enzim katalase pada benguk

Upload: adha-hujatulatif

Post on 06-Jul-2018

287 views

Category:

Documents


2 download

TRANSCRIPT

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    1/34

    LAPORAN

     GROUP PROJECT 

    PRAKTIKUM BIOKIMIA

    Perbedaan Aktivitas Pemecahan H2O2 pada Berbagai Kondisi Benguk ( Mucuna pruriens)

    (Biji Benguk, Benguk Rebus, dan Tempe Benguk !itinjau dari "um#ah $e#embung %ang

    !ihasi#kan, &ama Terbentuk $e#embung, dan Tes '%a#a

    Ke#ompok )

    Anisa 'ur "annah (**22+*-

    Putri .handra Har%anto (**22+*2-

    Adha Hujatu#ati/ (**22+*0

    Hirmampuni Adinda Putri (**22+*0+

    .itra Hanum 1ardhani (**22++*

    PRODI PENDIDIKAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    2/34

    FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

    UNIVERSITAS NEGERI YOGYAKARTA

    2016

    3 P4'!AH5&5A'

    A3 "udu#

    Perbedaan Aktivitas Pemecahan H2O2  pada Berbagai Kondisi Benguk 

    ( Mucuna pruriens) (Biji Benguk, Benguk Rebus, dan Tempe Benguk !itinjau dari

    "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan, &ama Terbentuk $e#embung, dan Tes '%a#a3

    B3 &atar Be#akang

     Mucuna pruriens termasuk da#am /ami#% 6abaceae3 7pesies ini dikena# dengan

    nama benguk atau kara benguk di ndonesia3 7pesies ini juga dikena# dengan sebutan

    velvet bean. 7pesies ini ban%ak ditemukan di Asia, A/rica, Pasi/ik, dan juga di

    Amerika3

    !i ndonesia, benguk dikonsumsi da#am berbagai macam o#ahan3 Benguk 

    dapat direbus, dikeringkan, hingga dibuat tempe %ang kemudian dapat dibacem

    ataupun digoreng3 8eski demikian pengonsumsian benguk sebagai sumber bahan

    makanan masih kurang di ndonesia3 Benguk masih menjadi sumber makanan %ang

     be#um dikonsumsi secara #uas o#eh mas%arakat ndonesia sebab mas%arakat #ebih

    memi#ih tempe kede#ai dibandingkan tempe benguk3

    Berbanding terba#ik dengan rendahn%a konsumsi benguk di ndonesia,

     permintaan akan benguk di dunia justru meningkat karena benguk memi#iki khasiat

    tinggi bagi kesehatam3 Pene#iti bahkan men%atkan bah9a benguk mengandung nutrisi

    %ang baik untuk dikonsumsi3 !i da#am benguk atau  Mucuna pruriens  justru terdapat

     ban%ak nutrisi3 'atarajan,et3a#,(2*2) :0 men%atakan bah9a  Mucuna form a rich

     source of protein, carbohydrate, lipid, fiber, minerals and amino acids.  pern%ataan di

    atas menekankan bah9a da#am kara benguk, terdapat protein, karbohidrat, serat,

    minera#, maupun #emak3 7e#ain itu, 'atarajan,et3a#,(2*2) :- juga men%atakan bah9a

    the total daidzin and genistein in Mucuna was found to be higher than in soybeans…

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    3/34

    !aid;in dan genistein merupakan iso/#avon %ang ber/ungsi sebagai antioksidan3

    Keduan%a terkandung da#am kede#ai maupun kara benguk3 8eski demikian,

     pern%ataan tersebut menekankan bah9a jum#ah tota# daid;in dan genistein di Mucuna

    #ebih tinggi dibandingkan da#am kede#ai3

    7e#ain itu, benguk juga memi#iki khasiat #ain3 Khasiat tersebut ada#ah khasiat

    antioksidan3 8ucuna pruriens memi#iki kemampuan antilipid peroxidation sehingga

    mampu menghi#angkan superoksida3  Lipid peroxidation merupakan proses %ang

    men%ebabkan terbentukn%a radika# bebas3 Berkurangn%a proses lipid peroxidation

     berarti bah9a pembentukan radika# bebas juga berkurang3 Ha# tersebut didukung o#eh

     pene#itian Haresh chandra,et3a#,(2*2)200 bah9a aktivitas kata#ase di se#otak %ang

    te#ah ditreatment dengan ekstrak 8ucuna pruriens menga#ami kenaikan3

    Tabe# *3 Hasi# pene#itian pengaruh 8ucuna pruriens pada aktivitas kata#ase3

    7umber tab#e) Hareshchandra,et3a#,(2*2)20:3

    Berdasarkan tab#e hasi# pene#itian di atas, diketahui bah9a aktivitas kata#ase

    menga#ami peningkatan pada ke#ompok %ang diberikan treatment Mucuna pruriens3

    Hasi# pene#itian o#eh Hareshchandra,et3a#,(2*2)200 juga men%atakan bah9a there is

    a moderate decrease in the glutathione peroxidase activity in brain homogenate in

    comparison to B!" group. treated group3 $#utathione peroksidase merupakan

    en;im %ang ter#ibat da#am metabo#ism g#utathione3 Penurunan aktivitas en;im ini

    akan men%ebabkan s%stem anti oksidan da#am tubuh meningkat3 O#eh sebab itu,

     Mucuna pruriens  dapat meningkatkan aktivitas kata#ase da#am memecah sen%a9a

     peroksida3

    7e#ain itu, da#am pene#itian 7huk#a,et3a#, (20) *+2 dipero#eh hasi# bah9a

    moreover, we also observed that in infertile men who were under psychological stress,

    there were low seminal plasma #"$ and catalase activities. But there was

    improvement in these enzymes and molecule levels following treatment with M.

     pruriens3 Pern%ataan tersebut menekankan bah9a aktivitas kata#ase pada seorang pria

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    4/34

    %ang sedang menga#ami stress psiko#ogis dapat ditingkatkan dengan treatment

    menggunakan kara benguk3

    !i beberapa daerah, seperti $unungkidu#, mas%arakat mengonsumsi benguk 

    dengan merebus ataupun dengan menggoreng dan membacem sete#ah benguk dio#ah

    menjadi tempe3 Berto#ak dari berbagai man/aat benguk da#am memecah sen%a9a

     peroksida, per#u diketahui pada keadaan apakah benguk pa#ing baik da#am memecah

    sen%a9a peroksida3 5ntuk dapat mempero#eh man/aat benguk da#am memecah

    sen%a9a peroksida, maka per#u dibuat pi#ihan %ang tepat da#am mengo#ah dan

    mengonsumsi benguk3 O#eh sebab itu per#u di#akukann%a suatu pen%e#idikan untuk 

    men%e#idiki aktivitas kata#ase pada benguk mentah, direbus, maupun da#am bentuk 

    tempe3

    .3 Rumusan 8asa#ah

    Berdasarkan uraian #atar be#akang masa#ah di atas maka rumusan masa#ah

    da#am pene#itian ini ada#ah sebagai berikut3

    * Apakah terdapat perbedaan aktivitas pemecahan H2O2  antara biji benguk,

    tempe benguk, dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang

    dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a<

    2 8anakah hasi# %ang #ebih baik antara biji benguk, tempe benguk, dan benguk 

    rebus da#am memecah H2O2 ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan,

    #ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a<

    !3 Tujuan

    Berdasarkan masa#ah %ang te#ah dirumuskan di atas, tujuan dari pene#itian

    ini ada#ah sebagai berikut3

    * 8en%e#idiki perbedaan aktivitas pemecahan H2O2 antara biji benguk, tempe

     benguk, dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan,

    #ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a3

    2 8en%e#idiki hasi# %ang #ebih baik antara biji benguk, tempe benguk, dan

     benguk rebus da#am memecah H2O2 ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang

    dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a3

    43 8an/aat

    = 8an/aat Teoretis

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    5/34

    Hasi# pene#itian ini dapat menambah 9a9asan pengetahuan mengenai

     pengo#ahan dan pengonsumsian benguk %ang pa#ing baik untuk mempero#eh

    man/aat benguk da#am memecah sen%a9a peroksida3

    = 8an/aat Praktis

    a3 Bagi pene#iti

    Hasi# pene#itian ini dapat menambah 9a9asan pengetahuan dan

     pemahaman mengenai pengo#ahan dan pengonsumsian benguk %ang

     pa#ing baik untuk mempero#eh man/aat benguk da#am memecah

    sen%a9a peroksida3

     b3 Bagi mas%arakat

    i3 8endorong mas%arakat untuk mengonsumsi benguk3

    ii3 8enambah 9a9asan pengetahuan dan pemahaman mengenai pengo#ahan dan pengonsumsian benguk %ang pa#ing baik untuk

    mempero#eh man/aat benguk da#am memecah sen%a9a peroksida

    %ang berbaha%a bagi tubuh3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    6/34

    3 T'"A5A' P57TAKA

    A3 4n;im Kata#ase

    4n;im ada#ah biokata#isator %ang mampu mempercepat #aju reaksi dengan

    menurunkan energ% aktivasi3 4n;im memi#iki peran masing=masing da#am

    mempercepat reaksi, sebab en;im bersi/at spesi/ik terhadap substrat %ang

    dikata#isis o#ehn%a3 &uhova,et3a#,(2)*>* men%atakan bah9a sa#ah satu dari

    en;im utama %ang berperan da#am mengkatabo#isme h%drogen peroksida ada#ah

    en;im kata#ase3 4n;im ini dapat ditemui da#am darah, sumsum tu#ang, membranmukosa, ginja# dan hati (Kumar dkk, 2:3 8erupakan hemoprotein %ang

    mengandung empat gugus heme3 !i da#am se#, kata#ase ditemukan di da#am

     peroksisom3

    8ekanisme aktivitas kata#ase sebagai antioksidan dengan cara

    mengkata#isis pemecahan H2O2  menjadi H2O dan O2, ada#ah sebagai berikut

    (Kumar dkk, 2:3

    Kata#ase=6e( ? H2O2 sen%a9a=* ?H2O tahap

    7en%a9a=* ? H2O2 kata#ase=6e( ? H2O2 ? O2 tahap

    2H2O2 2H2O ? O2

    7en%a9a=* merupakan sen%a9a antara serta merupakan kunci dari oksidasi

    da#am reaksi en;imatik kata#ase3 Ha# ini disebabkan o#eh keberadaan sen%a9a=*

    heme dengan suatu atom oksigen dari mo#eku# H 2O2 pada tahap ini3 Hasi# reaksi

    ini membentuk mo#eku# air pada tapak akti/ en;im %ang dekat heme 6e3

    Kapasitas reduksi kata#ase tinggi pada suasana H2O2  konsentrasi tinggi,

    sedangkan pada konsentrasi rendah kapasitasn%a menurun (.eme#i dkk, 2-@

    8i9a dkk, 2:3 Ha# ini disebabkan karena kata#ase memer#ukan reaksi dua

    mo#eku# H2O2 da#am proses reduksin%a, sehingga ha# ini #ebih jarang ditemukan

     pada konsentrasi substrat rendah (.eme#i dkk, 2-3 Pada konsentrasi H2O2

    rendah seperti %ang dihasi#kan dari proses metabo#isme norma#,  peroxiredo%sin

    (PR %ang ber/ungsi untuk mengikat H2O2 dan mengubahn%a menjadi oksigendan air (8i9a dkk, 2:3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    7/34

    Faktor-aktor Ya!" M#$%#!"ar&'( K#r)a E!*($

    Aktivitas en;im dipengaruhi beberapa /aktor, antara #ain)

    1+ S&'&

    Kenaikan temperature mengindikasikan bah9a #aju reaksi dapat meningkat3

    Ha# tersebut dapat terjadi sebab menurut 7u and &i, (20)** molecules collide at 

    a greater fre&uency and with more force at higher temperatures. 'hus, substrates

    and enzymes can locate each other easier in the system, speeding up the rate of 

    the reaction. Pern%ataan di atas menekankan bah9a mo#eku# menjadi #ebih sering

     bertabrakan da#am ga%a %ang besar dengan bertambahn%a temperature3 O#eh sebab

    itu #aju reaksi menjadi meningkat karena substrat dan en;im menjadi #ebih mudah

     bersatu3 8eski demikian, kenaikan temperature dapat meningkatkan energ%

    kinetic en;im pada suatu titik %ang dapat mengganggu ikatan non kova#en %ang

    mempertahankan struktur tiga dimensi en;im3 Kerusakan tersebut men%ebabkan

    rantai po#ipeptida mu#ai terbuka sehingga en;im terdenaturasi dan kehi#angan

    kemampuan kata#itikn%a3 Pern%ataan di atas didukung o#eh 8urra%,et3a#,(2)

     bah9a the polypeptide chain then begins to unfold, or denature, with an

    accompanying rapid loss of catalytic activity.7u and &i,(20)** juga

    men%atakan bah9a after a certain point this will no longer be true, as sustained 

    high temperatures will begin to denature the catalyst, lowering the reaction rate

    dramatically3

    4n;im pada he9an berdarah panas dan manusia bekerja pa#ing e/isien pada

    suhu 0o  .3 meski demikian 8urra%,et3a#,(2) menekankan bah9a the

    temperature range over which an enzyme maintains a stable, catalytically

    competent conformation depends upon(and typically moderately exceeds(the

    normal temperature of the cells in which it resides. Temperature optima# masing=

    masing en;im berbeda=beda, sebab en;im di da#am tubuh bekerja di se# %ang

     berbeda=beda3 Temperature optima# suatu en;im sehingga en;im dapat

    memaksima#kan kemampuan kata#itikn%a bergantung pada temperature norma# se#

    dimana en;im bekerja3

    . %H

    7emua en;im peka terhadap perubahan pH, dan nonakti/ pada #ingkungan pH

    sangat rendah (asam kuat dan pH tinggi (basa kuat3 Ha# tersebut didasarkan pada

     perubahan bentuk sisi akti/ en;im %ang akan berpengaruh pada kee/ekti/an

     pengikatan substrat3 'icho#s and .ho#e9iak,(2)+ menje#askan bah9a a s the

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    8/34

     p* is lowered, an enzyme will tend to gain *+ ions, and eventually enough side

    chains will be affected so that the enzymes shape is disrupted. Li%ewise, as the p* 

    is raised, the enzyme will lose *+ ions and eventually lose its active shape. Many

    enzymes have an optimum in the neutral p* range and are denatured at either 

    extremely high or low p* 3 Pern%ataan tersebut menekankan bah9a pH %ang

    rendah ataupun tinggi dapat merusak aktivitas en;im3 7aat pH ter#a#u rendah

    sedangkan en;im bekerja di pH netra# ataupun tinggi, maka en;im akan cenderung

    mengikat ion H? sehingga rantai %ang men%usun struktur en;im rusak3 O#eh sebab

    itu, bentuk en;im rusak3 Begitupu#a dengan pH tinggi3 Bagi en;im %ang tidak 

    mampu bekerja pada pH tinggi maka akan terjadi perubahan bentuk hingga

    kehi#angan sisi akti/ en;im bi#a en;im ditempatkan di pH tinggi3 !engan demikian

     pengikatan terhadap substrat dapat menga#ami penurunan3 Berikut merupakan

    gra/ik hubungan pH dengan aktivitas en;im3

    $ambar *3 $ra/ik hubungan pH dengan aktivitas en;im3

    7umber gambar) 8urra%,et3a#,(2)+3

    $ra/ik di atas merepresentasikan hubungan antara aktivitas en;im dengan pH3 pH

    %ang ter#a#u asam ataupun ter#a#u basa akan mempengaruhi aktivitas en;im3

    ,+ Ko!#!tra( S&.trat

    Konsentrasi substrat turut berpengaruh terhadap kinerja en;im3 "ika pH dan

    suhu suatu sistem en;im ada#ah konstan, dan jum#ah substrat ber#ebihan, maka

    #aju reaksi ada#ah sebanding dengan jum#ah en;im %ang ada3 7eba#ikn%a jika pH,

    suhu dan konsentrasi en;im konstan, maka #aju reaksi ada#ah sebanding dengan

     jum#ah substrat (7uhara,2*2)*23

    Konsentrasi substrat dapat meningkatkan #aju reaksi hingga mencapai #aju

    maksimum3 Bi#a #aju reaksi te#ah mencapai #aju maksimum maka kenaikan

    konsentrasi substrat tidak akan meningkat #aju reaksi karena en;im te#ah

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    9/34

    menga#ami kejenuhan3 8urra%,et3a#,(2)+ mendukung pern%ataan di atas

    dengan men%atakan bah9a 6or a t%pica# en;%me, as substrate concentration is

    increased, vi increases unti# it reaches a maCimum va#ue - maC3 1hen /urther 

    increases in substrate concentration do not /urther increase vi, the en;%me is said

    to be DsaturatedE 9ith substrate3 $ra/ik di ba9ah ini menunjukkan bah9a

     penambahan substrat tidak akan meningkatkan #aju reaksi sete#ah #aju te#ah

    mencapai FmaC3 Pada titik ., semua en;im berada da#am kondisi te#ah terikat

    dengan substrat membentuk komp#eks en;im substrat (473 O#eh sebab itu tidak 

    terdapat en;im bebas %ang dapat membentuk komp#eks en;im substrat kemba#i3

    !engan demikian, penambahan substrat tidak akan menambah #aju reaksi3

    $ambar 23 Pengaruh konsentrasi substrat terhadap #aju reaksi en;imatis3

    7umber gambar) 8urra%,et3a#,(2)+3

    Representasi keadaan di titik A, B, dan . pada gra/ik ada#ah sebagai berikut3 Titik 

    . digambarkan pada keadaan bertanda . di gambar3 Keadaan tersebut

    menunjukkan te#ah terbentukn%a komp#eks en;im substrat %ang men%ebabkan

    tidak adan%a en;im bebas3

    $ambar 23 Representasi keadaan en;im da#am konsentrasi substrat rendah (A dan

    tinggi (.3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    10/34

    7umber gambar) 8urra%,et3a#,(2)>3

    A 7umber en;im kata#ase

    Pada he9an, kata#ase terdapat pada semua organ, khususn%a di hati %ang

    merupakan organ metabo#ik terbesar dan terpenting di tubuh (Gainuri dan

    1anandi,2*2)::3 4n;im kata#ase juga dapat ditemukan di tumbuhan3 atalase

    is found in animal and plant tissues, and is especially abundant in plant storage

    organs such as potato tubers, corms, and in the fleshy parts of fruits ('icho#s and

    .ho#e9iak,2)>3 Titik tekan pern%ataan di atas ada#ah bah9a en;im kata#ase

     juga dapat ditemukan di umbi=umbian, seperti kentang, buah=buahan, hingga

    modi/ikasi perkembangbiakan vegetative tumbuhan, %aitu corm3

    Pencampuran kata#ase dengan 8nO2 dapat menimbu#kan panas3 Reaksi antara

    keduan%a ada#ah

    2H2O2(a ====(cata#ase dan 8nO2===I 2H2O (# ? O2 (g

    8anganese dioCide ada#ah kata#is inorganic %ang dapat membantu pencernaan

    H2O2 (1a#ter,et3a#,*->)> 3

    B Kara Benguk 

    Kacang=kacangan se#ain dikonsumsi da#am bentuk as#in%a, misa#n%a me#a#ui proses penggorengan dan perebusan, dapat pu#a dikonsumsi da#am bentuk #ain3

    7ebagai contoh tahu dan susu kede#ai sebagai hasi# o#ahan kede#ai, tempe sebagai

    hasi# /ermentasi kede#ai dan taoge sebagai hasi# perkecambahan kacang3 "enis kacang

    %ang #ain te#ah dicoba sebagai bahan baku pembuatan tempe maupun taoge3 Koro

     benguk (8ucuna Pruriens, gude (.ajanus cajan, dan koro putih (Phaseo#us #unatus

    te#ah dicoba untuk dio#ah menjadi tempe %ang kemudian diuji perubahan aktivitas

    en;im /itase se#ama prose pengo#ahann%a (8ahendradatta, 22

    Koro merupakan sa#ah satu jenis kacang=kacangan %ang dapat tumbuh di tanah

    %ang kurang subur dan kering3 7e#ain untuk diman/aatkan bijin%a, tujuan penanaman

    koro ada#ah sebagai tanaman pe#indung dan pupuk hijau (Ba%u Kanetro dan 7et%o

    Hastuti, 23

    Koro benguk (8ucuna pruriens berasa# dari Asia tropis ban%ak ditanam di

    Asia dan Austra#ia3 !i ndonesia tanaman ini ditemukan di "a9a, Ba#i dan 7umatra

    %ang mana memi#iki beberapa varietas dengan 9arna ku#it biji abuabu, hitam, cok#at

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    11/34

    atau berbecak=becak (Anon, *->>@ Tabu#ated n/ormation, *->- cit ndra9ati, *-00 cit

    7ri Handajani dan 1indi Atmaka, *--23 Biji koro benguk merupakan sumber protein

    tambahan da#am makanan, %ang mana ka%a akan antioksidan (Tripathi dan 5padhat%,

    2* cit Bhat et a#3, 203

     'amun demikian da#am koro benguk juga terdapat sen%a9a atau /aktor 

    antinutriti/ seperti /eno#, tanin, &=!opa, #ektin, protease inhibitor (Puga#enthi 8,

    2>@ Bhat, 203 Berdasarkan hasi# pene#itian Pangastuti H3P3 dan Tri9ibo9o 7

    (*-- bah9a #ama perendaman, perebusan dan pengukusan berpengaruh terhadap

    kadar /aktor antinutriti/ pada proses pembuatan tempe3 7e#ain itu ndra9ati, *--0 cit

    7ri Handajani dan 1indi Atmaka, *--2 mengatakan bah9a sebagian besar ;at

    merugikan %ang terkandung da#am koro benguk rusak o#eh pemanasan dan sebagian

    #agi #arut da#am air3 "ika dibandingkan dengan biji kede#ai, kandungan protein dan

    #emak biji koro benguk #ebih rendah, tetapi karbohidratn%a dan seratn%a #ebih besar 

    sehingga berpotensi da#am penanggu#angan pen%akit degenerati/3 Kandungan H.'

    da#am biji segar **,> mgJ*g, dan sete#ah perendaman tiga hari tingga# , mg (7ri

    Handajani, et a#, *--3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    12/34

    7ejauh ini keberadaan asam /itat di da#am bahan makanan keban%akan tidak 

    dikehendaki3 Ha# ini dikarenakan di da#am bahan makanan asam /itat membentuk 

    komp#eks dengan minera#=minera# penting dan atau dengan protein3 Ban%ak dari

    komp#eks tersebut tidak #arut dan men%ebabkan minera#minera# %ang terikat tidak 

    tersedia secara bio#ogis bagi tubuh pada kondisi /isio#ogis tertentu3 5mumn%a

     pene#itian pada makh#uk hidup memper#ihatkan bah9a asam /itat menghambat

     bioavai#abi#itas ;at besi makanan karena terbentukn%a komp#eks3 7emakin tinggi

    kandungan asam /itat da#am bahan makanan, semakin sedikit jum#ah ;at besi %ang

    dapat diserap tubuh (A#suhendra, 2>3

    Pengo#ahan koro pada umumn%a dia9a#i dengan perendaman untuk 

    menghi#angkan sianidan%a karena kadar sianida pada koro re#ati/ tinggi3 7ete#ah

     perendaman biasan%a diikuti dengan pemasakan3 Karena kandungan karbohidrat %ang

    tinggi men%ebabkan koro memi#iki tekstur %ang keras, sehingga pemasakan di#akukan

    agar teksturn%a menjadi #unak3 Ka#au kede#ai kandungan proteinn%a bisa sekitar >,

    sementara untuk Koro bisan%a sekitar *:3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    13/34

    $ambar

    7umber ) dokumen pribadi

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    14/34

    . Kandungan 4n;im Kata#ase pada Biji Koro Benguk, Koro Benguk %ang !irebus, dan

    Koro Benguk %ang !ijadikan Tempe

    Biji koro benguk merupakan jenis biji=bijian %ang mengandung sen%a9a

    /eno#ik3 Berdasarkan hasi# pene#itian in vitro menunjukkan bah9a ekstrak 

    metano# biji koro benguk ( Mucuna pruriens) mempun%ai aktivitas antioksidan3

    4kstrak koro benguk dengan konsentrasi **> gJm& mempun%ai aktivitas

     pemerangkapan radika# H2O2sebesar > L (Rajesh9ar dkk3, 2>) *=-3

    7edangkan pada pengo#ahan biji koro benguk dengan /ermentasi dapat

    meningkatkan aktivitas antioksidan3 Ha# itu akan meningkatkan ni#ai /ungsiona#

    dari produk tersebut3 Hasi# ana#isis aktivitas antioksidan pada biji koro benguk 

    ada#ah :0,2 M ,: L dan tempe koro benguk ada#ah ->,>- M ,:2L

    (Retnaningsih, dkk, *>03

    Antioksidan %ang ada di da#am tempe ini terdapat da#am bentuk iso/#avon3

    7en%a9a tersebut masuk da#am ke#ompok /#avonoid, sen%a9a po#i/eno#ik %ang

    umumn%a terdapat di da#am buah=buahan, sa%ur=sa%uran, dan biji=bijian3

    Antioksidan da#am pengertian kimia ada#ah sen%a9a pemberi e#ektron

    (electron donor , da#am arti bio#ogis antioksidan ada#ah semua sen%a9a %ang

    dapat meredam radika# bebas dan reactive oxygen species (RO7 %ang bersi/at

    oksidan termasuk protein pengikat #ogam3 4n;im=en;im %ang dapat

    memusnahkan radika# bebas ada#ah superoksida dismutase (7O!, g#utation

     peroksidase ($PC, dan kata#ase3 Antioksidan sering diisti#ahkan sebagai peredam

    dan pemerangkap ( scavenger  radika# bebas %aitu mo#eku# %ang dapat bereaksi

    dengan radika# bebas dan ber/ungsi menetra#kan radika# bebas (Perciva#, *--:) *=

    +3

    Tempe dibuat me#a#ui proses /ermentasi menggunakan kapang terutama

     hizopus oligosporus3 7ete#ah menga#ami proses /ermentasi, tempe memi#iki ni#ai

    kecernaan %ang tinggi dan bentuk antioksidan bebas, karena antioksidan tersebut

    sudah ter#epas dari sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan ==

    g#ikosidik3 7e#ain itu biji koro benguk dibuat tempe untuk menghi#angkan

    sen%a9a antigi;i seperti asam sianida (Handajani, 2*) 222=22>3

    Pada proses /ermentasi tempe, terjadi biotrans/ormasi iso/#avon g#ikosidamenjadi iso/#avon ag#ikon, %aitu sen%a9a antioksidan tersebut sudah ter#epas dari

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    15/34

    sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan No=g#ikosidik3 Ha# ini akan

    meningkatkan aktivitas antioksidan pada tempe3 Pada proses /ermentasi tempe

    terbentuk antioksidan /aktor (,0,+=trihidroksi iso/#avon %ang mempun%ai si/at

    antioksidan pa#ing kuat dibandingkan dengan iso/#avon da#am biji3 !engan

    demikian tempe koro memi#iki potensi sebagai antioksidan %ang tinggi

    (Ratnaningsih, 2*) *>>3

    Tempe mengandung antioksidan, sen%a9a %ang mampu menangka#

    radika# bebas3 Radika# bebas ada#ah atom atau mo#eku# %ang memi#iki e#ektron

    %ang tidak berpasangan dan bersi/at dapat menarik e#ektron dari sen%a9a #ain

    sehingga terbentuk radika# bebas %ang baru3 Radika# bebas %ang sangat reakti/ 

     bersi/at tidak stabi#, sehingga berumur sangat pendek dan su#it dideteksi3 .ontoh

    sen%a9a reakti/ misa#n%a gugus hidroksi# (=OH, radika# peroksi# (OOH, ion

    superoksida (O23, Hidrogen peroksida (H2O2, dan #ain=#ain3 Keberadaan radika#

     bebas da#am tubuh dapat men%ebabkan terjadin%a pen%akit degenerati/, misa#n%a

     jantung, diabetes, ateroske#orosis, kanker dan sebagain%a3 Bahkan radika# bebas

    ini dapat merusak se#aput se# dan !'A (Perciva#, *--:) *=+@ Agba/or dan

     '9achuk9u, 2**) +3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    16/34

    3 84TO!4 P4'4&TA'

    A3 A#at dan Bahan

    A#at dan bahan %ang kami gunakan ada#ah sebagai berikut3

    A#at )

    a3 Tabung reaksi

     b3 Pipet tetes

    c3 Tabung berska#a

    d3 Pisau si#et

    e3 7umbat gabusJkaret

    /3 'eraca

    g3 K#em dans tati/ 

    h3 Bekerge#as

    i3 &idi dan korek api

     j3 7e#ang p#astic

    Bahan

    a3 Biji kara benguk 

     b3 H2O2 *L

    c3 Auades

    B3 .ara Kerja

    a 8engetahui keberadaan en;im kata#ase

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    17/34

     b 8e#ihat pengaruh panambahan substrat pada aktivitas kata#ase

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    18/34

    c 8engetahui pengaruh pH terhadap aktivitas en;im kata#ase

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    19/34

    d 8e#ihat pengaruh suhu terhadap aktivitas en;im kata#ase

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    20/34

    7kema percobaan

    .3 Tabu#asi !ata

    Gelas ukur

    Gelas beker

    Selang plastik

     Tabung reaksi

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    21/34

    7ampe# "um#ah

    $e#embung

    &ama Terbentuk 

    $e#embung (menit

    Tes '%a#a

    *3 Biji koro benguk ?

    H2O2

    > ???

    23 Biji koro benguk

    rebus? H2O2

    > ?

    3 Tempe koro benguk ?

    H2O2

    :: > ????

    +3 Tempe koro benguk

    rebus? H2O2

    > ??

    Keterangan

    = ) Tidak 8en%a#a

    ? ) 7angat redup

    ?? ) Redup??? ) Terang

    ???? ) 7angat Terang

    ????? ) 7angat Terang 7eka#i

    !3 Ana#isis !ata

    $ra/ik *3 "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan

    Biji koro benguk + H2O2

    0

    20

    40

    60

    80

    100

     Jumlah Gelembung

     Jumla Gelembung

    sampel

     jumlah gelembng (buah)

    $ra/ik 23 5ji '%a#a

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    22/34

    00!"

    11!"22!"

    ##!"

    44!"

    #

    1

    4

    2

    Tes Nyala

     Tes $%ala

    BAB

    P48BAHA7A'

    Percobaan %ang di#akukan pada hari Kamis tangga# 2: 8aret 2* di &aboratorium

    Bio#ogi!asar 68PA 5' berjudu# D5ji Kata#ase pada Berbagai Kondisi Benguk ( Mucuna

     pruriens) (Biji Benguk, Benguk Rebus, Tempe Benguk Rebus dan Tempe Benguk !itinjau

    dari "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan, &ama Terbentuk $e#embung, dan Tes '%a#aE+

    Tujuan dari percobaan ini %ang pertama %aitu men%e#idiki perbedaan aktivitas pemecahan

    H2O2 antara biji benguk, tempe benguk, dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung

    %ang dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung, dantesn%a#a3Tujuan %ang kedua %aitu

    men%e#idikihasi# %ang #ebih baik antara biji benguk, tempe benguk, dan benguk rebus da#am

    memecah H2O2 ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung,

    dantesn%a#a3

    Adapun a#at dan bahan %ang digunakan diantaran%a ada#ah tabung reaksi, pipet tetes,

    tabung berska#a, pisau, sumbat gabusJkaret, a#u dan mortar, kaki tiga, pembakar spritus,

     pe9aktu, neraca, ge#as beker, #idi dan korek api, se#ang p#astic, biji kara benguk, H2O2 *L,

    dan air3

    Percobaan pertama  %ang di#akukan %aitu uji kandungan en;im kata#ase pada biji

    koro benguk %ang be#um direbus3 &angkah pertama %ang di#akukan praktikan %aitu

    mengha#uskan biji koro benguk dengan a#u dan mortar3 Kemudian menimbang masa biji koro

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    23/34

     benguk sebesar ,> gr dengan neraca digita#3 7e#anjutn%a memasukan ,>gr biji koro benguk 

    ke da#am tabung reaksi %ang berisi * m# H2O2 #a#u merangkain%a sesuai skema a#at percobaan3

    Adapun hasi# %ang dipero#eh se#ama > menit pada uji kandungan en;im kata#ase

     pada biji koro benguk %aitu ge#embung gas seban%ak dan n%a#a bara api %ang terang ???3

    Ha# ini menunjukan bah9a terdapat kandungan en;im kata#ase pada biji koro benguk 3

    Percobaan %ang di#akukan untuk menguji adan%a kandungan kata#ase pada biji koro

     benguk menunjukkan hasi# %ang sesuai dengan teori, bah9a se#ain pada he9an en;im

    kata#ase juga terdapat pada tumbuhan, %aitu pada biji koro benguk3 4n;im ini berperan da#am

    memecah h%drogen peroksida3

    8ekanisme aktivitas kata#ase sebagai antioksidan dengan cara mengkata#isis

     pemecahan H2O2menjadi H2O dan O2, ada#ah sebagai berikut (Kumar dkk, 2:3

    Kata#ase=6e( ? H2O2 sen%a9a=* ?H2O tahap

    7en%a9a=* ? H2O2kata#ase=6e( ? H2O2 ? O2tahap

    2H2O2 2H2O ? O2

    7en%a9a=* merupakan sen%a9a antara serta merupakan kunci dari oksidasi da#am

    reaksi en;imatik kata#ase3 Ha# ini disebabkan o#eh keberadaan sen%a9a=* heme dengan suatu

    atom oksigen dari mo#eku# H2O2 pada tahap ini3 Hasi# reaksi ini membentuk mo#eku# air 

     pada tapak akti/ en;im %ang dekat heme 6e3

    8enurutRajesh9ardkk3 (2>) *=- biji koro benguk merupakan jenis biji=bijian

    %ang mengandung sen%a9a /eno#ik3 Berdasarkan hasi# pene#itian in vitro menunjukkan

     bah9a ekstrak metano# biji koro benguk ( Mucuna pruriens) mempun%ai aktivitas

    antioksidan3 4kstrak koro benguk dengan konsentrasi **> gJm& mempun%ai aktivitas

     pemerangkapan radika# H2O2 sebesar > L3

    Biji koro benguk merupakan sumber protein tambahan da#am makanan, %ang mana

    ka%a akan antioksidan3 'amun demikian da#am koro benguk juga terdapat sen%a9a atau

    /actor antinutriti/ seperti /eno#, tanin, &=!opa, #ektin, protease inhibitor (Puga#enthi 8, 2>@

    Bhat, 203 "ika dibandingkan dengan biji kede#ai, kandungan protein dan #emak biji koro

     benguk #ebih rendah, tetapi karbohidratn%a dan seratn%a #ebih besar sehingga berpotensi

    da#am penanggu#angan pen%akit degenerati/3

    7e#anjutn%a uji pada koro benguk %ang direbus ter#ebih dahu#u3 Berdasarkan hasi#

     pen%e#idikan terhadap aktivitas kata#ase pada biji benguk ( Mucuna pruriens rebus, dipero#eh

    hasi# bah9a tidak terdapat ge#embung %ang dihasi#kan namun positi/ terhdap uji n%a#a3

    Berdasarkan hasi# pen%e#idikan diketahui bah9a biji benguk ( Mucuna pruriens memi#iki

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    24/34

    aktivitas kata#ase3 Ha# tersebut ditunjukkan dari hasi# pen%e#idikan aktivitas kata#ase dengan

    meninjau jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan da#am rentang 9aktu > menit dan tes uji n%a#a

    untuk menguji keberadaan gas oksigen3

    Hasi# pen%e#idikan menunjukkan bah9a uji biji benguk dengan h%drogen peroksida

    menghasi#kan ge#embung dengan tes uji n%a#a positi/3 Ha# tersebut menunjukkan bah9a di

    da#am biji benguk terdapat en;im kata#ase %ang mampu me#aksanakan proses oksidasi

    h%drogen peroksida menjadi oksigen dan air me#a#ui reaksi di ba9ah ini3

    2H2O2 2H2O ? O23

    !onor?H2O2 donor teroksidasi ?2H2O3

    (&uhova,et3a#,2)*>*3

    Ha# tersebut didukung o#eh hasi# pene#itian Retnaningsih, dkk ,(2*)*>0 bah9a hasi#

    ana#isis aktivitas antioksidan pada biji koro benguk ada#ah :0,2 M ,: L dan tempe koro

     benguk ada#ah ->,>- M ,:2L 3 Biji benguk mengandung sen%a9a %ang dapat meredam

    radika# bebas dan reactive oxygen species (RO7 %ang bersi/at oksidan seperti h%drogen

     peroksida %ang merupakan oksidator kuat3 !engan demikian dapat diketahui bah9a da#am

     biji benguk terdapat sen%a9a peredam dan pemerangkap ( scavenger  radika# bebas %aitu

    mo#eku# %ang dapat bereaksi dengan radika# bebas dan ber/ungsi menetra#kan radika# bebas3

    Berdasarkan uraian di atas maka dapat diketahui bah9a da#am biji benguk terdapat

    en;im=en;im %ang mampu berperan sebagai aktioksidan3 Hasi# %ang ber#ainan dipero#eh

    terhadap hasi# uji biji benguk rebus3 8eski masih mampu men%a#akan bara api da#am

    keadaan redup (?, biji benguk rebus tidak menghasi#kan ge#embung %ang terdeteksi3

    Peristi9a ini dapat terjadi akibat adan%a perubahan struktur en;im akibat adan%a pemanasan3

    Pemanasan dapat merubah struktur en;im sehingga en;im tidak dapat memerankan /ungsin%a

    secara norma#3 Ha# tersebut terjadi karena kenaikan temperature dapat meningkatkan energ%

    kinetic en;im pada suatu titik %ang dapat mengganggu ikatan non kova#en %ang

    mempertahankan struktur tiga dimensi en;im3 Kerusakan tersebut men%ebabkan rantai

     po#ipeptida mu#ai terbuka sehingga en;im terdenaturasi dan kehi#angan kemampuan

    kata#itikn%a3 Pern%ataan di atas didukung o#eh 8urra%,et3a#,(2) bah9a the polypeptide

    chain then begins to unfold, or denature , with an accompanying rapid loss of catalytic

    activity. 7u and &i,(20)** juga men%atakan bah9a after a certain point this will no longer 

    be true, as sustained high temperatures will begin to denature the catalyst, lowering the

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    25/34

    reaction rate dramatically3 !enaturasi en;im mengakibatkan hi#angn%a kemampuan kata#itik 

    en;im sehingga #aju reaksi semakin menurun3

    4n;im juga tersusun atas protein pada bagian apoen;imn%a3 Kondisi %ang berbeda

    dengan di se# tempat protein bekerja dapat men%ebabkan protein kehi#angan /ungisng%a3

    Protein dapat kehi#angan struktur tiga dimensin%a me#a#ui proses %ang disebut dengan

    denaturasi3 &ehninger,et3a#,(2:) *+ men%atakan bah9a  proteins can be denatured by

    heat, which has complex effects on the wea% interactions in a protein /primarily hydrogen

    bonds). Protein dapat terdenaturasi dengan panas3 Panas dapat mempengaruhi interaksi #emah

    da#am protein, %aitu pada ikatan h%drogen protein3 Bi#a temperature meningkat secara

     per#ahan, kon/ormasi protein akan tetap sama, namun kenaikan temperature da#am jum#ah

     besar akan mu#ai men%ebabkan struktur protein berubah3 8eski struktur protein en;im tidak 

    rusak di semua sisi, namun kerusakan di satu sisi dapat memengaruhi struktur tota# protein

    sehingga terjadi penurunan /ungsi protein3

    nteraksi nonkova#en antara en;im dan substrat berperan da#am menghasi#kan energi

    %ang mampu menurunkan energi aktivasi reaksi en;imatik3 nteraksi antara substrat dan

    en;im menghasi#kan energi bebas %ang disebut binding energy. Binding energy  ada#ah

    sumber energi bebas utama %ang digunakan o#eh en;im untuk menurunkan energi aktivasi3

    8engingat pentingn%a interaksi antara substrat dan en;im, maka struktur protein %ang juga

     berperan da#am membentuk interaksi antara en;im dan substrat menjadi penting3 Berikut

    merupakan contoh interaksi antara en;im dan substrat3

    7umber gambar ) &ehninger,et3a#,(2:) *:-3

    1arna merah ada#ah 'A!P?  sedangkan 9arna kuning ada#ah tetrahidro/o#at3 Keduan%a

     berikatan dengan en;im me#a#ui ikatan=ikatan %ang sa#ah satun%a ada#ah ikatan h%drogen3

    Berdasarkan gambar di atas dapat diketahui bah9a struktur en;im memengaruhi interaksin%a

    dengan substrat3

    Pen%e#idikan ini di#akukan dengan memanaskan biji benguk se#ama menit da#am

    temperature berkisar :>

    .3 8urra%,et3a#,(2) menekankan bah9a the temperature range

    over which an enzyme maintains a stable, catalytically competent conformation depends

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    26/34

    upon(and typically moderately exceeds(the normal temperature of the cells in which it 

    resides. Titik tekann%a ada#ah bah9a temperature optima# masing=masing en;im berbeda=

     beda, sebab en;im di da#am tubuh bekerja di se# %ang berbeda=beda3 Temperature optima#

    suatu en;im sehingga en;im dapat memaksima#kan kemampuan kata#itikn%a bergantung pada

    temperature norma# se# dimana en;im bekerja3 4n;im kata#ase ada#ah en;im %ang bekerja

     pada organe# peroksisome %ang berada di se#3 .ampbe##,et3a#,(2**) *** bah9a  peroxisomes

    contain enzymes that remove hydrogen atoms from various substrates and transfer them to

    oxygen /"), thus producing hydrogen peroxide /*") as a by0product 3 Titik tekan

     pern%ataan di atas ada#ah bah9a en;im kata#se %ang berperan da#am oksidasi h%drogen

     peroksida bekerja di da#am se# tubuh sehingga dapat bekerja pa#ing e/isien pada rentang

    temperature 0o  .3 O#eh sebab itu pemanasan da#am temperature :> . cukup mampu

    merusak ikatan nonkova#en %ang mempertahankan strutkur tiga dimensi en;im3 Akibatn%a

    ikatan en;im dengan substrat menjadi terganggu dan en;im tidak mampu bekerja optima#3

    Ha# ini ditunjukkan dari hasi# pen%e#idikan bah9a en;im kata#ase pada biji benguk masih

    mampu menguraikan h%drogen peroksida menjadi air dan oksigen %ang terdeteksi da#am uji

    n%a#a3 8eski demikian oksigen %ang dihasi#kan da#am jum#ah sangat sedikit sehingga tidak 

    terdeteksi me#a#ui penghasi#an ge#embung dan han%a men%a#akan bara api dengan redup dan

    mati da#am rentang 9aktu cepat3

    Pen%e#idikan ini men%impu#kan bah9a aktivitas kata#ase da#am biji benguk rebus

    te#ah menga#ami penurunan karena bagian protein pada en;im te#ah menga#ami perubahan

    struktur tiga dimensin%a %ang disebut dengan denaturasi3 Akibatn%a en;im kata#ase

    kehi#angan aktivitas kata#itikn%a da#am memecah h%drogen peroksida menjadi air dan

    oksigen3 &ehninger,et3a#,(2:) *:- menekankan bah9a thus the primary, secondary,

    tertiary, and &uaternary structures of protein enzymes are essential to their catalytic activity3

    Bi#a bagian protein en;im diuraikan menjadi asam=asam aminon%a, struktur protein baik 

     primer, sekunder, maupun tersier dan kuartenern%a dapat berubah, sedangkan struktur protein

    sangat penting bagi kemampuan kata#itik suatu en;im3 !engan demikian temperature %ang

    ekstrem dengan rentang jauh berbeda dengan temperature en;im tersebut biasa bekerja dapat

    merusak kemampuan en;im da#am mengkati#isis suatu reaksi3

    Kemudian se#anjutn%a uji di#akukan pada sampe# koro benguk %ang dibuat tempe

    tanpa direbus3 Hasi# percobaan men%atakan bah9a sampe# tempe koro benguk %ang

    ditambah H2O2 menghasi#kan ge#embung seban%ak :: buah da#am 9aktu #ima menit dan

    menghasi#kan n%a#a sangat terang (????3 $e#embung %ang dihasi#kan sampe# tempe koro

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    27/34

     benguk %ang ditambah H2O2 pa#ing ban%ak dibandingkan dengan sampe# %ang #ain3 Ha# ini

    ter#ihat dari gra/ik berikut3

    $ra/ik *3 "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan

    Biji koro benguk + H2O2

    0

    20

    40

    60

    80

    100

     Jumlah Gelembung

     Jumla Gelembung

    sampel

     jumlah gelembng (buah)

    !emikian pu#a dengan hasi# uji n%a#a pada sampe# ini %ang menunjukkan n%a#a pa#ing

    terang (???? dibandingkan dengan sampe# %ang #ain3

    $ra/ik 23 5ji '%a#a

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    28/34

    00!"

    11!"22!"

    ##!"

    44!"

    #

    1

    4

    2

    Tes Nyala

     Tes $%ala

    Ban%akn%a jum#ah ge#embung dan terangn%a n%a#a bara api pada sampe# tempe koro

     benguk menunjukkan bah9a tempe ini beraktivitas da#am pemerangan radika# H2O2 dengan

     baik3 Ha# ini dikarenakan pada dasarn%a biji koro benguk merupakan jenis biji=bijian %ang

    mengandung sen%a9a /eno#ik3 Rajesh9ar dkk3(2>, *=- da#am hasi# pene#itian in vitro0

    n%a  menunjukkan bah9a ekstrak metano# biji koro benguk ( Mucuna pruriens) mempun%ai

    aktivitas antioksidan3 4kstrak koro benguk dengan konsentrasi **> gJm& mempun%aiaktivitas pemerangkapan radika# H2O2 sebesar > L3 7edangkan pada pengo#ahan biji koro

     benguk dengan /ermentasi dapat meningkatkan aktivitas antioksidan3 Ha# itu akan

    meningkatkan ni#ai /ungsiona# dari produk tersebut3 Hasi# ana#isis aktivitas antioksidan pada

     biji koro benguk ada#ah :0,2 M ,: L dan tempe koro benguk ada#ah ->,>- M ,:2L

    (Retnaningsih, dkk, *>03

    Tempe dibuat me#a#ui proses /ermentasi menggunakan kapang terutama  hizopus

    oligosporus3 7ete#ah menga#ami proses /ermentasi, tempe memi#iki ni#ai kecernaan %ang

    tinggi dan bentuk antioksidan bebas, karena antioksidan tersebut sudah ter#epas dari sen%a9a

    gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan ==g#ikosidik3 7e#ain itu biji koro benguk dibuat

    tempe untuk menghi#angkan sen%a9a antigi;i seperti asam sianida (Handajani, 2*) 222=

    22>3

    Antioksidan %ang ada di da#am tempe ini terdapat da#am bentuk iso/#avon3 7en%a9a

    tersebut masuk da#am ke#ompok /#avonoid, sen%a9a po#i/eno#ik %ang umumn%a terdapat di

    da#am buah=buahan, sa%ur=sa%uran, dan biji=bijian3 Antioksidan da#am pengertian kimia

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    29/34

    ada#ah sen%a9a pemberi e#ektron (electron donor , da#am arti bio#ogis antioksidan ada#ah

    semua sen%a9a %ang dapat meredam radika# bebas dan reactive oxygen species (RO7 %ang

     bersi/at oksidan termasuk protein pengikat #ogam3 4n;im=en;im %ang dapat memusnahkan

    radika# bebas ada#ah superoksida dismutase (7O!, g#utation peroksidase ($PC, dan

    kata#ase3 Antioksidan sering diisti#ahkan sebagai peredam dan pemerangkap ( scavenger 

    radika# bebas %aitu mo#eku# %ang dapat bereaksi dengan radika# bebas dan ber/ungsi

    menetra#kan radika# bebas (Perciva#, *--:) *=+3

    $e#embung dan hasi# n%a#a bara pada sampe# ini #ebih tingi dari biji koro benguk 

    mentah dikarenakan pada proses /ermentasi tempe, terjadi biotrans/ormasi iso/#avon

    g#ikosida menjadi iso/#avon ag#ikon, %aitu sen%a9a antioksidan tersebut sudah ter#epas dari

    sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan No=g#ikosidik3 Ha# ini akan meningkatkan

    aktivitas antioksidan pada tempe3 Pada proses /ermentasi tempe terbentuk antioksidan /aktor 

    (,0,+=trihidroksi iso/#avon %ang mempun%ai si/at antioksidan pa#ing kuat dibandingkan

    dengan iso/#avon da#am biji3 !engan demikian tempe koro memi#iki potensi sebagai

    antioksidan %ang tinggi (Ratnaningsih, 2*) *>>3

    Pada percobaan %ang se#anjutn%a ada#ah benguk %ang sudah menjadi tempe %ang

    direbus, maka tempe tersebut direbus ter#ebih dahu#u kemudian sete#ah itu ditambah

    dengan H2O2 3 7ebe#um percobaan dimu#ai ada#ah menimbang tempe %ang di rebus3 Pada

     percobaan saat Tempe rebus ? H2O2  bertujuan untuk me#acak dan munujukkan keberadaan

    kata#ase, perhitungan ge#embung di#akukan se#ama > menit3 Pada penggunaan bahan tempe

     benguk rebus sebagai ekstrak tidak menghasi#kan ge#embung dan ketika bara api dimasukkan

    keda#am tabung reaksi juga timbu# n%a#a api %ang redup (?? 3 Ha# ini disebabkan karena

     protein di da#am en;im kata#ase %ang terdapat di tempe benguk rebus te#ah rusak sehingga

    tidak dapat menguraikan H2O2 menjadi H2O dan O23 tu membuktikan juga bah9a dimana

    en;im kata#ase tidak akan bekerja secara optima# pada suhu tinggi saat perebusan, karena kita

    ketahui bah9a en;im kata#ase akan bekerja pada suhu netra#3

    Kenaikan temperature dapat meningkatkan energ% kinetic en;im pada suatu titik 

    %ang dapat mengganggu ikatan non kova#en %ang mempertahankan struktur tiga dimensi

    en;im3 Kerusakan tersebut men%ebabkan rantai po#ipeptida mu#ai terbuka sehingga en;im

    terdenaturasi dan kehi#angan kemampuan kata#itikn%a3 Pern%ataan di atas didukung o#eh

    8urra%,et3a#,(2) bah9a the polypeptide chain then begins to unfold, or denature, with

    an accompanying rapid loss of catalytic activity.7u and &i,(20)** juga men%atakan bah9a

    after a certain point this will no longer be true, as sustained high temperatures will begin to

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    30/34

    denature the catalyst, lowering the reaction rate dramatically3 Berdasarkan ha# tersebut,

    Temperature optima# masing=masing en;im berbeda=beda, sebab en;im di da#am tubuh

     bekerja di se# %ang berbeda=beda3 Temperature optima# suatu en;im sehingga en;im dapat

    memaksima#kan kemampuan kata#itikn%a bergantung pada temperature norma# se# dimana

    en;im bekerja3

    7ebe#um direbus , tempe dibuat me#a#ui proses /ermentasi menggunakan kapang

    terutama hizopus oligosporus3 7ete#ah menga#ami proses /ermentasi, tempe memi#iki ni#ai

    kecernaan %ang tinggi dan bentuk antioksidan bebas, karena antioksidan tersebut sudah

    ter#epas dari sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan ==g#ikosidik3 7e#ain itu biji

    koro benguk dibuat tempe untuk menghi#angkan sen%a9a antigi;i seperti asam sianida3

    7ehingga tempe %ang te#ah direbus mengakibatkan protein di da#am en;im kata#ase

    %ang terdapat di tempe benguk rebus te#ah rusak sehingga tidak dapat menguraikan

    H2O2 menjadi H2O dan O23 tu membuktikan juga bah9a dimana en;im kata#ase tidak akan

     bekerja secara optima# %ang ditandai dengan tidak menghasi#kan ge#embung saat di amati dan

    ketika bara api dimasukkan keda#am tabung reaksi juga timbu# n%a#a api %ang redup (?? dan

    7uhu sangat mempengaruhi karena sebagian besar ;at merugikan %ang terkandung da#am

    koro benguk rusak o#eh pemanasan dan sebagian #agi #arut da#am air3 4n;im menjadi rusak 

     bi#a suhun%a ter#a#u tinggi atau rendah3 Protein akan mengenta# atau menga#ami koagu#asi

     bi#a suhun%a ter#a#u tinggi (panas3

    !ari pembahasan diatas dapat disimpu#kan bah9a akti/itas sampe# tempe koro

     benguk pa#ing tinggi dibandingkan dengan sampe# #ain dikarenakan kandungan antioksidan

    %ang mampu menangka# radika# dari H%drogen peroksida (H2O2 berjum#ah pa#ing ban%ak 

    dibandingkan kandungan antioksidan pada sampe# %ang #ain3

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    31/34

    BAB F

    K478P5&A' !A' 7ARA'

    A3 K478P5&A'

    Berdasarkan percobaan dan pembahasan dapat disimpu#kan bah9a

    *3 Terdapat perbedaan aktivitas pemecahan H2O2 antara biji benguk, tempe benguk,

    dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan, #ama terbentuk 

    ge#embung, dan tes n%a#a3

    23 Akti/itas sampe# tempe koro benguk pa#ing tinggi dibandingkan dengan sampe#

    #ain dikarenakan kandungan antioksidan %ang mampu menangka# radika# dari

    H%drogen peroksida (H2O2 berjum#ah pa#ing ban%ak dibandingkan kandungan

    antioksidan pada sampe# %ang #ain

    A3 7ARA'

    Peman/aataan koro benguk sebagai sumber bahan makanan sangat baik untuk 

    menunjang kebutuhan nutrisi tubuh3 !a#am peman/aatann%a berdasarkan hasi#

     percobaan se%og%an%a dapat dijadikan 9a9asan mengenai bagaimana pengo#ahan

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    32/34

    dan pengonsumsian %ang pa#ing baik untuk mempero#eh man/aat da#am pemecahan

     peroksida3 7ehingga potensi tanaman benguk %ang tumbuh di ndonesia dapat #ebih

    dikembangan sebagai a#ternati/ bahan makanan3

    !a/tar Pustaka

    Agba/or, K3'3 dan '9achuk9u '3 (2**3 Ph%tochemica# Ana#%sis and AntioCidant Propert%

    o/ &ea/ 4Ctracts o/ -itexdoniana and  Mucuna pruriens3  Biochemistry esearch 1nternational. Fo#ume 2**, Artic#e ! +>-:-, + pages doi)*3**>>J2**J+>-:-3

    Akhtar,Kha#ida, et3a#32*23 4//ect o/ pH and Temperature on the .ata#%tic Properties o/ 

    Pro%#rt(# o Ma!"a!## /(o(/#  J.Chem.Soc.Pak., Vol. 34, No. 2, 2!2(versi

    e#ektronik3 !iunduh dari http)JJ#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# 2 8aret 2*3

    A#suhendra3 2>3 7udah Ban%ak Konsumsi 7a%ur 8asih 7aja Kurang !arah3

    9993ha#a#mui3or3idJk3

    Bajji,8ohammed,et3a#3203 .ata#ase inhibition acce#erates dormanc% re#ease and sprouting

    in potato (#olanum tuberosum &3 tubers)  Biotechnol. !gron. #oc. 2nviron. 20 **

    (2, *2*N**(versi e#ektronik3 !iunduh dari http)JJ#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# 2

    8aret 2*3

    Ba%u Kanetro dan 7et%o Hastuti, 23 Ragam Produk O#ahan Kacang N kacangan3

    5niversitas 1angsa 8angga#a Press3 og%akarta

    .eme##i, 43, Baumgartner, A3, Anderson, !3 2-, AntioCidant and The .ommet Assa%3

     Mutation esearch, :*)>*=03

    http://lib.ugm.ac.id/http://lib.ugm.ac.id/http://lib.ugm.ac.id/http://lib.ugm.ac.id/

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    33/34

    4ssid,836,et3a#32*+3 H%drogen PeroCide and .ata#ase as a 9a% to break dormanc% o/ potato

    tubers (#olanum tuberosum &3)  1ntl 3 !gri rop #ci. -ol., 4 /56), 57805789, :57

    (versi e#ektronik3 !iunduh dari http)JJ#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# 2 8aret 2*3

    Handajani, 73 (2*3 ndogenous mucuna tempe as /unctiona# /ood3  !sia ;acific 3ournalof 

    linical 3

    Hareshchandra,!esai ogesh,et3a#32*>3 'euro=protective ro#e o/ seeds o/ Mucuna pruriens

    B4K and Mucuna monosperma !. in 9istar a#bino rats) 'he 3ournal of

     ;hytopharmacology :56= 7/8)> 480?5 (versi e#ektronik3!iunduh dari http)JJ9993

    #ib3ugm3ac3id3Pada tangga# 8aret 2*3

    Kumar, F3, Abbas, A3K3, 6austo, '3, Aster, "3.3, Hauth, ",.3 2:3 Robbins and .otran

    Patho#ogic Basic o/ !isease3 4ight edition3 ellular !daptations,ell 1n@ury, and 

    ell $eath, *)*=*:

    &uhova,&3et3a#323Activities o/ Amine oCidase, peroCidase, and cata#ase in seed#ings o/ 

    Pisum sativum & under di//erent #ight condition> ;L!

  • 8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk

    34/34

    Rajesh9ar, 3, Kumar, $3P373, $upta, 8353K3 dan 8a;umber (2>3 7tudies on in vitro

    antioCidant activities o/ methano# eCtract o/  Mucuna pruriens (6abaceae 7eeds3

     2uropean Bulletin of $rug esearch 1,(*) *=-3

    Ratnaningsih, .hristiana, dkk3 2*3  ;ening%atan !%tivitas !ntio%sidan #upero%sida

     $ismutase pada 'i%us *ipergli%emi dengan !supan 'empe Goro Bengu% /Mucuna

     pruriens L). di unduh dari> http>HHwww.@urnal0

    [email protected]?7H47 pada 7e#asa,

    8aret 2* puku# *32 1B3

    7huk#a,Kam#a Kant,et3a#3203 Mucuna pruriens Reduces 7tress and mproves the ua#it% o/

    7emen in n/erti#e 8en) e!M :5:=4/5)5A4577 (versi e#ektronik3!iunduh dari

    http)JJ9993 #ib3ugm3ac3id3Pada tangga# 8aret 2*3

    7u, chris and 8ei%i &i3203atalase Ginetics  (versi e#ektronik3!iunduh dari

    http)JJ999J#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# * 8aret 2*3

    7uhara32*23 ;engantar 'entang 2nzim3Bandung)5P3

    7ri Handajani3 *--3 Pengaruh &arutan Perendam dan Perebus Terhadap Kekerasan, Kua#itas

    Tanak, dan Kandungan 8inera# Biji Kacangkacangan3 6aku#tas Pertanian, 5niversitas

    7ebe#as 8aret3 7urakarta

    1a#ter .37chumb,et3a#3*->3  *ydrogen ;eroxide.  'e9 ork ) Reinho#d Pub#ishing

    .orporation3

    Gainuri 8asagus dan 7epte#ia na9ati 1anandi32*23 Aktivitas 7pesi/ik 8anganese

    #uperoxide $ismutase /Mnsod) !an Kata#ase pada Hati  Tikus %ang !iinduksi

    Hipoksia 7istemik)  Hubungann%a dengan Kerusakan Oksidati/)  Media Litbang 

     Gesehatan -olume