BAB 1PENDAHULUAN1.1Latar belakangsensitifitas menyatakan bahwa uji sentifitas bakteri merupakan suatu metode untuk menetukan tingkat kerendahan bakteri terhadap zat anti bakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktifitas anti bakteri. Metode uji sensifitas bakteri adalah metode cara bagaimana mengetahui dan mendapatkan produk alam yang berpotensi sebagai bahan anti bakteri serta mempunyai kemampuan untuk menghambat pertumbuhan atau mematikan bakteri pada kosentrasi yang rendah. Uji sentsitiifitas bakteri merupakan satuan metode untuk menentukan tingkat kerentanan bakteri terhadap zat anti bakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas anti bakteri(Hastowo, 1992).Diameter zona hambatan pertumbuhan bakteri menunjukan sensitifitas bakteri terhadap zat anti bakteri. Selanjutnya dikatakan bahwa semakin tebar diameter zona tambatan yang terbentuk bakteri tersebut semakin sansitif(Hastowo, 1992).Yang melatar belakangi percobaan ini yaitu praktikan dapat mengetahui beberapa zat anti mikrobial yang mempunyai daya hambat, kekuatan klasifikasi anti bacterial, pengukuran zat anti bakterial dan faktor-faktor yang mempunyai ukuran diameter zona hambatan.1.2Tujuan-Mengetahui faktor-faktor yang mempengaruhi ukuran diameter zona hambatan.-Mengetahui prinsip uji daya hambat mikroba-Mengetahui zat anti bakteril dalam menghambat atau membunuh pertumbuhan bakteri secara invintroBAB IITINJAUAN PUSTAKAKehidupan bakteri tidak hanya dipengaruhi oleh faktor-faktor lingkungan, tetapi juga akan mempengaruhi keadaan lingkungan.Misal bakteriTermogenesismenimbulkan panas didalam media tempat ia tumbuh. Bakteri dapat pula mengubah pH dari medium tempat ia hidup, perubahan ini disebut perubahan secara kimia. Adapun faktor-faktor lingkungan dapat dibagi atas factor-faktor biotik dan faktor-faktor abiotik. Faktor-faktor biotik terdiri atas mahluk-mahluk hidup, sedangkan faktor-faktor alam (fisika) dan faktor-faktor kimia (Dwidjoseputro,2005).Yang digolangkan sebagai faktor-faktor alam ialah temperatur,keabsahan, nilai osmotik dari medium, radiasi oleh sinar biasa dan radiasi oleh sinar-sinar yang lain, serta pengahancuran secara mekanik (Dwidjoseputro,2005).Pada umumnya metode yang digunakan dalam uji sensivitivitas bakteri adalah metode difusi agar yaitu dengan cara mengamati daya hambat pertumbuhanmikroorganisme oleh ekstrak yang diketahui dari daerah disekitar kertas cakram(paper disk) yang tidak ditumbuhi oleh mikroorganisme. Zona hambta pertumbuhan inilah yang menunjukan sensivitas bakteri terhadap bahan antibaktri (Dwidjoseputro,2005).Berdasarkan daya kerjanya, senyawa antibakteri dibagi menjadi dua sifat, yaitu :A.Zat yang hanya bersifat menghambat pertumbuhan bakteri dengan tidak membunuhnya.B.Zat yang dapat membunuh bakteri (Bacteriosidal) (Dwidjoseputro,2005).Kebanyakan antibiotik yang efektif kerjanya menggangu sintesis, penyusuhan atau fungsi komponen-komponen makromolekul sel. Seperti penghambtan pembentukan dinding sel oleh pelimiskin, penghambatan sintesis protein oleh kloramfenikol (Irianto,2006).Antibakteri yang efektif bagi banyak spesies, baik kokus, basil maupun spiril,dikatakan mempunyai spektrum luas. Sebaliknya, suatu antibiotik yang hanya efektif untuk spesies tertentu, disebut antibiotik yang spketrumnya sempit. Penisilis hanya efektif untuk memberantas terutama jenis kokus, oleh karena itu penisilin dikatakan mempunyai spektrum yang sempit. Tetrasiklin efektif bagi kokus, basil dan jenis spiril tertentu oleh karena tetrasiklin dikatakan mempunyai spektrum luas (Dwidjoseputro,2005).Zat yang dapat membunuh bakteri disebut desinfektan, germisida atau bakterisida. Apakah suatu kimia itu merupakan suatu antiseptik atau germisida,hal ini kebanyakan kali bergabtung kepada persenan konsentrasi dan lamanya kena zat tersebut (Dwidjoseputro,2005).Pada umumnya bakteri yang muda itu kurang daya tahannya terhadap desinfektan daripada bakteri yang tua. Pekat encernya konsentrasi, lamanya berada dibawah pengaruh desinfektan, merupakan factor-faktor yang masuk pertimbangan pula. Kenaikan temperatur menambah daya desinfektan, selanjutnya medium dapat juga menawar daya desinfektan susu, plasma darah, dan zat-zat lain yang serupa protein sering melindungi bakteri terhadap pengaruh desinfektan tertentu (Dwidjoseputro,2005).Diantara banyak faktor yang mempengaruhi aktivitas antibiotik in vitro, hal-hal tersebut dibawah ini perlu diperhatikan, karena sangat mempengaruhi hasil-hasil pengujiana.pH lingkunganb.Komponen-komponen mediumc.Stabilitas obatd.Takaran inakalume.Lamanya inkubasif.Aktifitas metabolisme mikroorganisme (Irianto,2006).Daya kerja bakterisidal berbeda dengan bakteri ostatik. Bakteriostatik berjalan searah yaitu bakteri yang telah mati tidak dapat berkembangbiak lagi meskipun bahan antibakteri telah dihilangkan bakteriostatik mempunyai karakteristik bila bahan antibakterinya dihilangkan maka bakteri tersebut dapat tumbuh lagi (Lay,1992).Istilah antibiotik pertama kali digunakan oleh Waksman (1945) sebagai nama dari suatu golongan substansi yang berasal dari bahan biologis yang kerjanya antagonistik terhadap mikroorganisme (Irianto,2006).Antibiotik ialah zat-zat yang dihasilkan oleh mikroorganisme dan zat zat dalam jumlah yang sedikitpun mempunyai daya hambat penghambat kegiatan mikroorganisme yang lain (Dwidjoseputro,2005).Zat-zat seperti H2O2, Na2BO4, KMnO4mudah benar melepaskan O2untuk menimbulkan oksidasi.Klor didalam air menyebabkan bebasnya O2, sehingga zat ini merupakan desinfektan. Hubungan klor langsung dengan protoplasma pun dapat menyebabkan oksidasi (Dwidjoseputro,2005).Zat seperti air raksa, perak, tembaga dan zat-zat organik seperti fenol, formaldehida, etanol menyebabkan penggumpalan protein yang merupakan konsitutuen dari protoplasma. Protein yang telah menggumpal itu protein yang mengalami denatirasi,dan didalam keadaan yang demikian itu protein tidak berfungsi (Dwidjoseputro,2005).GenusStremtomycesmenghasilkan streptomisin, aureomisin kloramisetin, teramisin, eritromisin, magnamisin yang masing-masing mempu yai khasiat yang berlainan. Akhir-akhir ini telah membuat klormisetin secara sintetik obat-obatan ini terkenal sebagai kloramfenicol (Dwidjoseputro,2005).Dalam hal infeksi oleh mikroorganisme yang resisten penelitian laboratorium sewaktu-waktu dapat menggunakan kombinasi antibiotik yang mungkin esensial (Irianto,2006).Kemampuan mikroorganisme untuk tumbuh dan tetapi hidup merupakan hal yang penting. Suatu pengetahuan dan pengertian tentang factor-faktor yang mempengaruhi kemampuan tersebut sangat penting untuk mengendalikan hubunganantara mikroorganisme-makanan-manusia (Buckle,1987).Penggunaan antiseptik dan disinfektan.Hingga sekarang semakinbanyak zat-zat kimia yang dipakai untuk membunuh atau mengurangi jumlah mikroorganisme dan penemuan-penemuan bar uterus muncul dipasaran. Oleh karena itu, tidak ada bahan kimia yang ideal atau yang dapat dipergunakan untuk segala macam keperluan, maka pilihan jatuh pada bahan kimia yang mampu membunuh organisme yang ada dalam waktu yang tersingkat dan tanpa merusak segala bahan yang didisinfeksi. Beberapa hal yang perlu diperhatikan pada disinfeksi secara kimia:-Rongga yang perlu cukup diantara alat-alat yang didisinfeksi. Sehingga seluruh permukaan alat tersebut dapat berkontak dengan disinfektan.-Lamanya disinfeksi harus tepat alat-alat yang didisinfeksi jangan diangkat sebelum waktunya.-Sebaiknya menyediakan hand lotion untuk merawat tangan setelah berkontak dengan disinfektan.Beberapa Disinfektan dan Antiseptika. Logam-logam Berat logam berat berfungsi sebagai antimikrobe oleh karena dapat mempresipitasikan enzim-enzim atau protein esensial dalam sel. Logam berat yang umumnya dipakai adalah Hg, Ag, Zn, dan Cu.b. fenol dan Senyawa-senyawa Sejenis fenol (asam karbol) untuk pertama kalinya dipergunakan lister didalam ruang bedah sebagai germisida untuk mencegah timbulnya infeksi pasca bedah.c. Alkohol Alcohol merupakan zat yang paling efektif dan dapat diandalkan untuk sterilisasi dan disinfeksi. Alcohol mendenaturasikan protein dengan jalan dehidrasi dan juga merupakan pelarut lemak.d. Aldehid Cara bekerjanya aldehid ialah dengan cara membunuh sel mikroba dengan mendenaturasikan protein.e. Yodium Larutan yodium baik dalam air maupun dalam alcohol bersifat sangat antiseptic dan telah lama dipakai sejak lama sebagai antiseptic kulit sebelum proses pembedahan.f. Detergen Sabun biasa tidak banyak khasiatnya sebagai zat pembunuh bakteri (bakterisida) tetapi kalu dicampur dengan hesaklorofen daya bunuhnya menjadi besar sekali.g. Antibiotik Antibiotik adalah suatu substansi (zat-zat) kimia yang diperoleh dari atau dibentuk dan dihasilkan oleh mikroorganisme dan zat-zat itu dalam jumlah yang sedikitpun mempunyai daya panghambat kegiatan mikroorganisme yang lain (Hastowo, 1992).BAB IIIMETODE KERJA3.1Waktu dan Tempat Pratikum kali ini, melakukan percobaan tentangUjiDayaHambatMikroba yang dilaksanakan pada hariRabu, tanggal 27April 2011, pukul 10.00-12.00WITA. Pengulangan percobaan pada hariKamis, tanggal28April 2011, pukul 11.30-14.30WITAdan pengamatan pada hariJumat, tanggal29 april 2011, pukul09.30-11.30WITAbertempat diLaboratoriumMikrobiologidanBioteknologiFakultasMatematikaDanIlmuPengetahuanAlamUniversitasMulawarmanSamrinda.3.2Alat danBahan3.2.1Alat-alat-laminar air flow-autoclave-hot plate-timbangan analitik-incubator-rak tabung reaksi-tabung reaksi-cawan petri-labu Erlenmeyer-lampu Bunsen-jarum ose-pinset-mikropipet-gelas ukur-magnetic stirrer-pipet volume-lidi dengan ujung berkapas-penggaris-spidol-kertas cakram-spray3.2.2Bahan-Bahan-biakan bakteristaphylococcus aerus-Nacl 0,9 %-MediaLBA-ampicillin 0,0125 gr-amoxilin 0,0125 gr-chloramphenicol 0,0125 gr-detergen-wipol-listeryn-detol-bayclin-kertas label-aquades 10 ml-alcohol 70 %-aluminium foil-kertas-karet gelang-tissue-kertas cakram3.3CaraKerja3.3.1UjiDayaHambatBakteriAntibakteri1.disemprotkan alcohol kepada tangan pratikan yang akan melakukan percobaan2.disiapkan cawan petri, media lba padat, bahan-bahan, lampu Bunsen, tabung reaksi, rak tabung reaksi, dan kertas cakram3.ditimbang bahan-bahan yang merupakan sebanyak 0,125 gr kemudian dilarutkan pada 10 ml aquades4.disiapkan tabung reasi yang bersisi biakan bakteri staphylococcus aerus dan nacl 0,9 % serta cawan petri yang sudah berisi media lba padat untuk antibakteri5.diambil 4 ose dari tabung reaksi biakan bakteri staphylococcus aerus kedalam tabung reaksi berisi nacl 0,9 %6.kemudian dimasukkan lidi berujung kapas steril didalam tabung-tabung reaksi yang berisi nacl 0,9 % kemudian diangkat diswabkan kedalam cawan petri untuk antbakterial yang terdapat media lba beberapa kali sampai rata pada permukaan media7.bakar pinset agar steril, diamkan sebentar agar dingin8.kemudian ambil kertas cakram, celupkan dalam larutan ampicillin kemudian masukkan kedalam cawan petri yang sudah diswab tadi dengan ditekan pelan kertas cakramnya, bakar kembali pinset lakukan berulang-ulang pada larutan chloramphenicol, amoxilin, dan detergen9.diberi kertas label dibawah cawan petri yang berisi kertas cakram dengan bertuliskan, ampicilin, chloramphenicol, amoxilin dan detergen10.dipanaskan cawan petri biar steril11.diinkubasikan pada temperatur 37 c selama 24 jam12.diamati dan diukur diameter hambatannya menggunakan penggaris kemudian ditulis datanya dan dihitung3.3.2UjiDayaHambatBakteri Disinfektan1.disiapkan cawan petri, media lba padat, bahan-bahan lampu Bunsen, tabung reaksi, rak tabung reaksi dan kertas cakram2.dilarutkan bahan-bahan pada 10 ml aquades3.disiapkan tabung reaksi yang berisi biakan bakteri staphylococcus aerus dan nacl 0,9 % serta cawan petri yang sudah berisi media lba padat untuk disinfektan4.diambil 4 ose dari tabung reaksi biakan bakteriStaphylococcus aerouskedalam tabungreaksi berisi NaCl 0,9%5.kemudian dimasukkan lidi berujung kapas steril didalam tabung reaksi yang berisi NaCl 0,9%, kemudian diangkat, disuabkan kedalam cawan petri untuk didesinfektan yang terdapat media LBA beberapa kali sampai rata pada permukaan media6.bakar pinset agar steril, diamkan sebentar agar dingin7.kemudian ambil kertas cakram, dicelupkan dalam larutan wipol kemudian dimasukkan kedalam cawan petri yang sudah disuab tadi dengan ditekan pelan kertas cakramnya, ulang pada larutan bayclean, listerin dan detol8.diberi kertas lebel di bawah cawan petri yang berisi kertas cakram dengan bertuliskan wipol, detol, bayclean dan listerin9.dipanaskan cawan petri biar steril10.diinkubasi pada temperatur 37oC selama 24 jam11.diamati dan diukur diameter hambatnya menggunakan penggaris kemudian ditulis datanya dan dihitungBAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN4.1Hasil Pengamatan4.1.1 Tabel Pengamatan Uji Daya Hambat MikrobaNo.Zat Anti MikrobaKeterangan

1.Atibiotik

1.Ampisilin2.Chloramfenicol3.Deterjen4.Amoxisil

2.Desinfektan

1.Detol2.Wipol3.Bayclin4.Listerin

4.3PembahasanAntibiotik adalah zat kimia yang dihasilkan oleh suatu mikroba yang mempunyai khasiat antimikrobal.Orang yang pertamakali mempelajari antibiotik secara sistematis adalah Gratia dan Dath (1924) dengan menemukanActinomycetinyang berasal dariActinomycetes.Sampai sekarang sudah ditemukan beribu-ribu antibiotika, tetapi tidak semuanya dapat digunakan dalam pengobatan (Entjang,2003).Antibiotika yang ideal sebagai obat harus memenuhi syarat-syarat berikut:A.Mempunyai kemampuan untuk mematikan atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme yang luasB.Tidak menimbulkannya terjadinya resisten dan mikroorganisme pahogenC.Tidak menimbulkan pengaruh samping yang buruk pada host, seperti reaksi alergi, kerusakan syaraf, iritasi lambung dan sebagainya.D.Tidak mengganggu keseimbangan flora yang normal dati host seperti flora usus atau flora kulit (Entjang,2003).Antibiotik yang efektif bagi banyak spesies bakteri baik kakus, basil maupun spiril,dikatakan mempunyai spektrum luas. Sebaliknya suatu antibiotik yang hanya efektif untuk spesies bakteri tertentu disebut antibiotik yang spektrumnya sempit (Dwijdoseputro,2005).Desinfektan merupakan proses yang mematikan semua mikroorganisme patogen dengan cara kimiawi atau fisik. Desinfektan mempunyai daya kerja terhadap vegetatif dari mikroorganisme, tetapi belum tentu mematikan sporanya, sedangkan antiseptis merupakan proses yang mencakup inaktifitas atau mematikan mikroorganisme dengan cara kimiawi. Antiseptik dapat bersifat bakterisidal atau bakteri kostatik. Proses bakteri kostatik hanya menghentikan pertumbuhan bakteri istilah desinfektan, sehinga penggunaannya boleh dikatakan sinonim (Lay,1992).Syarat yang ideal untuk desinfektan :a.Toxisitas yang tinggi terhadap mikrobab.Kelarutannya tinggic.Stabilitasnya tinggid.Tidak bersifat toxis terhadap manusia dan binatang, yang paling ideal adalah sangat toxis kepada mikroba, tetapu tidak toxis terhadap manusia dan ninatang.e.Homogenf.Tidak mudah membentuk ikatan kimia dengan zat organik lainnyag.Bersifat toxis terhadap mikroba pada suhu kamar atau suhu badanh.Tidak bersifat korosif dan tidak memeberi warnai.Tidak berbau yang mengganggu, kalau bisa berbau wangij.Daya tembusnya tinggik.Bersifat deterjen (membersihkan / mencuci)l.Harganya murah dan mudah dibuat.Komponen-komponen desinfektan terdiri dari, garam atau basa yang kuat dengan komponen-komponen amonium yang terdiri dari empat bagian. Adanya unsur radikal dalam garam atau basa tersebut. Radikal merupakan golongan alifat dan asam sulfat (Dwidjoseputro,2005).Desinfektan berfungsi untuk mematikan sel vegetatif tetapi tidak mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab penyakit (Pelczar,2006).Staphylococcus aureusadalah bakteri yang mempunyai sifat bakteri bentuk cocus, gram positif, formasi staphylae, mengeluarkan endotoxin, tidak bergerak tidak mampu membentuk spora. Fakultatif anaerob, sangat tahan terhadap pengeringan, mati pada suhu 60C setelah 60 menit. Merupakan flora pada kulit dan saluran pernapasan bagian atas. Dialam terdapat pada tanah, air dan debu diudara (Entjang,2003).Penyakit yang dapat ditimbulkan adalaf infeksi bernanah dan abses. Infeksinyakan lebih berarti bila menyerang anak-anak, usia lanjut dan orang yang daya tahan tubuhnya menurun, seperti penderita diabetes melitus, luka bakar dan AIDS (Entjang,2003).Pencegahan penyakit dilakukan dengan meningkatkan daya tahan tubuh, hygiene pribadi dan sanitasi lingkungan (Entjang,2003).Dari percibann ini didapatkan data dari antibiotik ampisilin diameter zona beningnya adalah 42,25mm dan indeks daya hambatnya 61,04mm, antibiotik chloramfenicol diameter zona beningnya adalah 26mm dan indeks daya hambatnya 3,33mm, pada antibiotik amoxilin diameter zona beningnya adalah 0 mm dan indeks daya hambatnya 0m, sedangkan pada deterjen diameter zona beningnya adalah 49,75mm.Dari data ini didapatkan bahwa pada amoxilin tidak terdapat zona bening maupun indeks daya hambat.Dari desinfektan, detol dimeter zona beningnya 47,74mmdan indeks zona hambatnya 6.96mm. Bayclin diameter zona beningnya 0 dan indeks zona hambatnya -1, pada wipol diameternya zona bening 0 dan indeks daya hambatnya -1, sedangkan pada listerin diameter zona beningnya dan indeks zona hambatnya masing-masing adalah 0mm dan -1mm, dari data ini didapatkan bahwa pada bayclin, wipol, dan listerin tidak terdapat diameter zona beningnya.Dalam pratikum ini digunakan antibakterial yang terdiri dari 3 antibiotik dan 1 detejen, yang dimana amoxilin merupakan salah satu antibiotik yang menghambat sintesis dinding sel dengan mengikat salah satu atau lebih pada ikatan penisilin-protein sehingga menyebabkan penghambatan pada tahapan akhir transpeptidase sintesis peptidoglikan dalam dinding sel bakteri, akibatnya biosintesis dinding sel terhambat, dan sel bakteri menjadi pecah (lisis) (Anonim,2011).Ampisilin memiliki mekanisme yang sama dalam penghancuran dinding sel peptidoglikan, hanya saja ampisil mampu berpenetrasi kepada bakteri gram positif dan gram negatif. Hal ini disebabkan keberadaan gugus amino pada ampisilin, sehingga mampu menembus membran terluar pada bakteri gram negatif (Anonim,2011).Chloramfenicol adalah antibiotik yang mempunyai aktivitas bakteriostatik dan pada dosi tinggi bersifat bakterisidal. Aktifitasnya menghambat sintesis protein dengan jalan mengikat ribosom yang merupakan langkah penting dalam pembentukan ikatan peptida (Anonim,2011).Antibiotik adalah zat yang dihasilkan oleh organisme (mikroorganisme) hidup, yang dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme lain, bahkan dapat memusnahkannya (Irianto,2006).Berdasarkan sifatnya (daya hancutnya) antibiotik dibagi menjadi dua :a.Antibiotik yang bersifat bakterisidal, yaitu bakteri yang bersifat dektruktif terhadap bakterib.Antibakteri yang bersifat bakteriostatik, yaitu antibiotik yang bekerja menghambat pertumbuhan atau multiplikasi bakteri.Bakterisidal adalah suatu bahan yang mematikan bentuk-bentuk vegetatif bakteri, sedangkan bakteriostatik adalah suatu keadaan yang menghambat pertumbuhan bakteri (Pelczar, 2006).Dari percobaab ini didapatkan faktor kesalahan yaitu : tidak telitinya cara penculupan lidi kedalam larutan suspensi bisa mengakibatkan tidak terambilnya suspensi, pada saat melakukan suap bila tidak dilakukan dengan benardan rata pada permukaan media LBA dapat mengakibatkan tidak tumbuhnya bakteri tersebut.BABVPENUTUP5.1KesimpulanDidapatkan hasil kesimpulan dari uji daya hambat mikroba:-Faktor-faktor yang mempengaruhi ukuran diameter zona hambatan ialah: kelarutan supensi bakteri. Waktu pengeringan atau peresapan sespensi bakteri, tenperatur inkubasi, waktu inkubasi, tebal agar-agar, jarak antara seobat.-Prinsip percobaan uji daya hambat mikroba adalah menghambat membasmi atau menyingkirkan mikroorganisme dengan cara mengganggu pertumbuhan dan metabolism melalui mekanisme penghambatan pertumbuhan mikroorganisme menggunakan zat antibacterial.-Zat anti bakterial dalam menghambat atau membunuh pertumbuhan bakteri secara in vitro. Ada dua yaitu diffusion test dan dilution test.5.2SaranPada percobaan ini sebaiknya bahan-bahan yang digunakan dapat lebih diperbanyak agar pratikan bisa mengetahui bahan-bahan apa saja yang bisa menghambat seperti penicillin pada obat-obatan.DAFTAR PUSTAKABuckel. 1987.Ilmu Pangan. Universitas Indonesia : JakartaDwidjoseputo, D. 2005.Dasar-dasar Mikrobiologi. Djambatan : JakartaEntjang, Indan. 2003.Mikrobiologi dan Parasitologi. PT Citra Aditya Bakti : BandungIrianto, Koes. 2006.Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme. Wyrama Widya : BandungLay, Bibiana W dan Sugyo Hastowo. 1992.Mikrobiologi. Rajawali : JakartaPelczar, micheal. 2006. Dasar-dasar Mikrobiologi. UI Press : JakartaAnonim. 2008.http://queenufsheba. wordpress. com. Bakteri/staphylococcus/aureus. diakses tanggal 2 mei 2011. Pukul 23.00 WITABAB IPENDAHULUANA.Latar BelakangDalam kehidupan sehari-hari banyak kita jumpai berbagai macam senyawa kimia baik organik maupun anorganik bersifat racun terhadap jasad renik. Sehubung dengan itu usaha manusia dalam mengatasi jasad renik. Penyebab penyakit banyak dilakukan menggunakan bahan kimia. Senyawa kimia yang mematikan jasad renik disebut dengandesinfektan.Desinfektan adalah zat kimia yang mematikan sel vegetatif belum tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit. Desinfektan digunakan untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada benda-benda mati seperti meja, lantai, objek glass dan lain-lain. Kelompok utama desinfektan yaitu fenol, alkohol, aldehid, halogen, logam berat, detergen, dan kemosterilisator gas. Cara kerja zat-zat kimia dalam mematikan atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme berbeda-beda antara lain dengan merusak dinding sel, mengubah permeabilitas sel, mengubah molekul protein dan asam amino yang dimiliki mikroorganisme, menghambat kerja enzim, menghambat sintesis asam nukleat dan protein, serta sebagai antimetabolit.Berdasarkan uraian di atas, perlu diketahui karakteristik desinfektan yang kuat, lemah, maupun sedang, sehingga kami menyusun makalah ini untuk mengetahui langkah-langkahmenuuji kekuatan desinfektan.B. Tujuan1. Tujuan UmumMahasiswa mampu mengimplementasikan cara menguji kekuatan desinfektan.2. Tujuan KhususMahasiswa mampu mendeskripsikan desinfektan lemah, sedang, maupun kuat.BAB IITINJAUAN PUSTAKAA. Sifat-sifat desinfektan yang ideal1. Mempunyai efektivitas yang tingi terhadap sejumlah besar jenis mikroorganisme dalam konsentrasi sedemikian rendahnya, sehingga ekonomis dalam pemakaiannya dan tidak toksis untuk hewan atau tumbuhan.2. Tidak merusak dan tidak mewarnai bhan-bahan seperti pakaian, alat rumah tangga, atau bahan-bahan yang terbuat dari logam, bau dan rasa tidak menyengat.3.Tidak hilang keaktifannya oleh bahan-bahan dari luar.4. Merupakan zat penegang permukaan yang baik, jadi mempunyai sifat membasahkan dan penetrasi yang baik.5. Stabil dalam penyimpanan.6. Mudah didapat dan tidak mahal.7. Mudah digunakan untuk kondisi rumah tangga dan keperluan lain yang praktis.8. Hal yang utama adalah mempunyai sifat mikrobisida yang sempurna dalam waktu beberapa mikrobiostatis yang membawa pada perasaan (sangkaan) aman yang semu.B. Kelompok DesinfektanDisinfektan digunakan untuk mengendalikan pertumbuhan dan kontaminasi dengan mikroba. Pengendalian yang dimaksud yang dimaksud artinya semua kegiatan yang dapat membunuh, menghambat, dan sebagai anti metabolik.Mikroorganisme yang dihambat mempunyai proses penghambatan yang sama dan perbedaannya adalah sifat resisten yang berbeda-beda antara lain mikroorganisme satu dengan yang lainnya. Sifat resisten ini dapat dipengaruhi oleh kandungan lipid pada membran selnya. Teknik dan cara-cara yang digunakan dapat dengan cara fibrik atau kimiawi diantaranya dapat menggunakan senyawa-senyawa fenolik, alcohol, chlor, iodium, dan senyawa-senyawa lain yang mempunyai ciri komposisi molekuler yangdapat menyebabkan terjadinya reaksi.Disinfektan merupakan proses yang mematikan semua mikroorganisme patogendengan cara kimiawi atau fisik. Disinfeksi mempunyai daya kerja terhadap vegetatif darimikroorganisme, tetapi belum tentu mematikan sporanya, sedangkan antiseptis merupakan proses yang mencakup inakvikasi atau mematikan mikroorganisme dengan cara kimiawi. Antiseptik dapat bersifat bakterisidal atau bakteri kostatik. Prosesbakteri kostatik hanya menghentikan pertumbuhan bakteri. Istilah disinfeksi dan antiseptis secara umumsulit dibedakan, sehingga penggunaanya boleh dikatakansinonim. Komponen-komponen disinfektan terdiri dari:1. Garam atau basa yang kuat dengan komponen-komponen ammonium yang terdiri dari empat bagian.2. Adanya unsur radikal dalam gram atau basa tersebut.3. Radikal merupakan golongan alifat dan asam sulfat.Menurut Pelzar dan Chan menyatakan bahwa bakteri yang lebih muda kurang daya tahannya terhadap disinfektan jika dibandingkan bakteri yang luar yang memberikan hasil zona hambat yang terbentuk. Hal ini juga sesuai dengan sifat dari dinding sel daribakteri.Struktur dinding bakteri gram positif adalah tebal dan berlapis tunggal dengan kandungan peptidoglikan yang tinggi serta lebih resisten terhadap gangguan fisik maupunkimia dibandingkan dengan struktur dinding sel dari kedua jenis bakteri ini jelas berbeda karena bakteri gram negatif.Permeabilitas dinding sel dari jenis bakteri ini jelas berbeda karena bakteri gram negatif mengandung peptidoglikan lebih sedikit sehingga memiliki pori-pori yang besar dibanding gram positif sehingga bakteri gram positif lebih rentan terhadap antibiotik.Rusaknya membran sitoplasma berkaitan dengan tegangan permukaan yang mempengaruhi lapisan/ membran sel dari bakteri yang bersifat elatis. Tegangan permukaan tersebut akan diteruskan kedalam membran sitoplasma kemudian sel beradaptasi di dalamnya. Adanya diinfeksi yang bersifat bakteri ostatik merubah tegangan permukaan yang ada sehingga bakteri tidak dapat menyesuaikan diri dan terhambat pertumbuhannya. Beberapa kelompok utama disinfektan yaitu:1.Fenol dan persenyawaan penolat2.Alkohol3.Hidrogen4.Logam berat dan persenyawaannya5.Detergen6.Aldehid7.Kemosferilisator gas8.Oxidator9.Aerosol10. Zat warna11. Yodium12. Preparat ChlorSalah satu cara pengujian desinfektan yang umumnya dipakai di laboratorium adalah metode pengeceran dimana kekuatan desinfektan dinyatakan dengan koefisien fenol. Metode koefisien fenol merupakan uji yang telah dibukukan dengan baik. Dalam metodeini, mikroorganisme uji dimasukkan dalam larutan fenol murni dan larutan zat kimia yang akan di evaluasi pada berbagai taraf pengenceran. Koefisien fenol dinyatakan sebagai suatu bilangan dan dihitung dengan cara membandingkan aktivitas suatu larutan fenol dengan pengenceran terhadap aktivitas larutan zat kimia dengan pengenceran tertentu yang sedang diuji.C. Uji Kekuatan Desinfektan1. Tujuana. Mengevaluasi daya anti mikroba suatu desinfektan dengan memperkirakan potensi dan efektifitas desinfektan berdasarkan konsentrasi dan lamanya kontak terhadap kuman.b. Mengetahui kekuatan suatu desinfektan dalam mematikan maupun menghambat pertumbuhan mikroorganisme.2. Prinsip KerjaPertumbuhan bakteri uji pada media yang sesuai setelah bakteri tersebut kontak dengan disinfektan dalam waktu 5,10,dan15 menit.3. Alat dan Bahan:a. Alat:1. Tabung reaksi2. Ose/sengkelit3. Pencatat waktu (stopwatch)4. Mc Farland III (109 kuman/ml)5. Vortex6. Stiker label7. Spiritusb. Bahan:1. Kaldu nutrisi (Nutrient Broth)2. Air suling steril3. Staphylococcus aureus ATCC 25953 dalam agar nutrisi (Gram +)4. Salmonella thyphosa ATCC 6539 dalam agar nutrisi (Gram -)5. Larutan NaCl fisiologis 0,9%6. Fenol standar7. Desinfektan uji4. Cara Kerjaa. Pembuatan mediaMedia kaldu nutrisi (Nutrient Broth) dimasukkan dalam 12 tabung reaksi ukuran 20 x 150 mm, volume masing-masing dibuat 5 ml. Komposisi perliter terdiri dari pepton 10 g, ekstrak daging 5 g, dan NaCl 5 g; pH akhir 6,8.b. Pembuatan Inokulum

Bakteri Salmonella thyphosa atau Staphylococcus aureus sebelumnya telah ditanam pada agar nutrisi (Nutrient Agar) miring dan diinkubasi pada suhu 37C selama 24-48 jam. Tahap pengenceran bakteri uji adalah sebagai berikut:1.Siapkan tabung reaksi berisi 2 ml NaCl fisiologis 0,9%2.Pindahkan biakan S. thyphosa atau S. aureus tersebut (pilih salah satu) ke dalamlarutanNaCl dengan ose, dan setarakan kekeruhannya dengan larutan Mc Farland III(109kuman/ml).3.Suspensi kuman tersebut kini diperkirakan berisi 109 kuman/ml.4.Siapkan 3 buah tabung reaksi masing-masing berisi 4,5 ml NaCl fisiologis 0,9%.5.Pipet 0,5 ml dari suspensi kuman sebelumnya (109 kuman/ml), pindahkan ke salah satu tabung reaksi berisi 4,5 ml NaCl. Suspensi kuman kini berkonsentrasi 108 kuman/ml.6.Lakukan pengenceran kedua dengan mengambil 0,5 ml dari suspensi kuman 108 dan memindahkannya ke dalam tabung berisi 4,5 NaCl yang kedua. Suspensi kuman kini berkonsentrasi107kuman/ml.7.Pengenceran terakhir dilakukan dengan memindahkan 0,5 ml dari suspensi kuman 107 ke dalam tabung terakhir NaCl. Suspensi kuman telah setara dengan 106 kuman/ml. Suspensi bakteri dengan konsentrasi inilah yang akan digunakan untuk melakukan uji praktikum ini.3. Pembuatan Larutan Desinfektan

Pengenceran larutan desinfektan dilakukan pada tabung steril berukuran 25 x 150 mm. Tahapannya adalah sebagai berikut:1.Siapkan 4 buah tabung steril berisi aquades dengan volume yang berbeda-beda di dalamnya yaitu 9 ml, 7 ml, 4,5 ml, dan 7 ml, secara berurutan.2.Lakukan pengenceran pertama dengan mempipet 1 ml larutan desinfektan ke dalam 9 ml air suling sehingga konsentrasi menjadi 1:103.Pengenceran selanjutnya adalah dengan memindahkan 1 ml desinfektan 1:10 ke dalam tabung berisi 7 ml air suling. Konsentrasi desinfektan pada tabung ini adalah 1:80.4.Pindahkan 0,5 ml desinfektan 1:80 ke dalam 4,5 ml aquades sehingga konsentrasi kini 1:100.5.Pipet 0,5 ml desinfektan 1:100 ke dalam tabung berisi 7 ml air suling sehingga konsentrasi pada tabung ini adalah 1:150.6.Desinfektan yang akan dipakai selanjutnya adalah yang konsentrasinya 1:80, 1:100, dan 1:150. Oleh karena itu, samakan volumenya masing-masing menjadi 5 mlMedia, bakteri uji dan desinfektan telah disiapkan. Dengan demikian kita dapat melakukan inokulasi kuman uji dalam desinfektan dengan memperhitungkan waktu kontak 5, 10, dan 15 menit secara akurat. Label 12 tabung berisi Nutrient both dengan menandai DES 1:80 10, DES 1:80 15, DES 1:100 5, DES 1:100 10, DES 1:100 15, DES 1:150 5, DES 1:150 10, DES 1:150 15.a)Uji I 1:80Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:80. Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel DES 1:80 5. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:80 10. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:80 15.b)Uji II 1:100Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:100. Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel DES 1:100 5. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:100 10. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:100 15.c)Uji III 1:150Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:150. Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel DES 1:150 5. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:150 10. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:150 15.Tabung-tabung reaksi uji kemudian dieramkan di dalam inkubator pada suhu 37C selama 24-48 jam.Diamati ada tidaknya pertumbuhan bakteri pada setiap tabung.Pengamatan cara inokulasi kuman ke dalam disinfectan.(+) keruh : ada pertumbuhan(-) jernih : tidak ada pertumbuhan5.Hasil pengamatanSetelah tabung reaksi diinkubasi padsa suhu 37C selama 24 - 48 jam, maka didapatkan hasil sebagai berikut:JenisPengenceranWaktu/menit

51015

Desinfektan1:80---

Desinfektan1:100---

Desinfektan1:150+--

6. Pembahasana. PenyimpanganPada pengenceran suatu desinfektan 1:80, tidak terdapat kuman sama sekali dari menit ke-5 sampai menit ke-15. Dengan hasil tersebut, asumsi kami adalah desinfektan ini memiliki kefektifitasan yang cukup bagus sehingga dapat langsung membunuh kuman dengan cepat.Sementara pada pengenceran 1:100, tabung reaksi juga tidak menampakkan kekeruhan dan disimpulkan bahwa tidak ada bakteri yang hidup.Namun pada pengenceran desinfektan yang terakhir, yaitu 1:150, terdapat kekeruhan di menit ke-5 tetapi tidak pada menit ke-10 dan ke-15. Kekeruhan pada pengenceran terakhir ini menimbulkan keraguan pada hasil dari pengenceran 1:100, atau pada pengenceran 1:150 ini. Oleh karena kesalahan yang kami lakukan pada praktikum ini, kita tidak dapat melakukan perhitungan koefisien fenol.Terjadinya hal ini dapat diakibatkan oleh berbagai faktor kemungkinan.Faktor-faktor kemungkinan penyebab terjadinya kesalahan kami antara lain adalah:1.Pengerjaan praktikum secara paralelKegagalan yang terjadi dalam praktikum ini mungkin juga disebabkan oleh pengerjaan tabung Uji Desinfektan secara paralel yang saat itu dimaksudkan untuk mempersingkat waktu pengerjaan. Pengerjaan secara paralel tersebut telah mengakibatkan ketidakakuratan dan ketidaktelitian perhitungan waktu yang diperlukan.2.Ketidakakuratan dalam pengambilan kuman menggunakan ose.Dalam menginokulasi kuman uji terhadap desinfektan, kami memindahkan kuman tersebut hanya dengan 1 ose. Dengan penggunaan ose, terdapat kemungkinan kuman tidak terangkat sesuai dengan konsentrasi yang diinginkan. Sebab pada percobaan kami, banyak kuman yang mati. Pengambilan kuman dengan 2 ose mungkin dapat lebih akurat.3.Penggunaan spiritus yang berlebihan.Banyaknya kuman yang mati juga dapat disebabkan terlalu seringnya dilakukan flambir pada pembuatan inokulum dan pada penginokulasian kuman uji terhadap desinfektan. Kuman S. aureus dan S. thyphosa tumbuh optimum pada suhu 37C, oleh karena itu tidak diperlukan suhu panas yang berlebihan.4.Pengenceran desinfeKtan yang tidak akuratPada percobaan kali ini, kami mungkin juga melakukan kesalahan ketika melakukan pengenceran desinfektan ke dalam 1:80, 1:100, 1:150. Pengenceran yang dilakukan tidak akurat, yaitu terlalu banyak desinfektan yang terkandung dalam 1:80 atau 1:100, sehingga desinfektan terlalu pekat dan tidak sebanding dengan jumlah kuman yang dibiakkan.b. Pertanyaan1. Apa saja fungsi dari desinfektan?jawaban: Desinfektan digunakan untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada benda-benda mati seperti meja, lantai, objek glass dan lain-lain.2. Dalam pengujian kekuatan desinfektan ini, metode apa yang digunakan?jawaban: metode pengenceran koefisien fenol3. Di antara ketiga pengenceran desinfektan, menurut hasil pengamatan, mana yang paling efektif?jawaban: pengenceran dengan perbandingan 1: 80 yang paling efektif.BAB IIIPENUTUPA. Kesimpulan1. Desinfektan adalah zat kimia yang mematikan sel vegetatif belum tentu mematikan bentuk spora mikroorganisme penyebab suatu penyakit.2. Desinfektan digunakan untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada benda-benda mati seperti meja, lantai, objek glass dan lain-lain.3. Semakin pekat konsentrasi pengenceran desinfektan, semakin efektif desinfektan tersebut dalam mematikan mikroorganisme.DAFTAR PUSTAKADrs. Koes Irianto. 2006. Mikrobiologi: Menguak Dunia Mikroorganisme Jilid 1. Bandung: CV. Yrama Widya.http://informasi-budidaya.blogspot.com/2011/02/laporan-praktikum-desinfektan.html