inokulasi dan mikroskop

7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop

1/12

1

Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)

LAPORAN RESMI

INOKULASI MIKROORGANISME DAN MIKROSKOP

I. Tujuan

I.1. Inokulasi Mikroorganisme

Percobaan ini bertujuan untuk mempelajari teknik-teknik inokulasi biakan mikroorganisme

pada medium steril.

I.. Mikrosko!

Tujuan dari percobaan ini adalah sebagai berikut :

1. Melatih menggunakan mikroskop dengan jalan melihat morphologi jamur,yeast, bakteri, dan

beberapa mikroorganisme.

2. Mengenal bentuk-bentuk mikroorganisme.

3. Melatih membuat preparat.

II. Pengama"an

II.1. Inokulasi Mikroorganisme

Ta#el II. 1 $asil Per%o#aan Inokulasi Mikroorganisme

Ta#ung reaksi

&' jam(

$asil !engama"an

Me)ia N*A &L. plantarum( Me)ia PDA &A. niger(

*lanko

Laboratorium Mikrobiologi

Jurusan Teknik Kimia TI!IT"


2/12

2


*iakan

Ke"erangan

-Warna :

- epekatan :

Warna putih susu

epekatan merata, tidak terlalu

pekat

Warna putih berbintik hitam

Pekat dibagian tengah

Ta#ung reaksi

&+, jam($asil !engama"an

Me)ia N*A &L. plantarum( Me)ia PDA &A. niger(

*lanko




3/12

#


*iakan

Ke"erangan

-Warna :

- epekatan :

Warna putih susu

!ukup pekat, bateri tumbuh

merata

"itam

Pekat, bakteri tumbuh ban#ak

dan merata

Pe"ri Dis-

&' jam($asil !engama"an

Me)ia N*A &A. Niger( Me)ia PDA &L. Plantarum(

*lanko




4/12

$


*iakan &"am!ak a"as(

Ke"erangan

- Warna :

- epekatan :

- $iameter :

Putih kekuningan

Pekat, belum merata

1.% cm

Putih susu

&arang

'.2% cm*iakan &"am!ak sam!ing(

Ke"erangan

-Warna :

- epekatan :

- $iameter :

Putih kekuningan

Pekat, belum merata

1.% cm

Putih susu

&arang

'.2% cm




5/12

5


Pe"ri Dis-

&+, am(

$asil Pengama"an

Me)ia N*A &A. niger( Me)ia PDA &L. plantarum(

*lanko

*iakan &"am!ak a"as(

Ke"erangan

-Warna :

- epekatan :

- $iameter :

Putih kekuningan

Pekat

2 cm

Putih susu

&arang

'.( cm




6/12

%


*iakan &"am!ak sam!ing(

Ke"erangan

-Warna :

- epekatan :

- $iameter :

Putih kekuningan

Pekat

2 cm

Putih susu

&arang

'.( cm

II.. Mikrosko!

Ta#el II. $asil !engama"an menggunakan mikrosko!

Per#esaran

&'//0(

$asil Pengama"an

Ke"erangan

La%"o#a%illus

!lan"arum

*erkoloni #er#en"uk

sekum!ulan #a"ang

As!ergillus niger*erkoloni #er#en"uk

#ula" &%o%%us(

III. Pem#a-asan




7/12

&


III.1. Inokulasi Mikroorganisme

Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mempelajari teknik inokulasi biakan mikroorganisme

pada medium steril.

Media #ang digunakan dalam percobaan ini adalah )*+ )utrien *roth +gar dan P$+

Potato $etrose +gar. )*+ )utrient *roth +gar merupakan suatu ekstrak cair jaringan daging

sapi #ang empuk, dikonsentrasikan menjadi pasta. andungan dalam )*+ ini adalah substansi

jaringan he/an #ang dapat larut dalam air, meliputi karbohidrat, sen#a/a nitrogen organik, 0itamin

#ang larut dalam air, dan garam-garaman #ang baik bagi untuk berkembangbiakn#a bakteri.

edangkan media P$+ Potato $etrose +gar digunakan untuk medium penumbuhan jamur

karena P$+ mengandung sumber karbohidrat dalam jumlah cukup #aitu terdiri dari 2' ekstrak

kentang dan 2 glukosa sehingga baik untuk pertumbuhan jamur. Pelcar, 134, 2''5ebelum dimasukkan ke tabung reaksi dan petridish, media dipanaskan terlebih dahulu di

atas hotplate dan diaduk dengan magnetic stirrer agar terjaga tetap cair dan homogen. Media cair

dipindahkan ke petridish dan tabung reaksi dengan sendok. Pemindahan harus dilakukan dengan

cepat agar media tidak mengeras. 6ntuk petridish, media harus rata agar mikroorganisme dapat

berkembang biak dengan baik. &uga perlu disiapkan tabung reaksi dan petridish #ang berisi media

)*+ dan P$+ saja sebagai pembanding blanko.

etelah diisi dengan medium, langkah selanjutn#a #ang dilakukan adalah mensterilisasi

peralatan baik tabung reaksi maupun petridish #ang akan digunakan, beserta medium dan penutup

di dalam autocla0e selama 1% menit pada suhu 121 . uhu tersebut dipilih karena dapat

membunuh spora dan bakteri #ang dapat bertahan /alaupun dididihkan sekalipun. ebelum

dimasukkan ke dalam autocla0e petridish dibungkus menggunakan kertas coklat dan tabung reaksi

disumbat dengan kapas. *agian kertas coklat #ang berplastik berada di bagian luar karena bertujuan

untuk mencegah agar uap air tidak masuk ke petridish #ang akan membuat petridish terkontaminasi.

Proses sterilisasi ditujukan untuk mematikan bakteri #ang terdapat pada peralatan dan medium.

terilisasi dengan autocla0e disebut sterilisasi uap. $/idjoseputro, 71, 2''%

etelah disterilisasi dengan autocla0e maka tabung reaksi berisi media dimiringkan agar

media media mengeras dalam posisi miring. "al ini dimaksudkan agar luas permukaan sentuh #ang

akan digunakan untuk inokulasi lebih luas. ebelum melakukan inokulasi maka semua media baik

pada tabung reaksi maupun petridish dibiarkan mengeras terlebih dahulu.

8nokulasi adalah proses penanaman bakteri pada medium steril dengan kandungan nutrisi

#ang sesuai. Mikroorganisme #ang diinokulasikan pada percobaan ini adalah Lactobacillus

plantarumdanAspergillus niger. Pelcar, 177, 2''5




8/12

'


8nokulasi harus dilakukan di dalam incase suatu kotak kaca atau laminar 9lo/ #ang

bertujuan untuk mengurangi kontaminan mikroorganisme lain dari luar. Pertama-tama ka/at ose

dipegang pada tangan kanan, lalu ujungn#a dipijarkan hingga men#ala, sedang sisa tangkain#a

cukup dile/atkan saja pada pembakar spritus. Prosedur ini bertujuan untuk mensterilisasikan ka/at

ose, teknik ini disebut aseptic. ka/at ose #ang telah dipijarkan dibiarkan sebentar agar kembali

dingin dan kemudian cukup disentuhkan pada suatu koloni. Mulut tabung tempat biakan murni juga

dipanaskan pada pembakar spritus setelah sumbat kapasn#a diambil. etelah pengambilan inokulum

sampel bakteri selesai, mulut tabung kembali dipanaskan dan ditutup dengan sumbat kapas seperti

semula. 6jung ka/at ose #ang memba/a inokulum tersebut digoreskan lurus mulai dasar tabung

reaksi hingga ujung media dan digoreskan ig-ag pada petridish. $/idjoseputro, 77, 2''%

Tabung reaksi dan petridish #ang berisi inokulum lalu dimasukkan ke dalam inkubator.8nkubator adalah alat #ang digunakan untuk menginkubasi mikroba pada suhu terkontrol. Petridish

diletakkan di dalam inkubator dalam posisi terbalik dengan terlebih dahulu dibungkus kertas coklat.

"al ini bertujuan agar tidak ada uap air #ang menetes ke media agar di petridish sehingga dapat

membuat proses pembiakan terkontaminasi. Tujuan peletakan biakan mikroorganisme adalah agar

mikroorganisme berada pada 9ase ketika mikroorganisme tersebut berkembang biak dengan

optimal. 8nkubasi dilakukan selama 27 jam dan 75 jam pada suhu 3' .

etelah diinkubasikan selama 27 jam, dilakukan pengamatan pada tabung reaksi danpetridish. Pada tabung reaksi berisi medium )*+ dan bakteri Lactobacillus plantarum, mulai

terlihat koloni bakteri /alaupun masih sedikit. oloni ini be/arna putih susu dan belum terlalu

pekat. edangkan pada tabung reaksi berisi medium P$+ dan jamurAspergillus niger mulai terlihat

koloni #ang masih be/arna putih, tetapi telah tampak sedikit bintik-bintik hitam #ang menandakan

keberadaan jamur tersebut.Pada petridish berisi medium )*+ dan jamurAspergillus niger koloni

#ang terbentuk be/arna putih kekuningan. "al ini tidak sesuai dengan ciri-ciri dari jamur

Aspergillus niger#ang ketika membentuk koloni be/arna hitam. ondisi ini disebabkan media

pertumbuhan #ang tidak sesuai. &amur memerlukan glukosa dan karbohidrat untuk tumbuh dengan

baik sementara media )*+ mengandung sen#a/a-sen#a/a nitrogen organik, 0itamin, serta garam-

garam mineral #ang tidak cocok untuk pertumbuhan jamur. Pada petridish berisi medium P$+ dan

bakteri Lactobacillus plantarum koloni #ang terlihat be/arna putih susu, tetapi sangat jarang

sedikit dan berdiameter kecil. "al ini dikarenakan media pertumbuhan #ang tidak sesuai. 6ntuk

pertumbuhann#a bakteri memerlukan karbohidrat, sen#a/a organik, 0itamin, dan garam-garam




9/12


mineral sedangkan P$+ han#a mengandung karbohidrat saja #ang men#ebabkan pertumbuhan

bakteri tidak optimal. Pelcar, 134, 2''5

etelah diinkubasikan selama ( jam, pengamatan dilakukan kembali. Pada tabung reaksi

berisi medium )*+ dan bakteri Lactobacillus plantarum terlihat koloni pekat be/arna putih susu.

edangkan pada tabung reaksi berisi medium P$+ dan jamur Aspergillus niger terlihat koloni

be/arna hitam pekat #ang hamper memnuhi seluruh permukaan medium. "al ini menunjukkan

bah/a bakteri dan jamur tersebut tumbuh baik pada medium #ang sesuai. Pada petridish berisi

medium )*+ dan jamurAspergillus nigerterbentuk koloni putih kekuningan dan luma#an pekat.

ondisi ini berbeda dengan hasil pada tabung reaksi dimana pada medium P$+ jamur Aspergillus

nigerbe/arna hitam dalam kolonin#a. "al ini disebabkan tidak sesuain#a medium #ang digunakan

untuk pemenuhan nutrisi pertumbuhan jamur tersebut. edangkan pada petridish berisi mediumP$+ dan bakteriLactobacillus plantarumterbentuk koloni putih susu #ang tetap sedikit dan sedikit

bintik-bintik hitam #ang menandakan adan#a Aspergillus niger. ondisi ini menunjukkan telah

terjadi kontaminasi pada mediumn#a. "al ini mungkin dikarenakan ka/at ose #ang kurang steril,

pada saat pemijaran tidak sampai membara.

III.. Pengunaan Mikrosko!

Tujuan dari percobaan mikroskop ini adalah untuk melatih menggunakan mikroskop dengan

jalan melihat morphologi jamur, bakteri, dan beberapa mikroorganisme, mengenal bentuk-bentuk

mikroorganisme, dan melatih membuat preparat.

$alam percobaan ini, langkah pertama #ang dilakukan adalah mempersiapkan mikroskop

dan membersihkan lensa-lensan#a menggunakan tisu agar debu #ang melekat pada lensa hilang dan

tidak menghalangi pengamatan. ;bject glass dan deck glass #ang akan digunakan terlebih dahulu

dibersihkan dengan menggunakan alkohol 4' untuk menghilangkan pengotor dan

mikroorganisme lain #ang masih menempel.


10/12

10


selain itu media #ang ikut terambil oleh ka/at ose men#ebabkan mikroorganisme sulit diamati.

ebelum biakan diletakkan diatas object glass, ke atas object glass diberi satu tetes a=uadest #ang

sudah disterilkan. emudian biakan diletakkan pada tetesan a=uadest di atas object glass dan

ditutup dengan deck glass. Penambahan a=uadest dilakukan agar pengamatan dari mikroskop lebih

jelas, sebagai perekat object glass dan deck glass agar mikroorganisme tidak tercecer dan mengenai

lensa.


11/12

11


Mold dapat berkembang biak secara aseksual melalui pembentukan spora dan pembelahan selA

serta secara seksual melalui isogamet dan heterogamet.

2. ebutkan penggunaan dan arti mold #ang disebut diatas@

Mold adalah jamur multiseluler #ang mempun#ai lebih dari satu inti dan membentuk benang-

benang 9ilamen.

3. +pa #ang disebut h#pha@

"#pha merupakan benang-benang pen#usun tubuh jamur #ang tersusun dari unit multinukleus

dan dinding-dinding #ang mempun#ai lubang agar sitoplasma dapat bergerak diantara sel.

7. *agaimana #east berkembang biak, dan apakah hal ini sesuai dengan preparat #ang

diamati@

Beast berkembang biak dengan cara membelah diri membentuk tunas atau budding cellA

dengan cara membelah diri membentuk 9issionA dan dengan cara membentuk spora.

%. +pakah #ang mempengaruhi akti9itas #east@

- uhu optimum 2% sampai 3' derajat celcius

- andungan nutrisi dalam substrat

- p", pada umumn#a #east ber9ungsi optimal di p" netral atau sedikit asam

(. ebutkan semua pembagian bakteri-bakteri beserta contohn#aC

a. *erdasarkan pe/arnaan gram

- ?ram positi9 A contohn#a D +erococcus

- ?ram negati9 A contohn#a D E. colib. *erdasarkan bentuk tubuh

- okus A contohn#a D . aureus

- *asil A contohn#a D +otobacter

- Fibric A contohn#a D


12/12

12


*akteri dapat berkembang biak secara aseksual melalui pembelahan binerA serta secara seksual

melalui trans9ormasi, transduksi dan konjugasi.

. Gaktor-9aktor apa saja #ang mempengaruhi pertumbuhan bakteri@

Pertumbuhan bakteri dipengaruhi oleh suhu, nutrisi, media tumbuh, p", ketersediaan oksigen

dan caha#a.

2. Kesim!ulan

2.1. Inokulasi Mikroorganisme

Mikroorganisme dapat dikembangbiakkan pada medium steril dengan menggunakan teknik

inokulasi.

2.. Penggunaan Mikrosko!1. $engan menggunakan mikroskop dapat diamati mor9ologi jamur, bakteri, #east, dan berbagai

macam mikroorganisme.

2. *erdasarkan pengamatan menggunakan mikroskop, diperoleh hasil bah/aLactobacillus

plantarumberbentuk batang basil danAspergillus nigerberbentuk bulat coccus..

3. Pembuatan preparat dilakukan dengan cara meletakkan biakan diatas object glass dan

menutupn#a dengan deck glass setelah diberi setetes a=uadest agar pengamatan dari

mikroskop lebih jelas dan untuk merekatkan object glass dan deck glass agar mikroorganisme

tidak tercecer dan mengenai lensa mikroskop

Da5"ar Pus"aka

$/idjoseputro, $. 2''%.Dasar-dasar Mikrobiologi. &akarta: $jambatan.

"ardiningsih, Hiani. $esember, 2''%. I8solasi dan 6ji Hesistensi *eberapa 8solat

inokulasi dan mikroskop

Documents