imunoassay

7/25/2019 Imunoassay

1/6

Bahan imser kel 2.2 & 2.4 RIA

https://nuclearthinker.wordpress.com/2014/07/2/radioimmunoassa!"ria/

http://a#usrusdiana.$lo#spot.co.id/2011/04/%"$eha%iorurldeault%ml"o.html

Radioimmunoassa! 'RIA(

)osted on *ul! 2+ 2014$! Rou

)en#ertian Radioimmunoassa!

Radioimmunoassa! merupakan metode la$oratorium 'in %itro method( untuk men#ukur den#an

relati%e tepat ,umlah -at !an# ada pada tu$uh pasien den#an isotop radioakti !an# $ercampur

den#an anti$od! !an# disisipkan ke dalam sampel. Radioimmunoassa! merupakan re%olusi

dalam pemeriksaan medis. )ada tahun 200+ teknik ini masih re%olusioner karena merupakan

$lueprint untuk pen#em$an#an metode le$ih lan,ut dalam teknik la$oratorium di $idan# medis.

Radioimmunoassa! adalah teknik nuklir !an# $an!ak di#unakan men#etahui konsentrasi

hormon. )en#u,ian ini men##unakan anti$odi !an# spesiik untuk hormon se$a#ai protein terikat

'technical reports series o 2+14(

en#an tipe anti#ent !an# sama 'soewondo+ 1(. Bahan pereksi dalam radioimmunoassa!

ialah anti#en radioakti dan anti$od! spesiik 'soewarsono dan ariin+ 1(

ar%e! et al '177(+ $ahwa dasar ker,a RIA adalah 3ntuk men#etahui per$andin#an konsentrasi

anti$od! !an# terdapat pada $a#ian dalam ta$un# dan anti #en !an# terdapat didalam sampel

den#an men##unakan radio akti. )ersain#an konsentrasi anti#en sampel dapat ditentukan dari

reaksi reduksi pen#ikatan konsentrasi anti#en dari anti$od! !an# terdapat pada $a#ian dalam

ta$un#.

asar"dasar teknik radioimmunoassa! 'RIA( atau prinsip competiti%e"$indin# radioassa! ini

pertama kali dikem$an#kan pada tahun 10"an oleh 5olomon Berson dan Rosal!n 6allow untuk
https://nuclearthinker.wordpress.com/2014/07/29/radioimmunoassay-ria/http://agusrusdiana.blogspot.co.id/2011/04/v-behaviorurldefaultvml-o.htmlhttps://nuclearthinker.wordpress.com/2014/07/29/radioimmunoassay-ria/https://nuclearthinker.wordpress.com/author/abdurrouf049/http://agusrusdiana.blogspot.co.id/2011/04/v-behaviorurldefaultvml-o.htmlhttps://nuclearthinker.wordpress.com/2014/07/29/radioimmunoassay-ria/https://nuclearthinker.wordpress.com/author/abdurrouf049/https://nuclearthinker.wordpress.com/2014/07/29/radioimmunoassay-ria/


2/6

memeriksa %olume darah+ meta$olism iodine+ menentukan kadar hormone insulin dalam plasma

darah. en#an men##unakan prinsip ini titer atau kadar $er$a#ai hormon+ anti#en+ anti$odi+

en-im dan o$at dalam darah dapat diukur den#an ketepatan dan ketelitian !an# san#at tin##i.

arena limit deteksi !an# san#at $aik ini maka RIA di#unakan se$a#ai peralatan la$oratorium

standar.

RIA memanaatkan radioakti%itas dari isotop radioakti !an# diin,eksikan ke dalam sampel.

8acahan radiasi dideteksi men##unakan pencacah seperti detector ei#er"9uller+ scintillator+

dan se$a#ain!a.

)emanaatan Radioakti%itas

eknik RIA adalah suatu teknik penentuan -at"-at !an# $erada dalam tu$uh $erdasarkan reaksi

imunolo#i !an# men##unakan tracer radioakti. racer radioakti adalah isotop radioakti !an#

akan meluruh pada melalui proses radioakti%itas. Radioakti%itas adalah proses peluruhan isotop

tidak sta$il 'radioakti( men,adi isotop !an# le$ih sta$il den#an memancarkan ener#! melalui

materi $erupa partikel"partikel 'alpha atau $eta( ataupun #elom$an# elektroma#netik 'sinar

#amma(. Intensitas dari sum$er radioakti din!atakan oleh transormasi inti rata"rata per satuan

waktu. 5atuan radioakti%itas din!atakan den#an 8urie '8i(. 1 8i awaln!a dideinisikan se$a#ai

radiasi !an# dipancarkan oleh 1 #ram Ra+ tetapi deinisi ini diu$ah se$a#ai kemurnian dari

penin#katan nuklida. ilai a$solute dari 1 8i sama den#an +7;1010 disinte#rasi/sekon. 5atuan

lain dari radioakti%itas adalah Bec


3/6

)rinsip radioimmunoassa! dapat dirin#kas se$a#ai persain#an reaksi dalam campuran !an#

terdiri dari anti#en/hormon $erla$el radioakti+ anti$odi dan anti#en/hormon !an# tidak $erla$el

radioisotop. Anti#en radioakti dicampur den#an se,umlah anti$odi. Anti#en dan anti$odi

$erikatan satu sama lain men,adi satu -at. emudian ditam$ahkan -at !an# tidak diketahui

,enisn!a !an# men#andun# sedikit anti#en. =at $aru ini merupakan -at !an# diu,i.

5ecara sederhana di#am$arkan den#an asumsi $ahwa anti$odi !an# dimaksud $erkonsentrasi

san#at tin##i untuk dikom$inasikan den#an anti#en atau anti#en !an# $erla$el dalam molekul

anti$odi. )ada saat ikatan kadar protein dan steroid radioakti konstan+ pen#ham$atan ikatan

hormon radioakti den#an ikatan protein merupakan un#si dari ,umlah hormon nonradioakti

!an# $erada pada sampel.

5ecara rin#kas+ skema proses pen#u,ian -at den#an teknik radioimmunoassa! diperlihatkan pada

#am$ar di $awah ini.

am$ar 1. 5kema sin#kat proses pen#u,ian -at den#an teknik radioimmunoassa!

9etode radioimmunoassa! 'RIA( mempun!ai kemampuan untuk menentukan -at"-at isiolo#is

dalam tum$uh sampai kosentrasi !an# san#at rendah sekali hampir sekitar nano#ram 'n# > 10??(

dan $ahkan mencapai konsetrasi picto#ram 'p# > 10 ( untuk setiap 1 ml. metode ini san#at

pentin# dalam peptide dan hormon steroid !an# terdapat dalam plasma !an# kosentrasin!a

rendah. 9etode RIA ini ter#antun# kepada kompetisi untuk mendapatkan tempat"tempat

kedudukan 'ikatan( pada anti$od! !an# spesiik dari suatu -at tertentu antara -at tertentu di


4/6

dalam serum dan -at !an# sama ditandai den#an unsur radioakti. =at ini misaln!a suatu hormon

seperti th!ro@in +5+C dan lain!a 'soewondo+ 1(.

asar ker,a radioimmunoassa! adalah pen#ikatan anti#en pro#esteron !an# terkandun# dalam

serum den#an pro#esteron anti$od! spesiik !an# di lapiskan pada dindin# ta$un#. 5isa anti $odi

!an# spesiik !an# tidak diikat oleh anti#en pro#esteron sample akan men#ikat 12I. makin

$an!ak 12I !an# terpecah $erarti semakin sedikit kadar pro#esteron di dalam saple 'mar!ati+

1(.

9enurut partodihard,o '1( metode RIA ini san#at peka terhadap pen#ukuran hormon sampai

sekecil 10 piko#ram '0+01 mu#milimiko#ram(. )ada metode ria ini !an# diukur adalah da!a

immunolo#in!a dan $ukan da!a $iolo#i hormon.

kele$ihan teknik RIA di$andin# den#an teknik lain diantaran!a : mudah di ker,akan+ mempun!ai

ketepatan !an# tin##i+ peker,aann!a le$ih cepat dan tidak memerlukan ,umlah sampel !an# $esar

'5oewarsono an Ariin+ 11(.

9enurut 8ook '10(+ anti serum untuk hormon !an# diu,i harus memiliki spesiik !an# tin##i.

etelitian ini dapat dikuran#i den#an s!rat $ahwa sampel hormonal $erla$el mempun!ai

kemurnian !an# luar $iasa. Anti serum mempun!ai eiditas !an# tin##i untuk anti #en hormon

dan diperlukan titer !an# tin##i. 8airan anti serum !an# di#uanakan antara 1 : 10.000 dan 1 :

100. ormon $erla$el menun,ukkan reaksi pada anti$od! den#an cara !an# sama den#an

hormone !an# tidak $erla$el. Ini tidak dapat ter,adi ,ika atom iodine relati%e le$ih $esar dari

molekul hormon dalam kompir#urasi !an# ditumpan#i.


5/6

http://dokumen.tips/health"medicine/radioimmunoassa!"ria.html

.Radioimmunoassa! 'RIA( Dleh Ahmad adli E/200 )endidikan Biolo#i

A. )endahuluan

Radioimmunoassa! pertama kali dikem$an#kan oleh Rosal!n 6alow dan 5olomon A.

Berson dari amerika serikat+ pertama kali mereka $eker,a untuk mempela,ari tentan#

hormon khususn!a insulin !aitu hormon !an# men#atur kadar #ula dalam darah.

Radioimmunoassa! adalah teknik nuklir !an# $an!ak di#unakan untuk men#etahui

konsentrasi hormon. )en#u,ian ini men##unakan anti$odi !an# spesiik untuk hormon

se$a#ai protein terikat.

B.)rinsip RIA

)risip dasaran!a dalah reaksi antaraanti#en dan anti$odi di dalam reaksin!a adalah siat

kekhususann!a se$uah anti#ent !an# $ereaksi den#an anti$od! !an# spesiik untukn!a

dan tidak men#adakan reaksi silan# 'cross reaction( den#an tipe anti#ent !an# sama.

Bahan pereaksi dalam radioimmunoassa! ialah anti#en radioakti dan anti$od! spesiik.

asar ker,a RIA adalah 3ntuk men#etahui per$andin#an konsentrasi anti$od! !an#

terdapat pada $a#ian dalam ta$un# dan anti#en !an# terdapat di dalam sampel den#an

men##unakan radio akti. )ersain#an konsentrasi anti#en sampel dapat ditentukan dari

reaksi reduksi pen#ikatan konsentrasi anti#en darianti$od! !an# terdapat pada $a#ian

dalam ta$un#.

)rinsip RIA sederhana !aitu: isotop di mi@ den#an anti$odi kemudian disisipkan pada

sampel darah pasien. 5u$stansi non radioakti dalam darah akan men##antikan posisi

radioakti pada anti$od! !an# men#aki$atkan radiokti lepas. Radiaokti !an# $e$as ini

kemudian diukur untuk menentukan $erapa $an!ak su$stansi dalam darah. Anti serum

untuk hormon !an# di u,i harus memiliki spesiik !an# tin##i

8. 9etode radioimmunoassa! 'RIA(
http://dokumen.tips/health-medicine/radioimmunoassay-ria.htmlhttp://dokumen.tips/health-medicine/radioimmunoassay-ria.html


6/6

1. )rinsip non kompetiti

6an# palin# $an!ak di #unakan adalah sandwich. )rinsip dasar dari sandwich adalah

reaksisuatu anti$odi dalam konsentrasi !an# ter$atas den#an $er$a#ai konsentrasi

anti#en

2. )rinsip ompetiti

5e,umlah tertentu anti$odi diimo$ilisasi'ditempelkan( pada suatu ase padat misaln!a

dindin# ta$un# plastik. 5ampel pasien !an# mun#kin men#andun# $iomolekul 'misaln!a

pato#en( ditam$ahkan $ersama den#an se,umlah tertentu $iomolekul $erla$el radioakti

!an# akan $erinteraksi den#an anti$odi !an# tim$ul.

. euntun#an dan eru#ian

1. euntun#an metode RIA adalah : 5ensiti%itas dan presisi !an# tin##i. 9udah

diker,akan. )eker,aann!a le$ih cepat dan tidak memerlukan sampel !an# $esar.

2. eru#ian metode RIA adalah : Rea#en kuran# sta$il. 9emerlukan proteksi

terhadap $ahanradioakti 'radioacti%e ha-ardous(

F. )rosedur er,a RIA

arah masin#"masin# di pipet 100 ul dan di masukkan kedalam ta$un# !an# telah di

lapisi oleh lapisan pro#esteron anti$od! !an# telah di$eri la$el. am$ahkan 1 ml

radio isotop 12 I )ro#esteron lalukocok den#an men##unakan %orte@ mi@er

kemudian tutup den#an plastic para ilm dan disimpan selama 24 ,am pada suhu

kamar. 5etelah disimpan larutan radio isotop di $uan# kedalam $otol khusus+ ta$un#

dikerin#kan den#an cara di$alik.5elan,utn!a pro#esteron di cacah den#an #amacoanter. )resentase pen#ikatan pro#esteron dalam sampel oleh pro#esteron anti$od!

spesiik dapat diketahui den#an mem$andin#kan hasil cacahan 12 I )ada ta$un#

$erlapis anti$od! tanpa sampel 'control(.

imunoassay

Documents