BLOK III : HOMEOSTASIS

LAPORAN PRAKTIKUM FARMAKOLOGI

MENENTUKAN ED50 ( EFFECTIVE DOSE ) DIAZEPAM PADA

MENCIT

Disusun Oleh :

Tri Waliyuddin Afif ( H1A015065 )

Dosen Pembimbing :

Dr. Nurhidayati, M.Kes

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MATARAM

NUSA TENGGARA BARAT

2016

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 LATAR BELAKANG

Diazepam termasuk dalam obat golongan Benzodizepine. Golongan obat ini bekerja

pada system saraf pusat dengan efek utama : sedasi, hypnosis, pengurangan terhadap

rangsangan emosi/ansietas, relaksasi otot dan antikonvulasi. Diazepam menyebabkan tidur dan

penurunan kesadaran yang disertai nistagmus dan bicara lambat, tetapi tidak berefek analgesic.

Juga tidak menimbulkan potensiasi terhadap efek penghambat neuromuskuler dan efek

analgesic obat narkotik. Diazepam digunakan untuk menimbulkan sedasi basal pada anastesi

regional, endoskopi dan prosedur dental, juga untuk induksi anastesia terutama pada penyakit

kardiovaskuler.

Peningkatan dosis benzodiazepine menyebabkan depresi SSP yang meningkat dari

sedasi ke hypnosis, dan dari hypnosis ke stupor. Keadaan ini sering dinyatakan sebagai efek

anastesia, tetapi obat golongan ini tidak benar-benar memperlihatkan efek anastesi umum yang

spesifik. Namun pada dosis pre-anastetik, benzodiazepine menimbulkan amnesia anterograd

terhadap kejadian yang berlangsung setelah pemberian obat. Profil farmakologi

benzodiazepine sangat berbeda pada spesies yang berbeda. Pada spesies tertentu, hewan coba

dapat meningkatkan kewaspadaannya sebelum timbul depresi SSP. Walaupun terlihat adanya

efek analgetik benzodiazepine pada hewan coba, pada manusia anya terjadi analgesi selintas

setelah pemberian diazepam.

Jadi dalam praktikum kali ini ditentukan dosis berapa yang memberikan efek tidur pada

50% individu atau separuh dari jumlah individu yang diamati memberi respon tidur. Dengan

menentukan ED50 dari diazepam, maka kita dapat mengetahui dosis terapi yang efektif dari

diazepam untuk menimbulkan efek tidur. Bermanfaat juga untuk pengobatan kecanduan, susah

tidur, gangguan pernapasan, dan kejang otot. Diazepam juga digunakan untuk perawatan

peradangan, gemetaran, dan halusinasi sebagai hasil dari kerja alcohol.

1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana cara mendapatkan dosis tertentu pada obat diazepam?

2. Bagaimana median Effective Dose (ED50) pada dosis obat diazepam yang diberikan

pada mencit?

3. Bagaimana perubahan aktivitas pada mencit setelah pemberian dosis obat diazepam

secara intraperitonial?

4. Bagaimana perbedaan onset of action dan duration of action yang ditumbulkan oleh

dosis obat diazepam yang berbeda pada setiap mencit?

1.3 TUJUAN

1. Untuk mengetahui median effect dose (ED50) obat diazepam yang akan diberikan

pada mencit.

2. Untuk mengetahui cara menitrasi diazepam agar mencapai dosis yang diinginkan.

3. Untuk mengetahui perbedaan efek yang ditimbulkan oleh perbedaan dosis diazepam

yang diberikan pada mencit.

4. Untuk mengetahui perbedaan onset of action dan duration of action yang ditimbulkan

oleh tiap dosis diazepam yang diuji.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 LANDASAN TEORI

ED50 ( Effective Dose 50 ) adalah dosis yang menimbulkan efek terapi pada 50%

individu. Pemberian fenobarbital dan diazepam secara intraperitoneal digunakan untuk

menentukan ED50 yaitu dosis yang memberikan efek tidur pada 50% individu atau separuh dari

jumlah individu yang diamati memberi respon tidur. Dosis yang menimbulkan efek terapi pada

50% individu disebut dosis terapi median atau dosis efektif median (ED50). Dosis letal median

(TD50) ialah dosis yang menimbulkan kematian pada 50% individu, sedangkan TD50 ialah

dosis toksik 50%. ED50 ini biasa digunakan untuk menentukan indeks terapi. Dalam suatu

farmakodinamik, indeks terapi suatu obat dinyatakan dalam rasio sebagai berikut,

Indeks terapi= TD 50 atau LD 50

Distribusi

Transpor hipnotik sedatif di dalam darah adalah proses dinamik dimana banyaknya

molekul obat masuk dan meninggalkan jaring tergantung pada aliran darah, tingginya

konsentrasi dan permeabilitas. Kelarutan dalam dalam lemak memegang peranan penting

dalam menentukan berapa banyak hipnotik-sedatif yang khusus masuk ke susunan saraf pusat.

Indikasi

Diazepam digunakan untuk memperpendek mengatasi gejala yang timbul seperti

gelisah yang berlebihan, diazepam juga dapat mengatasi gemetaran, kegilaan, dan halusinasi

sebagai akibat mengkonsumsi alcohol. Diazepam juga dapat dignakan untuk kejang otot.

Kejang otot merupakan penyakit neurology. Diazepam digunakan sebagai obat penenang dan

dapat juga dikombinasikan dengan obat lain.

Efek samping

Sebagaimana obat, selain memiliki efek yang menguntungkan, diazepam juga memiliki

efek samping yang perlu diperhatikan dengan seksama. Efek samping diazepam memiliki tiga

kategori efek samping yaitu:

1. Efek samping yang sering terjadi: pusing, mengantuk.

2. Efek samping yang jarang terjadi: depresi, impaired cognition.

3. Efek samping yang jarang sekali terjadi: reaksi alergi, amnesia, anemia, angiodema,

behavioral disorders, blood dyscrasias, blurred vision, kehilangan keseimbangan, konstipasi,

coordination changes, diarrhea, disease of liver, drug dependence, dysuria, extrapyramidal

disease, false sense of well-being, fatigue, general weakness, headache disorders, hipotensi,

increased bronchial secretion, leucopenia, libido changes, muscle spasm, muscle weakness,

nausea, neutropenia disorder, polydipsia, pruritus of skin, seizure disorder, sialorrhea, skin

rash, sleep automatism, tachyarrhytmia, trombositopeni, tremors, visual changes, vomiting,

xerostomia.

Farmakokinetik

Benzodiazepine bersifat lipofilik dan diabsorbsi secara cepat dan sempurna setelah

pemberian oral dan didistribusikan ke seluruh tubuh. Waktu paruh benzodiazepine penting

secara klinis karena lama kerja dapat menentukan penggunaan dalam terapi. Benzodiazepine

dibagi atas kelompok kerja jangka pendek, sedang, dan panjang. Dan diazepam masuk ke

dalam kelompok kerja lama. Obat dengan jangka panjang membentuk metabolit aktif dengan

waktu paruh panjang.

Diazepam, nitrazepam, bromazepam memiliki PP yang tinggi (80-90%) yang

diantaranya memiliki siklus enterohepatik. Distribusinya juga dalam tubuh cukup baik,

terutama di otak, jantung, hati, dan lemak. Apabila diberikan dalam bentuk suppositoria,

resorpsinya agak lama, kurang lebih 2 jam bereaksi setelah pemberian dibandingkan dengan

pemberian oral yang hanya membutuhkan waktu kurang lebih setengan jam saja. Namun

apabila diberikan dalam bentuk larutan khusus rektal (rektiole), penyerapannya lebih cepat

sekitar 10 menitan. Oleh karena itu rektiole lebih banyak diberikan dalam keadaan darurat,

misalnya pada pasien kejang.

Farmakodinamik

Pengikatan GABA (asam gama aminobutirat) ke reseptornya pada membrane sel akan

membuka saluran klorida, meningkatkan efek konduksi klorida. Aliran ion klorida yang masuk

menyebabkan hiperpolarisasi lemah menurunkan potensi postsinaptik dari ambang letup dan

meniadakan pembentukan kerja potensial. Benzodiazepine terikat pada sisi spesifik dan

berafinitas tinggi dari membran sel yang terpisah tetapi dekat reseptor GABA. Reseptor

benzodiazepine terdapat hany pada SSP dan lokasinya sejajar dengan neuron GABA.

Pengikatan benzodiazepine memacu afinitas resptor GABA untuk neurotransmitter yang

bersangkutan sehingga sluran klorida yang berdekatan lebih sering terbuka. Keadaan tersebut

akan memacu hiperpolarisasi dan menghambat letupan neuron (catatan: benzodiazepine dan

GABA secara bersama-sama akan meningkatkan afinitas terhadap sisi ikatannya tanpa

perubahan jumlah total sisi tersebut).

Lama pemberian

Obat diazepam ini tidak boleh digunakan dalam jangka waktu yang panjang, karena

dapat berakibat buruk bagi tubuh penderita. Diazepam segera didistribusi ke otak, tetapi

efeknya baru tampak setelah beberapa menit. Obat ini menyebabkan tidur dan penurunan

kesadaran disertai nistagmus dan bicara lambat, tetapi tidak berefek analgesic, juga tidak

menimbulkan potensiasi terhadap efek penghambat neuromuscular dan efek analgesic obat

narkotik. Diazepam digunakan untuk menimbulkan sedasi basal pada anastesia regional,

endoskopi, dan prosedur dental, juga untuk induksi anastesia terutama pada penderita dengan

penyakit kardiovaskuler. Dibandingkan dengan ultra short acting barbiturate, efek anastesia

diazepam kurang memuaskan karena mula kerjanya lambat dan masa pemulihannya lama.

Kadarnya segera turun karena adanya redistribusi, tetapi sedasi sering muncul lagi setelah 6-8

jam akibat adanya penyerapan ulang diazepam yang dibuang melalui empedu. Karena itu

diazepam jangka lama tidak memerlukan koreksi dosis.

BAB III

METODOLOGI

3.1 WAKTU DAN TEMPAT PELAKSAAN

Hari : Kamis, 7 Januari 2016

Pukul : 13.30 Selesai

Tempat : Lab. Anatomi

3.2 ALAT & BAHAN

a. Mencit 8 ekor

b. Diazeoam dengan dosis I : 0,156 mg/cc

Dosis II : 0,312 mg/cc

Dosis III : 0,625 mg/cc

Dosis IV : 1,25 mg/cc

c. Spuit injeksi 1 cc dan 3 cc

d. Jam atau stop watch

e. Bak penampung mencit

f. Spidol permanen

g. Aquadest

h. Becker glass

i. Gelas ukur

3.3 CARA KERJA

a. Menyiapkan semua alat dan bahan yang digunakan.

b. Menyiapkan mencit yang akan diberi perlakuan sebanyak 8 ekor dengan masing-

masing 2 ekor mencit untuk tiap dosis.

Kelompok I untuk mencit dengan dosis diazepam 0,156 mg/cc

Kelompok II untuk mencit dengan dosis diazepam 0,312 mg/cc

Kelompok III untuk mencit dengan dosis diazepam 0,625 mg/cc

Kelompok IV untuk mencit dengan dosis diazepam 1,25 mg/cc

c. Mengambil mencit dari bak penampungan dengan cara :

Tarik ekor mencit dan angkat kemudian taruh di atas kawat bak.

Dengan tangan kanan masih memegang ekor mencit, tangan kiri menjepit kulit

tengkuk bagian belakang kepala dan leher mencit dengan ibu jari dan jari telunjuk,

kemudian angkat mencit.

d. Setelah mencit dipegang dengan baik, injeksikan diazepam sebanyak 0,5 cc secara

intraperitoneal.

e. Tunggu selama 10 menit, lalu evaluasi keadaan mencit tiap 5 menit selama 60 menit.

f. Mencatat hasil pengamatan pada table. (1=tidur, 0=tidak tidur).

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 HASIL PENGAMATAN

Tabel Hasil Pengamatan

DOSIS MEN

CIT

WAKTU (MENIT)

5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60

DOSIS 1

0,156 mg/cc

M1 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 1 1

M2 0 0 0 1 1 1 1 1 0 1 1 1

DOSIS 2

0,312 mg/cc

M1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

M2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1

DOSIS 3

0,625 mg/cc

M1 0 0 0 1 1 0 1 1 1 1 0 0

M2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1

DOSIS 4

1,25 mg/cc

M1 1 1 1 1 0 1 1 0 1 1 0 1

M2 1 1 1 1 1 1 1 0 1 1 1 1

KETERANGAN

0 : tidak tidur

1 : tidur

4.2 ANALISIS DATA

Berdasarkan hasil pengamatan yang didapat, bahwa pengaruh dari dosis obat diazepam

yang berbeda-beda dapat memberikan pengaruh yang bervariasi dari hewan coba (mencit).

Dosis obat diazepam yang tinggi, pengaruh ataupun rangsangan yang ditimbulkan oleh

mencit dapat memberikan pengaruh tidur yang besar, perbedaan ini dapat dilihat pada menit-

menit pertama pemberian obat pada mencit, dari kedua mencit menimbulkan pengaruh yang

berbeda walaupun diberikan dosis obat diazepam yang sama.

Pada kelompok I dengan pemberian dosis obat diazepam 0,156 mg/cc, pada menci 1

menit ke-5 sampai menit ke-35 tidak menimbulkan pengaruh, setelahnya pada menit ke-40

obat diazepam memperlihatkan pengaruhnya yaitu mencit tidur, seterusnya pada menit ke-

45 mencit beraktivitas lagi dan menit ke-50 sampai menit ke-60 mencit tertidur. Sebaliknya

pada mencit 2, menit ke-5 sampai menit ke-25 obat diazepam belum memperlihatkan

pengaruhnya, setelahnya pada menit ke-20 sampai menit ke-40 obat diazepam

memperlihatkan pengaruhnya terhadap mencit 2 dengan tertidur, setelah menit ke-45 mencit

terbagun dan menit ke-50 sampai menit k-60 mencit tertidur.

Pada kelompok II dengan pemberian dosis 0,312 mg/cc, pada percobaan ini mencit 1

dosis obat diazepam ternyata tidak memperlihatkan pengaruhnya dari menit ke-5 sampai

menit ke-60, sebaliknya pada mencit 2 pada menit ke-5 sampai menit ke-50 obat diazepam

tidak memperlihatkan efeknya dan setelah menit ke-55 sampai menit ke-60 dosis obat

diazepam baru memperlihatkan pengaruhnya dengan mencit 2 tertidur.

Pada kelompok III dengan dosis 0,625 mg/cc obat diazepam, kelompok ini pada kedua

mencit pada menit ke-50 sampai menit ke-15 pengaruh obat diazepam belum

memperlihatkan pengaruhnya dan setelah dari menit ke-15 sampai menit ke-60 mencit

tertidur karena dosis obat diazepam telah mempengaruhi rangsangan pada mencit terkecuali

pada mencit 1 menit ke-30 mencit terbangun.

Pada kelompok IV dengn dosis 1,25 mg/cc obat diazepam, kedua mencit setelah

pemberian dosis obat diazepam dari menit ke-5 sampai menit ke-60 mencit dominan

memperlihatkan pengaruh dari obat diazepam yang diberkan yaitu mencit tidur. Walaupun

pada mencit 1 menit ke-25, ke-40 dan ke-55 mencit tidak tertidur, pada mencit 2 menit ke-

40 mencit terbangun.

4.3 PEMBAHASAN

Berdasarkan data dari hasil pengamatan, bahwa pengaruh dosis obat diazepam yang

lebih besar dapat memberikan efek yang lebih besar pula, efek yang diberikan pada hewan

percobaan atau mencit tersebut tertidur dan dosis pemberian obat ini pada kelompok IV.

sebaliknya, pada kelompok I dan II dengan dosis yang rendah dapat memberikan sedikit efek

atau pengaruh tertidur dari hewan percobaan atau mencit.

Untuk penghitungan effective dose (ED) pada percobaan ini, dari berbagai perbedaan

dosis dari semua kelompok hampir memberikan lebih dari 50% pengaruh obat diazepam pada

kedua mencit. Pada kelompok ke 2 hanya 1 mencit yang memperlihatkan pengaruhnya,

artinnya dapat disimpulkan kelompok 2 ini memberikan pengaruhnya 50% obat diazepam.

Dari data yang telah diamati, pemberian obat diazepam pada mencit terdapat keganjalan

dikarenakan mencit setelah tidur kembali bangun, data ini bias disebabkan karena pengaruh

dari rangsangan pengamat terhadap mencit terlalu berlebihan atau tidak konsisten dengan

pemberian rangsangan sebelum-sebelumnya dana tau efek dari obat diazepam yang belum

mencapai titik maksimun, sehingga mencit yang awalnya telah tidur menjadi bangun. Hal ini

dapat dilihat dari kelompok 1, 3 dan 4, sedangkan pada kelompok 2 entah kenapa pada mencit

1 tidak memiliki pengaruh tidur dan kebalikan pada mencit ke-2 telah memberikan pengaruh

yaitu pada menit ke-55 dan menit ke-60.

BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

Diazepam termasuk dalam obat golongan Benzodizepine. Golongan obat ini bekerja

pada system saraf pusat. Perbedaan dosis yang digunakan, sangat berpengaruh terhadap efek

yang ditimbulkan oleh suatu obat. Semakin besar dosis obat yang diberikan maka semakin

cepat pula onset of action yang dihasilkan oleh obat tersebut. Namun pada percobaan ini, ada

beberapa variabel penggangu yang merusak data pengamatan sehingga kurang sesuai dengan

konsep onset of action.

BAB VI

DAFTAR PUSTAKA

Bruton, L., Parker, K., Blumenthal, D., and Buxton, I. 2008. Goodman &Gilman: Manual

Farmakologi dan Terapi. Jakarta: EGC.

Deliana, Melda. 2002. Tata Laksana Kejang pada Anak in Sari Pediatri Vol. 4 No.2.

Available at: < http://saripediatri.idai.or.id/pdfile/4-2-4.pdf>

Frederick, Maryland. 2005. Diazepam Autoinjector. Columbia: Meridian Medical

Technologies. Available at:

Katzung, B.G., Masters, S.B., and Trevor, A.J. 2012. Farmakologi Dasar & Klinik, Edisi

12 Volume 1. Jakarta: EGC.

Universitas Indonesia, 2001. Famakologi dan Terapi, edisi 4. Gaya Baru : Jakarta