LAPORAN PRAKTIKUM

ANALISA KANDUNGAN TOTAL LIPID

Oleh:

Golongan D/Kelompok 3A

1. Widya Ramadhanti (161510501063)

2. Karolina Kristika Sudianti (161510501098)

3. Ilham Pratama (161510501293)

LABORATORIUM FISIOLOGI TUMBUHAN

PROGAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS JEMBER

2017

1

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Lipid merupakan senyawa nonopolar yang sifatnya hidrofobik atau tidak

dapat larut didalam air namun senyawa ini dapat larut pada pelarut nonpolar atau

pelarut organik seperti ether, benzena, dan khloroform. Lipid terdapat hampir

diseluruh tubuh mahluk hidup, hal ini karena lipid merupakan komponen

struktural membran sel, tidak hanya itu lipid juga berperan sebagai cadangan

sumber energi dan komponen hormon. Umbuhan memiliki kandungan lipid pada

tiap tiap bagian tubuhnya mulai dari akar hingga daun namun dengan jumlah yang

bervariasi.

Umumnya lipid banyak terdapat pada organ tumbuhan yang yang

memiliki kandungan karbohoidart tinggi seperti pada bagian biji. Biji yang

memeiliki kandungan karbohidrat yang tinggi umumnya berupa biji untuk

konsumsi seperti jagung, padi dan gandum, hal ini dikarenakan lemak dapat

disintesis dari karbohidrat dan protein. Sintesis lemak dari karbohidrat dimulai

saat glukosa diuraikan menjadi asam piruvat yang sebagian akan diubah menjadi

gliserol dan sebagiannya lagi akan diubah menjadi asetil KoA yang kemudian

diubah menjadi asam lemak. Dari kedua bahan tersebut yaitu gliserol dan asam

lemak maka akan terbentuk lipid.

Praktikum kali ini dilakukan untuk penganalisaan terhadap kandungan

lipid pada beras browrice dangan cara mengekstraksi lipid. Brown rice merupakan

beras yang diberi perlakuan hanya dangan menghilangkan sekam tanpa adanya

proses poles sehingga beras nampak berwarna coklat, berbeda dengan beras

biasanya yang melewati proses pengpolesan sehingga beras tersebut akan

menjadi beras yang berwarna putih. Brown rice tidak banyak dikonsumsi orang

dikarenakan rasanya tidak begitu enak dan tergolong pahit karena masih terdapat

sisa-sisa sekam tersebut.

Cara mngetahui kandungan lipid pada beras coklat (brown rice) dapat

dilakukan dengan menggunakan metode Bligh-Dyer Method. Metode ini

digunakan berdasarkan sumber bahan yang akan dianalisi kandungan lipidnya,

2

selain itu penggunaan metode ini juga harus memperhatikan beberapa kondisi

bahan seperti struktur, tekstur dan sensitivitasnya. Praktikum kali ini dilaksanakan

untuk mengetahui persentasi jumlah lipid yang terkandung pada biji brown rice

dan milk rice.

1.2 Tujuan Praktikum

Mengetahui persentase kandungan total lipid pada sampel menggunakan

metode Bligh Dyer Method.

3

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

Menurut Sahriawati dan Daud (2016), lipid merupakan senyawa organik

yang tidak dapat larut dalam air dan dapat larut pada pelarut organk nonpolar,

seperti aseton, alkohol, eter, benzena, dan klorofom. Lipid merupakan senyawa

non polar yang tersusun atas rantai hidrokarbon panjang berantai lurus, bercabang,

dan dapat pula membentuk struktur siklis. Lipid mempunyai peran yaitu penyusun

membran yang berperan untuk proses metabolisme, melindungi organ, penghasil

panas, sumber asam lemak esensial dan juga dapat berperan untuk melarutkan

beberapa vitamin antara lain vitamin A, D, E, dan K.

Lipid yang terdapat di alam ester dari asam lemak berantai panjang (C12 –

C14) dan gliserol yang dinamakan trigliserida. Trigliserida yang ditemukan dapat

berwujud cair maupun padat, hal ini tergantung pada asam lemak yang

mennyusunnya. Trigliserida dalam bentuk cair yang berada pada suhu ruangan

(27-30oC). Minyak merupakan trigliserida yang kaya akan asam lemak tidak jenuh

seperti asam linoleat dan asam oleat. Sedangkan lemak merupakan trigliserida

yang kaya akan asam lemak jenuh seperti asam palmitat dan asam stearat (Yang et

al, 2014).

Lipid terdiri atas lipid sederhana, lipid majemuk dan turunan lipid. Lipid

sederhana merupakan lipid yang disusun oleh trigliserida, yaitu tiga asam lemak

dan satu gliserol. Lipid majemuk merupakan lemak yang terdiri atas dan gugus

tambahan lain selain lemak, contohnya yaitu glikolipid dan fosfolipid. Turunan

lipid merupakan senyawa lemak yang dihasilkan dari proses hirolisis lipid,

contohnya yaitu kolesterol dan steroid. Lipid dapat diubah menjadi asam lemak

dan gliserol dengan bantuan enzim lipase, begitu juga sebaliknya lipase dapat

meyatukan asam lemak dan gliserol menjadi lipid (Herliani dkk., 2014).

Lipid pada tumbuhan terdapat pada membran kloroplas dimana reaksi

cahaya fotosintesis berlangsung. Lipid pada membran kloroplas sebagian besar

mengandung galaktolipid. Membran di luar plastida juga mengandung lipid. Lipid

pada membran di luar plastida sebagian besar terdiri atas campuran fosfolipid.

4

Pada tumbuhan juga terdapat triasigliserol. Triasigliserol sebagian besar bersifat

hidrofobik (tidak suka air).

Menurut Beisson et al (2013)., biosintesis lipid pada umumnya melibatkan

reaksi enzimatik. Tempat utama pembentukan gilesrolipid yaitu pada Retikulum

Endoplasma (RE) dan plastid. Hampir semua rantai asil yang membentuk inti

pada membran tanaman pertama kali diproduksi oleh asam lemak di plastid.

Biosintesis asam lemak penting karena berperan dalam suplai energi dalam bentuk

lemak. Tahapan biosintesi ada tiga yaitu mensintesis palmitat dari asetil-CoA,

pemanjangan rantai palmitat, dan pembuatan ikatan rangkap (desaturasi).

Lipid berdasarkan struktur dibagi menjadi dua yaitu lemak jenuh

(saturated fat) dan lemak tidak jenuh (unsaturated fat). Lemak jenuh yaitu lemak

dengan hidrokarbon ikatan. Lemak jenuh mempunyai jumlah jumlah atom C

genap dari C2 sampai C30 dan dalam bentuk bebas atau ester dengan gliserol.

Lemak jenuh sebagian besar berasal dari hewan, seperti daging, susu murni, dan

lain-lain. Contoh lemak jenuh yaitu asam laurat, asam palmitat, asam stearate

Lemak tidak jenuh (unsaturated fat) merupakan truktur lemak dengan

hidrokarbon yang mempunyai satu atau lebih ikatan rangkap (ganda). Contoh

lemak tidak jenuh yaitu asam oleat, asam linoleat, dan asam linolenat. Lemak

tidak jenuh sebagian besar berasal dari tumbuhan, seperti lemak dari buah alpukat

dan kacang-kacangan (Lakitan, 2015).

Menurut Braeil et al (2017), ekstraksi lipid bertujuan untuk memisahkan

lipid dari senyawa kompek lainnya seperti karbohidrat dan protein serta

komponen lain seperti asam amino dan mineral, selain itu ekstraksi lipid bertujuan

untuk menjaga lipid tidak rusak dalam proses isolasi dan sebelum analisis. Metode

yang dapat digunakan untuk ekstraksi lipid yaitu Blight dyer Method. Blight dyer

Method merupakan metode ekstraksi dan pemisahan lipid dari jaringan biologis

menggunakan kloroform, metanol serta air. Blight dyer Method terduri atas

beberapa tahapan dalam proses ekstraksi. Tahap terakhir yaitu menguapkan

lapisan klorofom sehingga dapat diperoleh lipid (Junaidi dkk., 2014).

5

BAB 3. METODE PRAKTIKUM

3.1 Waktu dan Tempat

Praktikum Agrobiosains acara “Analisa Kandungan Total Lipid”

dilaksanakan pada hari Sabtu tanggal 4 November 2017 pada pukul 12.30-14.00

WIB bertempat di Laboratorium Fisiologi Tumbuhan Fakultas Pertanian,

Universitas Jember.

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1 Alat

1. Tabung reaksi

2. Timbangan

3. Pipet

4. Mesin

5. Blender

6. Kertas

3.2.2 Bahan

1. Brown rice

2. Milk rice

3. Chlorofom

4. Methanol

5. Aquadest

3.3 Pelaksanaan Praktikum

1. Mengupas benih padi JRG

2. Mengupas benih brown rice menjadi milk rice untuk perlakuan yang

menggunakan benih milk rice.

3. Menghaluskan benih menggunakan blender.

4. Menimbang benih yang telah menjadi tepung sebanyak 3 gram.

5. Memasukkan ke dalam tabung reaksi tanpa tutup.

6

6. Menambahkan campuran methanol , klorofom sebanyak 5 ml. Memvortex

hingga tercampur.

7. Mendiamkan selama 5 menit, dan mengambil cairan yang terdapat pada

bagian atas.

8. Memasukkan cairan tersebut dalam tabung reaksi yang memiliki tutup.

9. Menambahkan 2 ml chlorofom dan 3 ml aquadest dalam tabung reaksi, lalu

mendiamkan hingga terdapat 2 layer.

10. Mengambil larutan non polar dan meletakkannya pada alumunium foil hingga

kering

11. Mengitung persentase kandungan lipid yang ditemukan.

3.4 Variabel Pengamatan

Variabel pengamatan yang diamati pada praktikum kali ini adalah

kandungan lipid yang terdapat dalam beras dengan perlakuan menggunakan

brown rice dan milk rice

3.5 Analisis Data

Analisis data yang dilakukan menggunakan analisis statistik deskriptif.

7

BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

4.1 Brown Rice

Grafik 1. Kandungan lipid pada brown rice

Kandungan lipid pada brown rice berbeda-beda. Kandungan lipid terbesar

yaitu senilai 0,67% pada kelompok 3. Kandungan lipid pada kelompok 1 sebesar -

2%. Kandungan lipid terendah terdapat pada kelompok 2 yaitu sebesar -3,67%.

4.2 Milk Rice

Grafik 2. Kandungan lipid pada milk rice

Kandungan lipid pada milk rice berbeda-beda. Kandungan lipid terbesar

yaitu senilai 0,33% pada kelompok 6. Kandungan lipid pada kelompok 2 sebesar -

3.67%. Kandungan lipid terendah terdapat pada kelompok 1 yaitu sebesar -4%.

-4

-3

-2

-1

0

1

Kelompok 1 Kelompok 2 Kelompok 3

Grafik Kandungan Lipid pada Brown Rice

-5

-4

-3

-2

-1

0

1

Kelompok 4 Kelompok 5 Kelompok 6

Grafik Kandungan Lipid pada Milk Rice

Series 1

8

4.2 Pembahasan

Metode yang digunakan dalam ekstraksi lipid yaitu Blight dyer Method.

Blight dyer Method merupakan metode ekstraksi dan pemisahan lipid dari

jaringan biologis menggunakan kloroform, metanol serta air. Ekstraksi dengan

Blight dyer Method dilakukan dengan dua perlakuam yaitu pada brown rice dan

milk rice dan proses ekstraksinnya terdiri atas beberapa tahapan.

Tahap pertama menyiapkan biji brown rice dan milk rice. Biji milik rice

harus dikupas terlebih dahulu sebelum dihaluskan sampai menjadi bubuk

sedangkan brown rice langsung dihaluskan sampaikan menjadi bubuk. Tahap

selanjutnya yaitu menimbang bubuk tersebut sampai 3 gram. Bubuk yang telah

ditimbang sebanyak 3 gram selanjutnya dimasukkan ke dalam tabung rekasi

dengan menambahkan klorofom dan methanol sebanyak 5 ml dengan

perbandingan 1:2. Tahap selanjutnya yaitu mengocok sampai homogen dan

mendiamkan selama 5 menit, setelah itu akan terbentuk dua lapisan, lapisan

bagian atas dinamakan supernatant dan bagian bawah dinamakan pellet. Bagian

supernatant dari lapisan tersebut diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi

baru yang ada tutupnya. Tahap selanjutnya yaitu menambahkan klorofom (2 ml)

dan aquadest (3 ml). selanjutnya akan terbentuk dua lapisan lagi. Bagian yang

diambil yaitu bagian yang bawah (nonpolar). Tahap selanjutnya yaitu

meletakkannya pada alumunium foil dan menghitung kandungan lipid.

Kandungan lipid dapat diketahui dengan rumus:

Brown rice F =

×100 % =

×100 %

= 0,0067 × 100 % = 0,67%

Milk rice F =

×100 % =

×100 %

= 0,0033 × 100 % = 0,33%

Berdasarkan pengamatan yang telah dilakukan dapat diketahui bahwa

kandungan lipid pada brown rice lebih banyak dibandingkan dengan pada milk

rice. Kandungan lipid pada brown rice sebesar 0,67% dan kandungan lipid pada

milk rice sebesar 0,33%. Perbedaan kandungan lipid pada brown rice dan milk

9

rice yang berbeda dipengaruhi oleh beberapa faktor. Brown rice merupakan beras

yang dilakukan satu kali proses penggilingan yang dihilangkan hanya bagian

lapisan terluar (sekam) sedangkan kulit ari-nya (kulit terluar beras) masih utuh.

Brown rice mengandung pigmen antosianin yang tinggi sehingga brown rice

berwarna hitam (juga dikenal sebagai ungu), coklat dan merah (Pengkumsri et al,

2015). Milk rice merupakan beras yang proses penggilingannya dilakukan berkali-

kali dan hasilnya adalah beras yang berwarna putih. Pada brown rice dan milk rice

terdapat karbohidrat, protein, dan lemak yang membedakan adalah kandungan

nutrisi pada brown rice dan milk rice. Pada brown rice kandungan karbohidrat,

protein dan lemak lebih banyak dibandingan dengan milk rice karena pada brown

rice hanya terjadi satu kali proses penggilingan dan kulit ari masih utuh, berbeda

dengan milk rice yang terjadi proses penggilingan yang berkali-kali sehingga

kandungan nutrisi pada beras akan hilang bersama dengan proses penggilingan.

Kandungan lemak pada beras juga akan mempengaruhi tingkat kepunelan pada

beras itu sendiri.

10

BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

1. Kandungan lipid pada brown rice sebesar 0,67%.

2. Kandungan lipid pada milk rice sebesar 0,33%.

3. Kandungan lipid pada brown rice lebih banyak dibandingkan dengan milk rice

karena pada brown rice hanya dilakukan satu kali proses penggilingan dan

masih meninggalkan kulit ari, sedangkan pada milk rice dilakukan

penggilingan secara berkali-kali sehingga kulit arinya hilang.

5.2 Saran

Praktikum acaara “Analisa Kandungan Total Lipid” sudah berjalan dengan

tertib, saran untuk praktikum yaitu seharusnya dalam satu kali praktikum tidak

dilakukan praktikum dua acara karena waktu praktikum tidak mencukupi dan

mengakibatkan waktu praktikum menjadi mundur.

11

DAFTAR PUSTAKA

Beisson, Y.L., B. Shorrosh, F. Beisson, M.X. Andersson, V.Arondel, P.D. Bates,

S. Baud, D. Bird, A. D. Bono, T. P. Durrett, R. B. Franke, I.A. Graham, K.

Katayama, A.A. Kelly, T. Larson, J. E. Markham, M. Miquel, I. Molina, I.

Nishida, O. Rowland, L. Samuels, K.M. Schmid, H. Wada, R. Welti, C.

Xu, R. Zallot, and J. Ohlrogge. 2013. Acyl-Lipid Metabolism. The

Arabidopsis Book, 11(1): 1-57

Braeil, C., M.A. Vian, T. Zemb, W. Kunz, and F. Chemat. 2017. “Bligh and

Dyer” and Folch Methods for Solid–Liquid–Liquid Extraction of Lipids

from Microorganisms. Comprehension of Solvatation Mechanisms and

towards Substitution with Alternative Solvents. Molecular Science, 18(4):

1-21.

Herliani, A. Sulaiman, dan Z. Rahman. 2014. Kualitas Nutrisi Dan Fisik Dedak

Padi Yang Difermentasi Dengan Menggunakan Ragi Tape Sebagai Bahan

Pakan Itik Alabio. Agroscientiae, 21(1): 37-41.

Junaidi, A,B., Zulfikurrahman, Abdulah, dan Gunawan. 2014. Ekstraksi Lipid

Dari Biomassa Synechococcus sp. dengan Metode Osmotic Shock. Sains

dan Terapan Kimia, 8(2): 94-102.

Lakitan, B. 2015. Dasar-Dasar Fisiolofi Tumbuhan. Jakarta: Rajawali Pers.

Pengkumsri, N., C. Chaiyasut, C. Saenjum, S. Sirilun, S. Peerajan, P.

Suwannalert, S. Sirisattha, and B. S. Sivamaruthi. 2015. Physicochemical

and antioxidative properties of black, brown and red rice varieties of

northern Thailand. Food Science and Technology, 35(2): 331-338.

Sahriawati dan Daud, A. 2016. Optimasi Proses Ekstraksi Minyak Ikan Metode

Soxhletasi Dengan Variasi Jenis Pelarut Dan Suhu Berbeda. Galung

Tropika, 5(3): 164-170.

Yang, F., W. Xiang, X. Sun, H. Wu, T. Li, and L. Long. 2014. A Novel Lipid

Extraction Method from Wet Microalga Picochlorum sp. at Room

Temperature. Marine Drugs, 12(3): 1258-1270.

12

LAMPIRAN

13

14

15

DOKUMENTASI

Penyortiran biji browrice

Penghalusan biji browrice

16

Menimbang browrice yang telah halus sebanyak 10 gram

Membri larutan clorofom metanol 1:2 pada browrice

17

Kemudian menvortexnya

Menambahkan larutan aquades

18

Vortex kembali kemudian tunggu hingga seperti gambar

Mengambil endpan yang berada dibawah dengan pipet

19

Hasil endapan yang diletakan di alumuniu foil

20

LITERATUR

Sahriawati dan Daud, A. 2016. Optimasi Proses Ekstraksi Minyak Ikan Metode

Soxhletasi Dengan Variasi Jenis Pelarut Dan Suhu Berbeda. Galung

Tropika, 5(3): 164-170.

21

Braeil, C., M.A. Vian, T. Zemb, W. Kunz, and F. Chemat. 2017. “Bligh and

Dyer” and Folch Methods for Solid–Liquid–Liquid Extraction of Lipids

from Microorganisms. Comprehension of Solvatation Mechanisms and

towards Substitution with Alternative Solvents. Molecular Science, 18(4):

1-21.

22

Herliani, A. Sulaiman, dan Z. Rahman. 2014. Kualitas Nutrisi Dan Fisik Dedak

Padi Yang Difermentasi Dengan Menggunakan Ragi Tape Sebagai Bahan

Pakan Itik Alabio. Agroscientiae, 21(1): 37-41.

23

Beisson, Y.L., B. Shorrosh, F. Beisson, M.X. Andersson, V.Arondel, P.D. Bates,

S. Baud, D. Bird, A. D. Bono, T. P. Durrett, R. B. Franke, I.A. Graham, K.

Katayama, A.A. Kelly, T. Larson, J. E. Markham, M. Miquel, I. Molina, I.

Nishida, O. Rowland, L. Samuels, K.M. Schmid, H. Wada, R. Welti, C.

Xu, R. Zallot, and J. Ohlrogge. 2013. Acyl-Lipid Metabolism. The

Arabidopsis Book, 11(1): 1-57.

24

Junaidi, A,B., Zulfikurrahman, Abdulah, dan Gunawan. 2014. Ekstraksi Lipid

Dari Biomassa Synechococcus sp. dengan Metode Osmotic Shock. Sains

dan Terapan Kimia, 8(2): 94-102.

25

Yang, F., W. Xiang, X. Sun, H. Wu, T. Li, and L. Long. 2014. A Novel Lipid

Extraction Method from Wet Microalga Picochlorum sp. at Room

Temperature. Marine Drugs, 12(3): 1258-1270.

26

Lakitan, B. 2015. Dasar-Dasar Fisiolofi Tumbuhan. Jakarta: Rajawali Pers.

27

Pengkumsri, N., C. Chaiyasut, C. Saenjum, S. Sirilun, S. Peerajan, P.

Suwannalert, S. Sirisattha, and B. S. Sivamaruthi. 2015. Physicochemical

and antioxidative properties of black, brown and red rice varieties of

northern Thailand. Food Science and Technology, 35(2): 331-338.