8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

1/23

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MIKROBA

PADA TANAH PEMBUANGAN AKHIRDI DAERAH TABING

OlehAfnida

Fidria Rahmadianti

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

2/23

TUJUAN

Mengetahui jenis mikroba pada

tempat pembuangan akhir

(sampah) di Daerah Tabing.

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

3/23

PENDAHULUAN

Isolasi bakteri

uatu !ara untuk memisahkan

mikroba tertentu dari

lingkungann"a sehingga diperoleh

kultur murni

ebar (spread plate)#

$engen!eran

(dilution method)#

%oresan (streak

plate)#

Metode isolasi

Taburan&tuang

(pour plate)

Mikromanipulator

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

4/23

Identifikasi bakteri

Makroskopis

'arna

kolonientuk

koloni

ji biokimia*i

pora

Mikroskopis

Tepian

$e*arnaan

+le,asi

%ram

Fermentasi

karbohidrat# uji

motil# uji indol

uji sitrat uji

metil red# ujitriple sugar iron

(TIA)

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

5/23

$e*arnaan

%ram

akteri grampositif

-hristian %ram Terbagi

Merah

akteri gramnegatif

ngu

ristal

,iolet

afranin

(ibiana#

/001)

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

6/23

Alat dan Bahan

Timbangan

digital

Tabung reaksi$etridish

Rak tabung

reaksi

Aluminium

foil

'rapping

Vortex 

Alat "ang digunakan

%elas ukur

Timbangan

analitik

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

7/23

 Erlemeyer  2arum

Ose

%elas

penutup

%elas

objek

omporlistrik

Beaker

 glass Autoclave

Mikroskoppatula

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

8/23

ahan "ang digunakan

ampel

tanah

larutan

ristal ,iolet#

larutan lugol#

Alkohol 034#safranin /4.

Medium $DAMedium 5A

Alkohol

674#A8uadest

steril

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

9/23

Cara KerjaA. $ersiapan

/. terilisasi

Alat di!u!i

terilisasi (suhu /9/ :-#tekanan

/3 psi selama /3 menit.

Dibungkus dan

masukkan ke plastik

Alat tidaktahan panas

Alkohol

($el!;ar dan

-han# 977

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

10/23

9. $embuatan medium 5A&$DA

5A&$DA

(97&=0 g)

terilisasi

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

11/23

Cara Kerja

a. Medium 5A

  Ambil bubuk 5A seban"ak 97 g

  Dimasukkan ke gelas ukur 9 ># tambah dengan akuades

steril sampai tertera / >.

  Medium dipanaskan sambil diaduk hingga homogen dan

mendidih#

  emudian di tuang ke dalam +rlenme"er berukuran 9 >

dan ditutup rapat dengan kain kasa dan aluminium foil.

  Medium disterilisasi dalam autoklaf pada suhu /9/?-

dan tekanan /3 psi selama /3 menit.

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

12/23

Diba*a ke laboratorium

Tanah kedalaman /7 !m

Tanah tempat pembuangan

akhir di daerah tabing.

. $elaksanaan

/. oleksi sampel tanah

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

13/23

9. $embiakan bakteri

oloni "ang tumbuh dengan *arna

berbeda# diambil satu ose dan ditanam

kembali kedalam !a*an untuk dimurnikan.

setelah didapat bakteri murni# dilakukan

identifikasi.

Tanah / g A8uadest

steril /77

ml

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

14/23

a. $engamatan makroskopis

metode

streak plate.

'arna

kolonientuk

koloni

Tepian +le,asi

=. Identifikasi isolat bakteri

Tunggu / menit

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

15/23

Membuat

apusan

isolat dan

fiksasi

b. $engamatan mikroskopis

$e*arnaan %ram

Tunggu / menit

(kristal ,iolet)

Tunggu / menit

(lugol)

Tunggu 13detik

(safranin)

etil alkohol

034

($el!;ar dan

-han# 977

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

16/23

Hasl Pen!a"atan

Ga"#ar Bent$% Ele&as Mar!n 'arna

Filamen Flat Filamen putih

Filamen Flat Filiform putih

tidakberaturan

Flat >obate $utih

Makroskopis

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

17/23

Isolat pertama

Isolat kedua

Isolat ketiga

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

18/23

Pe(arnaan Gra" )Per#esaran *+,*++-

Isolat pertama• akteri %ram

$ositif • erspora

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

19/23

Isolat edua

• akteri %ram

$ositif 

 

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

20/23

Isolat etiga

•akteri %ram

$ositif 

 

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

21/23

Kes".$lan dan Saran

esimpulan@  Isolasi bermanfaat untuk memisahkan mikroba.

  Tujuan pengen!eran adalah memperke!il jumlah mikroba

"ang tersuspensi dalam !airan.

 

Medium 5A untuk penumbuhan bakteri.  Medium $DA untuk penumbuhan jamur.

  Dari tiga sampel bakteri "ang dilakukan pe*arnaan %ram

semuan"a berbentuk basil .

  akteri "ang didapat adalah bakteri %ram positif.  eda bakteri gram positif dan negatif adalah bakteri %ram

positif mempertahankan *arna kristal ,iolet (ungu) dan

bakteri %ram negatif men"erap *arna safranin (merah)

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

22/23

aran@

  ebaikn"a alat dan bahan "nag diperlukan

men!ukupi.  Diharapkan ada uji lanjut untuk menetukan

menentukan jenis mikroba (bakteri).

8/15/2019 Isolasi Dan Identifikasi Mikroba Pada Tanah Pembuangan Akhir

23/23

Da/tar P$sta%a

ibiana# '.>./001. Analisis Mikrobiologi di

Laboratorium. 2akarta@ $T. Raja %rafindo

$ersada.

$el!;ar# M. 2.# dan +. -. . -han. 977