73

LAMPIRAN

74

Lampiran 1. Analisis Mikrobiologi

1. Cara perhitungan jumlah bakteri probiotik dengan metode TPC (Total Plate

Count) (Bacteriological Analytical Manual, 2001)

1) Sampel dari masing-masing suhu sebanyak 1 mL dilakukan pengenceeran

10-1 dengan 9 mL NaCl fisiologi 0,85% secara aseptis dalam tabung reaksi

2) Pengenceran dilakukan hingga diperoleh tingkat pengenceran sesuai

kebutuhan

3) Dari hasil pengenceran 3 terakhir, masing-masing diambil 1 mL dan

dimasukkan ke dalam cawan petri steril, dilakukan duplo.

4) Cawan petri kemudian ditambahkan media MRSA + asam asetat glasial

98% (pH mencapai 3,0), lalu cawan diputar membentuk angka 8 sehingga

sampel dan media tercampur merata.

5) Diamkan hingga agar menjadi padat.

6) Cawan petri kemudian diinkubasi dengan posisi terbalik di dalam

inkubator pada suhu 37oC selama 48 jam.

7) Untuk perhitungan, hanya dipilih cawan yang memiliki koloni 25 – 250

koloni dan dihitung dengan persamaan sebagai berikut

𝑁 = ∑𝐶

[(1 𝑥 𝑛1) + (0,1 𝑥 𝑛2)] 𝑥 𝑑

Keterangan:

N = jumlah koloni per mL/gram

∑𝐶 = jumlah total koloni dari semua cawan yang dihitung

n1 = jumlah cawan pada pengenceran pertama

n2 = jumlah cawan pada pengenceran kedua

75

d = tingkat pengenceran dari cawan yang pertama dihitung

2. Cara perhitungan jumlah bakteri asam laktat dengan metode TPC (Total Plate

Count) (Bacteriological Analytical Manual, 2001)

1) Sampel dari masing-masing suhu sebanyak 1 mL dilakukan pengenceeran

10-1 dengan 9 mL NaCl fisiologi 0,85% secara aseptis dalam tabung reaksi

2) Pengenceran dilakukan hingga diperoleh tingkat pengenceran sesuai

kebutuhan

3) Dari hasil pengenceran 3 terakhir, masing-masing diambil 1 mL dan

dimasukkan ke dalam cawan petri steril, dilakukan duplo.

4) Cawan petri kemudian ditambahkan media MRSA, lalu cawan diputar

membentuk angka 8 sehingga sampel dan media tercampur merata.

5) Diamkan hingga agar menjadi padat.

6) Cawan petri kemudian diinkubasi dengan posisi terbalik di dalam

inkubator pada suhu 37oC selama 48 jam.

7) Untuk perhitungan, hanya dipilih cawan yang memiliki koloni 25 – 250

koloni dan dihitung dengan persamaan sebagai berikut

𝑁 = ∑𝐶

[(1 𝑥 𝑛1) + (0,1 𝑥 𝑛2)] 𝑥 𝑑

Keterangan:

N = jumlah koloni per mL/gram

∑𝐶 = jumlah total koloni dari semua cawan yang dihitung

n1 = jumlah cawan pada pengenceran pertama

76

n2 = jumlah cawan pada pengenceran kedua

d = tingkat pengenceran dari cawan yang pertama dihitung

77

Lampiran 2. Analisis Fisiko-Kimia

1. Pengukuran pH dengan pH meter (SNI 06-6989.11-2004).

Persiapan Bahan (Kalibrasi)

1) Larutan penyangga (buffer): larutan penyangga 4, 7, dan 10 yang siap

pakai dan tersedia dipasaran, atau dapat dibuat dengan cara:

a. Larutan penyangga pH 4,004 (25oC): timbangkan 10,12 gram kalium

hidrogen ptalat, KHC8H4O4, larutkan dalam 1000 mL air suling.

b. Larutan penyangga pH 6,863 (25oC): timbangkan 3,387 gram kalium

dihidrogen fosfat, KH2PO4 dan 3,533 gram dinatrium hidrogen fosfat,

Na2HPO4, larutkan dalam 1000 mL air suling.

c. Larutan penyangga pH 10,014 (25oC): timbangkan 2,092 gram natrium

hidrogen karbonat, NaHCO3 dan 2,640 gram natrium karbonat Na2CO3,

larutkan dalam air suling.

Prosedur

1) Elektroda dibilas dengan air suling lalu dikeringkan dengan tisu.

2) Celupkan elektroda pada pH 4, 7, dan 10 untuk kalibrasi yang masing-

masingnya telah dibilas pada bagian elektroda saat berganti pH dan

dikeringkan dengan tisu.

3) Celupkan elektroda pada contoh uji hingga pH meter menunjukkan angka

yang tepat.

4) Catat hasil pembacaan pada pH meter.

78

Lampiran 3. Analisis Fisik

1. Pengukuran kekentalan menggunakan viscometer (Sutedjo dan Nisa, 2015)

1) Spindle dipasang pada poros, perhatikan ulir spindle ke kiri.

2) Spindle dimasukkan ke dalam sampel yang diuji hingga batas lekukan

yang terdapat pada batang spindel. Pastikan spindle tidak menyentuh

wadah sampel.

3) Nomor spindle dimasukkan sesuai dengan spindle yang akan digunakan.

4) Kecepatan diatur sesuai yang akan digunakan.

5) Mencatat nilai yang ditunjukkan pada layar.

79

Lampiran 4. Data Hasil Pengamatan Terhadap Bakteri Probiotik pada Bibit,

Suspensi, dan Kultur Freeze Dried Bifidobactrium bifidum.

Tabel 19. Data Perhitungan Bakteri Probiotik pada Bibit, Suspensi, dan

Freeze Dried

Sumber 10-8 10-9 10-10 10-11 10-12 TPC

(CFU/mL)

Bibit 124 35 14

2,0 x 1012 248 33 20

Suspensi TBUD 100 5

1,9 x 1010

38 86 2

Freeze

Dried

28 92 19 1,6 x 1010

186 36 31

Viabilitas=𝑇𝑃𝑉 𝑘𝑢𝑙𝑡𝑢𝑟 𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔

𝑇𝑃𝐶 𝑠𝑢𝑠𝑝𝑒𝑛𝑠𝑖× 100%

Viabilitas=1,6×1010

1,9×1010 × 100% = 0,895 × 100% = 84,2%

80

Lampiran 5. Data Hasil Pengamatan Minuman Sinbiotik Tepung Sorgum

pada Parameter Total Mikroorganisme, pH, dan Viskositas pada Berbagai

Suhu Penyimpanan.

Tabel 20. Total Bakteri Probiotik Minuman Sinbiotik Tepung Sorgum pada

Berbagai Suhu Penyimpanan.

Suhu

(oC)

Waktu

(jam) 10

-6 10

-7 10

-8 10

-9 Hasil TPC

(CFU/mL) Log CFU/mL

15±3

0 TBUD 287 33

2,4 x 1010 10,4 TBUD 235 24

24 TBUD TBUD 61

1,2 X 1010 10,1 255 74 12

48 278 TBUD 55

2,8 x 109 9,4 225 88 14

72 65 32 11

8,6 x 108 8,9 83 12 2

96 25 26 0

5,1 x 108 8,7 57 13 0

120 58 2 0

7,7 x 10 7 7,9 21 27 0

25±3

0 TBUD TBUD 11

2,4 x 1010 10,4 TBUD 236 28

2 TBUD 15 2

2,0 x 1010 10,3 TBUD 202 0

4 234 250 209

4,4 x 109 9,6 232 245 144

6 247 193 54

3,9 x 109 9,6 222 185 14

10 TBUD 213 135

3,9 x 108 8,6 146 104 66

24 29 6 0

2,8 x 107 7,4 26 4 0

35±3

0 TBUD 243 73

2,6 X 1010 10,4 TBUD 187 64

2 TBUD 187 43

2,1 x 1010 10,3 TBUD TBUD TBUD

4 TBUD 30 88

1,7 x 1010 10,2 TBUD 224 32

6 210 190 4

4,7 x 109 9,7 TBUD 160 86

10 233 141 70

3,6 x 108 8,6 218 192 142

24 26 25 11

4,0 x 107 7,6 33 19 8

81

Tabel 21. Total Bakteri Asam Laktat Minuman Sinbiotik Tepung Sorgum

pada Berbagai Suhu Penyimpanan.

Suhu

(oC)

Waktu

(jam) 10

-7 10

-8 10

-9 10

-10 Hasil TPC

(CFU/mL)

Log CFU/mL

15±3

0 TBUD 250 95

5,5 X 1010 10,7

244 209 76

24 TBUD 222 50

5,4 X 1010 10,7

239 189 21

48 242 121 64

3,1 X 1010 10,5

239 83 21

72 55 22 20

1,6 X 1010 10,2

164 125 34

96 35 26 15

8,7 X 109 9,9

90 40 24

120 TBUD 129 45

2,8 X 109 9,4

170 40 27

25±3

0 221 212 60

4,8 X 1010 10,7

TBUD 147 62

2 TBUD 160 45

4,6 X 1010 10,7

242 147 18

4 200 131 60

2,9 X 1010 10,4

250 60 3

6 115 130 2

2,8 x 1010 10,4

231 137 68

10 100 137 11

3,0 X 1010 10,5

247 180 9

24 173 129 10

2,2 X 109 9,3

112 70 30

35±3

0 TBUD 179 74

2,3 X 1011 11,4

TBUD TBUD 80

2 TBUD 212 51

2,2 X 1011 11,3

TBUD 172 55

4 TBUD 115 29

2,0 X 1011 11,3

TBUD 221 70

6 TBUD 160 57

3,9 X 1010 10,6

174 133 TBUD

10 201 TBUD 90

2,2 X 1010 10,3

236 TBUD 53

24 TBUD 154 61

4,6 X 109 9,7

207 196 59

Contoh perhitungan TPC metode BAM (suhu 15±3oC jam ke-0):

Jumlah mikroba= (244+250+209)

[(1×1)+(0,1×2)]×10−8 = 5,6 × 1010CFU/mL

82

Tabel 22. Nilai pH Minuman Sinbiotik Tepung Sorgum pada Berbagai Suhu

Penyimpanan.

Suhu Waktu (jam) Nilai pH

15±3oC

0 6,4

24 6,4

48 6,3

72 6,2

96 5,3

120 4,7

25±3oC

0 6,4

2 6,4

4 6,3

6 6,3

10 6,3

24 4,5

35±3oC

0 6,5

2 6,4

4 6,4

6 6,3

10 6,1

24 4,3

Tabel 23. Nilai Viskositas Minuman Sinbiotik Tepung Sorgum pada

Berbagai Suhu Penyimpanan.

Suhu Waktu Nilai Viskositas (mPas) Rata-rata

(mPas) 1 2

15±3oC

0 29 33 31

24 31 39 35

48 35 37 36

72 43 43 43

96 53 47 50

120 56 58 57

25±3oC

0 26 20 23

2 26 24 25

4 28 24 26

6 26 28 27

10 27 33 30

24 47 43 45

35±3oC

0 35 31 33

2 38 40 39

4 55 53 54

6 65 55 60

10 59 65 62

24 80 82 81

83

Lampiran 6. Perubahan Kualittas Minuman Sinbiotik Tepung Sorgum

dengan Metode ASLT Model Arrhenius.

Tabel 24. Pemilihan Ordo Reaksi

No. Parameter Suhu Waktu

(jam) Hasil (C) Ln C

R

Ordo 0

R

Ordo 1

Ordo

Terpilih

1 Probiotik

15oC

0 2,4 x 1010 23,86

0,77 0,98

1

24 1,2 x 1010 23,21

48 2,8 x 109 21,92

72 8,6 x 108 20,57

96 5,1 x 108 20,05

120 7,7 x 10 7 18,16

25oC

0 2,4 x 1010 23,90

0,59 0,95

2 2,0 x 1010 23,72

4 4,4 x 109 22,33

6 3,9 x 109 22,13

10 3,9 x 108 20,11

24 2,8 x 107 17,15

35oC

0 2,6 x 1010 23,98

0,62 0,92

2 2,1 x 1010 23,77

4 1,7 x 1010 23,56

6 4,7 x 109 22,39

10 3,6 x 108 19,92

24 4,0 x 107 17,50

2

Bakteri

Asam

Laktat

15oC

0 5,5 X 1010 24,75

0,94 0,94

1

24 5,4 X 1010 24,78

48 3,1 X 1010 24,25

72 1,6 X 1010 23,61

96 8,7 X 109 22,89

120 2,8 X 109 21,95

25oC

0 4,8 X 1010 24,78

0,82 0,91

2 4,6 X 1010 24,62

4 2,9 X 1010 24,19

6 2,8 X 1010 24,16

10 3,0 X 1010 24,12

24 2,2 X 109 21,56

35oC

0 2,3 X 1011 26,16

0,62 0,90

2 2,2 X 1011 26,12

4 2,0 X 1011 26,02

6 3,9 X 1010 24,48

10 2,2 X 1010 24,09

24 4,6 X 109 22,43

3 pH 15oC

0 6,4 1,86

0,79 0,78 0 24 6,4 1,86

48 6,3 1,84

84

No. Parameter Suhu Waktu

(jam) Hasil (C) Ln C

R

Ordo 0

R

Ordo 1

Ordo

Terpilih

72 6,2 1,82

96 5,3 1,67

120 4,7 1,55

25oC

0 6,4 1,86

0,88 0,87

2 6,4 1,86

4 6,3 1,84

6 6,3 1,84

10 6,3 1,84

24 4,5 1,50

35oC

0 6,5 1,87

0,94 0,93

2 6,4 1,86

4 6,4 1,86

6 6,3 1,84

10 6,1 1,81

24 4,3 1,46

4 Viskositas

15oC

0 31 3,43

0,95 0,97

1

24 35 3,56

48 36 3,58

72 43 3,76

96 50 3,91

120 57 4,04

25oC

0 23 3,14

0,99 0,997

2 25 3,22

4 26 3,26

6 27 3,30

10 30 3,40

24 45 3,81

35oC

0 33 3,50

0,86 0,75

2 39 3,66

4 54 3,99

6 60 4,09

10 62 4,13

24 81 4,39

85

Gambar 16. Grafik Pengaruh Lama Penyimpanan terhadap Total Bakteri

Probiotik Pada Ordo 0 dan Ordo 1 Penyimpanan Suhu 15oC, 25oC, 35oC.

y = -2E+08x + 2E+10

R² = 0.778

-1E+10

-5E+09

0

5E+09

1E+10

1.5E+10

2E+10

2.5E+10

0 24 48 72 96120

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

Probiotik Suhu 15oC Ordo 0

Suhu15°COrdo 0

Linear(Suhu15°COrdo 0)

y = -0.0468x + 24.104

R² = 0.9803

0

5

10

15

20

25

30

0 24 48 72 96 120

Ln

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

Probiotik Suhu 15oC Ordo 1

Suhu15°COrdo 1

Linear(Suhu15°COrdo 1)

y = -8E+08x + 2E+10

R² = 0.5042

-1E+10

-5E+09

0

5E+09

1E+10

1.5E+10

2E+10

2.5E+10

3E+10

024681012141618202224

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

Probiotik Suhu 25 oC Ordo 0

Suhu

25°COrdo 0

Linear(Suhu25°COrdo 0)

y = -0.2883x + 23.767

R² = 0.967

0

5

10

15

20

25

30

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

Probiotik Suhu 25 oC Ordo 1

Suhu

25°COrdo 1

Linear(Suhu25°COrdo 1)

y = -1E+09x + 2E+10

R² = 0.6368

-1E+10

-5E+09

0

5E+09

1E+10

1.5E+10

2E+10

2.5E+10

3E+10

024681012141618202224

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

Probiotik Suhu 35oC Ordo 0

Suhu35°COrdo 0

Linear(Suhu35°COrdo 0)

y = -0.2898x + 24.075

R² = 0.9347

0

5

10

15

20

25

30

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

Probiotik Suhu 35 oC Ordo 1

Suhu35°COrdo 1

Linear(Suhu35°COrdo 1)

86

Gambar 17. Grafik Pengaruh Lama Penyimpanan terhadap Total Bakteri

Asam Laktat Pada Ordo 0 dan Ordo 1 Penyimpanan Suhu 15oC, 25oC, 35oC.

y = -5E+08x + 6E+10

R² = 0.9363

-1E+10

0

1E+10

2E+10

3E+10

4E+10

5E+10

6E+10

7E+10

0 24 48 72 96120

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

BAL Suhu 15oC Ordo 0

Suhu15°COrdo 0

Linear(Suhu15°COrdo 0)

y = -0.0242x + 25.156

R² = 0.9357

20

21

22

23

24

25

26

0 24 48 72 96 120

Ln

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

BAL Suhu 15oC Ordo 1

Suhu15°COrdo 1

Linear(Suhu15°COrdo 1)

y = -2E+09x + 5E+10

R² = 0.8828

-1E+10

0

1E+10

2E+10

3E+10

4E+10

5E+10

6E+10

7E+10

024681012141618202224

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

BAL Suhu 25oC Ordo 0

Suhu25°COrdo 0

Linear(Suhu25°COrdo 0)

y = -0.1319x + 24.916

R² = 0.9469

0

5

10

15

20

25

30

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

BAL Suhu 25oC Ordo 1

Suhu25°COrdo 1

Linear(Suhu25°COrdo 1)

y = -1E+10x + 2E+11

R² = 0.6319

-5E+10

0

5E+10

1E+11

1.5E+11

2E+11

2.5E+11

024681012141618202224

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

BAL Suhu 35oC Ordo 0

Suhu35°COrdo 0

Linear(Suhu35°C

Ordo 0)

y = -0.1653x + 26.146

R² = 0.9084

20

21

22

23

24

25

26

27

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

C (

CF

U/m

l)

waktu (jam)

BAL Suhu 35oC Ordo 1

Suhu35°COrdo 1

Linear(Suhu35°C

Ordo 1)

87

Gambar 18. Grafik Pengaruh Lama Penyimpanan terhadap Nilai pH Pada

Ordo 0 dan Ordo 1 Penyimpanan Suhu 15oC, 25oC, 35oC.

y = -0.0142x + 6.7333

R² = 0.7939

0

1

2

3

4

5

6

7

8

0 24 48 72 96 120

pH

waktu (jam)

pH Suhu 15oC Ordo 0

Suhu 15Ordo 0

Linear(Suhu 15Ordo 0)

y = -0.0025x + 1.9195

R² = 0.7985

0

0.5

1

1.5

2

2.5

0 24 48 72 96 120

Ln

pH

waktu (jam)

pH Suhu 15oC Ordo 1

Suhu15°COrdo 1

Linear(Suhu15°COrdo 1)

y = -0.081x + 6.6545

R² = 0.8788

0

1

2

3

4

5

6

7

0 2 4 6 81012141618202224

pH

waktu (jam)

pH Suhu 25oC Ordo 0

Suhu 25Ordo 0

Linear(Suhu 25Ordo 0)

y = -0.0153x + 1.9076

R² = 0.8806

0

0.5

1

1.5

2

2.5

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

pH

waktu (jam)

pH Suhu 25oC Ordo 1

Suhu25°COrdo 1

Linear(Suhu25°COrdo 1)

y = -0.0938x + 6.7195

R² = 0.9385

0

1

2

3

4

5

6

7

8

0 2 4 6 81012141618202224

pH

waktu (jam)

pH Suhu 35oC Ordo 0

Suhu35°COrdo 0

Linear(Suhu35°C

Ordo 0)

y = -0.0176x + 1.9186

R² = 0.9246

0

0.5

1

1.5

2

2.5

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

pH

waktu (jam)

pH Suhu 35oC Ordo 1

Suhu35°COrdo 1

Linear(Suhu35°C

Ordo 1)

88

Gambar 19. Grafik Pengaruh Lama Penyimpanan terhadap Nilai Viskositas

Pada Ordo 0 dan Ordo 1 Penyimpanan Suhu 15oC, 25oC, 35oC.

y = 0.2167x + 29R² = 0.954

0

10

20

30

40

50

60

0 24 48 72 96 120

vis

kosi

tas

(mP

as)

waktu (jam)

Viskositas Suhu 15oC Ordo 0

Suhu 15Ordo 0

Linear(Suhu 15Ordo 0)

y = 0.0051x + 3.4076

R² = 0.9723

33.13.23.33.43.53.63.73.83.9

44.1

0 24 48 72 96 120

Ln

vis

kosi

tas

(mP

as)

waktu (jam)

Viskositas Suhu 15oC Ordo 1

Suhu15°COrdo 1

Linear(Suhu15°COrdo 1)

y = 0.9139x + 22.327

R² = 0.9859

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

0 2 4 6 81012141618202224

vis

kosi

tas

(mP

as)

waktu (jam)

Viskositas Suhu 25oC Ordo 0

Suhu25°COrdo 0

Linear(Suhu25°COrdo 0)

y = 0.0274x + 3.145

R² = 0.9966

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

4.5

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

vis

kosi

tas

(mP

as)

waktu (jam)

Viskositas Suhu 25oC Ordo 1

Suhu25°COrdo 1

Linear(Suhu25°COrdo 1)

y = 1.8339x + 40.773

R² = 0.8558

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

0 2 4 6 81012141618202224

vis

kosi

tas

(mP

as)

waktu (jam)

Viskositas Suhu 35oC Ordo 0

Suhu35°COrdo 0

Linear(Suhu35°C

Ordo 0)

y = 0.0325x + 3.711

R² = 0.7504

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

4.5

5

0 2 4 6 81012141618202224

Ln

vis

kosi

tas

(mP

as)

waktu (jam)

Viskositas Suhu 35oC Ordo 1

Suhu35°COrdo 1

Linear(Suhu35°C

Ordo 1)

89

Tabel 25. Data Kurva Arrhenius

No. Parameter Suhu Suhu (T) 1/T Persamaan Regresi k Ln k

1 Probiotik

15oC 288 K 3,5 x 10-3 y=24,10-0,05x 0,05 -3,06

25oC 298 K 3,4 x 10-3 y=23,77-0,29x 0,29 -1,24

35oC 308 K 3,2 x 10-3 y=24,07-0,29x 0,29 -1,24

2 BAL

15oC 288 K 3,5 x 10-3 y=25,26-0,02x 0,03 -3,69

25oC 298 K 3,4 x 10-3 y=24,92-0,13x 0,13 -2,07

35oC 308 K 3,2 x 10-3 y=26,14-0,16x 0,17 -1,75

3 pH

15oC 288 K 3,5 x 10-3 y=6,73-0,01x 0,01 -4,26

25oC 298 K 3,4 x 10-3 y=6,65-0,08x 0,08 -2,51

35oC 308 K 3,2 x 10-3 y=6,72-0,09 0,09 -2,37

4 Viskositas

15oC 288 K 3,5 x 10-3 y=3,41+0,01x 0,22 -1,53

25oC 298 K 3,4 x 10-3 y=3,14+0,03x 0,91 -0,09

35oC 308 K 3,2 x 10-3 y=3,71+0,03x 1,83 0,61

Gambar 20. Kurva Arrhenius

y = 25,69 - 8201,13xR² = 0,769

y = 26,50- 8636,73xR² = 0,882

y = 25,37- 8462,09xR² = 0,823

y = 31,59- 9506,21xR² = 0,961

-5

-4

-3

-2

-1

0

1

0.0035 0.0034 0.0032

Ln k

1/T

Kurva Arrhenius

Probiotik

BAL

pH

Viskositas

Linear (pH)

Linear (Viskositas)

Linear (Viskositas)

Linear (Viskositas)

90

Tabel 26. Penentuan Parameter Kritis Minuman Sinbiotik.

No. Parameter Persamaan Regresi Ea/R Ea

(kkal/mol) Kesimpulan

1 Probiotik y=25,69-8201,13x -8201,13 16,30 Probiotik

merupakan

titik kritis

2 BAL y=26,50-8636,73x -8636,73 17,16

3 pH y=25,37-8462,09x -8462,09 16,82

4 Viskositas y=31,59-9506,21x -9506,21 18,89

Contoh perhitungan Ea parameter probiotik:

b= −𝐸𝑎

𝑅

Keterangan :

Ea : Energi aktivasi (kkal/mol)

R : Tetapan gas konstan (1,987 kkal/mol.K)

b : slope persamaan Arrhenius

Maka :

-Ea=𝑏

𝑅=

−8201,13

1,987

Ea= 16,30 kkal/mol

91

Tabel 27. Nilai kt pada Berbagai Suhu Penyimpanan.

Parameter Persamaan Regresi Suhu Suhu (T) 1/T Ln kt kt

Probiotik y=25,69-8201,13x

4oC 277 K 3,6 x 10-3 -3,91 0,02

15oC 288 K 3,5 x 10-3 -2,78 0,06

25oC 298 K 3,4 x 10-3 -1,82 0,16

35oC 308 K 3,2 x 10-3 -0,94 0,39

pH y=25,37-8462,09x

4oC 277 K 3,6 x 10-3 -5,18 0,01

15oC 288 K 3,5 x 10-3 -4,01 0,02

25oC 298 K 3,4 x 10-3 -3,02 0,05

35oC 308 K 3,2 x 10-3 -2,10 0,12

Contoh perhitungan kt pada suhu 4oC parameter probiotik:

Ln kt = Ln k0 − (𝐸𝑎

𝑅) (

1

𝑇)

y=25,69-8201,13x

y=25,59-8201,13(3,6 x10-3)

y=-3,91=Ln kt

kt=𝑒3,91 = 0,02

Contoh perhitungan kt pada suhu 4oC parameter probiotik

Ln kt = Ln k0 − (𝐸𝑎

𝑅) (

1

𝑇)

y=25,37-8462,09x

y=25,37-8462,09x (3,6 x10-3)

y=-5,18=Ln kt

kt=𝑒5,18 = 0,01

92

Perhitungan Umur Simpan Parameter Probiotik pada:

a. Suhu 4oC

t= 𝑙𝑛𝐶0−𝑙𝑛𝐶𝑡

𝑘=

23,90−18,42

0,02= 272 jam = 11 hari 7 jam

b. Suhu 15oC

t= 𝑙𝑛𝐶0−𝑙𝑛𝐶𝑡

𝑘=

23,90−18,42

0,06= 88 jam = 3 hari 17 jam

c. Suhu 25oC

t= 𝑙𝑛𝐶0−𝑙𝑛𝐶𝑡

𝑘=

23,90−18,42

0,16= 34 jam = 1 hari 10 jam

d. Suhu 35oC

t= 𝑙𝑛𝐶0−𝑙𝑛𝐶𝑡

𝑘=

23,90−18,42

0,39= 14 jam

Perhitungan Umur Simpan Parameter Probiotik pada:

a. Suhu 4oC

t= 𝐶0−𝐶𝑡

𝑘=

6,4−4,6

0,01= 319 jam = 13 hari 7 jam

b. Suhu 15oC

t= 𝐶0−𝐶𝑡

𝑘=

6,4−4,6

0,02= 99 jam = 4 hari 3 jam

c. Suhu 25oC

t= 𝐶0−𝐶𝑡

𝑘=

6,4−4,6

0,05= 37 jam = 1 hari 13 jam

d. Suhu 35oC

t= 𝐶0−𝐶𝑡

𝑘=

6,4−4,6

0,12= 15 jam

93

Lampiran 7. Dokumentasi Penelitian

Gambar 21. Pembuatan Minuman

Sinbiotik Tepung Sorgum

Gambar 22. Kerusakan Minuman

Sinbiotik Tepung Sorgum Suhu 25oC

dan 35oC

Gambar 23. Kerusakan Minuman

Sinbiotik Tepung Sorgum Suhu 15oC

Gambar 24. Inkubasi Hasil

Pengenceran

Gambar 25. Perhitungan Bakteri

TPC Dengan Colony Counter.

Gambar 26. Pengujian pH Minuman

Sinbiotik Tepung Sorgum.