini sesuai dengan temuan sebelumnya (11).

    Dalam studi permeasi kulit in vitro juga , sistem dengan ERL , ERS dan EC membran tidak

    memberikan pelepasan obat konstan dan menunjukkan perembesan tinggi obat pada jam-jam

    awal . Ini lagi karena kandungan etanol ( 50 % ) dari reservoir obat , yang mungkin sebagianterlarut polimer yang

    membran dan sehingga mengganggu integritas membran ( 9 ) .

    The ERL , ERS dan EC membranmenunjukkan hilangnya struktur seragam setelah fabrikasi ke

    sistem final. Hal ini dikonfirmasi dengan memeriksa

    film setelah 24h fabrikasi sistem akhir di manaetanol yang mengandung gel berada dalam kontak langsung dengan membran atau setelah in

    vitro permeasi kulit percobaan . Hal ini juga didukung oleh penurunan tingkat kerataan ini

    mengendalikan membran setelah menyiapkan perangkat transdermal akhir . Film-film sebelum

    fabrikasi ke dalam sistem akhir dipamerkan 100 % kerataan menunjukkan tidak ada penyempitan. Setelah 24 jam fabrikasi , mereka menunjukkan penurunan nilai kerataan ( 80 % , 80 %

    dan 90 % dari kerataan untuk ERL , ERS dan EC membran , masing-masing)Pengamatan ini menunjukkan bahwa film yang dihasilkan dengan

    ERL , ERS dan EC kehilangan struktur terpisahkan mereka setelah

    datang ke dalam kontak

    dengan waduk obat Oleh karena itu dianggap kita

    e mereka membran , yang

    mempertahankan integritas mereka ketika

    mereka datang dalam kontak dengan

    reservoir obat . Membran dibuat dengan etil -

    ene vinil asetat kopolimer ( EVA ) secara luas digunakan untuk

    mengendalikan laju pelepasan obat dari berbagai transdermal

    sistem pengiriman obat ( 11 , 12 ) . Membran ini melakukan

    tidak kehilangan struktur terpisahkan ketika dibuat menjadi

    sistem akhir dan juga setelah

    in vitro

    permeasi kulit

    studi . Hal ini bisa disebabkan oleh

  • 8/10/2019 Pengembangan formulasi

    8/8

    kemampuan film ini

    untuk melawan efek ethano

    l dalam reservoir obat . ini adalah

    juga didukung oleh SEM st

    udies dari th

    film e EVA

    sebelum fabrikasi ke dalam sistem akhir dan setelah

    in vitro

    percobaan permeasi kulit , di mana film main-

    dipertahankan seragam dan permukaan halus , 100 % kerataan dan

    integritas struktur

    setelah percobaan permeasi . Oleh karena itu tingkat EVA mengontrol membran yang

    cocok untuk sistem transdermal waduk di

    penelitian ini .

    Jumlah kumulatif obat meresap di akhir

    dari 24 jam meningkat sebagai vinil asetat konten ( VA )

    dalam tingkat EVA mengendalikan membran meningkat .

    Pengamatan ini sesuai dengan sebelumnya

    laporan dimana permeasi obat meningkat sebagai

    isi vinil asetat dalam kopolimer EVA adalah

    meningkat ( 11,13,14 ) . Hal ini juga

    diakui bahwa adalah mungkin untuk mengubah permea yang

    bility EVA kopolimer

    membran dengan memvariasikan konten vinil asetat . itu

    perubahan permeabilitas telah dikaitkan dengan

    perubahan dalam suhu transisi kaca dan kristalinitas polimer . Sebagai isi vinil asetat

    meningkat , kristalinitas polimer menurun

    cepat dan ini bisa menjadi

    alasan untuk tingkat perembesan tinggi diamati dengan membran EVA dengan 19 %

    VA konten dibandingkan dengan EVA membran yang mengandung 9 % dan 2 % VA dalam penelitian ini (

    15 ) .

    Jumlah kumulatif glibenclamide meresap

    per sentimeter persegi perangkat transdermal dengan

    ERL , ERS dan EC tingkat mengendalikan membran

    melalui kulit mouse ketika diplot terhadap waktu,

    profil permeasi obat tampaknya mengikuti dicampur

    order / jelas orde nol

    kinetika seperti yang diamati dengan

    sistem matriks ( Gambar 3 ) . Jumlah tinggi obat adalah

    dirilis di jam awal karena peningkatan permeabilitas membran dengan etanol . Namun, kemudian

    obat dirilis tergantung pada konsentrasi

    dan dengan demikian mengubah sistem menuju pola urutan pertama .