media revisi.doc

7/25/2019 MEDIA REVISI.doc

1/14


2/14


3/14

A. TUJUAN

Tujuan praktikum ini adalah:

1. Mengenal jenis-jenis media pertumbuhan mikroba yang diperlukan dalam

praktikum mikrobiologi lingkungan berdasarkan susunan kimianya.

2. Mengenal konsep dan teknik pembuatan berbagai macam media pertumbuhanmikroba.

B. TINJAUAN PUSTAKA

Penumbuhan mikroba dan mengembangbiakan mikroba, diperlukan suatu

substrat yang disebut dengan media. Media itu sendiri sebelum dipergunakan

harus dalam keadaan steril, artinya tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak

diharapkan. Susunan bahan, baik bentuk bahan alami seperti tauge, kentang,

telur, daging, !ortel, dan sebagainya" ataupun bahan buatan berbentuk senya!a

kimia, organik, ataupun anorganik" yang dipergunakan untuk pertumbuhan danperkembangbiakan mikroba dinamakan media. #dapun macam-macam media

pertumbuhan anatra lain$alung, 2%%&" :

1. Medium bersarkan si'at 'isik

a. Medium padat yaitu media yang mengandung agar 1() sehingga setelah

dingin media menjadi padat.

b. Medium setengah padat yaitu media yang mengandung agar %,* + %,)

sehingga menjadi sedikit kenyal, tidak padat, tidak begitu cair. Media semi

solid dibuat dengan tujuan agar pertumbuhan mikroba dapat menyebar

keseluruh media tetapi tidak mengalami percampuran sempuran jika tergoyang.

Misalnya bakteri yang tumbuh pada edia itrogen 'ree romthymol lue"semisolid akan membentuk cincin hijau kebiruan diba!ah permukaan

mediajika media ini cair maka cincin ini dapat dengan mudah hancur.

Semisolid juga bertujuan untuk mencegah/ menekan di'usi oksigen, misalnya

pada media itrate roth, kondisi anaerob atau sedikit oksigen meningkatkan

metabolisme nitrat tetapi bakteri ini juga diharuskan tumbuh merata diseluruh

media.

c. Medium cair yaitu media yang tidak mengandung agar, contohnya adalah

utrient roth", 0 lactose roth".

2. Medium erdasarkan omposisi

a. Medium sintesis yaitu medium yang komposisi at kimia diketahui jenis dan

takarannya secara pasti. Misalnya $lucose #gar, Mac 3onkey #gar.

b. Medium semisintesis yaitu media yang sebagian komposisinya diketahui secara

pasti misalnya P4# Potato 4e5trose #gar" yang mengandunga agr dekstrosa

dan ekstrak kentang.

c. Medium nonsintesis yaitu media yang dibuat dengan komposisi yang tidak

dapat diketahui secara pasti dan biasanya langsung diekstrak dari bahan

dasarnya, misalnya Tomato 6uice #gar, rain 7eart 8n'usion #gar, Pancreatic

9kstrak.

*. Medium erdasarkan Tujuan


4/14


5/14

pangan, untuk memba!a stok kultur untuk pertumbuhan sampel pada uji bakteri

dan untuk mengisolasi organisme dalam kultur murni gr

utrien roth " 1.> gr

Potato 4e5trose #gar P4#" *.12 gr

2. 4aging segar tanpa lemak 2%% gr

*. entang 2%% gr. 4e5trose %.1( gr

(. Sukrosa %.> gr

>. Pepton 1.2( gr

?. a3l %.12( gr

=. #gar

&. #kuades


6/14

ubuk P4#

Media steril

Media siap digunakan

#lat dan bahan

D. CARA KERJA

1. P4#

*.12 gram Potato 4e5trose #gar

=% ml akuades

P4# dimasukan kedalam gelas beker

yang berisi akuades

$elas beker dipanaskan pada kompor

listrik sampai larut sempurna

P4# dimasukan kedalam tabung reaksi

sebanyak > ml

Tabung reaksi ditutup dengan kapas dan

aluminium 'oil

Media disterilkan dengan autokla' pada

suhu 121o3 tekanan 1 atm selama 1(-2%

menit


7/14

#lat dan bahan

Nutrient Agar

Media steril


2. #

1.> gramNutrien Agar #"

=% ml akuades

# dimasukkan ke dalam gelas beker

yang berisi akuades

# dipanaskan pada kompor listrik

sampai larut sempurna

# dimasukkan ke dalam tabung reaksi

sebanyak > ml


aluminium 'oil



menit


8/14

Nutrient Broth

Media steril


#lat dan bahan

*.

1.> gramNutrien Broth "

=% ml akuades

dimasukkan ke dalam gelas beker

yang berisi akuades

dipanaskan pada kompor listrik

sampai larut sempurna

dimasukkan ke dalam tabung reaksi

sebanyak > ml


aluminium 'oil



menit


9/14

. entang

entang dikupas lalu dicuci dan dipotongberbentuk dadu 2 cm.

Potongan kentang dimasukkan ke dalam panci

yang telah berisi (%% ml akuades.

Potongan kentang dan akuades dididihkan di

atas kompor listrik.

9kstrak kentang hasil pendidihan disaring dan

diambil sebanyak 1%% ml lalu dituang ke dalam

gelas beaker.

9kstrak kentang di dalam gelas beaker ditambah

dengan dextrosesebanyak 1,( gram dan agar

batangan sebanyak 1,( gram.

3ampuran tersebut dipanaskan di atas kompor

listrik sambil diaduk hingga semua bahan

terlarut sempurna.

3ampuran yang telah larut ditakar sebanyak >

ml dan dimasukkan dalam tabung reaksi.

Tabung reaksi yang berisi media ditutup

menggunakan kapas dan dilapisi aluminium 'oil.

Tabung reaksi disterilkan menggunakan autokla'

selama 2% menit dengan tekanan 1 atm dan suhu

121 derajat celcius.

(. 4aging

Media entangDextrose #gar

Media entangDextrose #gar Steril

entang 2%% gram


10/14

4aging dipotong dadu 1 cm

Potongan daging dimasukan ke dalam panic yang telah

berisi (%% ml akuades

Potongan daging dan akuades dididihkan pada kompor

listrik

#ir rebusan daging disaring dan dituang kedalam gelas

beker

$elas beker ditutup dengan aluminium 'oil dan

didiamkan selama satu malam didalam lemari pendingin

Suspensi bening dipisahkan ke dalam gelas beaker,

endapan dibuang.

#kuades ditambahkan hingga @olume akhir 1%% ml.

4itambahkan ke dalam gelas beaker berisi suspensi dan

akuades 4ipanaskan hingga semua bahan terlarut sempurna.

4itambahkan ke dalam gelas beaker berisi suspensi dan

akuades

4ipanaskan hingga semua bahan terlarut sempurna.

4aging segar tanpa

lemak 2%% gram

Suspensi bening dan

endapan

1,2( gr peptonA %,12( gr

a3lA dan *,?( gr agar

Media


11/14

Media dituangkan ke dalam tabung reaksi masing-

masing > ml.

Tabung reaksi ditutup rapat dengan kapas dan dilapisi

aluminium 'oil. Media disterilkan dengan autocla@e pada tekanan 1 atm,

suhu 121B3 selama 1(-2% menit.

E. PEMBAHASAN

MediaNutrien Agar#" digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri.

Media # termasuk media padat. Perbandingan # dan akuades saat digunakan

adalah 1:(%. 6adi, dalam praktikum ini kami memakai jumlah # dan akuades

berturut-turut adalah 1.> gram dan =% ml. Media # diambil kemudian ditimbang

dengan timbangan analitik, lalu dicampurkan dengan akuades =% ml. 3ampuran

tadi dipanaskan diatas kompor listrik agar semua bahan terlarut sempurna.

3ampuran yang masih panas tadi dimasukkan dalam 1% tabung reaksi. Mulut

tabung reaksi masing-masing ditutup rapas menggunakan kapas kemudian dilapisi

dengan alumunium 'oil. esepuluh tabung reaksi tadi kemudian dimasukkanautokla' untuk proses sterilisasi pada tekanan 1 atm, temperatur 1213 selama 1(-

2% menit. Media dapat digunakan setelah proses sterilisasi tadi.

Potatoes 4e5trose #gar P4#" merupakan salah satu media yang berbentuk

solid. P4# ini ber'ungsi sebagai media biakan kapang. Media P4# ini

berdasarkan susunanya termasuk media sintetik. elebihan dari media sintetik

adalah kandungan yang terdapat dalam P4# ini sudah diketahui komposisinya

sehingga dapat lebih spesi'ik 'ungsi dari media ini. ahan utama yang digunakan

dalam pembuatan media P4# adalah serbuk P4# dan akuades. Pembuatan media

dilakukan dengan memasukkan *.12 gram P4# kedalam gelas beker yang berisi

=% ml akuades yang kemudian dipanaskan diatas kompor listrik. Pemanasan

ber'ungsi untuk melarutkan P4# dalam akuades. Pemanasan dihentikan apabila

serbuk P4# sudah tercampur sempurna dengan akuades kemudian masukkan

kedalam tabung reaksi sebanyak > ml dengan menggunakan pipet @olume dan

tutup lubang tabung reaksi dengan kapas dan aluminium 'oil kemudian sterilkan

dengan menggunakan autokla' pada tekanan 1 atm dengan tempetatur 121o 3

selama 1( sampai 2% menit.

Pertama menyiapkan air aCuades sebanyak =% ml lalu dituangkan ke dalam

gelas beaker. seberat %,> gram untuk dilarutkan dalam aCuades. kemudian

dicampur dengan aCuades dalam gelas beker. emudian dipanaskan dengan



12/14

menggunakan kompor listrik sampai semua bahan terlarut sempurna dalam air

yang mendidih dan tercium bau seperti pakan ternak. 7asil campuran tadi

dimasukkan ke dalam tabung reaksi masing-masing > ml. Tutup rapat tabung

reaksi dengan kapas, lalu lapisi dengan alumunium 'oil. 0alu setelah semuanya

ditutup, disterilkan dengan autocla@e pada tekanan 1 atm, dengan temperature 121

o3 selama 1(-2% menit.

Salah satu media non sintetik adalah kentang de5trose agar. 0angkah

pertama pembuatan media ini adalah kentang sebanyak 2%% gram dikupas lalu

dicuci hingga bersih dan dipotong berbentuk dadu 2 cm agar kentang cepat

mendidih dan lebih mudah dalam proses pengekstrakan. emudian, potongan

kentang dimasukkan ke dalam panci yang telah berisi (%% ml akuades. Potongan

kentang dan akuades lalu dididihkan di atas kompor listrik agar etrcipta ekstrak

kentang.

9kstrak kentang hasil pendidihan disaring dan diambil sebanyak 1%% mlbagian yang bening, karena !arna media harus bening untuk mempermudah

pengamatan mikroba yang akan dikulturkan" lalu dituang ke dalam gelas beaker.

9kstrak kentang di dalam gelas beaker ditambah dengan dextrosesebanyak 1,(

gram dan agar batangan sebanyak 1,( gram untuk menambah nutrien dalam media

yang akan dibuat. 3ampuran tersebut lalu dipanaskan di atas kompor listrik

sambil diaduk hingga semua bahan terlarut sempurna. 3ampuran yang telah larut

kemudian ditakar sebanyak > ml dan dimasukkan dalam tabung reaksi dan jadilah

media kentang de5trose agar.

Tabung reaksi yang berisi media ditutup menggunakan kapas dan dilapisi

aluminium 'oil untuk persiapan sterilisasi 'isik menggunakan autokla'. Tabung

reaksi disterilkan menggunakan autokla' selama 2% menit dengan tekanan 1 atm

dan suhu 121 derajat celcius agar tercipta medium agar yang memenuhi syarat

steril dari mikroba.

F. DISKUSI

1. Sebutkan dan jelaskan * hal yang harus diperhatikan dalam membuat media

pertumbuhan mikrobaD

6a!ab:

a. 7arus mengandung semua unsur harayang dibutuhkan untukpertumbuhan dan perkembangan mikroorganisme.

b. Mempunyai tekanan osmosis, tegangan permukaan, dan p7 yang sesuai

dengan kebutuhan mikroorganisme.

c. Media harus dalam keadaan steril. Sebelum diinokulasi mikroorganisme

yang dimaksud tidak ditumbuhi mikroorganisme lain yang tidak

diharapkan.

2. Mikroba perlu ditumbuhkan dalam media yang sesuai, sebenarnya apakah

'ungsi dari media itu bagi pertumbuhan mikrobaE

6a!ab:


13/14

Fungsi dari suatu media adalah memberikan tempat dan kondisi yang

mendukung pertumbuhan dan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang

ditumbuhkan.

*. Gnsur-unsur apa saja yang harus ada dalam mediaE

6a!ab:Gmumnya mengandung air, protein, sumber energi, at hara sebagai sumber

karbon, nitrogen, sul'ur, 'os'at, oksigen, hidrogen, serta unsur-unsur lainnya

. #pa yang membedakan antara media padat dan cair serta media kaya dan

selekti'E

6a!ab:

- Media padat adalah media yang mengandung 1() agar sehingga mudah

mengeras, sedangkan media cair tidak mengandung agar seingga tidak

dapat mengeras.

- Media diperkaya yaitu media yang ditambahi at-at tertentu misalnya

serum darah ekstrak tanaman dan lain sebagainya, sehinggan dapat

digunakan untuk menumbuhkan mikroba yang bersi'at heterotro'.

Sedangkan media selekti' yaitu media yang ditambahi at kimia tertentu

untuk mencegah pertumbuhan mikroba lain bersi'at selekti'", misalnya

media yang mengandung ristal @iolet pada kadar tertentu dapat

mencegah pertumbuhan bakteri gram positi' tanpa mempengaruhi

pertumbuhan bakteri gram negati'.

G. DAFTAR PUSTAKA

4!ijoseputro, 4. 1&&=. 4asar-4asar Mikrobiologi. 4jambatan. Malang.

7adioetomo,


14/14

media revisi.doc

Documents